酶法破壁提取蜂花粉功能成分的工艺优化及抗氧化活性分析

目的探索酶解结合超声和碱解从而高效破壁和提取蜂花粉中的活性成分。方法采用扫描电镜对蜂花粉微观结构进行分析,并使用高效液相色谱法分析酚类物质的组成和含量变化。结果经12.5%碱性蛋白酶酶解1 h后,蜂花粉酶解上清液的总酚含量、总黄酮含量和2,2’-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt,ABTS]阳离子自由基清除能力最高,分别为(14.14±0.23)mg GAE/(g·dw),(2.34±0.04)mg RE/(g·dw)和(167.06±1.39)μmol TE/(g·dw)。将酶解辅以超声协同0.3 mol/L NaOH处理后,总酚、总黄酮、ABTS阳离子自由基清除能力及铁离子还原能力相比未处理花粉分别提高了191%、39%、69%和162%。扫描电镜结果显示,碱处理酶解后花粉细胞壁破碎程度显著增加,花粉内含物质从裂口处向外溢出,与理化指标趋势一致。最佳工艺条件为0.3mol/LNaOH超声-碱处理1h,调节pH至7,12.5%的碱性蛋白酶于50℃下酶解1 h。结论超声碱处理可辅助酶解实现蜂花粉的高效破壁,同时小肽、多酚、黄酮等营养成分也进一步溶出,促进了蜂花粉的高值化利用。

一种抗氧化膳食补充剂的增强免疫作用和毒理学评价

研究以雨生红球藻为主要原料复配富硒酵母、蜂花粉提取物和维生素E组成的抗氧化膳食补充剂的免疫作用和安全性。采用低、中、高三个剂量(0.1、0.2、0.4 g/kg bw)每天一次灌胃,连续30 d,观察对小鼠脾脏、胸腺指数、脾淋巴细胞转化活性、迟发型变态反应、抗体生成细胞水平、半数溶血值(HC_(50))、碳粒廓清速率、巨噬细胞的吞噬作用和自然杀伤细胞活性等指标的影响;通过Ames试验、骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验分别评估受试物的致癌潜力,以及对细胞和生殖系统的遗传毒性情况;通过30 d喂养试验考察受试物亚急性毒性。结果发现,与对照组相比,中、高剂量组OD差值分别提高了10.32%(P<0.05)和14.29%(P<0.01),说明该膳食补充剂可以促进小鼠的脾淋巴细胞增殖转化能力;高剂量组左右耳肿胀度差增加了8.02%(P<0.05),抗体积数增加了22.12%(P<0.05),说明该膳食补充剂可以显著提升迟发型变态反应能力和抗体生成细胞能力;无急性毒性、遗传毒性和亚急性毒性。实验证明,雨生红球藻、富硒酵母、蜂花粉提取物和维生素E复配的抗氧化膳食补充剂食用安全,具有增强免疫力的功能。

3种功能食品原料提取物毒性研究及安全性评价

目的 研究3种功能食品原料(红景天、五味子和蜂花粉)醇/醇水提取物毒性并评价其安全性。方法 利用小鼠急性毒性实验、遗传毒性实验(小鼠骨髓细胞微核实验、雄性小鼠精子畸形实验)和大鼠30 d喂养实验对3种提取物的毒性进行考察。结果 小鼠对红景天、五味子和蜂花粉提取物的最大耐受量都大于20 g/(kg·bw);3种提取物在遗传毒性实验均呈阴性反应;给予大鼠5.0 g/(kg·bw)红景天、五味子、蜂花粉提取物(分别相当于成人日推荐量250倍、250倍、500倍)连续灌胃30d,大鼠生长正常,无中毒症状、异常症状和死亡,各试食组动物体重、进食量、饲料利用率、血常规指标、常见血液生化指标、脏器重量以及病理组织学等指标与阴性对照组比较,无毒性反应。结论 红景天、五味子、蜂花粉提取物属无毒物质,无遗传毒性和长期毒性。本研究为以红景天、五味子和蜂花粉提取物为原料的功能食品开发和应用提供了一定的安全性依据。

