Determination of the Composition and Content of Lycium barbarum Polysaccharides by Chromatography

Lycium barbarum polysaccharides （LBP） were obtained after Lycium barbarum, the study object, went through chloroform-methanol degreasing, water extraction and alcohol precipitation, acetone and ether wash and dry, hydrogen peroxide bleaching, deproteinization by savage method. Determined LBP molecular weight by HPLC was 73950-138090Da. And the monosaccharides in LBP determined by IC mainly included glucose, arabinose, rhamnose, galactose, xylose and mannose, in which glucose, arabinose and galactose had larger contents, while the contents of other monosaccharides were low.

枸杞子化学成分及质量评价研究进展

目的:为枸杞子质量评价模式的构成提供思路,奠定基础。方法:基于近年来的文献资料,对枸杞子的化学成分、质量影响因素、现有标准及质量评价模式研究进展等梳理归纳。结果与结论:枸杞子活性成分种类复杂,包括枸杞多糖、类胡萝卜素、黄酮和维生素等,质量受产地、品种、种植加工方式等因素的影响。枸杞子药典标准主要以甜菜碱和枸杞多糖作为质控指标,而现有商品规格等级划分中主要以枸杞子果粒大小作为评价依据,均具有一定的局限性。现已有的枸杞子质量评价研究通过灰色关联度分析法、层次分析法和判别分析法等探索枸杞子多个质量参数的权重系数,进而建立质量评价模型,对枸杞子质量进行综合评分。为建立科学、统一的枸杞子质量评价标准提供思路。

枸杞多糖LBP－I的分离纯化及性质鉴定

枸杞多糖ＬＢＰ－Ｉ的分离纯化及性质鉴定何进梁运祥张声华（华中农业大学生命科学技术学院，武汉４３００７０）（华中农业大学食品科学技术系）Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｐｒｏｐｅｒｔｙｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｓａｃｃｈ...

枸杞LbMYB103基因克隆及转化拟南芥的研究

以枸杞品种‘宁杞1号’花药为材料,采用RT-PCR技术,分离了R2R3类MYB基因LbMYB103包含完整开放阅读框(ORF)的cDNA片段,碱基序列与已知基因HQ415755完全一致。运用Gateway技术构建LbMYB103基因植物过表达载体pMDC83-LbMYB103,利用基因枪法将融合有绿色荧光蛋白(GFP)的过表达载体转入洋葱表皮细胞,将LbMYB103基因定位在细胞核。实时荧光定量PCR分析发现,LbMYB103基因在花药中优势表达,果实中表达量较低,在根、茎和叶中均未检测到其转录本,推测LbMYB103基因可能在花药发育过程中起重要作用。通过根癌农杆菌介导法将pMDC83-LbMYB103转入拟南芥(Col-0),经筛选获得T1代抗性再生植株52棵,PCR鉴定有41棵阳性植株,收获T1代种子,经抗性筛选获得T2代抗性植株29棵,PCR鉴定有23棵阳性植株。实时荧光定量PCR分析表明,LbMYB103在拟南芥植株的基因组中正常表达。表型观察发现T1和T2代拟南芥花药发育异常,花发育迟缓,果荚短小无种子,进一步表明LbMYB103可能与植物的育性有关。该结果为进一步开展枸杞遗传转化,深入研究LbMYB103基因在枸杞花药发育过程中可能发挥的调控功能奠定了基础。

柱前衍生化HPLC法分析枸杞多糖中单糖组成

利用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法,建立6种常见单糖的色谱分离条件,并用于10种不同产地的自制枸杞多糖的单糖组成分析和8种市售枸杞多糖的分析鉴定。该HPLC方法简便、灵敏度高、重复性好,可用于枸杞多糖的组分分析和质量控制。对自制枸杞多糖的单糖组成分析结果表明,自制枸杞多糖由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖及阿拉伯糖6种单糖组成,平均物质的量比为1.00∶1.38∶0.63∶92.37∶1.18∶3.55。对市售枸杞多糖的分析鉴定结果表明,其中6种枸杞多糖的含量在正常范围内,另外2种多糖含量高于均值,其中葡萄糖相对物质的量比为自制枸杞多糖的2~3倍。

