SDS-PAGE法检测人甲状腺及其肿瘤组织中bFGFs条件的选择

探讨ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法检测人甲状及其肿瘤组织中ｂＦＧＦｓ（ｂａｓｉｃ Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ）的条件，。方法：采用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳法检测人甲状腺及其肿瘤组织中的ｂＦＧＦｓ。结果；分离胶浓度为１２．５％，胶原为０．５ｃｍ，电流强度为３０ｍＡ，样品量为５－６ｕｌ，标准ｂＦＧＦｓ上样量为２０ｕｌ较适全人甲状腺及其肿瘤组织中各种分子量的ｂＦＧＦｓ的分离及鉴定。

人甲状腺组织中bFGFs的定位研究

研究ｂＦＧＦｓ在人甲状腺及其肿瘤组织中的组织学定位。方法：采用组织化学方法。结果：ｂＦＧＦｓ存在于甲状腺滤泡上皮细胞中，同正常甲状腺相比较，甲状腺组织中存在大量ｂＦＧＦｓ。结论；在甲状腺肿瘤的发生，展过程中，ｂＦＧＦｓ起重要作用。

Western-blot方法分析人甲状腺及其肿瘤组织中bFGFs

目的：研究人甲状腺瘤的发生分期ｂＦＧＦｓ基因异常表达的关系。方法：采用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ方法对人甲状腺及其肿瘤组织来源的ｂＦＧＦｓ进行分析研究。结果：人正常甲状腺组织来源的ｂＦＧＦｓ分子量为１７ＫＤ和１８ＫＤ，而人甲状腺肿瘤组织来源的ｂＦＧＦｓ为１４ＫＤ、１７ＫＤ和１８ＫＤ。结论：１４ＫＤｂＦＧＦｓ的出现提示人甲状腺肿瘤的发生和发展可能与ｂＦＧＦｓ的基因异常表达有关。

超脉冲二氧化碳点阵激光治疗对凹陷性痤疮瘢痕TGF-β、EGF及bFGF水平变化的影响

目的 研究超脉冲二氧化碳点阵激光治疗对凹陷性痤疮瘢痕转化生长因子-β(TGF-β)、表皮生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平变化的影响。方法 选取2020年4月至2022年2月于自贡市第一人民医院就诊的凹陷性痤疮瘢痕患者104例,依据治疗方案分为对照组(n=51,常规手术治疗)和观察组(n=53,超脉冲二氧化碳点阵激光治疗)。比较两组临床疗效、皮肤情况、血管内皮因子(TGF-β、EGF、bFGF)水平、复发及不良反应发生率。结果 观察组临床总有效率(84.91%)高于对照组(62.75%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组紫质、纹理、色素斑、毛孔评分均下降,且观察组上述评分均比对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组TGF-β、bFGF水平比对照组高,EGF水平比对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组复发率比对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应总发生率(19.61%)比对照组低(5.66%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论 应用超脉冲二氧化碳点阵激光治疗凹陷性痤疮瘢痕患者疗效显著,可有效改善瘢痕组织中的TGF-β、EGF、bFGF表达水平,安全性良好。

刺血醒脑法对急性脑梗死患者脑血流动力学及血清VEGF、bFGF的影响

目的观察刺血醒脑法对急性脑梗死患者脑血流动力学及血清VEGF、bFGF的影响,探讨此方案的临床价值及机理。方法将62例急性脑梗死患者按照随机数字表法分成治疗组与对照组各31例。对照组予以规范化西医治疗联合康复治疗,治疗组在对照组的基础上增加刺血醒脑法。刺血的穴位为患侧的十宣穴、涌泉穴、少冲穴及百会穴,每日1次,治疗时间为14 d。在研究期间,记录治疗前和治疗后急性脑梗死患者NIHSS、Barthel评分的改变情况,血清VEGF、bFGF数值的变化情况,并采用经颅多普勒超声(TCD)记录治疗前和治疗后的脑血流动力学情况。结果治疗后两组NIHSS评分均较治疗前降低(P<0.05),且治疗组较对照组降低更显著(P<0.05);治疗后两组Barthel评分均较治疗前升高(P<0.05),且治疗组较对照组升高更显著(P<0.05);治疗后两组病灶侧大脑中动脉Vd、Vs、Vm比治疗前明显增快(P<0.05),且治疗组明显优于对照组(P<0.05);治疗后两组PI和RI较治疗前均明显降低,但两组降低程度相当(P>0.05);治疗后两组VEGF、bFGF较治疗前显著升高(P<0.05),且治疗组明显优于对照组(P<0.05)。结论刺血醒脑法可有效改善ACI患者神经功能缺损程度和生活质量,机制可能与改善脑血流动力学、促进血管新生等有关。