荞麦蜂花粉多酚对α-淀粉酶的抑制作用

蜂花粉多酚是一类能够有效降低血糖的天然物质。α-淀粉酶是高等生物体内血糖控制的关键酶,抑制其活性有助于控制餐后血糖。为探究蜂花粉多酚抑制α-淀粉酶发挥降糖活性的机制,本文以荞麦蜂花粉多酚(buckwheat bee pollen polyphenol,BBPP)为对象,采用比色法、荧光分光光度法研究BBPP对α-淀粉酶活性影响及其抑制机理。结果表明,BBPP能对α-淀粉酶产生较强的抑制作用,半抑制浓度(IC_(50))为2.00±0.06 mg/mL,抑制类型为可逆性混合型抑制。高温、强碱、光照以及高浓度氧化剂与还原剂等处理,均能降低BBPP对α-淀粉酶的抑制作用。在273~298 K和298~310 K时其结合过程分别为动态猝灭和静态猝灭。随着BBPP浓度增加,α-淀粉酶荧光最大发射波长产生蓝移,表明α-淀粉酶构象改变,疏水性增加。本研究发现荞麦蜂花粉多酚对α-淀粉酶具有较强抑制作用,对荞麦蜂花粉多酚的临床开发利用具有重要的理论参考价值。

未破壁蜂花粉对绵羊生长性能、免疫力和经济效益的影响

试验旨在研究未破壁蜂花粉对绵羊生长性能、免疫力和经济效益的影响。试验选取体重(36.53±3.81) kg的湖羊母羊30只,随机分成5组,每组3个重复,每个重复2只羊。对照组(CK组)羊饲喂基础日粮,各试验组羊分别饲喂添加2 (A组)、5 (B组)、8 (C组)、11 g/(只·d)(D组)的未破壁蜂花粉的基础日粮。试验期40 d,其中预试期10 d,正式试验期30 d。结果显示,与CK组对比,B组湖羊平均日采食量极显著降低(P<0.01)。与CK组相比,A组湖羊血清免疫球蛋白A (IgA)含量显著上升(P<0.05),免疫球蛋白G(IgG)含量极显著上升(P<0.01);B组和C组血清IgG含量显著上升(P<0.05)。与CK组对比,A组、B组、C组和D组饲料总成本分别增加-1.29%、3.99%、17.83、31.66%,增重收益分别增加33.33%、6.67%、-6.67%和-11.79%,经济效益分别增加124.61%、13.72%、-71.23%、-126.33%。研究表明,绵羊适当饲喂未破壁蜂花粉可降低饲料投入,提升绵羊生长性能、血清免疫功能和经济效益,建议在湖羊生产添加2 g/(只·d)未破壁蜂花粉。

蜂花粉中新烟碱农药的残留分析及膳食摄入风险评估

该研究探讨了我国不同植物源66个蜂花粉样品中8种新烟碱农药的残留情况,并根据残留结果进行普通人群膳食摄入风险评估。结果发现,样品检出率为50.0%,共检出5种新烟碱农药,包括啶虫脒、吡虫啉、噻虫嗪、噻虫胺和呋虫胺,检出率最高的为噻虫嗪(31.8%),残留浓度最高为啶虫脒(195.1 ng/g)。4种植物源的蜂花粉中新烟碱农药的残留存在显著差异:茶花粉的检出率显著高于其他3种花粉;杂花粉的残留浓度显著高于茶花粉和油菜花粉,残留浓度从高到低依次为杂花粉、荞麦粉、茶花粉、油菜花粉。来自6个主要地区的蜂花粉残留情况也有所不同,这可能跟我国不同地区和不同作物中新烟碱农药的施用情况相关。依据新烟碱农药的残留浓度进行人类膳食摄入风险评估,评估结果(风险商值均小于1%)说明蜂花粉中的新烟碱农药残留风险可接受。

蜂花粉和蜂蜜的添加及焙烤条件对曲奇品质及功能特性的影响

通过单因素和正交试验,研究蜂花粉添加量、蜂蜜添加量、焙烤温度和焙烤时间对曲奇的色泽(明亮度L*)、硬度和感官品质的影响,确定曲奇的最佳制备工艺,并通过聚类分析确定曲奇硬度等级。结果表明,曲奇的最佳制备工艺为蜂花粉添加量20%(以小麦粉干基计),蜂蜜添加量10%,焙烤温度170℃,焙烤时间18 min,1级曲奇硬度为360 g~420 g。DPPH自由基和羟基自由基清除能力及总还原能力测试结果表明,同时添加蜂花粉和蜂蜜能显著提高曲奇的抗氧化能力。