不同产地“宁杞1号”枸杞果实的多糖合成代谢差异

基于同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantity,iTRAQ)技术,以采自宁夏中宁的“宁杞1号”枸杞果实为样品,以采自新疆精河、内蒙古乌拉特前旗、甘肃瓜州和青海德令哈的“宁杞1号”枸杞果实为对照,进行差异蛋白组学的生物信息学分析。结果表明,新疆/宁夏组、内蒙古/宁夏组、甘肃/宁夏组和青海/宁夏组分别有446,166,966个和1015个差异表达蛋白(DEPs),与枸杞多糖合成代谢相关的DEPs共160个。进一步筛选得到23个与枸杞多糖相关DEPs,包括蔗糖磷酸合成酶、β-葡萄糖苷酶和α-半乳糖苷酶等。推测采自不同产地的枸杞果实的多糖合成代谢差异通路主要包括蔗糖、纤维素、半乳聚糖、半纤维素和果胶合成代谢过程,且这些过程均可通过UDP-葡萄糖链接在一起。通过蛋白组学分析枸杞多糖合成途径上的相关蛋白,为深入研究不同产地同种枸杞多糖调控机制提供理论参考。

枸杞多糖-2的抗羟基自由基氧化作用

用水杨酸法检测羟基自由基（·OH）研究枸杞多糖组分2（LBP2）清除·OH的效果；用硫代巴比妥酸法测定小鼠肝丙二醛含量，用以DPH为荧光探剂的荧光偏振法测定小鼠肝线粒体膜流动性，以及用分光光度法测定小鼠红细胞溶血和肝线粒体膨胀程度研究LBP2的抗·OH氧化效果。结果表明，LBP2可以清除·OH，抑制·OH所致丙二醛的产生，抑制·OH所致膜流动性下降，减少·OH所致红细胞溶血，减轻·OH所致肝线粒体膨胀程度。可以得出LBP2具有抗·OH所致氧化的作用。

枸杞粗多糖的免疫活性

为进一步分离纯化枸杞多糖并进行深入的免疫药理学研究 ,应用淋巴细胞增殖 ,溶血空斑 ,杀伤性T淋巴细胞 (CTL)杀伤活性测定 ,酶联免疫测定法和噻唑蓝等方法研究了枸杞粗多糖 (LBP)的免疫活性特点 .结果发现 :口服给予LBP对LACA小鼠脾细胞增殖反应和抗体生成反应均具有明显的促进作用 ,但对CTL细胞特异性杀伤P815瘤细胞的杀伤活性无明显影响 ;明显增加快速老化模型小鼠(SAMP8)脾抗体生成细胞的数目 ,升高脾细胞产生抗体IgG水平 .结果提示 ,LBP是枸杞子中主要免疫活性成分 ,促进或改善体液免疫功能可能是其对免疫系统的主要作用之一 .

枸杞子活性成分及分析方法研究进展

枸杞为茄科枸杞属植物,枸杞子是枸杞的成熟果实,为我国传统中药材,具有清除自由基、抗氧化、提高免疫力以及抑制细胞突变和肿瘤生长等药理作用,目前主要用于肿瘤以及高血脂、高血糖、动脉粥样硬化等一些老年疾病的辅助治疗。文章概述了枸杞中多糖、黄酮、色素等活性成分的研究概况及分析方法研究进展,并对枸杞活性成分的开发与利用进行了展望。

枸杞子活性多糖的研究

目的 对 4个均一枸杞多糖 :LBP 1a 1,LBP 1a 2 ,LBP 3a 1和LBP 3a 2进行结构研究和药理评价。方法采用凝胶柱色谱、酸水解、过碘酸氧化和波谱学等方法测定多糖样品的分子量、单糖组成及连接方式 ,并以小鼠脾淋巴细胞增殖反应为免疫活性指标对多糖样品进行活性评价。结果 4个多糖样品的分子量分别为 11 5× 10 4 ,9 4×10 4 ,10 3× 10 4 ,8 2× 10 4 ,LBP 1a 1,LBP 1a 2为 1,6连接的葡聚糖 ;LBP 3a 1,LBP 3a 2具有 1,4连接的多聚半乳糖醛酸主链 ,及微量的半乳糖和阿拉伯糖分支。 4个多糖均具有免疫促进作用。结论 4种多糖首次从枸杞子中分离得到 ,具有 1。