特异性bFGF拮抗剂FGFR1-Fc对视网膜新生血管的抑制作用

目的探讨特异性bFGF拮抗剂(FGFR1-Fc)对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)刺激的人视网膜微血管内皮细胞(HRCEC)增殖、迁移和血管生成的抑制作用。验证FGFR1-Fc在氧诱导的视网膜新生血管(OIR)小鼠模型中的抑制作用,并分析FGFR1-Fc和抗血管内皮生长因子(VEGF)药物的协同作用。方法体外培养HRCEC,用bFGF和不同浓度FGFR1-FC处理细胞。采用MTT法测定细胞活性、划痕法检测细胞迁移能力、流式细胞术检测细胞周期、蛋白质印迹法检测蛋白表达水平;以OIR小鼠为动物模型,观察视网膜血管状态及计算视网膜无灌注区面积。采用苏木精-伊红染色(HE)法计数突破视网膜内界膜的新生血管内皮细胞核数目。结果FGFR1-Fc抑制bFGF刺激的HRCEC细胞的增殖,其可能通过下调ERK1/2、P38和AKT蛋白分子的活化进而抑制细胞增殖。FGFR1-Fc抑制细胞周期进程,阻断G0/G1期细胞增殖。FGFR1-Fc抑制bFGF刺激的HRCEC细胞迁移,其可能通过抑制STAT3的活化水平下调迁移相关蛋白的表达而抑制血管生成。FGFR1-Fc和Razumab可抑制视网膜新生血管,两者具有协同作用。结论FGFR1-Fc抑制bFGF刺激的HRCEC增殖、迁移和血管生成。FGFR1-Fc与抗VEGF药物具有协同作用。

碱性成纤维细胞生长因子与创面修复——1024例多中心对照临床试验结果

在全国３２家医院，采用多中心对照方法，进一步观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对创面修复的影响和可能发生的毒副反应。结果表明，在统一病例选择范围、治疗方法及治疗标准的前提下，３２家医院经ｂＦＧＦ治疗的１０２４例烧伤（３３０例）、手术创伤或供皮区创面（５０９例）及慢性难愈合创面（１８５例）均较对照创面（８２６例，其中１８５例为自身对照）修复质量显著提高，创面愈合时间分别缩短３天～４天。ｂＦＧＦ对烧伤、手术创伤、供皮区创面及慢性难愈合创面促修复的有效率分别为９５．２％、９６．５％和９３．５％。

人参皂甙Rg3抑制肿瘤新生血管形成机制研究

目的 人参皂甙 Rg3抑制肿瘤新生血管的机制。方法 采用鸡胚 CAM和小鼠 Lewis肺癌模型及免疫组化方法探讨 Rg3抑制新生血管形成的机制。结果 Rg3浓度为 0 .1 m M、0 .5 m M时 ,抑制鸡胚 CAM的血管指数 (BI)分别达到 6 2 .4%、45 .6 %。而给予小鼠 Rg3灌胃剂量分别为 5、1 0、2 0 mg/kg/隔日 ,连续 2 0天后 ,观察到 3组的抑瘤率分别为 2 3.0 4%、31 .30 %、47.1 0 % ,同时观察到 Rg3组的新生血管数也明显减少。免疫组化证实 Rg3可明显抑制肿瘤组织内 b FGF的表达。结论 Rg3可明显抑制 Lewis肺癌的生长并抑制了肿瘤新生血管形成。

