葛根蛋白及其酶解物的体外抗氧化活性和功能特性

以葛根为原料,采用碱提法提取葛根蛋白,对其进行酶解,研究不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶)对葛根蛋白的酶解效果及其酶解物的抗氧化活性和功能特性,并与葛根蛋白进行对比。3种蛋白酶对葛根蛋白的酶解效果及其酶解物抗氧化特性研究结果表明,碱性蛋白酶酶解物水解度和蛋白回收率最佳,并具有良好的体外抗氧化活性。功能特性研究结果表明,与葛根蛋白相比,3种葛根蛋白酶解物的溶解性、持油性和起泡性均有不同程度提升,但持水性、起泡稳定性、乳化性及乳化稳定性均有所下降。其中碱性蛋白酶酶解物的功能特性最优,pH值为5时,溶解度达98.43%;温度为60℃时,持油性达4.23%;pH值为6时,起泡性达106%。结果表明,碱性蛋白酶酶解效率高,且适合用于提高葛根蛋白抗氧化活性及功能特性。

石莼酶解提取物延缓皮肤衰老作用

目的:研究石莼酶解提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠的抗衰老作用。方法:按800 mg/kg·d进行颈背部皮下注射D-半乳糖6周,建立小鼠亚急性衰老模型;提取物和V_(C)给药28 d后,表征小鼠皮肤老化及氧化应激水平。结果:与水浸提物相比,石莼酶解提取物中可溶性总糖、蛋白质、还原糖、多酚固形物含量显著提高(P<0.05),且对羟自由基和DPPH自由基清除率及SOD活力提高5.72、7.95、13.26倍。动物实验显示,石莼酶解提取物显著改善衰老性皮肤GSH-Px、T-SOD、CAT、T-AOC活力及MDA、蛋白质羰基水平,缓解小鼠脏器萎缩;皮肤中胶原蛋白含量提高71.63%,Ⅰ/Ⅲ型胶原比例提高55.40%;显著提高机体抗氧化酶GSH-Px、T-SOD、CAT活力和T-AOC水平;抑制机体生物大分子的氧化降解,如降低蛋白质羰基和MDA水平(P<0.05)。结论:石莼酶解提取物可降低小鼠氧化应激水平,延缓小鼠皮肤衰老。

秀珍菇残次菇超声酶解工艺优化及挥发性风味成分分析

为提高秀珍菇副产物的附加值,利用秀珍菇残次菇制备调味基料,筛选适宜的蛋白酶酶解秀珍菇残次菇,基于水解度、模糊数学评定法设计单因素试验和响应面法优化超声波耦合蛋白酶酶解的工艺参数,分析酶解产物的抗氧化性和挥发性风味成分。结果表明,超声酶解最佳工艺条件为料液比1∶30、酶添加量1.5%、pH 7.0、温度47℃、时间72 min、超声功率420 W。在此条件下,秀珍菇水解度、酶解产物得率和综合评分分别为(51.98±3.82)%、(71.83±3.61)%、98.04±3.58;酶解后的总氨基酸含量、抗氧化活性都有显著提高(P<0.05);主要挥发性成分蘑菇醇含量显著增加,月桂烯含量显著减少,且新增了12种挥发性香气成分。该研究结果为秀珍菇残次菇制备调味基料提供了理论和技术支持。

白茶蛋白酶解物的抗氧化与α-葡萄糖苷酶抑制力研究

【目的】提取和酶解制备白茶蛋白生物活性肽,并探讨其抗氧化能力和α-葡萄糖苷酶抑制率,为白茶综合利用提供理论依据。【方法】以寿眉白茶为原料,采用碱提酸沉法获得白茶蛋白粗提物,再分别以碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和复配酶进行酶解,比较各酶解物的DPPH自由基清除率、ABTS自由基清除率、总还原力和α-葡萄糖苷酶抑制率差异。【结果】采用碱提(0.3 mol·L^(-1)NaOH)酸沉(pH=3.0)法获得白茶蛋白粗提物,其纯度46.6%,得率7.1%。酶解物的活性评价结果显示,木瓜蛋白酶酶解物浓度为200μg·mL^(-1)时对DPPH自由基清除率最大,为86.8%;4种蛋白酶酶解物对ABTS自由基清除能力相当;复配酶酶解物浓度为1000μg·mL^(-1)时总还原力最大,为0.930;中性蛋白酶酶解物浓度为1000μg·mL^(-1)时对α-葡萄糖苷酶抑制力最强,为97.8%。【结论】使用中性蛋白酶、复配酶和木瓜蛋白酶,有望开发具备抗氧化能力与α-葡萄糖苷酶抑制力的白茶蛋白活性肽。

