等电点沉淀法分离大豆球蛋白酸性亚基和碱性亚基

利用β-巯基乙醇切断大豆球蛋白酸性亚基和碱性亚基之间二硫键的基础上,根据两类亚基等电点的差异分离纯化大豆球蛋白亚基,从而建立了分离大豆球蛋白酸性亚基和碱性亚基的等电点沉淀法。利用这一方法分离得到的酸性亚基和碱性亚基纯度分别为92.69%和80.76%,酸性亚基和碱性亚基的净产率分别达31.40%和41.64%。该方法是一种简单有效、价格低廉的大豆球蛋白亚基分离方法。

大豆球蛋白碱性亚基的分离纯化、特性及应用研究进展

大豆蛋白是一种含有低纤维和平衡氨基酸的优质植物蛋白来源,营养价值高,应用范围广。大豆球蛋白碱性亚基是大豆蛋白11S组分中的碱性多肽链。大豆球蛋白碱性亚基具有独特的溶解性、低抗原性和优异的乳化性、耐高温、易吸收及抗菌特性,将其添加到食品中既能发挥其营养功能又能提升食品的品质,延长储存期,具有广阔的开发前景。本文介绍了大豆球蛋白碱性亚基的等电点沉淀法及层析法等分离纯化方法研究及其功能特性、抗菌特性的研究进展,并指出了大豆球蛋白碱性亚基未来的研究方向及可应用的发展前景,为其进一步的深入研究和综合开发利用提供一定的参考。

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜成纤维细胞整合素β1亚单位mRNA表达的影响

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜成纤维细胞整合素β1亚单位mRNA表达的影响,探讨bFGF在牙周组织再生中的意义。方法体外培养人牙周膜成纤维细胞,分别用质量浓度0.1、1.0、10.0 ng.mL-1的bFGF刺激细胞,培养24、48、72 h,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测牙周膜成纤维细胞内整合素β1亚单位mRNA表达的变化。结果 bFGF可促进人牙周膜成纤维细胞内整合素β1亚单位mRNA的合成,在培养24、48、72 h时,1.0 ng.mL-1组整合素β1亚单位表达均明显高于对照组;培养72 h时各实验组整合素β1亚单位表达均明显高于培养24、48 h时。结论 bFGF通过提高整合素β1亚单位mRNA的表达,促进牙周膜成纤维细胞的黏附,在牙周组织修复再生中起作用。

重度子痫前期患者胎盘组织hTERT和bFGF的表达及意义

目的探讨重度子痫前期患者胎盘组织中人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的表达及其意义。方法用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(streptavidin-perosidase,SP)检测重度子痫前期30例(早产17例,足月产13例)和25例无并发症的对应孕周孕妇(早产14例,足月11例)胎盘组织中hTERT和bFGF表达水平。结果重度子痫前期组胎盘中hTERT水平(45.09±11.10)显著降低于对照组hTERT(59.90±4.64),P<0.05。早产重度子痫前期组胎盘bFGF表达(74.71±11.87)显著高于早产组(54.38±19.52),P<0.05;足月重度子痫前期bFGF表达(47.57±8.83)与正常足月组(46.10±16.25)无统计学差异(P>0.05)。结论重度子痫前期胎盘hTERT的表达降低,可能是重度子痫前期胎盘滋养细胞侵入异常的主要原因,而在重度子痫前期bFGF表达显著增加可能在其发病中起到保护性作用。

病毒性脑膜炎患儿血清中枢神经特异性蛋白β髓鞘碱性蛋白的表达与临床预后的关系

目的 分析病毒性脑膜炎(VE)患儿血清中枢神经特异性蛋白β(S-100β)、髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达及与临床预后不良的关系。方法 选取信阳市第四人民医院2019年1月至2021年1月收治的110例VE患儿作为研究对象,全部患儿均进行综合治疗,于治疗7 d评估患儿治疗效果,并分为预后良好组和预后不良组。于入院时检测血清S-100β、MBP、中性粒细胞CD64表达,分析入院时VE患儿血清S-100β、MBP的表达与临床预后不良的关系。结果 110例VE患儿临床预后不良26例,占23.6%;临床预后良好84例,占76.4%;预后不良组中性粒细胞CD64、血清S-100β、MBP表达高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,中性粒细胞CD64、血清S-100β、MBP高表达可能是VE患儿临床预后不良的风险因子(OR>1,P<0.05);绘制受试者工作特征(ROC)曲线发现,血清S-100β、MBP单一及联合预测VE患儿临床预后不良风险的曲线下面积(AUC)分别为0.811、0.791、0.835,AUC均>0.70,有一定预测价值,且当二者截断值分别取1.705μg/L、15.305μg/L时,预测价值最佳。结论 VE患儿血清S-100β、MBP呈高表达,且血清S-100β、MBP与VE患儿临床预后不良有关。