阿魏酸钠对高脂血症家兔动脉粥样硬化形成的影响及其机制的研究

目的 观察阿魏酸钠 (sodiumferulate,SF)对高脂血症导致动脉粥样硬化 (atherosclerosis,AS)的治疗作用及其机制。方法 高胆固醇喂养复制AS动物模型 ;以高脂血清(hyperlipidemicserum ,HLS)损伤培养人脐静脉内皮细胞。检测AS斑块面积 ,扫描电镜观察内皮细胞形态的改变 ,免疫细胞化学方法观测内皮细胞表面转化生长因子 β1(trans forminggrowthfactorβ1,TGFβ1)及碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor ,bFGF)的表达 ,并对细胞培养液中一氧化氮 (Nitricoxide,NO)的分泌量进行检测。结果 SF可明显减少斑块面积 ,改善HLS导致的内皮细胞损伤 ,使细胞表面TGFβ1的表达增高 ,bFGF的表达降低 ,细胞培养液中NO的分泌量升高。结论 SF可以降低高胆固醇导致的AS斑块面积 。

碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β在溃疡与增生性瘢痕组织中的表达及其对创面修复的影响

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子 (b FGF)与转化生长因子 - β(TGF- β)在溃疡和增生性瘢痕组织中的表达特征以及与修复结果的关系。方法 2 1例标本包括体表慢性溃疡 8例、增生性瘢痕 8例和正常皮肤5例。用免疫组织化学法和常规病理技术确定两种生长因子在溃疡和增生性瘢痕的定位与表达量。结果 b FGF和TGF- β在正常皮肤中有少量表达 ,主要位于表皮基底细胞胞浆和细胞外基质。此外 ,b FGF还见于真皮毛细血管内皮细胞等。在溃疡组织 b FGF与 TGF- β表达量明显增加 ,其中 b FGF的阳性信号主要见于成纤维细胞和毛细血管内皮细胞 ,而 TGF- β则仅见于炎性细胞。在增生性瘢痕 TGF- β的表达为阴性 ,而 b FGF则仍呈现出较高的表达量。结论 在高浓度生长因子环境下创面修复延迟可能和生长因子与其受体结合障碍有关。研究结果还提示 b FGF参与了瘢痕发生的全过程 ,TGF- β则主要作用于瘢痕形成早期。

脂肪来源的干细胞移植对大鼠脑缺血后微血管生成及bFGF和VEGF表达的影响

目的:探讨脂肪来源的干细胞(ADSC)移植对大鼠脑缺血后微血管生成的可能机制。方法:72只清洁级成年雄性Sprague-Darley大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、局灶性脑缺血组(MCAO组)、溶剂对照组(vehicle组)和ADSC治疗组(ADSC组),每组18只,采用改良Zea-Longa线栓法制作大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,ADSC移植前用DAPI标记,ADSC组于造模成功1d后经侧脑室注射入30μL的经DAPI标记的ADSC细胞悬液,内含1×106细胞,vehicle组则注射同等剂量的PBS,术后4d、7d和14d分批处死实验动物,并断头取脑,采用免疫组织化学法和半定量RT-PCR法检测缺血区脑组织的新生血管及bFGF和VEGF表达的动态变化。结果:大鼠脑缺血后缺血区即可见大量的微血管生成,2周达高峰。ADSC组较MCAO组和vehicle组缺血区微血管密度明显增高(P<0.01);ADSC组术后4d、7d和14d脑组织中bFGF和VEGF的表达水平较MCAO组和vehicle组明显增高。结论:ADSC移植促进脑缺血大鼠缺血区微血管的生成,其机制可能与促进bFGF和VEGF的表达有关。

碱性成纤维细胞生长因子加速慢性难愈合创面愈合

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子（ｂ Ｆ Ｇ Ｆ）对慢性难愈合创面（溃疡）的促修复作用并探讨其促修复机制。方法 ２８ 例共３３ 个慢性难愈合创面，其中创伤性溃疡１２ 例（１４ 个创面），压迫性溃疡 ９ 例（１２ 个创面），糖尿病溃疡 ４ 例，放射性溃疡 ３ 例。所有创面经清创后用ｂ Ｆ Ｇ Ｆ 治疗（１５０ Ｕ／ｃｍ ２ 创面，每天１ 次）。结果 所有经ｂ Ｆ Ｇ Ｆ治疗的创面都产生了明显的愈合，其中２ 周内愈合者２０ 个创面，３ 周内愈合者 ３ 个创面，４ 周内愈合者８ 个创面，超过４ 周愈合者２个创面。４ 周内总愈合率为９３．９％ 。结论 ｂ Ｆ Ｇ Ｆ可以显著地加速慢性难愈合创面愈合，其可能的机制涉及外源性ｂ Ｆ Ｇ Ｆ能够补充内源性ｂ Ｆ Ｇ Ｆ 的不足或调控内源性ｂ Ｆ Ｇ Ｆ活性。