罗非鱼鱼皮酶解物及其硒螯合物的结构与抗氧化特性

为了高值化利用罗非鱼副产物资源以及为酶解物-硒螯合物的产业化提供理论依据,本实验以罗非鱼鱼皮胶原蛋白(TSC)为原料,用4种蛋白酶对其进行酶解,分别获得了酸性蛋白酶酶解物(TSCAc)、木瓜蛋白酶酶解物(TSCP)、菠萝蛋白酶酶解物(TSCB)、碱性蛋白酶酶解物(TSCAl),以Na2SeO3为硒源,制备并筛选出硒螯合量最高的酶解物,测定酶解物及其硒螯合物的紫外光谱、荧光光谱、红外光谱、表面疏水性,并对酶解物及其硒螯合物的抗氧化性与抗氧化稳定性进行分析。结果显示,TSCAl的水解度(DH)最高(18.2%),其与硒螯合后的硒螯合量最高(153.5 mg/g),硒螯合率最高(23.7%),小分子量(500~1000 u)的含量最高。其与硒螯合后,紫外光谱吸收峰强度增大,荧光光谱吸收峰由波长419.8 nm红移到422.0 nm且荧光强度减弱,疏水性在螯合后降低,表明TSCAl与硒螯合生成了新的物质。推测酰胺键、氨基的氮原子、羧基的氧原子可能参与了与硒的螯合反应。研究表明,碱性蛋白酶酶解物-硒螯合物(TSCAl-Se)具有良好的抗氧化性,其在不同温度、pH值以及经胃消化后皆具有稳定的抗氧化活性。本研究制备了一种新型罗非鱼鱼皮胶原蛋白酶解物-硒螯合物,为研究和开发硒元素膳食补充剂及抗氧化剂提供了理论依据。

马铃薯蛋白酶抑制剂酶解产物超滤组分的抗氧化活性与结构特征

超声波联合蛋白酶K酶解马铃薯蛋白酶抑制剂,研究酶解产物(PPIHs)的理化性质、抗氧化稳定性及其超滤后各组分的抗氧化活性及结构特性。结果表明,超声联合酶解处理后,PPIHs的溶解度和乳化及乳化稳定性增强;抗氧化稳定性在80℃以下较好,超过80℃有下降趋势;在酸性或非碱性环境下,除对ABTS自由基的抗氧化稳定性较差,PPIHs对其他自由基的抗氧化稳定性较好。PPIHs经过超滤得到PPIHs-Ⅰ(>10 ku)、PPIHs-Ⅱ(3~10 ku)和PPIHs-Ⅲ(<3 ku)3种超滤产物,PPIHs-I对ABTS自由基的清除能力最强,Zeta电位的绝对值显著增大;PPIHs-II的抑制油脂氧化以及对-OH和DPPH自由基的清除能力较强,粒径显著减小。紫外吸收光谱、红外光谱和荧光光谱表明,酶解产物的结构发生改变,如无规卷曲和β-转角含量提高,β-折叠和α-螺旋减少,疏水性增强等,进而改善其抗氧化活性。

棘胸蛙肌肉水解物的制备及抗氧化活性评价

以棘胸蛙腿部肌肉为研究材料,利用木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶两种酶,以成品率和水解度为指标,通过单因素结合响应面分析的方法优化棘胸蛙水解物的酶解工艺,同时对棘胸蛙水解物抗氧化能力进行研究。结果表明,棘胸蛙水解物经木瓜蛋白酶和酸性蛋白酶的最佳酶解条件为:在各酶最适pH和温度的条件下,料液比为1:15(g/mL)、酶解时间4 h、加酶量为2%(m/m);该工艺条件下,棘胸蛙水解物的水解度分别为19.23%、23.51%,成品率分别为22.66%、15.32%,清除DPPH自由基的IC50值分别为2.61、2.95 mg/mL,清除ABTS+自由基的IC_(50)值分别为3.46、3.20 mg/mL,清除羟基自由基的IC_(50)值分别为8.20、9.23 mg/mL。综上,通过响应面法优化的棘胸蛙水解物酶解工艺方便可行,制备得到的水解物具有较强抗氧化活性,为棘胸蛙资源的开发提供了理论基础。

