牛肉、肝和肾中9种抗菌药物残留的HPLC-MS/MS检测方法研究

为有效监测牛肉、肝和肾中抗菌药物多残留水平,提升风险隐患的排查能力,建立一种快速测定牛肉、肝和肾中9种药物残留的高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS),药物涉及大环内酯类、磺胺类、喹诺酮类、四环素类、氨基糖苷类共5大类。通过比较提取溶剂、提取次数、称取重量和净化柱选择对9种抗菌药提取效果的影响,考察牛肉组织的基质效应,确定最优的检测条件为:称取2.5 g,采用Mcllvaine-Na 2 EDTA-甲酸-乙腈溶液提取2次,提取液经HLB柱净化,使用C18柱(50 mm×2.1 mm,1.8μL)色谱柱分离,以0.1%甲酸水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾电离(ESI)和多反应监测(MRM)模式检测,基质外标法定量。结果显示,9种抗菌药物在相应线性范围内R^(2)均大于0.99,检出限为0.1~0.5μg/kg,定量限为0.5~2μg/kg;在0.5~200μg/kg添加浓度范围内,平均回收率为71.65%~118.59%,相对标准偏差(RSD)为0.14%~9.57%。建立了牛肉、肝和肾中9种药物残留检测的高效液相色谱串联质谱法,该方法灵敏准确,适用于牛肉、肝和肾3种产品中9种抗菌药物的残留检测。

不同青贮饲料对安格斯肉牛屠宰性能、血清生化指标和肝脏脂质代谢的影响

试验旨在探究不同青贮饲料对安格斯肉牛屠宰性能、血清生化指标和肝脏脂质代谢的影响。试验将45头月龄相近、体重(567.68±23.62)kg的安格斯公牛随机分为3组,每组15个重复,每个重复1头。分别饲喂由青贮玉米、苜蓿和高粱构成的试验日粮,试验为期80 d(预饲期8 d,正试期72 d)。结果表明,与玉米青贮组相比,苜蓿青贮组FBW显著提高4.00%、ADG显著提高19.28%、料重比显著降低13.23%(P<0.05);苜蓿青贮组肉牛的肾脂率和大网膜脂率均显著高于玉米青贮组和高粱青贮组(P<0.05);此外,不同青贮对肉牛胴体重、屠宰率、心脂率、净肉重、净肉率和眼肌面积无显著影响(P>0.05)。苜蓿青贮组肉牛血清葡萄糖含量显著高于玉米青贮和高粱青贮组(P<0.05);苜蓿青贮组肉牛血清甘油三酯含量显著低于玉米青贮和高粱青贮组(P<0.05);苜蓿青贮和高粱青贮组肉牛血清总蛋白含量显著高于玉米青贮组(P<0.05);此外,不同青贮对安格斯肉牛血清总胆固醇、球蛋白、白蛋白、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白含量均无显著影响(P>0.05)。苜蓿青贮组肉牛肝脏FAS基因表达水平显著高于玉米和高粱青贮组(P<0.05);苜蓿青贮组和高粱青贮组肉牛肝脏CPT1基因表达水平显著高于玉米青贮组(P<0.05);苜蓿青贮组肉牛肝脏PPAR-γ基因表达水平显著高于玉米和高粱青贮组(P<0.05);此外,不同青贮对肉牛肝脏LPIN1基因表达无显著影响(P>0.05)。结论:本试验数据显示,苜蓿青贮可增加安格斯肉牛的脂质沉积。在本试验条件下,苜蓿青贮对安格斯肉牛的育肥效果最佳。

低温储藏条件下氧化状态对牦牛肝中挥发性化合物的影响

为了研究低温储藏条件下氧化状态对牦牛肝中挥发性化合物的影响,选取成年牦牛肝为研究对象,在低温条件下进行储藏,测定储藏前后的过氧化氢值(POV)、硫代苯巴比妥酸反应底物值(TBARS)以及挥发性化合物。结果表明,相比于储藏前,储藏后的POV和TBARS分别增加了135.96%和197.28%。储藏前后共检出31种挥发性化合物,其中苯乙醛、反-2-癸烯醛、2-庚酮等10种物质仅在储藏后检出。经储藏后,醛类物质含量增加了17.38%,其中己醛、庚醛、辛醛3种直链脂肪醛分别增加了8.95%、3.42%、1.17%,而异戊醛减少了1.58%。经过储藏酮类减少了10.40%,丙酮下降了12.45%,而2-丁酮、2-庚酮等甲基酮含量均提高。杂环类化合物在储藏前后差异不显著,但苯并噻唑却极显著地降低了1.71%(p<0.01)。结果表明,在低温储藏条件下氧化程度的升高,增加了直链脂肪醛和甲基酮等脂质氧化产物,而减少了异戊醛、苯并噻唑等美拉德反应产物。