碱性成纤维细胞生长因子增强人重组骨形态发生蛋白-2诱导成骨的调节机理

目的：对ｂＦＧＦ增强ｒｈＢＭＰ－２诱导成骨的调节机理进行探讨。方法：２１０只ＢＡＬＢ／ｃ小鼠随机分为３组，每组７０只，试验侧均位于右后肢。设立ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体、单纯牛松质骨载体为对照组，分别于术后１２ｈ～２１ｄ共１１个时间点取材，观察其诱导成骨过程。结果：ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／聚乙烯吡咯啉酮／牛松质骨载体组在诱导间充质细胞增殖、分化，软骨细胞、新生骨形成方面均早于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组，成骨量优于ｒｈＢＭＰ－２／牛松质骨载体组，而单纯牛松质骨载体组在２１ｄ仅出现了少量增殖的间充质细胞。结论：ｒｈＢＭＰ－２和ｂＦＧＦ在诱导成骨调节中存在着协同作用。

蛇床子素对体外培养骨髓基质干细胞增殖与成骨性分化的影响

目的研究蛇床子素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal stem cells,BMSCs)增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养单核层细胞,培养于含10%FBS的DMEM-F12培养液中,3d后首次换液,9d后传代培养。培养基中蛇床子素终浓度分别为1×10-4、1×10-5、1×10-6、1×10-7mol·L-1。增殖分析采用MTT法,于成骨性诱导培养d4、8、12、16测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量,d15进行钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RTReal-Time PCR法检测bFGF、IGF-1、Osterix与Runx-2的基因表达情况。结果蛇床子素剂量依赖性抑制BMSCs增殖,但能明显促进其向成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进骨钙素分泌、钙盐沉积量、增加钙化结节数量、提高bFGF、IGF-1、Osterix和Runx-2的mRNA表达水平。结论终浓度为1×10-5mol·L-1蛇床子素能明显促进BMSCs的成骨性分化,证明蛇床子素是中药蛇床子抗骨质疏松的有效成分。

金铃调胃汤治疗慢性萎缩性胃炎中EGF、VEGF、bFGF和NO等血管内皮因子的作用

目的：探讨表皮细胞生长因子（Epidermal Growth Factor,EGF）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factor,b FGF）和一氧化氮（Nitric Oxide,NO）在金铃调胃汤治疗慢性萎缩性胃炎中的变化及意义。方法：120例慢性萎缩性胃炎患者随机分为两组,观察一组60例接受常规西药治疗,观察二组60例接受金铃调胃汤治疗。另选取健康体检者60例为对照组。治疗前后分别检测患者血清中EGF、VEGF、b FGF和NO的浓度变化。结果：观察一组和观察二组患者的疗效具有明显差异,观察一组有效率为93. 33%,观察一组有效率为76. 67%,差异具有统计学意义（P 〈0. 05）。与对照组相比,观察一组和观察二组患者血清内VEGF含量明显降低,患者血清内EGF含量明显上升,差异具有统计学意义（P 〈0. 05）。在不同疗法的药物治疗后,观察一组和观察二组患者血清VEGF、b FGF和NO含量明显上升,患者血清EGF含量明显下降,差异具有统计学意义（P 〈0. 05）。与观察一组患者相比,观察二组患者应用金铃调胃汤后血清内VEGF、b FGF和NO含量明显上升,患者血清内EGF含量明显下降差异具有统计学意义（P 〈0. 05）。结论：慢性萎缩性胃炎患者血清中EGF、VEGF、b FGF和NO的浓度在金铃调胃汤治疗前后具有明显变化; EGF、VEGF、b FGF和NO在慢性萎缩性胃炎的临床治疗过程中对病情的判断和治疗情况具有重要的提示作用。