酶解制备金乌贼抗氧化产物的工艺优化及营养评价

目的:研究金乌贼蛋白抗氧化酶解产物(antioxidant enzymatic hydrolysate,AEH)的制备和脱苦工艺,并对其氨基酸组成和营养价值进行评价。方法:分别以.OH清除率和苦味值为指标,利用正交试验设计对木瓜蛋白酶制备AEH的水解条件及活性炭脱苦工艺进行优化;利用氨基酸自动分析仪测定AEH的氨基酸组成;以鸡蛋蛋白质为标准蛋白和WHO/FAO必需氨基酸参考模式为评价标准,采用氨基酸系数比值法对AEH营养价值进行评价。结果:木瓜蛋白酶的最佳酶解条件为酶用量1.0%、pH7.0、温度55℃、酶解时间5h;活性炭脱除苦味的最佳工艺为活性炭用量3.0%,处理时间120min,温度40℃;在此处理条件下,AEH可基本脱除苦味且清除羟自由基活性远高于蛋白粗提物的活性:AEH粗蛋白含量为18.07%,氨基酸种类齐全,含量为95.95%,必需氨基酸占氨基酸总量的42.00%,第一限制性氨基酸为缬氨酸,AEH必需氨基酸指数为93.7,谷氨酸等呈味氨基酸占氨基酸总量的38.68%。结论:AEH具有很高的营养价值和良好的风味,是一种理想的补充蛋白源。

鳕鱼排蛋白水解及其营养风味型美拉德反应产物的制备

为充分利用鳕鱼下脚料鳕鱼排,用复合蛋白酶水解鳕鱼排来抽提鱼肉骨蛋白,并利用获得的可溶性蛋白与木糖、葡萄糖、混合糖(葡萄糖和木糖质量比4:1)在110℃分别加热90min,制备美拉德反应产物,测定其还原能力和清除DPPH自由基能力。结果表明,鳕鱼排酶解获得可溶性物质得率为24.14%,其中蛋白含量为89.64%,鲜味氨基酸含量高达46.33%,人体必需氨基酸为37.65%。除葡萄糖单独作为糖供体制得的反应产物外,木糖和混合糖与酶解物制备的美拉德反应产物具有显著的清除自由基能力和铁还原能力,其反应产物的海鲜特征风味也更加醇厚。因此,鳕鱼排水解蛋白美拉德反应产物是一种具有较强抗氧化性的营养风味型食品添加剂。

鸢乌贼酶解产物的抗氧化稳定性与功能特性

以鸢乌贼(Symplectoteuthis oualaniensis)胴体为原料,采用木瓜蛋白酶进行酶解,比较了酶解液中不同分子量组分的抗氧化特性,探讨了温度、p H和光照对其抗氧化活性的影响,以及其功能特性(包括乳化性和乳化稳定性、起泡性和泡沫稳定性、吸水性、持水性和吸油性等)。结果表明,鸢乌贼酶解产物具有一定的耐热性,在酸性偏中性的环境中能较好地保持其抗氧化活性,日光照射会降低其抗氧化能力。此外,酶解产物还具有较强的乳化性、起泡性、吸水吸油能力等功能特性。

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究

为了探索制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳工艺,在碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解的基础上,以酶解温度、酶解时间、酶解pH值和酶与底物质量比([E]/[S])为试验因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,采用响应面分析法优化Orientase 20A酶的酶解条件。结果表明:最优工艺参数为:酶解温度为41.74℃、pH3.97、酶解时间为6h、[E]/[S]为1.5%,酶解液水解度和DPPH自由基清除率的预测值分别为9.42%和35.01%,验证值分别为9.57%和35.21%。响应面对酶解法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的酶解条件的优化是可行的,可以用于实际预测。抗氧化活性实验表明,酶解肽具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+.能力,其IC50值分别为10.78mg/mL和8.26mg/mL。

