放疗前后宫颈鳞癌组织凋亡指数与bcl-2、bax基因表达的相关性研究

检测了宫颈鳞癌患者放疗前和放疗中凋亡指数 (AI)及bcl- 2、bax的基因表达 ,探讨了宫颈癌组织中基因表达与凋亡之间的关系。采用免疫组化SABC法检测bcl- 2和bax基因的表达 ,TUNEL法检测宫颈癌活检组织的细胞凋亡水平。在此基础上分析bcl- 2和bax基因表达的细胞阳性率与凋亡指数的关系。结果表明 ,X射线照射 10Gy后 ,宫颈癌组织bax基因表达增强 (p<0 .0 5 ) ,凋亡指数亦明显增加 (p <0 .0 1) ,bcl- 2基因表达的细胞阳性率水平无明显改变 (p >0 .0 5 )。照射前宫颈癌组织bcl- 2和bax的基因综合表达细胞阳性率与自发凋亡相关性较差 (p >0 .0 5 ,r=0 .370 3,其上界为 0 .70 71) ,而 10Gy照射后 ,宫颈癌组织中bcl- 2和bax的综合表达细胞阳性率与辐射诱导的凋亡具有明显的相关性 (p <0 .0 5 ,r =0 .5 2 6 4,其上界为 0 .70 71)。

Caspase活化的细胞凋亡在非小细胞肺癌组织中的表达

目的 观察非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中Caspase活化的癌细胞凋亡与临床病理特征的关系。 方法 对手术切除的NSCLC组织标本 5 0例 (其中鳞癌 2 4例 ,腺癌 2 6例 ) ,采用Caspase特异的单克隆抗体—M 30CytoDEATH免疫组化染色方法显示凋亡细胞 ,计算凋亡指数 (AI)。结果 2 8.0 % ( 14 /5 0 )的肺癌组织标本中可见不同程度的M 30表达 ,其中肺鳞癌组织的M 30阳性表达率 ( 41.7% )明显高于肺腺癌 ( 15 .3% ) ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。肺鳞癌组织的AI亦高于腺癌 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。低分化NSCLC组织的AI高于中、高分化的NSCLC组织 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。低分化鳞癌组织的AI明显高于中、高分化的鳞癌 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。M 30的表达与其它临床病理学特征无相关性。结论 非小细胞肺癌组织中存在Cas pase活化的自发性癌细胞凋亡机制 。

幽门螺杆菌对大鼠乙酸胃溃疡愈合的影响及机制

目的探讨幽门螺杆菌对大鼠乙酸胃溃疡愈合的作用及机制。方法幽门螺杆菌感染大鼠4周后,制作成乙酸胃溃疡模型,放免法测定血清胃泌素、血清生长抑素,胃粘膜表皮生长因子含量;切口末端标记法测定凋亡指数;液相竞争法测定血清肿瘤坏死因子含量;薄层分析法测定血清血小板活化因子含量。结果 Hp+乙酸溃疡组与乙酸溃疡组相比,在第3、8、16天,血清胃泌素含量分别增高(P<0.01);血清生长抑素含量分别降低(P<0.01);胃粘膜表皮生长因含量分别降低(P<0.01);凋亡指数分别增高(P<0.01);血清 PAF 和 TNF-α含量分别增高(P<0.01)。结论幽门螺杆菌具有延迟大鼠乙酸胃溃疡愈合的作用。

