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拟南芥AST基因的精细作图(英文)
被引量:
1
1
作者
毛爱军
王台
宋艳茹
《Acta Botanica Sinica》
CSCD
2003年第1期88-92,共5页
拟南芥(Arahidopsis thaliana (L.)Heynh.)ast(anthocyanin spotted testa)突变体是由碳离子辐射诱导产生的与花青苷生物合成有关的基因突变体,受单隐性核基因控制。根据拟南芥数据库中的sNPs(single nucleotide poly-mophisms)序列和插...
拟南芥(Arahidopsis thaliana (L.)Heynh.)ast(anthocyanin spotted testa)突变体是由碳离子辐射诱导产生的与花青苷生物合成有关的基因突变体,受单隐性核基因控制。根据拟南芥数据库中的sNPs(single nucleotide poly-mophisms)序列和插入/缺失多态性(insertion/deletion polymorphisms)序列,设计了一系列分子标记。采用图位克隆策略,应用这些分子标记完成了对拟南芥AST基因的精细作图,成功地将AST基因定位到BAC克隆T13M11上,初步认为该BAC克隆中的基因T13M11.8可能是AST基因。该基因的DNA序列长1432 bp,含有6个外显子和5个内含子,编码的蛋白与花青苷生物合成途径中的二氢黄酮醇-4-还原酶有较高的同源性。将进一步通过功能互补实验验证图位克隆的结果。
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关键词
拟南芥
ast
基因
精细作图
ast
突变
分子标记
图位克隆
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职称材料
用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异
被引量:
7
2
作者
毛爱军
王台
宋艳茹
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期736-739,共4页
通过调整差异显示反转录PCR (DDRT PCR)中总RNA、锚定引物、随机引物、cDNA和dNTP等关键试剂的用量 ,优化了适用于银染检测的DDRT PCR方法 .PCR扩增产物经 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离后 ,银染能检测到多而清晰的条带 .泳道中的...
通过调整差异显示反转录PCR (DDRT PCR)中总RNA、锚定引物、随机引物、cDNA和dNTP等关键试剂的用量 ,优化了适用于银染检测的DDRT PCR方法 .PCR扩增产物经 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离后 ,银染能检测到多而清晰的条带 .泳道中的条带数最少为 40个 ,最多达 80个 ,平均为 6 0个 ,条带大小分布在 10 0~ 90 0bp范围 ,灵敏度为 5pg/mm2 .此方法操作简便快速 ,灵敏度高 ,重复性好 .采用这个改良的方法 ,分析了拟南芥野生型和ast突变型基因表达的差异 .从 16 0 0 0个cDNA扩增产物条带中筛选出 2 8个差异条带 .二次PCR扩增后 ,进一步筛选出 13个差异条带 ,其中 7个是野生型特异表达的 ,6个是突变型特异表达的 。
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关键词
差异显示反转录PCR
银染
拟南芥
ast
突变型
植物
基因表达
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职称材料
题名
拟南芥AST基因的精细作图(英文)
被引量:
1
1
作者
毛爱军
王台
宋艳茹
机构
中国科学院植物研究所资源植物分子与发育生物学研究中心
出处
《Acta Botanica Sinica》
CSCD
2003年第1期88-92,共5页
基金
中国科学院生物科学与生物技术研究特别支持费课题(财政部专项)(SIZ98-2-14)~~
文摘
拟南芥(Arahidopsis thaliana (L.)Heynh.)ast(anthocyanin spotted testa)突变体是由碳离子辐射诱导产生的与花青苷生物合成有关的基因突变体,受单隐性核基因控制。根据拟南芥数据库中的sNPs(single nucleotide poly-mophisms)序列和插入/缺失多态性(insertion/deletion polymorphisms)序列,设计了一系列分子标记。采用图位克隆策略,应用这些分子标记完成了对拟南芥AST基因的精细作图,成功地将AST基因定位到BAC克隆T13M11上,初步认为该BAC克隆中的基因T13M11.8可能是AST基因。该基因的DNA序列长1432 bp,含有6个外显子和5个内含子,编码的蛋白与花青苷生物合成途径中的二氢黄酮醇-4-还原酶有较高的同源性。将进一步通过功能互补实验验证图位克隆的结果。
关键词
拟南芥
ast
基因
精细作图
ast
突变
分子标记
图位克隆
Keywords
ast mutant
ast
gene
molecular marker
fine mapping
map-based cloning
Arabidopsis
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异
被引量:
7
2
作者
毛爱军
王台
宋艳茹
机构
中国科学院植物研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期736-739,共4页
基金
中国科学院生物科学与生物技术特别支持费资助课题 (STZ98 2 14 )~~
文摘
通过调整差异显示反转录PCR (DDRT PCR)中总RNA、锚定引物、随机引物、cDNA和dNTP等关键试剂的用量 ,优化了适用于银染检测的DDRT PCR方法 .PCR扩增产物经 6 %变性聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳分离后 ,银染能检测到多而清晰的条带 .泳道中的条带数最少为 40个 ,最多达 80个 ,平均为 6 0个 ,条带大小分布在 10 0~ 90 0bp范围 ,灵敏度为 5pg/mm2 .此方法操作简便快速 ,灵敏度高 ,重复性好 .采用这个改良的方法 ,分析了拟南芥野生型和ast突变型基因表达的差异 .从 16 0 0 0个cDNA扩增产物条带中筛选出 2 8个差异条带 .二次PCR扩增后 ,进一步筛选出 13个差异条带 ,其中 7个是野生型特异表达的 ,6个是突变型特异表达的 。
关键词
差异显示反转录PCR
银染
拟南芥
ast
突变型
植物
基因表达
Keywords
differential display reverse transcription polymerase chain reaction
silver staining
Arabidopsis thaliana
ast mutant
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
拟南芥AST基因的精细作图(英文)
毛爱军
王台
宋艳茹
《Acta Botanica Sinica》
CSCD
2003
1
下载PDF
职称材料
2
用差异显示反转录PCR银染技术研究植物基因表达的差异
毛爱军
王台
宋艳茹
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2001
7
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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引证文献
统计分析
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