导致阿米卡星双圈耐药肠杆菌科细菌耐药性研究

目的探讨临床分离的纸片扩散法药物敏感性试验对阿米卡星(AMK)呈双圈耐药的肠杆菌科细菌相关携带基因及药物诱导对耐药基因mRNA表达量的影响。方法收集纸片扩散法药物敏感性试验对AMK呈双圈耐药的大肠埃希菌(编号Eco85)和肺炎克雷伯菌(编号Kpn110)各1株;纸片诱导法探讨耐药表型的改变;聚合酶链反应(PCR)扩增氨基糖苷类修饰酶基因、整合子及其可变区以及16S rRNA甲基化酶基因;逆转录PCR分析armA基因在AMK诱导前后菌株中的表达情况;接合试验探讨耐药基因的可传递性。结果 Eco85和Kpn110分别在第10代和第16代诱导后转变为双圈消失;2株菌均扩增出Ⅰ类整合子基因,可变区分别携带aadA5-dfra17和aadA2-dfrA12基因盒,未扩增出Ⅱ和Ⅲ类整合子基因;Eco85扩增出aac(6)-Ⅰ基因,而Kpn110扩增出ant(3″)-Ⅰ基因;Eco85和Kpn110均扩增出armA基因,基因测序未发现突变,未检出rmtB基因;经AMK诱导后菌株armA基因mRNA表达量明显上升;接合试验未获成功。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对AMK呈双圈耐药可能与16S rRNA甲基化酶armA基因的诱导表达相关。

鲍曼不动杆菌armA基因的分布与耐药性的研究

目的调查我院鲍曼不动杆菌中16S rRNA甲基化基因armA的分布以及与鲍曼不动杆菌耐药谱的关系，并初步探讨其在分子流行病学分析中的作用。方法收集72株鲍曼不动杆菌，采用K-B法对鲍曼不动杆菌进行药物敏感试验，后采用PCR筛选鲍曼不动杆菌的16S rRNA甲基化基因。armA，并利用随机扩增多态性DNA法（RAPD）技术进行基因分型。统计各鲍曼不动杆菌菌株对多种氨基糖苷类药物的药敏结果，并分析基因型与耐药性的关系。结果根据PCR产物片段大小，72株鲍曼不动杆菌共有armA基因阳性菌株20株（27．8％）。含有armA基因型鲍曼不动杆菌菌株对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星的耐药率均为90％；随机扩增多态性DNA法显示20株armA基因阳性的鲍曼不动杆菌主要分为7型，A型为优势克隆株。结论产16S rRNA甲基化基因armA的鲍曼不动杆菌菌株可对多种氨基糖苷类抗生素高水平耐药。同一克隆菌株在病房内和病房间的传播为我院armA以基因传播的主要方式。

阴沟肠杆菌临床分离株armA基因分布与分子分型研究

目的调查某医院阴沟肠杆菌临床分离株的耐药性和arm A基因分布情况,探索arm A阳性菌株与耐药性的关系及其分子分型特征。方法采用微量肉汤稀释法对51株临床分离的阴沟肠杆菌进行药敏试验;荧光定量PCR方法检测16S rRNA甲基化基因arm A;脉冲场凝胶电泳试验(PFGE)分析arm A阳性菌株间的亲缘关系。结果阴沟肠杆菌临床分离株对阿米卡星和庆大霉素的耐药率分别为39.2%和54.9%,arm A基因阳性率为23.5%,arm A阳性菌株对阿米卡星和庆大霉素均耐药;12株携带arm A基因菌株主要分为5型,无明显优势菌株。结论产16S rRNA甲基化酶arm A的阴沟肠杆菌菌株对氨基糖苷类药物耐药,应加强对该基因监测,合理指导临床抗生素应用。

广泛耐药肺炎克雷伯菌16S rRNA甲基化酶基因的检测

目的 检测临床分离的广泛耐药肺炎克雷伯菌菌株的16S rRNA甲基化酶基因。方法 2019年2月—2020年12月延安大学附属医院分离的广泛耐药肺炎克雷伯菌59株,行菌株对4种抗生素的药敏试验,用PCR方法检测6种16S rRNA甲基化酶基因。结果 肺炎克雷伯菌对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、奈替米星的耐药率分别为88.14%、98.31%、89.83%、91.53%,对庆大霉素的耐药率高于阿米卡星、奈替米星,差异有统计学意义(P<0.05)。16S rRNA甲基化酶基因检出率为66.10%,其中armA、rmtB基因检出率分别为23.73%、42.37%,未检出其他4种甲基化酶基因。结论16S rRNA甲基化酶基因在耐药肺炎克雷伯菌分离株中广泛分布,以armA、rmtB基因为主。