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AtTPS03基因RNA干扰载体的构建及拟南芥转化 被引量:4
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作者 杜培粉 伍林涛 +3 位作者 姚远颋 尹峰 阮颖 刘春林 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第3期451-455,共5页
本研究以拟南芥DNA为模板,将罗勒烯合成酶AtTPS03基因的一个目的片段克隆到T-载体上。对克隆片段测序后,进行Blast比对,结果目的片段的序列与GenBank上报道的序列同源性达到100%。根据RNA干扰的基本原理,将目的片段正反向连到干扰载体pF... 本研究以拟南芥DNA为模板,将罗勒烯合成酶AtTPS03基因的一个目的片段克隆到T-载体上。对克隆片段测序后,进行Blast比对,结果目的片段的序列与GenBank上报道的序列同源性达到100%。根据RNA干扰的基本原理,将目的片段正反向连到干扰载体pFGC5941查尔酮内含子的两侧,经限制性酶切和PCR扩增检测,证明已成功构建了干扰载体P-2AT03。利用农杆菌介导的浸花法转化拟南芥。收获的种子在含草丁膦的培养基上筛选抗性苗,通过对抗性苗的PCR检测,已成功获得了12株转基因苗。这些转基因苗为进一步研究罗勒烯和罗勒烯合成酶的功能奠定了良好基础。 展开更多
关键词 attpS03基因 RNA干扰 拟南芥转化
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噬菌体φHAU3的cos位点及其与寄主相互作用的功能位点attP和attB的定位 被引量:1
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作者 周秀芬 邓子新 《病毒学报》 CSCD 北大核心 1995年第2期163-168,共6页
HAU3是寄主范围很广的放线菌噬菌体。Southern杂交实验表明,HAU3可以整合到吸水链霉菌应城变种10-22和变铅青链霉菌66的突变体ZX1的染色体中,形成溶原,其溶原菌自发释放HAU3,不受热激和紫外线照射的... HAU3是寄主范围很广的放线菌噬菌体。Southern杂交实验表明,HAU3可以整合到吸水链霉菌应城变种10-22和变铅青链霉菌66的突变体ZX1的染色体中,形成溶原,其溶原菌自发释放HAU3,不受热激和紫外线照射的诱导。通过比较HAU3衍生噬粒pIJ8300的DNA酶切片段在加热前、后电泳带谱的区别,将HAU3的cos位点在pIJ8300的图谱上得到了定位。还利用Southern杂交的方法定位了HAU3与宿主形成溶原时附着位点(attP),并利用脉冲电泳技术定位了在变铅青链霉菌ZX7和吸水链霉菌应城变种10-22中形成溶原的附着位点(attB)。这些信息均有利于以HAU3为基础的载体的发展和优化。 展开更多
关键词 噬菌体 attp attB cos位点 定位 功能位点
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应用接头PCR的方法扩增假attP位点
3
作者 欧海龙 黄英 《生命科学研究》 CAS CSCD 2009年第1期11-15,共5页
φC31整合酶可高效介导外源基因特异、稳定地与哺乳动物基因组发生重组反应,基因组中被整合的位点为假attP位点.运用接头PCR的方法对φC31整合酶介导的含有attB序列及表达绿色荧光蛋白(GFP)的载体在牛基因组中的一个新的特异整合位点(假... φC31整合酶可高效介导外源基因特异、稳定地与哺乳动物基因组发生重组反应,基因组中被整合的位点为假attP位点.运用接头PCR的方法对φC31整合酶介导的含有attB序列及表达绿色荧光蛋白(GFP)的载体在牛基因组中的一个新的特异整合位点(假attP位点)进行扩增,并且显示接头PCR技术在克隆与已知序列相邻的未知旁侧序列上其具有高效、特异、灵敏等特点. 展开更多
关键词 接头PCR ΦC31整合酶 attp位点 牛基因组
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Preparation and properties of PAn/ATTP/PE conductive composites 被引量:2
4
作者 邱建辉 冯辉霞 《中国有色金属学会会刊:英文版》 CSCD 2006年第B02期444-448,共5页
Polyaniline/Attapugite/ PE(PAn-ATTP/PE)composites containing particles with core-shell structure were obtained via the two-step blending processs. The experimental condition is as follows: Organo-attapulgite and PAn w... Polyaniline/Attapugite/ PE(PAn-ATTP/PE)composites containing particles with core-shell structure were obtained via the two-step blending processs. The experimental condition is as follows: Organo-attapulgite and PAn was obtained by modifying attapulgite with laury benzenesulfonic acid sodium salt and, then added to PE. The electrical conductivity, structure and properties of the composites were studied. Under the function of shear stress, core-shell structure particles with ATTP as the core and PAn as the