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题名大鼠表皮基底层干细胞体外分离与培养
被引量:2
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作者
邓先见
姚波
李力
徐苗苗
顾玮
杨策
蒋建新
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机构
第三军医大学大坪医院野战外科研究所第四研究室/全军交通医学研究所/创伤烧伤与复合伤国家重点实验室
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出处
《重庆医学》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第21期2441-2443,2448,共4页
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基金
国家自然科学基金重点项目(81030037)
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文摘
目的建立简单、可靠的大鼠表皮基底层干细胞体外分离培养方法。方法取新生大鼠背部皮肤,采用胰酶两步消化法获得单细胞悬液,Ⅳ型胶原差速贴壁法富集干细胞,将慢黏附细胞作为对照组细胞,均以角质形成细胞无血清培养基培养。以β1-整合素和角蛋白19(K19)双重荧光染色鉴定细胞表型,克隆形成实验检测细胞体外增殖能力。结果分离培养的细胞为多角形、呈铺路石样排列,倍增时间约为24h,细胞形态和生长规律符合基底层干细胞的特征。免疫荧光鉴定显示细胞共表达β1-整合素和K19,基底层干细胞克隆形成能力显著强于对照细胞。结论两步消化联合Ⅳ型胶原差速贴壁法获取基底层干细胞简易可行,培养的细胞活力好、表型可靠。
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关键词
成体干细胞
细胞培养技术
表皮干细胞
基底层干细胞
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Keywords
adult stem cell
cell culture techniques
epidermal stem cell
basal layer stem cell
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分类号
R329
[医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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