牛肝中苯并咪唑类药物残留的高效液相色谱检测方法

建立了牛肝组织中苯并咪唑类药物(阿苯哒唑,噻苯哒唑和奥芬哒唑)多残留检测的高效液相色谱法。用乙酸乙酯提取牛肝组织样品中的药物,提取液浓缩后加入酸性乙醇和正己烷分配脱脂,过C18固相萃取柱净化。以甲醇-磷酸二氢铵缓冲液为流动相,反相高效液相色谱紫外检测法检测。方法的平均回收率为78.8%,平均变异系数为2.18%。3种药物的检测限为8μg/kg,定量限为25μg/kg。

黑龙江省放牧与舍饲肉牛肝功能状态的评价

为了比较舍饲和放牧两种饲养模式肉牛肝功能的状态,试验选择黑龙江省双鸭山、九三、大庆3个地区的肉牛养殖场共59头肉牛,分别于6,7,8月份定期采集血液,分离血清检测7项肝功能指标和5项能量代谢指标。结果表明:3个地区放牧组总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、总胆红素(TBIL)含量和丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转肽酶(GGT)活性与舍饲组差异不显著(P>0.05),但放牧组ALT、AST、GGT活性和GLO含量高于舍饲组;大庆地区舍饲组肉牛葡萄糖(GLU)含量极显著高于放牧组(P<0.01),九三地区舍饲组肉牛GLU含量显著高于放牧组(P<0.05)。说明舍饲组和放牧组肉牛肝功指标存在差异,且舍饲组肉牛肝功能状态要优于放牧组。

烹饪方式对牛肝样品中VB_(12)摄食率的影响研究

目的:考察不同烹饪方式对牛肝样品中VB12摄食率的影响及其烹饪前后含量的变化规律。方法:采用高效液相色谱法结合酶解、衍生等前处理技术达到对牛肝样品中VB12的测定,同时采用模拟实验的方式模拟煎炒、油炸、水煮等现实烹饪食物加工方式,实现对不同烹饪方式对食物中VB12的影响的分析研究。结果:随着烹饪温度的升高和时间的加长,VB12的损失越大。采用水煮方式加工,食物中的VB12随着烹饪时间的增长而逐渐转移至汤中,建议肝与肉汤一起食用可达到对VB12的最大摄食获取。结论:不同烹饪方式对牛肝样品中VB12的摄食率影响不同,损失率的大小与烹饪温度与烹饪持续的时间有较多联系,建议在烹饪熟的前提下,尽量缩短烹饪时间。

牛肝营养成分及活性物质研究进展

牛肝基础营养成分丰富,含有多种生物活性物质,其开发利用前景十分广阔.综述国内外对牛肝营养成分及活性物质的最新研究成果,为牛肝的综合利用及生物活性成分研究提供参考.

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定牛肉和牛肝中5种β_2-受体激动剂

建立了牛肉和牛肝中克仑特罗(clenbuterol)、莱克多巴胺(ractompamine)、沙丁胺醇(salbutamol)、西马特罗(cimaterol)和特布他林(terbutaline)的超高效液相色谱-串联质谱同时快速检测方法.样品经酶解,固相萃取技术(SPE)净化,多反应监测模式(MRM)下进行定性和定量分析.标准工作溶液在0.2～10μg/kg浓度范围内,5种受体激动剂线性关系良好,相关系数R2均大于0.99.方法的检出限为0.2μg/kg,定量限为0.5μg/kg.在0.5、1、2μg/kg的添加浓度下,回收率在78.2%～114.2%之间,相对标准偏差在2.0～16.0%之间.方法具有快速、经济、准确等特点,适合于牛肉和牛肝中β2-受体激动剂的快速定量、定性检测.

含有不同诱食剂的猫粮的挥发成分对猫适口性的影响

研究对比添加不同诱食剂的成品宠物猫粮的挥发组分对临清狮猫的适口性影响。以鸡肝、牛肝及两者混合后加入焦磷酸盐制作3种诱食剂产品,均匀喷涂在基础猫粮中,进行氨基酸组成和挥发性风味物质分析。结果表明:含有不同诱食剂的猫粮中的谷氨酸和胱氨酸的含量与采食率呈现显著线性相关(P<0.05)。诱食剂处理的猫粮中的挥发性风味物质种类和相对峰面积比例高于对照组。含有不同诱食剂的猫粮中的酸类、酮类及烷烃类物质的相对峰面积比例与适口性具有显著的回归关系(P<0.05)。以牛肝为原料制作的诱食剂具有良好的适口性,并具有良好的挥发性风味物质和呈味氨基酸沉积。