shell were formed in the composites. The structure of PAn-ATTP/PE composites were characterized by FTIR,XRD,SEM, etc, respectively. The effects of concentration of doping agent on the conductivity and mechanical property of the composites were investigated. The mechanical properties and impact fracture surface of the ternary composites were studied by means of the tensile tester, SEM, etc. The results show that polyaniline encapsulated ATTP enhances the strength of the PE. And the conductivity of PAn-ATTP/PE composites of is improved effectively when polyaniline encapsulated ATTP is added. The composite have good conductivity when 10% polyaniline encapsulated ATTP is added. 展开更多
关键词 PAn/attp/PE导电复合物 制备 性质 聚苯胺 绿坡缕石
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PWA/TiO_2/ATTP复合催化剂光催化降解气相苯
5
作者 刘翠翠 郑吉宝 赵军 《巢湖学院学报》 2016年第3期50-54,共5页
通过溶胶-凝胶法制备PWA/TiO_2/ATTP复合催化剂,利用X射线衍射仪(XRD),扫描电子显微镜(SEM)及氮气吸脱附分析仪对复合催化剂进行了一系列表征。实验研究表明复合催化剂对气相苯具有良好的催化活性。当催化剂中PWA/TiO_2/ATTP的质量比1:5... 通过溶胶-凝胶法制备PWA/TiO_2/ATTP复合催化剂,利用X射线衍射仪(XRD),扫描电子显微镜(SEM)及氮气吸脱附分析仪对复合催化剂进行了一系列表征。实验研究表明复合催化剂对气相苯具有良好的催化活性。当催化剂中PWA/TiO_2/ATTP的质量比1:5:5,煅烧温度350℃,煅烧时间2 h时,在254 nm紫外照射2 h后苯去除率达到96.3%。同时,矿化实验表明复合催化剂能够将苯和中间产物氧化成二氧化碳。 展开更多
关键词 PWA TIO2 attp 复合催化剂
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“ATTPS”教学法在中职《物流中心运作与管理》课程中的应用
6
作者 韩月 《才智》 2018年第14期173-173,共1页
教学方法直接影响职业教育教学的有效性和职业教育质量,因此教学方法改革是提高教学质量的必由之路。本文在对学生特点和课程特点的分析基础上,阐述"ATTPS"教学法在物流专业课程中的具体实施过程,最后总结出"ATTPS"... 教学方法直接影响职业教育教学的有效性和职业教育质量,因此教学方法改革是提高教学质量的必由之路。本文在对学生特点和课程特点的分析基础上,阐述"ATTPS"教学法在物流专业课程中的具体实施过程,最后总结出"ATTPS"教学法的优势和在运用中存在的问题及其具体改进措施。 展开更多
关键词 attpS”教学法 教学质量 物流
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ΦC31整合酶介导猪基因组定点修饰的探讨 被引量:4
7
作者 毕延震 刘西梅 +3 位作者 华再东 张立苹 郑新民 肖红卫 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期187-193,共7页
高效与特异的基因组定点修饰是基因工程动物研究的前沿与难点.链霉菌噬菌体ΦC31整合酶能介导含attB位点的外源基因定点整合于多种真核生物基因组的假attP位点,可维持外源基因的正常结构及高效表达.本文探讨ΦC31整合酶介导外源基因在... 高效与特异的基因组定点修饰是基因工程动物研究的前沿与难点.链霉菌噬菌体ΦC31整合酶能介导含attB位点的外源基因定点整合于多种真核生物基因组的假attP位点,可维持外源基因的正常结构及高效表达.本文探讨ΦC31整合酶介导外源基因在猪基因组内定点整合的分子基础.构建含attB位点的报告载体pEGFP-N1-attB,与ΦC31整合酶表达载体pCMV-INT共转染猪肾PK15细胞,G418筛选获得单克隆细胞系.实时荧光定量PCR筛选出单拷贝整合的转基因细胞系.TAIL-PCR鉴定出1个猪基因组假attP位点,位于猪1号染色体,watson链,坐标114220087-114220126,命名为pig-attP-1.测序结果显示,pEGFP-N1-attB在attB位点处断开插入到pig-attP-1.用荧光计测定细胞培养基上清EGFP含量发现,该转基因细胞系EGFP的表达水平是本底的50倍(13500 AU vs.280 AU),表明pig-attP-1是利于外源基因高效表达的"友好位点".该研究不仅为实现外源基因在猪基因组内的定点整合提供了新策略,也为创制基因工程猪、建立动物生物反应器等研究注入了新思路. 展开更多
关键词 链霉菌噬菌体φC31整合酶 attp位点 基因工程动物 定点修饰
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钴负载凹凸棒石基复合吸附脱硫剂脱除SO_2的实验研究 被引量:10
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作者 张婷 俞树荣 +1 位作者 冯辉霞 王毅 《矿物岩石》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第3期24-28,共5页