合浦珠母贝肉酶解液中抗氧化肽的分离及活性研究

合浦珠母贝肉酶解液经膜分离后,采用葡聚糖凝胶G-25进行分离纯化,对分离组分的总抗氧化性、DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力和在化妆品中的应用效果进行测定,结果表明:经分离得到10个有效组分F1-F10,其中F4组分的总抗氧化性最强,DPPH自由基清除能力44.1±0.3%,羟自由基清除率76.0±1.5%,将合浦珠母贝抗氧化肽(F4组分)添加到营养霜中,当添加量为1.0%时,抗氧化活性A700nm为1.599±0.004,能有效提高营养霜的抗氧化性,且营养霜的性状没有发生改变。该研究为合浦珠母贝肉抗氧化肽的结构和在化妆品中的应用研究奠定基础。

裂壶藻渣酶解产物的抗氧化稳定性

本实验以裂壶藻渣酶解产物对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除能力及其还原力活性为评价指标,探讨温度、p H值、食品辅料、防腐剂、金属离子及人工胃肠道模拟环境对其抗氧化活性的影响。结果表明:在30~100℃的范围内温度变化对裂壶藻渣酶解产物的抗氧化活性影响不明显;在酸性环境中酶解产物可以较好地保持活性;蔗糖及Na Cl对酶解产物活性影响不显著,葡萄糖在质量分数2%~10%范围内,随质量分数提高,对其活性的影响渐增;防腐剂山梨酸钾对酶解产物活性的影响略强于苯甲酸钠;金属离子对样品活性的影响大小为:Zn2+>Cu2+>K+>Ca2+;体外模拟胃肠实验中,酶解产物经胃肠液处理后其活性保持率可达65%以上。

大米蛋白酶解产物抗氧化活性及功能性质研究

采用不同的蛋白酶(木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、精制中性蛋白酶和碱性蛋白酶)水解大米蛋白,以制备抗氧化活性肽。结果发现,精制中性蛋白酶水解大米蛋白得到的产物对DPPH自由基的清除能力最强,而且水解度其清除能力影响显著。同时测定了酶解产物的还原能力、金属离子螯合能力以及在Fe2+引发的亚油酸过氧化物体系中的抗氧化活性,结果表明,此酶解产物表现出一定的还原能力,能够抑制由Fe2+引发的亚油酸过氧化物体系中的抗氧化活性,具有一定的金属离子螯合能力。结果表明,这种肽具有一定的抗氧化活性,具有良好的功能特性。

核桃蛋白中性蛋白酶水解物的制备及其抗氧化活性研究

[目的]研究制备核桃蛋白水解物的最佳工艺条件及水解物的抗氧化活性。[方法]以核桃蛋白为底物,采用正交试验研究制备其中性蛋白酶水解物的工艺条件,通过测定自由基清除能力研究酶水解物的抗氧化活性。[结果]制备核桃蛋白酶水解物的最优工艺条件为:温度40℃、底物浓度4%、酶浓度4 000 U/g、pH值8.0;核桃蛋白酶水解物的水解度与其对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除能力有关,其水解度为24.2%时对羟自由基(OH.)和超氧阴离子自由基(O2.)的清除率分别为17.0%和52.0%。[结论]采用Sephdex G-25凝胶柱层析对水解度为24.2%的酶水解物进行分离,得到了A、B、C和D 4种肽混合物,其中,肽混合物C的自由基清除能力最大,肽混合物D最小。

四角蛤蜊酶解肽抑制ACE活性与抗氧化活性研究

目的评价四角蛤蜊酶解肽体外抑制ACE活性与抗氧化活性。方法以胃蛋白酶和胰蛋白酶模拟在体过程对四角蛤蜊进行酶解获得酶解肽。利用高效液相色谱法测定四角蛤蜊酶解肽的抑制ACE的活性,以Fenton法检测四角蛤蜊酶解肽对羟自由基的清除作用。结果胰蛋白酶酶解6h的四角蛤蜊酶解肽抑制ACE活性最佳,IC50=15.06μg/mL。胰蛋白酶酶解2h的羟自由基清除率最高,为93.78%。结论四角蛤蜊酶解肽具有一定的抑制ACE活性与抗氧化活性。

超声波预处理对大豆蛋白酶水解物抗氧化活性的影响

试验采用超声波法对大豆蛋白溶液进行预处理,再用碱性蛋白酶进行水解,通过大豆蛋白酶水解物的亚铁还原能力来确定超声波预处理的最佳工艺条件。结果表明,经超声波预处理大豆蛋白溶液最佳工艺条件为超声波功率:500 W,超声波处理时间:30 min,超声波处理温度:70℃。经超声波预处理的酶水解物抗氧化能力强于未经超声波处理的5 h酶水解物且差异显著(P<0.05)。超声波预处理的酶水解物亚铁还原能力虽不及BHA(P<0.05),但明显强于抗坏血酸(P<0.05)。超声波预处理的酶水解物对TBARS抑制效果和DPPH清除能力均强于未经超声波处理的5 h酶水解物(P<0.05)。