宫颈鳞癌患者组织自发性凋亡和辐射诱导凋亡与放疗疗效的关系

目的探讨宫颈鳞癌患者组织细胞自发凋亡和放疗10Gy后辐射诱导的凋亡与放疗疗效的关系,快速确定宫颈鳞癌的辐射敏感性,为肿瘤放射治疗方案的个体化提供理论依据。方法采用核酸电泳和TUNEL方法检测宫颈癌活检组织中细胞凋亡水平。结合病人接受根治性放疗后的疗效,分析细胞凋亡指数与放疗疗效的关系。结果核酸电泳,在放疗后的宫颈癌组织出现典型的DNA梯状带(DNAladder)。TUNEL标记发现,照射前宫颈癌组织存在较低的细胞凋亡指数,但与其放疗的疗效具有相关性;放疗10Gy后凋亡指数(AI10)明显增加(P<0.01),但未观察到与放疗疗效的关系。结论自发性凋亡指数(AI0)可作为宫颈鳞状细胞癌放疗疗效的预测指标。

细胞凋亡指数在口腔鳞状细胞癌中的预后意义

目的:探讨细胞凋亡与口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)预后之间的关系。方法:48例患者均接受过外科切除手术治疗并被分成2组:24例接受新辅助化疗及另外的24例仅接受外科手术治疗。通过TUNEL法,评价经福尔马林固定、石蜡包埋预处理的48例OSCC标本的细胞凋亡水平,并且将TUNEL法标记的凋亡细胞百分比表示为细胞凋亡指数(apoptotic index,AI)。结果:在仅接受外科手术治疗的患者组,高AI与好的预后显著相关(P<0.05)。结论:结合其它附加信息,如肿瘤分级、治疗方法,AI值可以作为OSCC患者的一个可靠的预后因子。

Ⅰ期非小细胞肺癌的分子预后

目的联合检测Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)的细胞增殖,凋亡和血管生成,探讨Ⅰ期非小细胞肺癌预后分层。方法应用免疫组织化学方法检测118例Ⅰ期非小细胞肺癌,30例肺良性组织和30例正常肺组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达,应用Ki67标记检测细胞增殖指数(PI)。TUNEL法检测70例Ⅰ期非小细胞肺癌,30例正常肺组织凋亡指数(AI)。结果单因素分析结果表明,肿瘤血管浸润、VEGF高表达、高PI、低AI为Ⅰ期非小细胞肺癌的不良预后因素。多因素分析结果显示,肿瘤血管浸润(BVI)、VEGF及PI可以作为影响Ⅰ期非小细胞肺癌预后的独立因素。根据免疫组化综合评分(IRS)IRS=VEGF+PI+AI,将患者分为低危组及高危组,5年总体生存率分别为82.22%,23.33%,有显著性差异(P=0.0056)。综合评分可作为独立预后因素(RR=4.878,95%CI:1.379～17.258,P=0.014)。结论联合检测肿瘤的细胞增殖,凋亡和血管生成,可能实现对Ⅰ期非小细胞肺癌的预后分层,判断预后以及指导治疗。

大肠良恶性病变细胞凋亡与增殖的观察

目的 观察凋亡指数 (AI)和分裂指数 (MI)在病变的生物学行为及判断预后中的价值。方法 用62例大肠良恶性病变标本 ,利用图像分析系统 ,观察分析细胞的凋亡指数及分裂指数与病变性质的关系。结果 正常粘膜上皮细胞AI为 5± 1,在浸润性大肠癌病变中AI为 3.4± 1.87。统计学分析处理发现 ,浸润性癌细胞AI显著低于其他病变 (P <0 .0 1) ,而MI显著高于其他病变 (P <0 .0 1) ,表明细胞生长旺盛。结论 提示AI。