基因重组bFGF的药效学研究

利用小型猪创伤模型，将ｂＦＧＦ分成３ 组（５００、１ ０００、１ ５００ Ｕ／ｍ ）处理创面，并用ＳＤ－Ａｇ 及生理盐水做对照，观察创面愈合情况，结果表明１ ０００ Ｕ／ｍ ｌ浓度组促创伤作用比较明显，体外细胞培养５０ ｎｇ／ｍ ｌｂＦＧＦ细胞增殖作用最明显。

碱性成纤维细胞生长因子在大鼠坐骨神经损伤修复中的作用

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂ Ｆ Ｇ Ｆ）对周围神经损伤的促修复作用。方法 建立大鼠坐骨神经离断模型，镜下进行神经外膜缝合，局部滴加药物和术后肌注ｂ Ｆ Ｇ Ｆ 以及临床用药神经生长因子（ Ｎ Ｇ Ｆ），通过神经传导速度和功能指数评定观察坐骨神经修复情况。结果 术后１ 个月，以正常对照为标准，０ 基线为正常水平，生理盐水、 Ｎ Ｇ Ｆ、ｂ Ｆ Ｇ Ｆ 使用组神经功能指数评定结果分别为：－ １１４．３０±１０．３４、－ ７０．５０±１１．０１、－ ５０．４５±７．８２；术后３ 个月，分别为：－ ５４．９６±１６．４６、－ ３５．２１±１０．８０、－ ２７．５３±１１．２３，ｂ Ｆ Ｇ Ｆ组神经传导速度明显快于生理盐水组和 Ｎ Ｇ Ｆ 组（ Ｐ＜ ０．０１）。结论 ｂ Ｆ Ｇ Ｆ对坐骨神经损伤具有显著的促功能修复作用，并且在神经损伤早期就能最有效地发挥作用，效果明显优于临床用药 Ｎ Ｇ Ｆ。

骨痂中骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子基因表达与骨折愈合预后

骨痂中骨形态发生蛋白和碱性成纤维细胞生长因子基因表达与骨折愈合预后李亚非时述山刘树清丁华野李青＊卞建江骨折愈合与骨断端成骨细胞活性及血液循环状态密切相关。ＢＭＰ有高度骨诱导活性，ｂＦＧＦ也有促进成骨细胞增殖及毛细血管生成作用。本实验采用原位杂交和免疫...

几种因素对培养小鼠精原干细胞的影响

探讨了小鼠胚胎成纤维细胞饲养层及干细胞因子 ( SCF)、白血病抑制因子 ( LIF)、碱性成纤维细胞生长因子 ( b FGF)等对体外培养小鼠精原干细胞的作用。结果显示 ,在饲养层上 ,精原干细胞贴壁时间缩至 8～1 2 h,饲养层具有促进其分裂增殖的作用 ;培养液中加入不同浓度的 SCF、LIF及 b FGF,可延长精原干细胞在体外的存活时间 ,其中加入 30μg/L SCF后 ,其体外存活时间与对照组相比差异显著 ( P <0 .0 5 )。

夏枯草硫酸多糖对肝癌血管生成的作用及机制研究

目的:观察夏枯草硫酸多糖(PVSP)对肝癌细胞中血管生成因子bFGF,VEGF和IL-8蛋白分泌及肝癌血管生成的影响。方法:ELISA法观察PVSP和香菇多糖(LNT,不含硫酸基,阴性对照)对bFGF、VEGF和IL-8在肝癌细胞中的分泌情况影响;免疫组化法观察PVSP和LNT以及PBS空白对照对肝癌组织微血管密度的影响。结果:同PBS空白对照相比,200μg/mL的PVSP抑制bFGF的分泌(P<0.01),而LNT对bFGF表达无影响。各剂量组的PVSP和LNT对VEGF、IL-8的分泌均无影响。200 mg/kgPVSP能够减少肿瘤组织块中的微血管密度(P=0.03),而LNT 10 mg/kg对肿瘤组织中微血管密度无影响。结论:PVSP对bFGF分泌的抑制作用是其抑制肝癌血管生成的一个可能原因。