外源茉莉酸及枸杞瘿螨危害诱导的枸杞防御反应

利用植物的诱导抗性防治病虫害越来越受重视,为寻求枸杞害虫防治的新方法,探索外源茉莉酸对枸杞的诱导反应及机制,本研究测定了外源茉莉酸(jasmonic acid,JA)及枸杞瘿螨Aceria pallida Keifer危害对枸杞叶蛋白酶抑制剂(protease inhibitors,PIs)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、苯丙氨酸解氨酶(phenylalanine ammonia-lyase,PAL)活性及多糖(polysaccharide)、木质素(xylogen)含量的变化。结果表明:外源JA处理或枸杞瘿螨危害均使枸杞叶PIs,SOD和PAL活性及木质素含量显著提高,却使多糖含量显著降低。胰凝乳蛋白酶抑制剂(chymotrypsin inhibitors,CI)和胰蛋白酶抑制剂(trypsin inhibitor,TI)在喷洒JA或枸杞瘿螨危害的第5天增幅最大,且在JA浓度、瘿螨危害间差异显著(P<0.05),其中,0.1mmol/L JA处理使CI增加了96%,TI增加了128%,枸杞瘿螨危害使CI增加了94%,TI增加了122%。枸杞叶多糖含量在JA处理或瘿螨危害后显著降低(P<0.05),且与JA浓度有关,浓度越高,降低越明显。JA或瘿螨危害使枸杞叶木质素增加的最大值出现在处理后的第5天,高浓度JA、瘿螨危害及低浓度JA分别使其增加了70%,41%和36%,三者之间差异显著(P<0.05),第10天增加幅度减低。3种处理同样使SOD和PAL活性显著增加(P<0.05),第5天时增幅最大,高浓度JA处理使枸杞叶SOD活性由对照的70.77U增加到128.98U,PAL活性由10.91U增加到20.59U,第10天时呈现下降趋势。这些与抗性有关物质的变化及其变化趋势,说明外源茉莉酸及枸杞瘿螨均可诱导枸杞产生防御反应,而且反应的程度与茉莉酸浓度及处理后的时间有关。

宁夏不同地域枸杞多糖和总糖含量与土壤环境因子关系的研究

通过对宁夏4个主要枸杞产区土壤理化因子及枸杞果实主要成分枸杞多糖和总糖含量进行分析,研究不同土壤理化因子对枸杞有效成分枸杞多糖和总糖含量的影响。结果表明:宁夏4个主产区枸杞多糖累积与肥力因子间无显著相关性,而总糖含量与肥力因子间呈负相关,其中与速效氮呈显著负相关,与速效磷呈极显著负相关。宁夏枸杞果实内多糖和总糖含量与土壤盐分呈正相关。宁夏4个主要产区枸杞多糖含量差异不显著,但枸杞总糖含量差异显著,其中新产区惠农和同心总糖含量比老产区中宁、园林场含量高。

枸杞多糖水提工艺的优选

目的 :确定枸杞多糖最佳提取条件。方法 :分别以多糖得率及多糖含量为考察指标 ,以正交实验法确定枸杞多糖的最佳提取工艺。结果 :枸杞多糖的最佳提取工艺为 :取枸杞药材 ,第一次加水 10倍 ,以后每次加水 8倍量 ,共冷浸 3次 ;每次冷浸 1h ;每小时搅拌 10min。结论

GIS技术在宁夏枸杞气候区划中的应用

GIS技术为农业气候区划的进一步深入提供了有效的技术方法。在专业地理信息系统软件ArcGIS系统支持下,根据宁夏枸杞产量与气象条件的关系,分析得出:枸杞全生育期最优≥10℃积温为3 450℃.天;≥10℃积温在3 200℃~3 700℃.天范围内,枸杞一般能获得正常产量,热量不是枸杞限制因子;≥10℃积温在3 200℃.天以下时,热量不足引起枸杞减产。枸杞全生育期最适日照时数为1 640h;在1 500h^1 800h内,日照不是限制枸杞产量的因素,低于1 500h时,全生育期日数短,积温少,枸杞减产;高于1 800h时,产量也会有所下降。在此基础上确定了宁夏枸杞产量的气候区划指标,进行了区划指标的小网格点推算。并采用GIS技术对宁夏进行了枸杞产量的气候区划,划分出适宜、次适宜和不适宜种植区。提出:在适宜区有灌溉条件的地方,扩大枸杞种植面积;在次适宜区可适当种植枸杞,以优化农业产业结构,但不可盲目扩大种植面积;在光热条件较差,产量低而不稳,很难形成经济效益的不适宜区不宜种植枸杞。为趋利避害合理发展枸杞生产,进一步科学地优化农业产业结构,合理布局枸杞种植提供了参考依据。

枸杞多糖与土壤养分、气象条件的量化关系研究

根据2000～2001年我国北方枸杞主产区采样化验资料、田间试验资料以及土壤化验资料和逐日气象资料,分析了影响枸杞多糖形成的主要气象和土壤因子。结果表明:土壤因子比气象因子对枸杞多糖含量的影响大,其中,全磷是影响枸杞多糖含量的最主要的因子,其次为枸杞开花至果熟期的降水日数和平均日较差。