I期非小细胞肺癌的分子预后

目的 联合检测I期非小细胞肺癌（NSCLC）的细胞增殖、凋亡和血管生成，探讨I期非小细胞肺癌预后分层。方法应用免疫组织化学方法检测118例I期非小细胞肺癌、30例肺良性组织和30例正常肺组织血管内皮生长因子（VEGF）的表达，应用比Ki67标记检测细胞增殖指数（PI）。TUNEL法检测70例I期非小细胞肺癌，30例正常肺组织凋亡指数（AI）。结果单因素分析结果表明，肿瘤血管浸润、VEGF高表达、高PI、低AI为I期非小细胞肺癌的不良预后因素。多因素分析结果显示，肿瘤血管浸润（BVI、VEGF及PI可以作为影响I期非小细胞肺癌预后的独立因素。根据免疫组化综合评分（IRS）IRS=VEGF＋PI＋AI，将患者分为低危组及高危组，5年总体生存率分别为82．22％、23．33％，有显著性差异（P=0．0056）。综合评分可作为独立预后因素（RR=4．878，95％CI：1．379～17．258，P=O．014）。结论联合检测肿瘤的细胞增殖、凋亡和血管生成，可能实现对I期非小细胞肺癌的预后分层，判断预后以及指导治疗。

血管生成抑制剂NM-3抑制胃癌生长机制研究

目的:研究血管生成抑制剂NM-3对胃癌生长的影响,探讨其抑制胃癌生长可能存在的分子机制。方法:建立人胃癌裸鼠皮下种植模型。将40只荷瘤裸鼠随机分成4组,种植后第2 d开始分别腹腔内注入生理盐水(2 ml/kg,对照组)、NM-3(剂量分别为10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg,治疗组),每周2次,共6周。第7周处死动物,测量皮下肿瘤体积、计算抑瘤率;取瘤组织行免疫组化染色测定微血管密度(MVD)、胃癌细胞凋亡指数(AI)。结果:NM-3剂量为10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg的皮下肿瘤体积分别为(915.46±39.66)mm3(、871.26±38.84)mm3(、812.27±32.59)mm3,明显低于生理盐水对照组(1 609.55±41.32)mm3(P<0.05),抑瘤率为43.20%、45.87%、49.53%;和生理盐水组比较,NM-3治疗后肿瘤的微血管密度明显减少,胃癌细胞的凋亡指数显著增加(P均<0.05),且与治疗剂量有关。结论:NM-3可通过抑制肿瘤微血管生成,诱导胃癌细胞凋亡,抑制体内人胃癌生长。

清毒汤对实验性重症肝损伤大鼠Bax蛋白及Bcl-2蛋白表达的影响

目的观察清毒汤对实验性重症肝损伤大鼠Bax、Bcl-2蛋白的表达以及肝细胞凋亡的影响,探讨该方对慢性重型肝炎(chronic severe hepatitis,CSH)大鼠肝细胞凋亡作用机制。方法建立硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)致实验性大鼠重症肝损伤模型,给予清毒汤干预后,用原位细胞凋亡技术法检测大鼠肝细胞凋亡指数(apoptotic index,AI)、蛋白免疫印迹法检测大鼠肝组织中Bax、Bcl-2蛋白表达的水平。结果与正常组比较,模型组AI显著增高(P<0.05),清毒汤各组较模型组AI明显降低,(P<0.01或P<0.05)。清毒汤对实验性肝损伤大鼠模型Bax蛋白表达具有抑制作用(P<0.01),对Bcl-2蛋白表达具有促进作用(P<0.01),能够提高Bcl-2/Bax的比值(P<0.01)。结论清毒汤可以调控Bax、Bcl-2蛋白表达量、降低AI,减轻肝细胞的凋亡和坏死。

体内药敏实验中瘤细胞凋亡/增殖变化的实验研究

目的探讨体内药敏实验中化疗前后瘤细胞凋亡指数/增殖指数变化的意义.方法①裸鼠60只分为生理盐水组及5-Fu、DDP、MMC化疗组,每组15只.所有小鼠均采用同一新鲜胃癌标本进行SRCA实验.测量移植瘤体积变化差值△TS值,计算肿瘤消退率RR(%).②分别用免疫组化和TUNEL方法检测移植瘤及肿瘤标本的增殖指数和凋亡指数.③比较分析移植前后瘤的在肿瘤消退率、凋亡指数与增殖指数的差异.结果6天法SRCA中,敏感组移植前后瘤细胞凋亡指数/移植瘤的增殖指数(AI/PI)的差异有显著性,两不敏感组中移植前后瘤细胞的(AI/PI)的差异无显著性(p>0.05).结论在裸鼠SRCA药物敏感性试验中,瘤细胞移植前后AI/PI的变化对评价体内药物敏感性有重要意义.