油菜蜂花粉的生物活性及其开发利用现状

人们健康理念日益增强,油菜蜂花粉作为一种天然保健原料,研究开发价值极高。文章介绍了油菜蜂花粉富含的多种营养成分和活性物质,主要总结油菜蜂花粉在抗氧化、抗炎、增强免疫、抗菌、保护前列腺、抗糖尿病并发症、抗肿瘤、调节保护肠道、保护卵巢等方面的生物活性和药理作用,以及油菜蜂花粉在蜂产品、保健品、食品、医药、化妆品中的应用,并对油菜蜂花粉的发展方向进行了展望。

蜜生假丝酵母LGL-2发酵油菜蜂花粉酵素工艺优化及品质评价

以油菜蜂花粉为主要原料,以蜂蜜中选育出的蜜生假丝酵母LGL-2为试验菌株,研究不同发酵时间、发酵温度、接种量和底物含量对油菜蜂花粉酵素总酚含量的影响。以总酚含量为指标,采用响应面法优化油菜蜂花粉酵素发酵工艺条件。在此条件下,进一步比较分析油菜蜂花粉及其酵素的酚类化合物、挥发性风味成分和抗氧化活性。结果表明:油菜蜂花粉酵素的最佳发酵工艺参数为发酵时间48 h、发酵温度30℃、接种量20%、底物含量30%,此时油菜蜂花粉酵素总酚含量可达11.48 mg GAE/g。采用高效液相色谱(HPLC)分析酚类化合物,发现其内包含没食子酸、对香豆酸、芦丁、鞣花酸和槲皮素,各酚类化合物含量经蜜生假丝酵母LGL-2发酵后均有所提高。采用相对气味活度值法(ROAV)结合顶空固相微萃取-气相色谱-质谱技术(HS-SPME-GC-MS)对油菜蜂花粉及其酵素的挥发性香气成分进行测定分析,共检测出26种挥发性香气成分,其中7种被鉴定为油菜蜂花粉酵素关键性挥发性香气成分,部分醇类和酯类物质含量提升为产品带来优良风味。抗氧化活性试验表明,相比于发酵前,油菜蜂花粉酵素具有更强的DPPH自由基清除能力(DPPH·)、ABTS^(+)自由基清除能力(ABTS^(+)·)以及铁离子还原能力(FRAP)。综上,经蜜生假丝酵母LGL-2发酵能有效提高油菜蜂花粉的酚类物质含量、风味品质及抗氧化活性。

基于蜂花粉质量控制现状的问题分析及研究展望

中药质量控制是保证中药临床用药安全有效的重要措施。蜂花粉作为一种药食同源的药材,因其富含丰富的抗氧化活性物质在临床上应用越来越广,其质量的优劣直接影响临床治疗效果。目前不同地区蜂花粉质量标准存在较大差异,本研究对蜂花粉药材现有质量标准及存在问题和质量控制研究进展进行综述,探讨存在的主要问题,以期为蜂花粉质量标准的完善和质量的提升提供依据。

茶花蜂花粉破壁工艺及其水提物降血糖功效的研究

以粗多糖含量为指标,在单因素试验的基础上,采用正交试验优化茶花蜂花粉温差法破壁工艺,而后进行最佳超声时间的探究,获得超声辅助温差法的最优工艺。同时探究茶花蜂花粉水提物对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制作用。结果表明:超声辅助温差法的最佳工艺为冷冻时间24 h、温差90℃、料液比1∶35(g/mL)、水浴温度65℃、水浴时间4.5 h、超声60 min,该工艺下粗多糖含量为515.65 mg/g。相同质量浓度下,茶花蜂花粉水提物对α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制率高于阿卡波糖,结果表明该破壁工艺所得的茶花蜂花粉水提物是一种良好的α-淀粉酶、α-葡萄糖苷酶的抑制剂。

