兽用预混剂中非法添加杆菌肽锌UPLC-PDA检查方法的建立

建立了兽用地克珠利预混剂、盐霉素预混剂、莫能菌素预混剂中非法添加杆菌肽锌的超高效液相色谱-二极管阵列检查方法。采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.05 mol/L甲酸铵溶液(甲酸调节pH值至4.0)-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速0.5 mL/min,二极管阵列检测器(PDA),波长采集范围为200~400 nm,记录色谱图波长217 nm,柱温30℃,进样量5μL。采用峰纯度检查和光谱相似度检查辅助标准品比对方法,对非法添加杆菌肽锌进行确证,并对建立的方法进行方法学验证。结果显示,杆菌肽锌质量浓度在0.4~2 mg/mL内峰面积呈良好线性关系(R^(2)=0.9996),在地克珠利预混剂、盐霉素预混剂、莫能菌素预混剂中杆菌肽锌的平均回收率分别为100.34%、99.22%和95.92%,RSD分别为1.40%、1.21%和1.26%,主成分杆菌肽A与其他成分分离度较好,峰纯度检查和光谱相似度检查均符合要求。本方法操作简便、准确、可靠,适用于以上三种兽用预混剂中非法添加杆菌肽锌的检查。

酵母β-葡聚糖和抗生素对早期断奶犊牛生长性能和肠道菌群的影响

分别在犊牛代乳粉中添加酵母β-葡聚糖和杆菌肽锌,研究其对早期断奶犊牛生长性能及肠道微生物菌群变化的影响。选取20头新生荷斯坦公犊牛,随机分为4个处理,每个处理5个重复,每个重复1头牛,分别饲喂以下日粮:试验A组为基础日粮组(对照组)、试验B、C组均为基础日粮+酵母β-葡聚糖75mg·kg-1、试验D组为基础日粮+杆菌肽锌60mg·kg-1。试验全期共28d,每日记录犊牛采食量、每2周逐一称重并计算日增体质量,在试验第21天晨饲时,给A、B、D3组犊牛口服大肠杆菌(O141∶K99)肉汤培养基进行攻毒,C组继续正常饲喂。于试验第28天晨饲前,采集犊牛直肠内约10cm处靠近上壶腹黏膜部的粪便样品用于测定肠道微生物区系变化。结果显示,大肠杆菌攻毒前,B组犊牛0～14d和14～21d两阶段ADG比A组分别提高了26.18%和24.93%(P<0.05);攻毒后,B、D组21～28dADG比A组分别提高了30.38%、30.82%(P<0.05)。试验各期F/G,B、D组均显著低于A组(P<0.05)。与A组相比,B、D组犊牛攻毒后12和24h时,直肠中大肠杆菌数量显著降低(P<0.05),同时D组犊牛直肠中乳酸杆菌数量也显著降低(P<0.05);C组犊牛直肠中乳酸杆菌数量显著高于A组(P<0.05)。利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术分析显示,B、C两组条带数多于A、D组,且C组与A、D组相比差异显著(P<0.05);不同试验组犊牛的总菌区系相似性处于50%～75%。结果表明,在代乳粉中添加75mg·kg-1酵母β-葡聚糖可改善犊牛肠道微生物区系,优化肠道微生物结构,从而保证犊牛健康生长,并能在一定程度上替代或减少抗生素的使用。