以甘肃产凹凸棒石(ATTP)为基体,辅以活性氧化铝、成型剂等成分,经造粒后附载过渡金属氧化物Co3O4,制得了一种新型复合吸附脱硫剂Co3O4-γ-Al2O3/ATTP。通过对该物质的动态脱硫实验,研究发现ATTP含量、焙烧温度、脱硫剂含水率及... 以甘肃产凹凸棒石(ATTP)为基体,辅以活性氧化铝、成型剂等成分,经造粒后附载过渡金属氧化物Co3O4,制得了一种新型复合吸附脱硫剂Co3O4-γ-Al2O3/ATTP。通过对该物质的动态脱硫实验,研究发现ATTP含量、焙烧温度、脱硫剂含水率及过渡金属浸渍液浓度对SO2脱除性能均有影响,当ATTP含量为60%~70%,焙烧温度为600℃,Co(NO3)2浸渍液浓度为20%左右,且脱硫剂的含水率达到15%~30%时,该复合吸附脱硫剂具有较强的吸附性能和催化脱硫能力,其硫容可高达19.74%,脱硫效果优于CuO-γ-Al2O3/ATTP脱硫剂和CuO/γ-Al2O3脱硫剂。 展开更多
关键词 凹凸棒石(attp) 活性氧化铝 CO3O4 吸附 催化 脱硫
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拟南芥β-罗勒烯合成酶基因T-DNA插入突变体的鉴定
9
作者 马泉芳 魏然 刘春林 《作物研究》 2011年第5期477-481,共5页
β-罗勒烯(β-Ocimene)是一种单萜挥发性有机物,亦是一种重要的植物通讯信号分子。为了进一步研究β-罗勒烯的作用机理,需要获得β-罗勒烯合成酶基因表达沉默的实验材料。根据TAIR网站上公布的β-罗勒烯合成酶信息,从美国拟南芥生物资... β-罗勒烯(β-Ocimene)是一种单萜挥发性有机物,亦是一种重要的植物通讯信号分子。为了进一步研究β-罗勒烯的作用机理,需要获得β-罗勒烯合成酶基因表达沉默的实验材料。根据TAIR网站上公布的β-罗勒烯合成酶信息,从美国拟南芥生物资源中心购买该基因的T-DNA插入突变体材料,运用双引物法对这些突变体进行了T-DNA插入位点的鉴定,获得8株稳定遗传的纯合突变体,该结果为深入研究β-罗勒烯的功能奠定了良好基础。 展开更多
关键词 β-罗勒烯 单萜合酶attpS03 T-DNA插入突变 拟南芥
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应急物流系统绩效评价 被引量:14
10
作者 钟利军 《物流工程与管理》 2009年第3期68-69,共2页
在阐述应急物流系统运作流程的基础上,构建了应急物流系统运作绩效评价指标体系,建立了应急物流系统运作绩效模糊综合评价模型,并采用AHP分析法确定权重。最后,通过一个实例验证了该模型的可行性。
关键词 应急物流系统 绩效评价 AHP分析法 模糊综合评判
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首个治疗成年获得性血栓性血小板减少性紫癜的纳米抗体药物caplacizumab 被引量:2
11
作者 李蓉蓉 白秋江 《中国药师》 CAS 2020年第3期520-523,共4页
美国食品药品管理局(FDA)批准了首个用于治疗成年获得性血栓性血小板减少性紫癜(aTTP)的纳米抗体药物caplacizumab(商品名Cablivi?),该药作用机制主要指向血管性血友病因子(vWF)体片段,与血浆置换和免疫抑制治疗联合使用用于治疗成年aTT... 美国食品药品管理局(FDA)批准了首个用于治疗成年获得性血栓性血小板减少性紫癜(aTTP)的纳米抗体药物caplacizumab(商品名Cablivi?),该药作用机制主要指向血管性血友病因子(vWF)体片段,与血浆置换和免疫抑制治疗联合使用用于治疗成年aTTP患者。本文就caplacizumab的疗效和安全进行评价,详细介绍药物信息,给后期患者合理选择使用此药物做一参考。 展开更多
关键词 caplacizumab 获得性血栓形成血小板减少性紫癜 血管性血友病因子 ADAMTS13蛋白酶
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Acquisition and dissemination mechanisms of CTXΦ in Vibrio cholerae : New paradigm for dif residents
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作者 Bhabatosh Das G Balakrish Nair Rupak K Bhadra 《World Journal of Medical Genetics》 2014年第2期27-33,共7页
Vibrio cholerae(V. cholerae) genome is equipped with a number of integrative mobile genetic element(IMGE) like prophages, plasmids, transposons or genomic islands, which provides fitness factors that help the pathogen... Vibrio cholerae(V. cholerae) genome is equipped with a number of integrative mobile genetic element(IMGE) like prophages, plasmids, transposons or genomic islands, which provides fitness factors that help the pathogen to survive in changing environmental conditions. Metagenomic analyses of clinical and environmental V. cholerae isolates revealed that dimer resolution sites(dif) harbor several structurally and functionally distinct IMGEs. All IMGEs present