油菜蜂花粉发酵工艺及生物活性研究

蜂花粉富含营养成分和生物活性物质,乳酸菌发酵是改善食品感官、营养和生物活性的有效方法之一。该文以油菜蜂花粉为原料,选用植物乳杆菌和鼠李糖乳杆菌进行混合发酵,用单因素试验和正交设计对发酵工艺进行优化,并对比了发酵前后蜂花粉基本营养成分、抗氧化、抗炎和抑菌活性。结果显示,油菜蜂花粉的最佳发酵条件为添加水量40%,发酵温度37℃,乳酸菌接种量10%,植物乳杆菌与鼠李糖乳杆菌的菌液比例为3∶1,最优条件下发酵72 h后油菜蜂花粉总酚和总黄酮的含量分别提高了16.09%和51.02%;还原糖和蛋白质含量显著降低(P<0.05);总抗氧化能力提高了1.26倍,DPPH自由基清除率、Fe^(2+)螯合率分别提高了10.49%、23.19%;透明质酸酶活性抑制率达到46.08%,抑制蛋白质变性的能力提高了24.65%;油菜蜂花粉经发酵后对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌抑菌活性均显著增强(P<0.05)。研究表明,发酵可进一步提高蜂花粉品质,增强其生物活性,该研究可为油菜蜂花粉进一步深加工提供理论指导。

紫外和荧光光谱法研究油菜蜂花粉多酚对胰脂肪酶的作用过程

本文利用酶动力学方法测定了油菜蜂花粉多酚对胰脂肪酶的抑制作用,并通过紫外光谱、荧光光谱和同步荧光光谱分析了油菜蜂花粉多酚与胰脂肪酶的相互作用过程。结果表明,油菜蜂花粉多酚对胰脂肪酶的活性具有一定的抑制作用,其半抑制浓度(IC_(50))为1.670±0.045 mg/mL,抑制类型为可逆性抑制中的混合型抑制。荧光光谱分析显示,随着油菜蜂花粉多酚浓度增加,胰脂肪酶的最大荧光发射强度逐渐降低,同时荧光最大发射波长从341 nm红移到349 nm。同步荧光光谱表明,多酚与胰脂肪酶结合时酶内部的疏水性降低,肽链的伸展程度增加;荧光猝灭机理结果显示,猝灭常数随温度升高从0.1000减小到0.0743,其结合过程为静态猝灭,且结合位点约为1个。综上,油菜蜂花粉多酚通过改变胰脂肪酶构象来抑制胰脂肪酶的活性,这为深入研究蜂花粉减脂机理提供了一定理论依据。

响应面法优化余甘子凝胶糖果的配方研究

本研究以余甘子果、山茶蜂花粉为主要原料,辅以甜味剂(山梨糖醇、赤藓糖醇)、稳定剂(卡拉胶、魔芋胶)、氯化钾制作凝胶糖果。在复合凝胶添加量、复合凝胶复配比、果粉浆添加量、果粉浆复配比、复合糖醇添加量、氯化钾添加量对凝胶糖果的影响共六个单因素实验的基础上,采用响应面(Response surface method,RSM)的中心复合实验法(Central composite design,CCD)设计实验,以凝胶糖果的感官评分为评价指标,确定凝胶糖果的最佳配方。结果表明,最佳配方为果粉浆100 mL(余甘子果肉∶山茶蜂花粉=12.5∶1,m/m),复合凝胶8 g(卡拉胶∶魔芋胶=1∶1,m/m),复合糖醇60 g(山梨糖醇∶赤藓糖醇=1∶1,m/m),氯化钾0.3 g。结合质构仪分析显示,该配方制作的凝胶糖果口感柔软细腻、有嚼劲、有弹性、色泽黄亮、外形良好,富有余甘子独特的风味。

Folin-Ciocaileu比色法测定蜂花粉中的总酚

蜂花粉含有丰富的多酚类化合物,这类化合物具有抗动脉硬化、降低胆固醇、抗氧化和抗辐射等作用,因此可以用来评价蜂花粉的活性。本文采用Folin-Ciocaileu法对蜂花粉中的总酚进行检测。本方法以原儿茶酸为对照品,标准曲线的回归方程为:C=7.9234A-0.0157(R2=0.9999);对稳定性、精密度、重现性、回收率进行了试验,相对标准偏差(RSD)为0.05%～1.43%。该方法简便、快速、准确,是检测蜂花粉中总酚的可靠方法。