酵母β－葡聚糖和杆菌肽锌对早期断奶犊牛生长性能和胃肠道发育的影响

本试验旨在研究在犊牛代乳粉中分别添加酵母β-葡聚糖和杆菌肽锌对早期断奶犊牛生长性能及胃肠道发育的影响。选取20头新生荷斯坦公犊牛,随机分为4组,每组5个重复,每个重复1头牛。A组(对照组)饲喂基础饲粮,B、C组饲喂基础饲粮+75m g/kg酵母β-葡聚糖,D组饲喂基础饲粮+60m g/kg杆菌肽锌。试验期28d。每日记录犊牛采食量、每14d逐一称重并计算平均日增重(ADG),在试验第21天晨饲时,给A、B、D3组犊牛口服大肠杆菌肉汤培养基进行攻毒,C组继续正常饲养,收集攻毒后3d直肠内容物经稀释后做微生物计数。试验结束时屠宰,取瘤胃前背盲囊、十二指肠、空肠和回肠做肠道组织切片。结果显示:1)大肠杆菌攻毒前,B组犊牛第1～14天和第15～21天ADG比对照组分别提高了26.17%和24.93%(P<0.05);攻毒后,B、D组ADG比对照组分别提高了30.38%和30.81%(P<0.05)。试验各期饲料转化率(F/G)上,B、D组均显著优于对照组(P<0.05)。2)与对照组相比,B、D组犊牛攻毒后12和24h时直肠中大肠杆菌数量显著降低(P<0.05),同时D组犊牛直肠中乳酸杆菌数量也显著降低(P<0.05);C组犊牛直肠中乳酸杆菌数量显著高于对照组(P<0.05)。3)屠宰试验表明:与对照组相比,B、C组可显著增加犊牛瘤胃乳头长度和乳头宽度(P<0.05)。C、D组犊牛十二指肠隐窝深度显著小于对照组和B组(P<0.05);绒毛高度和隐窝深度比(V/C)也以试验B、C、D各组显著高于对照组(P<0.05)。由此可见,在代乳粉中添加75m g/kg酵母β-葡聚糖能缓解由大肠杆菌攻毒所导致的生长性能下降、小肠组织形态损伤,从而保证犊牛健康生长,并能在一定程度上替代或减少抗生素的使用。

杆菌肽产品在动物饲料中的应用研究进展

杆菌肽是一种多肽类抗生素,具有促进动物生长、提高饲料转化率、预防和治疗多种动物肠道疾病的作用,同时具有无残留、无休药期、不产生耐药性、无毒副作用、安全性好等特性,在动物养殖和饲料生产中已有广泛应用。文中简介了杆菌肽的理化性质及其特点,综述了杆菌肽产品在动物饲料中的应用研究进展,并分析和展望了杆菌肽产品的市场应用前景。

抗生素杆菌肽锌对鸡粪厌氧水解酸化的影响

以上海某养鸡场产生的粪便为研究对象,探讨抗生素杆菌肽锌(ZnBc)对鸡粪厌氧水解酸化的影响。结果表明:(1)相比于发酵前的pH,发酵后的pH变化幅度不大,在6.65～7.40变化。(2)氨氮和ZnBc浓度对数(lgc)呈负线性相关,经拟合方程测算出ZnBc对氨氮的半抑制常数(IC50)为15.23mg/L。当ZnBc>5 105mg/L时,氨氮的产生完全受抑制。添加ZnBc对发酵液氨氮的影响极显著。(3)溶解磷(SP)和lgc满足Boltzman方程。添加ZnBc对发酵液SP的影响极显著。(4)ZnBc不仅影响挥发性脂肪酸(VFAs)浓度,还影响VFAs组分。(5)添加ZnBc对发酵液总有机碳(TOC)有极显著影响。(6)相比原鸡粪,发酵后固体有机N、C、H均下降,并分别在ZnBc为0.10、0.01、0.01mg/L时达到最低值,说明鸡粪在厌氧水解酸化过程中固体有机组分向液体转移。

对杆菌肽锌含量测定中若干问题的探讨

为了摸清杆菌肽锌不同测定方法和不同溶剂对测量结果的影响 ,对现行的几种测定方法进行了比较 ,采用不同溶剂溶解杆菌肽锌并改变其用量。结果表明 :用吡啶与磷酸缓冲液的混合液 ( 9∶ 31 )溶液溶解杆菌肽锌后测出含量比用盐酸溶液溶解后测出含量高约 1 0 %,同时盐酸的加入量会影响测出含量 ,加入盐酸量越大 ,测出含量越小。