限制性酶解对大米蛋白结构、功能特性及体外抗氧化活性的影响

利用胰蛋白酶对大米蛋白进行限制性酶解,得到2%,4%和8%水解度的大米蛋白水解产物,探究不同水解程度对大米蛋白的结构、理化性质及体外活性的影响。结果表明,限制性酶解对大米蛋白的溶解性及乳化性有很大提升,当水解度低于4%时,酶解产物具有良好的热稳定性,然而,随着水解度的增大,其热稳定性呈下降趋势。因酶解作用,大米蛋白中β-转角含量升高,故具有更加舒展的二级结构。其表面呈疏松多孔的微观结构。相比于天然大米蛋白,酶解产物体外抗氧化活性显著提高,而且在高浓度时DPPH和ABTS自由基清除率与同浓度的BHT相当。限制性酶解作为一种温和、安全且高效的改性方法,可有效改善大米蛋白的功能特性,提高其体外抗氧化活性,以丰富大米蛋白资源的应用。

条斑紫菜R-藻红蛋白酶解物的制备及其抗氧化和肿瘤细胞增殖抑制活性

【目的】研究木瓜蛋白酶对条斑紫菜R-藻红蛋白的抗氧化性和肿瘤增殖抑制活性的影响。【方法】采用超声波破壁法提取条斑紫菜R-藻红蛋白,用DEAE柱层析法纯化后进行木瓜蛋白酶酶解,通过正交试验设计,以还原力A700为考察指标确定酶解反应的最佳工艺参数,进一步测定获得的R-藻红蛋白及其酶解物的还原力、清除羟自由基能力和对人肉瘤细胞U2O及人肝癌细胞HepG-2的肿瘤增殖抑制活性。【结果】R-藻红蛋白的最佳酶解工艺条件为:木瓜蛋白酶添加量25 000 U.g-1,pH 7.0,温度50℃,酶解时间4 h。在此条件下,R-藻红蛋白酶解物还原力为0.573,较未酶解的R-藻红蛋白提高了2.35倍;清除羟自由基能力为51.03%,较未酶解的R-藻红蛋白活性提高了3.22倍。随着浓度的增加,R-藻红蛋白及其酶解物对人肉瘤细胞U2O和人肝癌细胞HepG-2抑制生长作用增强。R-藻红蛋白对人肉瘤细胞U2O抑制作用的IC50值为2 431.32μg.mL-1,其酶解物IC50值降低为1 271.46μg.mL-1。R-藻红蛋白对肝癌细胞HepG-2抑制作用的IC50值为1 593.61μg.mL-1,其酶解物IC50值降低为512.05μg.mL-1。【结论】经木瓜蛋白酶酶解后,R-藻红蛋白酶解物具有较强的抗氧化和抑瘤活性。酶解技术可作为进一步提高R-藻红蛋白生物活性的有效手段。

大眼金枪鱼头蛋白酶解物1ku超滤组分的抗氧化活性及其理化性质

研究大眼金枪鱼头蛋白酶解物1 ku超滤组分体外的还原力、自由基清除能力及对衰老小鼠体内抗氧化能力的影响,分析1 ku超滤组分的一般成分、氨基酸组成及分子量分布,为进一步分离纯化金枪鱼头抗氧化肽提供基础。体外结果显示,1 ku超滤组分对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH自由基的清除活性随浓度的增加而增强,IC50分别为1.38、0.73与0.93mg/mL,还原力也随浓度的增加而增大,在浓度为12.5 mg/mL时为0.763;体内结果显示,灌胃30 mg/kg的1 ku超滤组分连续42 d,D-半乳糖致衰老小鼠肝组织的超氧化物歧化酶（SOD）活性、肝组织和血清的谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性显著提高（P〈0.05）,血清丙二醛（MDA）含量显著降低（P〈0.01）;理化分析结果显示,1 ku超滤组分（干基计）蛋白质含量为96.40%,脂肪0.11%,灰分4.86%,疏水性氨基酸占氨基酸总量的35.8%,活性组分分子量在1 802~2 519 u和422~922 u。