in the dif region exploit chromosomally encoded tyrosine recombinases, Xer C and Xer D, for integration. Integration takes place due to site-specific recombination between two specific DNA sequences; chromosomal sequence is called att B and IMGEs sequence is called att P. Different IMGEs present in the att P region have different attP structure but all of them are recognized by Xer C and Xer D enzymes and mediate either reversible or irreversible integration. Cholera toxin phage(CTXΦ), a lysogenic filamentous phage carrying the cholera toxin genes ctx AB, deserves special attention because it provides V. cholerae the crucial toxin and is always present in the dif region of all epidemic cholera isolates. Therefore, understanding the mechanisms of integration and dissemination of CTXΦ, genetic and ecological factors which support CTXΦ integration as well as production of virion from chromosomally integrated phage genome and interactions of CTXΦ with other genetic elements present in the genomes of V. cholerae is important for learning more about the biology of cholera pathogen. 展开更多
关键词 Vibrio cholerae Cholera toxin phage VGJΦ Plasmids Integrative mobile genetic element Xer C Xer D Dimer resolution sites att P attB
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φC31整合酶与生物医学 被引量:2
13
作者 徐焕宇 马晴雯 《医学分子生物学杂志》 CAS CSCD 2007年第4期339-342,共4页
来源于链霉菌噬菌体фC31的整合酶可通过介导链霉菌attB序列与多种生物内源性特异性序列产生重组反应,将外源基因定点整合到生物基因组中。在基因治疗研究中应用φC31整合酶,可使外源基因长期高水平表达,从而达到较好的治疗效果;且由于... 来源于链霉菌噬菌体фC31的整合酶可通过介导链霉菌attB序列与多种生物内源性特异性序列产生重组反应,将外源基因定点整合到生物基因组中。在基因治疗研究中应用φC31整合酶,可使外源基因长期高水平表达,从而达到较好的治疗效果;且由于外源基因定点整合,故安全隐患较小。此外,фC31整合酶还可以用来生产外源基因定点整合的转基因动物,在基础研究和应用研究领域都有很高的潜在应用价值。 展开更多
关键词 ΦC31整合酶 基因治疗 转基因动物 attp位点
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A GFP-based bacterial biosensor with chromosomally integrated sensing cassette for quantitative detection of Hg(Ⅱ) in environment 被引量:6
14
作者 Himanshu Priyadarshi Absar Alam +4 位作者 Gireesh-Babu P Rekha Das Pankaj Kishore Shivendra Kumar Aparna Chaudhari 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2012年第5期963-968,共6页
A mercury biosensor was constructed by integrating biosensor genetic elements into E. coli JM109 chromosome in a single copy number, using the attP/attB recombination mechanism of λ phage. The genetic elements used i... A mercury biosensor was constructed by integrating biosensor genetic elements into E. coli JM109 chromosome in a single copy number, using the attP/attB recombination mechanism of λ phage. The genetic elements used include a regulatory protein gene (merR) along with operator/promoter (O/P) derived from the mercury resistance operon from pDU1358 plasmid of Serratia marcescens. The expression