杆菌肽锌与硫酸抗敌素配伍对异育银鲫增重率和耐低氧力的影响

１４４尾异育银鲫随机分成 ３组，Ⅰ组对照组，投喂基础日粮，Ⅱ、Ⅲ组为试验组，分别投喂基础日粮含３０ｐｐｍ杆苗肽锌、基础日粮含３０ｐｐｍ杆菌肽锌和６ｐｐｍ硫酸抗敌素，探讨杆菌肽锌与硫酸抗敌素配伍对异有银鲫增重串和耐低氧力的影响。经 ３９天饲养试验，结果表明：加药的 Ⅱ、Ⅲ组增重率分别高于对照组 ９．８％和２４．５％，且差异都显著（Ｐ＜０．０５）。杆菌肽锌和硫酸抗敌素配合使用比单独使用杆蓖肽锌增重率提高 １３．４％，抗低氧能力为Ⅰ＞Ⅱ＞Ⅲ，且Ⅰ与Ⅲ组差异显著（Ｐ＜０．０５）。

杆菌肽(锌)及其应用进展

随着科学技术的发展,作为一种多肽类抗菌药物,杆菌肽(锌)在人们的生产和生活中的应用逐渐合理和规范。笔者综述了近年来杆菌肽(锌)研究、应用及检测的进展情况。

饲料添加剂对肉鸡生产性能的影响

试验选用杆菌肽锌、泰乐菌素和金霉素3种抗生素药物添加剂,添加到日粮中,对640只艾维茵肉鸡进行对比饲养试验。第1组为杆菌肽锌组、第2组为泰乐菌素组、第3组为金霉素组,第4组为对照组(不添加任何抗生素)。试验期41天,分为2个阶段(1～20日龄、21～41日龄)。结果表明:第1阶段在日粮中添加杆菌肽锌、泰乐菌素和金霉素,与对照组比较,成活率分别提高了2.5、2.5、1.88个百分点,增重分别提高了3.97%、0.39%、1.83%,料肉比分别降低了0.20%、0.25%、0.23%。第2阶段,添加杆菌肽锌组成活率下降1.21个百分点,添加泰乐菌素和金霉素组成活率分别提高0.07、1.34个百分点,增重分别提高了7.0%、9.92%、4.27%,料肉比分别降低了0.08%、0.22%、0.07%。

硫酸黏杆菌素与不同抗生素配伍对断奶仔猪生长性能的影响

为研究硫酸黏杆菌素与不同抗生素药物组合对早期断奶仔猪的应用效果,对照组饲喂"基础日粮+硫酸黏杆菌素(20 mg/kg)",试验各组分别在对照组的基础上另添加黄霉素(6 mg/kg)、杆菌肽锌(30 mg/kg)、那西肽(5 mg/kg),测定各组仔猪的平均日增重、饲料转化率和腹泻率。结果表明:试验1、2和3组平均日增重较对照组分别提高21.7%、19.6%、10.1%(P<0.05);料肉比分别降低13.4%、12.4%、8.1%(P<0.05);腹泻率分别降低65.2%、61.5%、47.8%(P<0.01);且黄霉素组和杆菌肽锌组平均日增重显著高于那西肽组(P<0.05)。

杆菌肽锌对夏季产蛋鸡生产性能及血液指标的影响

３８０日龄北京白鸡８０只被随机分成２个处理，每个处理４个重复，每个重复１０只鸡，对照组喂基础日粮，试验组在基础日粮中添加５０ｍｇ／ｋｇ杆菌肽锌．试验被安排在１９９８年６月３０日至７月３０日进行．试验结果表明：杆菌肽锌对产蛋鸡平均产蛋量、平均蛋重及饲料转化率没有显著影响，但却可以明显改善蛋壳质量（蛋壳强度、蛋壳厚度）（Ｐ＜０．０５），并显著减少破软蛋率（Ｐ＜０．０１）．而且在夏季（３２℃以上）蛋鸡产蛋率下降阶段可以减少产蛋率的下降幅度．杆菌肽锌对蛋鸡血液中Ｃａ、Ｐ、Ｚｎ及ＡＬＫＰ（碱性磷酸酶）含量的影响不显著．