颅脑外伤术后血清神经生化标志物及其脑脊液中P73、P38蛋白表达的意义

目的探讨颅脑外伤术后血清神经生化标志物及其脑脊液中肿瘤蛋白P73(P73)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38)蛋白表达的意义。方法选取2017年5月至2019年7月郑州大学附属郑州中心医院收治的101例颅脑外伤术后病人作为观察组,选取同期体检中心101例健康体检者作为对照组。比较两组、不同预后病人血清中枢神经特异性蛋白(S100β)、人脑髓鞘碱性蛋白(MBP)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平及脑脊液中P73、P38蛋白表达情况。采用Pearson分析各指标与格拉斯哥预后评分(GOS)的相关性,采用接收者操作特征(ROC)曲线分析血清神经生化标志物、脑脊液中P73、P38蛋白预测不良预后的价值。比较不同认知功能病人血清神经生化标志物水平及脑脊液中P73、P38蛋白表达情况,分析各指标与MMSE评分相关性。结果观察组血清S100β[(0.91±0.36)μg/L]、MBP[(5.76±2.43)mg/L]、NSE[(9.74±5.02)μg/L]较对照组[(0.58±0.24)μg/L、(2.93±0.71)mg/L、(6.03±1.85)μg/L]高(P<0.05);预后良好、重残、不良病人血清S100β[(0.62±0.35)μg/L、(1.02±0.36)μg/L、(1.55±0.39)μg/L]、MBP[(3.81±2.15)mg/L、(6.44±2.64)mg/L、(10.20±2.82)mg/L]、NSE[(7.17±4.54)μg/L、(10.78±5.08)μg/L、(15.24±6.81)μg/L]表达依次递增,脑脊液中P73[(0.33±0.06)、(0.29±0.07)、(0.24±0.05)]、P38蛋白[(0.30±0.03)、(0.25±0.05)、(0.19±0.04)]表达依次递减(P<0.05);术后第3 d血清S100β、NSE与术后1个月GOS评分呈负相关,脑脊液中P73、P38蛋白与GOS评分呈正相关(P<0.05);各指标预测不良预后的AUC由大到小依次为S100β、P38蛋白、P73蛋白、NSE、MBP,最佳截断值分别为1.48μg/L、0.25、0.21、14.18μg/L、7.72 mg/L;认知功能损害为轻度、中度、重度的病人血清S100β、NSE依次升高,脑脊液中P73、P38蛋白依次降低(P<0.05);术后第3 d血清S100β、NSE与术后1个月MMSE评分呈负相关,脑脊液中P73、P38蛋白与MMSE评分呈正相关(P<0.001)。结论检测颅脑外伤病人血清S100β、NSE及脑脊液中P73、P38蛋白表达可在术后早期预测病人预后与认知功能,为临床干预提供重要参考。

大豆球蛋白的纤维聚集体行为及其稳定性研究

为了明确蛋白质的纤维聚集行为,本研究以大豆球蛋白(soy globulin,11S)为原料,从亚基层面对酸性条件下热诱导的11S纤维聚集过程进行跟踪,监测蛋白及其亚基的水解过程、结构变化及其稳定性。结果表明,11S的纤维化是一个多步骤的过程,包括多肽链的水解、自组装成淀粉样纤维聚集结构及逐渐生长成宏观可见的具有扭曲螺旋结构的纤维聚集体。与11S纤维化过程的单指数增长相比,酸性亚基的纤维化过程存在迟滞期。酸性亚基在纤维化聚集的初期主要贡献于纤维聚集的成核过程,碱性亚基的加入改变其纤维聚集进程。蛋白质的纤维化过程会增加11S在等电点处的溶解度,降低中性和酸性pH下的溶解度。此外,碱性环境(pH值10.0)会导致11S纤维聚集体全部溶解、宏观纤维长度变小、结构发生改变。以上研究结果旨在为合理利用蛋白纤维化聚集体作为新的功能性食品配料提供理论依据。

流感病毒聚合酶2蛋白介导的病毒毒力及宿主适应性选择

流感病毒的毒力由多种因素共同决定，其中聚合酶PB2能与宿主前体mRNA的5’端帽子结构结合，利用其核酸内切酶活性切割下5’端的核苷酸短链，进而介导病毒自身mRNA的转录合成。目前已经鉴定出PB2中多个位点的突变与病毒毒力和宿主适应性密切相关，是一个主要的毒力决定因子。因此，此文主要就流感病毒PB2蛋白在病毒毒力，宿主适应性选择，以及与宿主因子相互作用等方面的最新研究进展作一综述。