结晶法分离精制混合植物甾醇中β-谷甾醇和豆甾醇

利用豆甾醇和b谷甾醇在正戊醇和环己酮中的溶解性差异以及两种甾醇在环己酮中溶解度对温度的依赖性不同,研究了以正戊醇和环己酮为溶剂,用结晶法从精制植物甾醇中分离豆甾醇和b谷甾醇的工艺方法. 实验结果表明,以环己酮为溶剂,混合植物甾醇经过3次分级结晶后,b谷甾醇含量达到87%;以环己酮或正戊醇为溶剂,通过5次重结晶后,豆甾醇含量达到92%.

黄花稔化学成分的研究

从黄花稔带根全草中分离出7种结晶性成分,其中4种成分通过理化常数和光谱分析,分别鉴定为白芷属脑,β-谷甾醇,丁香甙和胡萝卜甙。

粉防己地上部分的非生物碱成分

从防己科粉防己的地上部分得到的4个非生物碱单体,经光谱分析及理化性质测定等结构研究手段鉴定为防己双黄酮甲、防己双黄酮乙、β—谷甾醇和正三十五烷,其中2个双黄酮成分为新结构类型化合物,这也是第一次在防己科植物中发现双黄酮。

新疆红芪的化学成分

目的研究新疆红芪(Hedysarum austrosibiricumb.Fedtsch.)的化学成分。方法采用柱色谱法。结果分得4个化合物,经理化性质及波谱方法鉴定为槲皮素(5,7,3′,4′-四羟基黄酮醇)、胡萝卜苷、β-谷甾醇、蔗糖。结论4个化合物为首次从该植物中分离得到。

中药羌活的化学成分研究

目的:对中药羌活进行化学成分研究,寻找其活性成分。方法:将干燥的羌活药材先用95%乙醇提取,再分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,对乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析分离,得到纯化合物后用核磁共振、质谱结合物理化学常数进行结构鉴定。结果:从羌活中分离得到5个化合物,即哥伦比亚苷元、哥伦比亚苷、羌活醇、异欧前胡素和b-谷甾醇。结论:香豆素类是羌活的主要化学成分。

基于网络药理学和分子对接探讨鸦胆子治疗结直肠癌的作用机制

目的采用网络药理学结合分子对接及体内验证,探究鸦胆子Brucea javanica治疗结直肠癌的活性成分、关键作用靶点及潜在的分子机制。方法从公共数据库中检索并收集鸦胆子的活性成分和对应的靶点以及结直肠癌相关的靶点,通过网络药理学分析出鸦胆子治疗结直肠癌的活性成分、成分-疾病的交集靶点以及可能的信号通路。通过分子对接预测活性成分与靶点蛋白的结合能力。通过体内实验进一步验证鸦胆子活性成分治疗结直肠癌的作用和作用机制。结果在满足筛选条件的15个成分中共筛出鸦胆子苦醇、木犀草素、鸦胆子苷B、β-谷甾醇4个鸦胆子生物活性成分及32个鸦胆子治疗结直肠癌的作用靶点,表皮因子生长受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinasparate protease-3,Caspase-3)及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)是鸦胆子治疗结直肠癌的关键靶点,EGFR/磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路可能在鸦胆子治疗结直肠癌中发挥重要作用。分子对接结果表示4个生物活性成分均可较好结合,其中鸦胆子苦醇与3个关键靶点的平均结合能负值最大,结合最稳定,可能是鸦胆子抗结直肠癌最有效的活性成分。动物实验结果表明,与对照组比较,鸦胆子苦醇明显抑制裸鼠体内移植瘤的体积和质量(P<0.01),下调肿瘤组织中EGFR、PI3K和Akt的蛋白表达水平(P<0.01),下调与G1/G0期细胞阻滞相关的cyclin D1和细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)的表达(P<0.01),上调与肿瘤细胞凋亡相关的cleaved Caspase-3表达及B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,Bax)/B淋巴细胞瘤-2(Bcell lymphoma-2,Bcl-2)值(P<0.01),下调与迁移和侵袭相关的蛋白基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)、MMP7表达(P<0.01);鸦胆子苦醇组裸鼠肝功能、肾功能及血液指标均未见显著性差异。结论鸦胆子能够通过多靶点、多通路治疗结直肠癌,其主要活性成分为鸦胆子苦醇,其机制可能与抑制EGFR/PI3K/Akt信号通路从而引起G1/G0期阻滞,抑制增殖、侵袭和迁移,促进细胞凋亡有关。

基于网络药理学联合加权基因共表达网络分析黄精治疗代谢性相关脂肪性肝病的作用机制

目的运用网络药理学结合加权基因共表达网络分析(WGCNA)探究黄精治疗代谢性相关脂肪性肝病的作用机制。方法利用中药系统药理数据分析平台(TCMSP)检索黄精主要活性成分,并采用Pharm Mapper平台挖掘黄精活性成分相关靶点。在GeneCards数据库中下载并整理了代谢性相关脂肪性肝病相关基因。通过GEO平台下载代谢性相关脂肪性肝病相关基因芯片GSE89632,使用R软件limma包进行差异分析,并运用WGCNA筛选出的模块基因作为疾病靶点基因。R软件Venn Diagram包进行交集分析并可视化。采用R软件clusterProfiler包对交集靶点基因进行基因本体论(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析。采用Cytoscape软件进行“药物–活性成分–共同靶点”网络的构建与分析。将交集靶点基因上传至String数据库,把结果数据导入至Cytoscape软件构建蛋白相互作用(PPI)网络并筛选核心靶点基因。采用MOE软件进行分子对接。结果共筛选出黄精活性成分12个,成分相关靶点327个;GeneCards数据库整理获得代谢性相关脂肪性肝病相关基因1227个;WGCNA关联模块基因2639个;最终获得黄精治疗代谢性相关脂肪性肝病靶点基因18个。富集分析发现18个靶点基因通过调控胰岛素抵抗、脂质和动脉粥样硬化、代谢性相关脂肪性肝病等信号通络,参与细胞间信号传导、脂质代谢、氧化应激、炎症反应等生物过程。分子对接研究显示核心靶点与相关黄精活性成分结合稳定。结论黄精具有治疗代谢性相关脂肪性肝病的作用,且在治疗代谢性相关脂肪性肝病中具有多靶点、多成分、协同作用的特点。