杆菌肽锌复合制剂对鸡产蛋性能的影响

以1 920只370日龄罗曼产蛋鸡为试验对象,研究了杆菌肽锌复合制剂对鸡产蛋性能的影响。试验随机分成5组,其中1个为对照组。对照组喂给基础日粮,4个试验组分别在基础日粮中添加不用水平的杆菌复合制剂。试验结果表明:随着杆菌肽锌在复合制剂中剂量的加大,产蛋率下降幅度变小,明显改善蛋壳质量(蛋壳强度、蛋壳厚度)(p<0.05),显著减少破蛋率(p<0.01),降低鸡的料蛋比(p<0.05),增加蛋重(p<0.05)和产蛋量(p<0.05)。综合考虑经济效益,在生产中宜选择在蛋鸡的基础日粮中添加50 mg/kg杆菌肽锌与100 mg/kg维生素C制成的复合制剂。

杆菌肽锌和喹乙醇对肉鸡生产性能的影响

选用600只1日龄艾维茵肉鸡，随机分成3组，每组2个重复。第1组基础日粮＋30×10－6杆菌肽锌，第2组基础日粮＋20×10－6喹乙醇，第3组喂基础日粮为对照组，试验期42天。结果表明，第1和第2组鸡全或平均日增重较第3组分别提高8．12％（P＜0．05）和6．49％（P＜0.05），料肉比分别下降10．85％（P＜0．05）和9．43％（P＜0．05），死亡率分别下降3.97个百分点（P＞O．05）和4.76个百分点（P＞0．05）。第1组与第2组相比各指标差异不显著（P＞0．05）。

益生素对肉仔鸡生产性能的影响

选用240只AA肉仔鸡,随机分成4组,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加杆菌肽锌(20mg/kg)、2%和3%的益生素,比较试验鸡的生产性能。结果表明:日粮中添加2%和3%的益生素可显著提高肉鸡的日增重、饲料效率、成活率、屠宰率(<0.05);益生素可替代抗生素杆菌肽锌提高肉鸡生产性能。

益力素及其它抗生素与酶制剂配伍对异育银鲫生产性能的影响

试验选300尾异育银鲫夏花(均重5g左右),随机分为5组,分别饲喂相同的基础日粮、并分别添加益力素、黄霉素、维吉尼亚霉素及益力素+复合酶、益力素+植酸酶日粮,饲养56d,结果表明:3种不同抗生素中以益力素添加组试验鱼增重率较好;在配伍添加组中以益力素与复合酶配伍组增重率最好,且差异显著(P<0.05),比添加益力素组提高了9%,其饲料系数下降了10%,但各组间饲料利用率差异不显著(P>0.05)。

杆菌肽锌对蛋鸡产蛋性能、存活率及蛋品质的影响

取300日龄罗曼蛋鸡768只，随机分为对照组和试验组（每组设4个重复，每个重复96只），其中在试验组的日粮中添加50mg／kg杆菌肽锌，在自由采食、饮水和光照16小时的条件下，进行了为期90天的饲养试验。结果表明，杆菌肽锌能显著提高产蛋率（P＜0．05），降低料蛋比（P＜0．05），并有效抑制疾病的发生，提高存活率（P＜0．01）。杆菌肽锌对日采食量、蛋重和蛋品质均无显著影响（P＞0．05）。

杆菌肽锌对断奶獭兔盲肠菌群和免疫功能的影响

为研究杆菌肽锌对断奶獭兔盲肠菌群和免疫功能的影响,本研究选用40只28日龄断奶獭兔,随机平均分为在基础日粮中添加杆菌肽锌(40 mg/kg)的实验组和不添任何抗生素的对照组。采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)和荧光定量PCR(q PCR)方法对断奶獭兔盲肠菌群和TLR2、TLR4 m RNA表达水平进行检测,ELISA对外周血细胞因子进行测定。PCR-DGGE结果表明,与对照组比较,实验组盲肠菌群丰富度、多样性和均匀度等均无显著变化(p>0.05)。q PCR检测表明,实验组的梭菌类群XIVa显著降低(p<0.05)。在免疫功能调节方面,实验组外周血细胞因子IL-1、IL-2、IL-4、TNF-α的浓度显著升高(p<0.05);TLR2、TLR4 m RNA的相对表达量总体呈上调趋势。以上结果表明,杆菌肽锌作为断奶獭兔饲料添加剂,对盲肠菌群结构没有显著影响,但能够增强机体免疫力。