of reporter gene gfp is also controlled by merR/O/P. Integration of the construct into the chromosome was done to increase the stability and precision of the biosensor. This biosensor could detect Hg(Ⅱ) ions in the concentration range of 100–1700 nmol/L, and manifest the result as the expression of GFP. The GFP expression was significantly different (P 0.05) for each concentration of inducing Hg(Ⅱ) ions in the detection range, which reduces the chances of misinterpretation of results. A model using regression method was also derived for the quantification of the concentration of Hg(Ⅱ) in water samples. 展开更多
关键词 attp/attB integration E. coli biosensor GFP MERCURY
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A Profile of Native Integration Sites Used by φC31 Integrase in the Bovine Genome 被引量:1
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作者 Lijuan Qu Qingwen Ma +5 位作者 Zaiwei Zhou Haiyan Ma Ying Huang Shuzhen Huang Fanyi Zeng Yitao Zeng 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 2012年第5期217-224,共8页
The Streptomyces phage φC31 integrase can efficiently target attB-bearing transgenes to endogenous pseudo attP sites within mammalian genomes. To better understand the activity of φC31 integrase in the bovine genome... The Streptomyces phage φC31 integrase can efficiently target attB-bearing transgenes to endogenous pseudo attP sites within mammalian genomes. To better understand the activity of φC31 integrase in the bovine genome, DNA sequences of 44 integration events were analyzed, and 32 pseudo attP sites were identified. The majority of these sites share a sequence motif that contains inverted repeats and has similarities to wild-type attP site. Genomic DNA flanking these sites typically contained repetitive sequence elements, such as short and long interspersed repetitive elements. These sequence features indicate that DNA sequence recognition plays an important role in guiding φC31-mediated site-specific integration. In addition, BF27 integration hotspot sites were identified in the bovine genome, which accounted for 13.6% of all isolated integration events and mapped to an intron of the deleted in liver cancer 1 (DLC1) gene. Also we found that the pseudo attP sites in the bovine genome had other features in common with those in the human genome. This study represents the first time that the sequence features of pseudo attP sites specific integrase system has great potential for applied modifications in the bovine genome were analyzed. We conclude that this site- of the bovine genome. 展开更多
关键词 φC31 integrase Pseudo attp sites Sequence motif Repetitive elements Bovine genome
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