枸杞子中免疫活性成分的分离、纯化及物理化学性质的研究

从宁夏枸杞子提取得到的糖缀合物ＬＢＰ经ＤＥＡＥｃｅｌｕｌｏｓｅ柱色谱得到５个组分，其中Ｌｂｐ３，Ｌｂｐ４和Ｌｂｐ５分别经ＣＭＳｅｐｈａｄｅｘＣ５０，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ５０柱色谱得到均一组分ＬｂＧｐ３，ＬｂＧｐ４和ＬｂＧｐ５。Ｎ含量：ＬｂＧｐ３０８３％，ＬｂＧｐ４１７２％，ＬｂＧｐ５９５８％。总糖含量：ＬｂＧｐ３９３６％，ＬｂＧｐ４８５６％，ＬｂＧｐ５８６％。分子量：ＬｂＧｐ３９２５×１０４，ＬｂＧｐ４２１４８×１０４，ＬｂＧｐ５２３７×１０４。糖组成为：ＬｂＧｐ３：Ａｒａ∶Ｇｌｃ＝１∶１，ＬｂＧｐ４：Ａｒａ∶Ｇａｌ∶Ｒｈａ∶Ｇｌｃ＝１５∶２５∶０４３∶０２３，ＬｂＧｐ５：Ｒｈａ∶Ａｒａ∶Ｘｙｌ∶Ｇａｌ∶Ｍａｎ∶Ｇｌｃ＝０３３∶０５２∶０４２∶０９４∶０８５∶１。初步分析表明ＬｂＧｐ４是Ｏ连接的糖蛋白。

枸杞糖缀合物及糖链的化学结构与免疫活性

为研究枸杞多糖的化学结构 ,免疫活性并探讨其构效关系 ,应用色谱法 ,凝胶过滤法和十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)技术从枸杞粗多糖 (LBP)中分离纯化了 5个组分 (LBP1 LBP5) ,并进一步从LBP1,LBP3,LBP4中纯化得到组分均一的糖缀合物LbGp1,LbGp3和LbGp4及其糖链LbGp1 OL ,LbGp3 OL和LbGp4 OL ,用甲基化 ,部分酸水解和核磁共振 (NMR)技术基本阐明了其化学性质 ,糖组成 ,氨基酸组成及主要结构特征 ,并用小鼠脾细胞增殖反应研究免疫活性表明 ,6个样品均具有直接增强小鼠脾细胞增殖反应的作用 .结果提示 ,枸杞子中具有免疫活性的有效成分是一类结构复杂的糖缀合物 ,其糖链部分可能是其发挥免疫活性的主要活性结构 .

枸杞及其多糖对家兔血脂的影响

采用萃取、离子交换层析、凝胶层析等方法，从枸杞中分离得到了粗品枸杞多糖及其纯化组分枸杞多糖－Ｘ。将枸杞、枸杞多糖及其枸杞多糖－Ｘ三者对实验性家兔高脂血症进行降血脂试验（开放型单向质反应序贯试验），探讨枸杞及其多糖降血脂的作用。试验结果表明，枸杞及其多糖对实验性高脂血症兔的血脂均有明显影响，能显著降低血清胆固醇及甘油三酯含量，降脂有效率达１００％。

不同产地枸杞药材中多糖的含量测定

目的建立枸杞多糖的含量测定方法,并测定不同产地枸杞药材中多糖的含量。方法采用水提醇沉法制备枸杞多糖,将枸杞多糖脱蛋白后制得精制枸杞多糖,以精制枸杞多糖测得枸杞多糖对葡萄糖的换算因子后,用苯酚-硫酸法测定不同产地枸杞药材中多糖的含量。结果平均回收率为98.8%,测得不同产地枸杞药材中多糖含量分别为4.03%、7.55%、2.92%、4.99%、3.54%和4.67%。结论该法操作简单,结果较接近真实值;不同产地枸杞中多糖含量的差异较大,该结果为枸杞多糖质量控制和药效评价的进一步研究奠定了基础。

宁夏枸杞新品种“宁杞1号”干果中总糖及多糖类物质的系统分析

本文对宁夏农林科学院枸杞研究所栽培的宁夏枸杞新品种“宁杞１号”枸杞干果中各种糖类物质、包括还原糖，中性多糖、酸提多糖和碱提多糖及糖醛酸的含量进行了系统的分析研究，并与原品种“大麻叶”枸杞干果的糖类成份含量进行了比较。实验结果表明，“宁杞１号”及“大麻叶”枸杞干果所含糖类物质总量分别为５９．６５％和５５．２２％；还原糖含量为１０．２６％和１２．０１％；中性多糖含量为２４．０８％和１８．９７％；酸捉取多糖含量分别为０．５６％和０．３８％；碱提取多糖含量分别为０．４４％和０．１２％；糖醛酸含量分别为２３．６４％和２２．９１％。“宁杞１号”枸杞干果的多糖含量比原“大麻叶”品种高２６．９％，而还原糖含量低１４．６％。