幕上星形细胞瘤的凋亡及相关基因p53、bcl-2的表达

目的 探讨幕上星形细胞瘤的细胞凋亡以及p5 3、bcl 2在凋亡中的意义。方法 免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡 ,SP法检测p5 3、bcl 2 ,实验数据由SPSS软件包分析处理。结果 细胞凋亡指数 (AI)随着肿瘤级别的增高而增加 ,各级别肿瘤间AI的差异均有显著性意义 (P <0 0 1) ;死亡组与存活组的AI的差异有显著性意义 (P <0 0 1) ,AI>0 5 %组与AI <0 5 %组的术后 1年生存率的差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ;AI/MI (分裂指数 )在高、低级别的星形细胞瘤中的差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。p5 3阳性组与p5 3阴性组的AI、MI术后 1年生存率的差异均有显著性意义 (均P<0 0 5 )。bcl 2阳性组与阴性组的AI、MI、预后均无统计学意义 (均 P >0 0 5 )。多因素logistic回归分析年龄分组、AI、AI/MI、放疗均与预后优劣相关。结论 AI可以作为提示预后的指标 ,并对判断幕上星形细胞瘤的生物学行为及肿瘤分级有指导意义 ;AI/MI值越小 ,肿瘤的恶性转化能力越强 ,预后越差 ;p5 3过度表达提示肿瘤恶性程度高、预后差 ;AI <0 5 %、AI/MI值大的、年龄较轻的、术后放疗病人预后较好。

促心肌素C-末端肽对再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的观察促心肌素(CT-1)C-末端肽在缺血再灌注损伤前后进行干预对大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法制备心肌缺血再灌注损伤(MI/R)模型,27只SD大鼠随机分为正常组(N,n=5)、再灌注损伤模型组(D,n=6)、MI/R后CT-1干预组(T,n=8)和MI/R前CT-1干预组(O,n=8)。检测各组血清肌酸激酶(CK)活性和丙二醛(MDA)浓度;并取缺血区及其周围心脏组织计算心肌细胞凋亡指数(AI)。结果 MI/R后,模型组SD大鼠的平均存活时间为(93.17±24.7)min,在MI/R前的CT-1干预组为(87.88±18.3)min,MI/R后的CT-1干预组为(155.5±80.13)min,明显长于模型组和MI/R前干预组(q值分别为3.171、3.716,P<0.01);模型组SD大鼠的血清CK、MDA浓度升高,梗死区周围的AI也升高(N vs D,q值分别为14.391、11.015、21.668,P<0.01);MI/R后CT-1干预组的大鼠,血清CK、MDA浓度及AI均有所降低(T vs D,q值分别为10.649、6.167、16.493,P<0.01),但仍高于正常组(q值分别为5.197、5.782、7.391,P<0.01);CT-1前干预组的动物,血清CK、MDA浓度明显高于模型组(q值分别为6.147、10.551,P<0.01),AI高于正常组(q=24.609,P<0.01),但与模型组比较无明显差异(q=1.683,P>0.05);心肌细胞的凋亡情况与心肌的损伤及氧化损伤程度,有明显的相关性(r值分别为0.9245、0.8679,P<0.01)。结论 CT-1 C-末端多肽再灌注早期短期使用能减轻心肌组织损伤及氧化损伤,以及心肌细胞凋亡的程度,使动物存活时间延长;但腹腔注射CT-1 C-末端多肽较长时间后,大鼠对MI/R的耐受力降低,组织损伤及氧化损伤的程度明显加重,且梗死周边区有相当的心肌细胞发生凋亡,动物的存活时间也较短。