基于网络药理学和分子对接研究甘草治疗白癜风的作用机制

目的利用网络药理学和分子对接方法研究甘草治疗白癜风的作用靶点和机制。方法使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选得到甘草中的活性成分,使用SwissTargetPrediction数据库预测各个活性成分的作用靶点;通过OMIM、GeneCards数据库获取白癜风的相关靶点,与活性成分作用靶点取交集;利用Cytoscape 3.9.1软件对交集靶点进行拓扑学分析并筛选得到甘草主要活性成分,构建得到“甘草主要活性成分–白癜风靶点”网络;将甘草活性成分和白癜风的交集靶点导入String数据库构建靶点间的蛋白相互作用(PPI)网络;使用Metascape数据库对潜在作用靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;使用AutoDockTools 1.5.7软件进行分子对接验证并使用PyMol软件对结果进行可视化处理。结果共筛选得到谷甾醇、格里西轮、光果甘草宁、甘草查尔酮B、刺芒柄花黄素等84个活性成分,作用于8400个潜在靶点,白癜风相关靶点1349个,甘草–白癜风的交集靶点133个;PPI网络分析得到蛋白激酶B1(Akt1)、信号传导和转录激活蛋白3(STAT3)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-6(IL-6)、有丝分裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、血管内皮生长因子A(VEGFA)6个核心作用靶点;GO和KEGG富集分析显示,甘草治疗白癜风主要涉及病毒感染、癌症、细胞凋亡、乙型肝炎、细胞衰老等信号通路。分子对接结果显示谷甾醇、格里西轮、光果甘草宁、(2S)-7-羟基-2-(4-羟基苯基)-8-(3-甲基丁烯-2-乙烯基)色曼-4-酮、甘草查耳酮B、刺芒柄花黄素6个核心成分与核心靶点具有较好的结合能。结论甘草可能通过调控细胞衰老和凋亡、免疫功能、炎症等多个方面发挥治疗白癜风的作用,为后续研究甘草治疗白癜风提供参考。

基于HPLC 多成分定量分析不同产地太子参药材的质量

目的建立太子参Pseudostellaria heterophylla HPLC多成分定量检测方法,结合化学计量学和加权逼近理想解排序(TOPSIS)法对不同产地太子参药材质量进行评价。方法以Agilent Zorbax ODS C18柱为色谱柱,乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长分别为254、285、203 nm,采用HPLC法同时检测尿苷、肌苷、鸟苷、川陈皮素、染料木苷、木犀草素、金合欢素、白杨素、水杨酸、阿魏酸、肉桂酸、太子参环肽B、太子参环肽A、乌苏酸和β-谷甾醇的含量。利用SIMCA 14.1和SPSS 26.0软件对上述15种成分含量检测结果进行主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA),挖掘影响太子参产品质量的差异性标志物。运用加权TOPSIS法进行7省17批次太子参药材综合质量评价。结果HPLC多成分定量分析方法学考察符合《中国药典》规定要求。PCA结果显示前2个主成分特征值均大于1,累积方差贡献率为87.843%,17批次太子参样品分为3类。OPLS-DA筛选出尿苷、金合欢素、肌苷、太子参环肽A、太子参环肽B、β-谷甾醇和阿魏酸为影响太子参产品质量的差异标志物。EW-TOPSIS欧氏贴近度在0.2585~0.6425,表明不同产地太子参质量差异较大,其中江苏、安徽地区太子参排名靠前,其次为福建、江西和湖南地区,云南、四川地区太子参排名靠后。结论建立的太子参HPLC多成分定量检测方法操作便捷、结果准确可靠,PCA、OPLS-DA联合加权TOPSIS法可用于不同产地太子参药材的质量评价。

酸浆全草甾体类化学成分研究

目的研究酸浆属植物酸浆Physalis alkekengi var. franchetii的化学成分。方法对酸浆全草醋酸乙酯部位采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS等多种柱色谱,并结合制备液相等方法进行分离和纯化,根据理化性质及波谱数据对其化学成分进行结构鉴定。结果从酸浆醋酸乙酯部位中共分离鉴定10个化合物,分别为4β-methoxy-7β-hydroxyneophysalin B(1)、酸浆苦素P(2)、7-氧代-β-谷甾醇(3)、7β-羟基谷甾醇(4)、3β-羟基豆甾-5,22-二烯-7-酮(5)、豆甾-5,22-二烯-3β,7β-二醇(6)、(24R)-5,28-stigmastadiene-3β,24-diol-7-one(7)、(24S)-5,28-stigmastadiene-3β,24-diol-7-one(8)、3β-羟基-胆甾-5-烯-7-酮(9)、sargassuol A(10)。结论化合物1为新化合物4β-methoxy-7β-hydroxyneophysalin B,中文俗名酸浆苦素ⅩⅢ,化合物3~10均为首次从该属植物中分离得到。