青海油菜蜂花粉黄酮类化合物含量的研究

采用正交试验设计,研究了青海油菜蜂花粉中黄酮类化合物的最佳提取条件,分别采用HPLC法和比色法测定了黄酮类化合物的含量。最佳提取条件是选用95%的乙醇作为溶剂,以10倍总量的乙醇用量,水浴热回流提取。以槲皮素、山奈酚、异鼠李素为对照品,采用HPLC法,测定出黄酮类化合物平均含量为3.194%;以芦丁为对照物,采用比色法,测定出总黄酮平均含量为3.70%。

蜂花粉油脂抗氧化活性与类胡萝卜素含量的相关性

以新鲜益母草、茶花、油菜、荷花、玫瑰、籽瓜、菊花、荞麦8种常见的蜂花粉油脂为材料,测定其中的类胡萝卜素含量,同时评价不同蜂花粉油脂的抗氧化活性。结果表明:8种蜂花粉油脂对DPPH自由基均具有一定的清除作用,不同蜂花粉油脂清除能力存在显著差异(P<0.05),IC50值在0.212～7.110mg/mL之间。蜂花粉油脂中含有较高含量的类胡萝卜素类物质,其含量与油脂抗氧化活性呈正相关(R2=0.8645),表明类胡萝卜素可能是蜂花粉油脂抗氧化的主要活性成分之一。

油菜蜂花粉提取物对羟基自由基介导2-脱氧核糖损伤的抑制作用

本文以水、80%乙醇、70%甲醇为溶剂提取油菜蜂花粉中的多酚类物质,测定了提取物中总酚含量、还原力、Fe2+络合能力及对DPPH自由基的清除能力。以Fenton为模型,研究了油菜蜂花粉提取物对羟基自由基介导2-脱氧核糖降解的保护机理。结果表明:3种提取物的抗氧化能力与总酚含量呈正相关,乙醇提取物和甲醇提取物的抗氧化能力较水提取物强;油菜蜂花粉提取物主要是作为自由基清除剂,不是依靠络合能力来发挥清除羟基自由基的作用。

蜂花粉及其多糖对犊牛体增质量、物质消化与血清指标的影响

研究蜂花粉及其多糖对14～70日龄犊牛生长性能、营养物质消化率和血清生化指标的影响。试验选用25头新生荷斯坦犊牛,随机分成5组,每组5头牛,分别是饲喂蜂花粉10 g.d-1(10BP)组、25 g.d-1(25BP)组、50g.d-1(50BP)组、蜂花粉多糖5 g.d-1(5PS)组和对照(C)组,试验期56 d,用全收粪法在犊牛21～28和42～49 d进行两期消化试验。结果表明:25BP和5PS组犊牛全期平均日增体质量显著高于C组(P<0.05);25BP组F/G改善了12.85%(P<0.05);在犊牛21～28 d时,25BP和5PS组分别提高干物质(DM)表观消化率8.38%和7.66%,显著高于C组和50BP组(P<0.05),25BP组提高粗蛋白(CP)表观消化率18.03%(P<0.05);在血清生化指标中,添加蜂花粉和多糖组犊牛70 d时,血清总蛋白(TP)和白蛋白(ALB)有增加趋势,尿素氮(BUN)和总胆固醇(CHO)有降低趋势,甘油三酯(TG)各处理组降低显著(P<0.05)。代乳粉中添加蜂花粉及其多糖可提高犊牛生长性能及对干物质和粗蛋白的表观消化率,改善饲料转化率和降低血清甘油三酯水平,并有提高血清总蛋白和白蛋白含量的趋势。蜂花粉添加量为25 g.d-1,蜂花粉多糖添加量为5 g.d-1水平时,犊牛生长性能和营养物质消化率有明显的改善。

蜂花粉总黄酮检测方法的研究

黄酮类化合物因具有多种生物活性而成为目前天然产物研究的热点。本研究通过三种检测方法的比较,确定了聚酰胺-UV法为蜂花粉总黄酮的测定方法,其检测波长为360nm,以芦丁为标准品,在0.005～0.025mg/ml范围内,其浓度与吸光度呈良好的线性关系,相关系数R2为0.9998,平均回收率分别为95.53%,稳定性、精密度和重现性均理想,其RSD分别为2.124%(n=3)、0.488%(n=3)、0.875%(n=5)。该法检测油菜蜂花粉中总黄酮含量为1.54%。