八角抽提油和蚯蚓粉对肉鸡肠道发育和养分利用率的影响

本试验旨在研究八角抽提油(八角油)和蚯蚓粉对肉鸡肠道发育和养分利用率的影响。试验一选用1日龄爱拔益加肉鸡384只,随机分为4个处理,每个处理12个重复,对照组饲喂基础日粮,八角油组、蚯蚓粉组和杆菌肽锌组分别在基础日粮中添加50 mg/kg八角油、100 mg/kg蚯蚓粉和20 mg/kg杆菌肽锌;试验二选用21日龄爱拔益加肉鸡120只,随机分为5个处理(处理1~4同试验一,处理5为内源组),每个处理12个重复。结果表明:与对照组相比,其余各组均能显著改善肉鸡21 d小肠各段的相对长度和相对重量(P<0.05);与对照组相比,八角油和蚯蚓粉均显著提高肉鸡部分肠段的绒毛高度(P<0.05);与对照组相比,其余各组均显著提高部分肠段绒腺比(P<0.05);与对照组相比,其余各组均极显著提高肉鸡氮的表观和真利用率(P<0.001);与对照组和杆菌肽锌组相比,八角油组和蚯蚓粉组肉鸡蛋氨酸的表观和真利用率均显著提高(P<0.001)。由此可见,八角油和蚯蚓粉作为饲料添加剂均可以一定程度上改善肉鸡肠道发育,提高养分利用率。

断奶仔猪料中添加甲酸钙、杆菌肽锌及高铜的效果

试验采用Ｌ９（３４）正交设计，将３５日龄断奶的２７窝仔猪共２０７头，以窝为单位分成９组。试验因子为３个不同水平的甲酸钙（０，１，２％），杆菌肽锌（０，６３，１２６万效价单位／吨），及铜（０，７５，１５００ｐｐｍ）。４５～７５日龄期间进行饲养试验。结果表明，在４５～７５日龄期间，添加甲酸钙极显著影响（降低）猪的平均日增重（Ｐ＜０．０１）和经济效益；添加杆菌肽锌有利于仔猪的平均日增重，且以添加６３万单位／吨为宜。加铜后不显著影响猪的平均日增重（Ｐ＜０．１）。建议４５～７５日龄期间不再添加酸化剂。

柑橘提取物对黄羽肉鸡血浆和肝脏抗氧化功能及血浆免疫指标的影响

试验旨在研究日粮中添加柑橘提取物对黄羽肉鸡血浆抗氧化、肝脏抗氧化和血浆免疫功能的影响。选取540只28日龄快大型黄羽肉鸡随机分为3组(每组6个重复,每个重复30只):对照组饲喂不含抗生素的基础日粮,试验组分别饲喂10 mg/kg杆菌肽锌和10 mg/kg柑橘提取物的试验日粮。试验为期35 d。结果表明:①与对照组和杆菌肽锌组相比,柑橘提取物组黄羽肉鸡血浆中总抗氧化能力(T-AOC)分别提高了33.88%和40.63%(P<0.05);谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力分别提高了10.58%和6.59%(P<0.01)。②与对照组和杆菌肽锌组相比,柑橘提取物组黄羽肉鸡肝脏中总抗氧化能力(T-AOC)分别提高了25.25%和22.22%(P<0.05);丙二醛(MDA)的含量分别降低了45.45%和43.75%(P<0.05)。③与对照组相比,柑橘提取物组黄羽肉鸡血浆中免疫球蛋白(IgA)的含量提高了85.85%,而白细胞介素-6(IL-6)的含量降低了23.68%(P<0.05)。与对照组相比,杆菌肽锌组和柑橘提取物组黄羽肉鸡血浆中白细胞介素-8(IL-8)的含量分别降低了35.48%和38.42%(P<0.01)。由此可见,柑橘提取物具有提高黄羽肉鸡血浆和肝脏的抗氧化能力以及血浆的免疫功能的作用,且其改善效果优于杆菌肽锌。