日粮中Zn和Se强化对秦宝雪花牛肝中矿物质及挥发性化合物的影响

为了研究日粮中Zn、Se营养强化对秦宝雪花牛(秦川牛×日本和牛)肝矿物质及挥发性化合物的影响,选取16头秦宝雪花公牛为实验对象,分别以基础日粮、添加Zn、Se营养强化剂的强化日粮进行饲养。在18月龄屠宰后测定其肝脏中的矿物质元素Ca、Fe、Zn、Se、Mg以及挥发性化合物。结果发现Zn、Se强化使秦宝雪花牛肝矿物质元素中的Zn含量提高了73%,并使Se含量提高了18.6倍。苯并噻唑的含量在Zn、Se强化后被提高了15%。此外,Zn、Se强化还会影响到壬醛、反-2-壬烯醛、2-戊基呋喃等物质的含量。结果表明,日粮中Zn、Se强化会提高秦宝雪花牛肝中Zn、Se等矿物质含量,同时会对部分含硫化合物和醛类物质产生明显影响。

NaCl浸泡处理对牛肝风味的影响

为明确脱腥前后牛肝挥发性有机物的变化,采用气相离子迁移谱技术结合主成分分析法对NaCl浸泡处理后的牛肝挥发性成分进行探究。结果表明,1.0%(质量分数,下同)NaCl浸泡60 min时,牛肝腥味值显著降低(P<0.05);采用气相-离子迁移谱技术研究发现,牛肝中共检出醛类物质27种,酮类物质16种、醇类物质14种、酯类8种、烃类1种、苯环1种、呋喃类1种,酸类物质1种,且醛类、酮类、酯类为牛肝的主要风味物质;相对于其他处理组,牛肝在1.0%NaCl浸泡60 min处理后,己醛二聚体、己醛和2-甲基丁醛等5种醛类的相对含量均显著增加(P<0.05),对牛肝不良风味改善可能有重要影响;而E-2-戊烯醛二聚体、E-3-戊烯-2-酮、乙酸乙酯、乙酸乙酯二聚体以及甲硫醇可能是引起牛肝腥味的主要物质,经1.0%NaCl浸泡60 min处理后,以上物质的相对含量均显著下降(P<0.05)。结合显著性分析和各主成分的贡献率发现,不同处理方式下对牛肝风味影响较大的为己醛和己醛二聚体。综上,1.0%NaCl浸泡60 min后牛肝腥味值显著降低(P<0.05),部分醛类物质的相对含量显著增加(P<0.05),而部分其他物质的相对含量均显著降低(P<0.05),可能是由于NaCl对牛肝腥味成分的脱除与掩盖作用综合引起,以改善牛肝不良风味。该研究可为牛肝脱腥以及开发利用提供参考。

基于混料回归设计优化牛肝肠的工艺配方

应用混料回归设计优化以牛肝为主要原料制备牛肝肠的复合香辛料配方。考察了复合香辛料中三种原料不同质量分数：料酒（30%～100%）,生姜粉（0%～70%）,I＋G（0%～70%）中不同组合对牛肝肠感官品质的影响,建立原料配方与感官品质之间的回归模型,利用感官评价方法筛选最佳的复合香辛料配方。根据混料设计得到的优选牛肝肠配方进行产品质构优化实验。结果表明：复合香辛料总质量分数为5%（以肝重计）时,其中料酒质量分数69.1%、生姜粉质量分数18.3%、呈味核苷酸二钠（I＋G）质量分数12.6%,卡拉胶添加量0.6%,大豆分离蛋白添加量4.5%,淀粉添加量6%,在此配方下所得牛肝肠产品口感细腻,整体风味良好。

牛肝排脱腥及腌制工艺优化

为有效脱除牛肝中腥味物质,改善其加工制品风味,本试验以腥味值为评价指标,对比食盐脱腥法、酵母脱腥法与食盐-酵母复合脱腥法脱腥效果,确定最佳脱腥方法、脱腥工艺、脱腥时间;同时,以食盐、白砂糖、味精、生姜粉和花椒粉为腌制料,在单因素试验基础上采用正交试验对牛肝排产品腌制料配比进行优化。结果表明,1.0%食盐浸泡60 min,牛肝腥味脱除效果最佳;牛肝排腌制料配比为食盐0.6%、白砂糖0.5%、味精0.3%、生姜粉0.1%及花椒粉0.05%时,煎烤的牛肝排产品感官评分最高。采用最佳脱腥及腌制工艺处理煎烤所得的牛肝排整体风味和谐、丰富,有牛肝特征香味,无腥味,总体接受度高,为牛肝排的实际生产应用提供了技术和理论支持。

金银腊牛肝的研制

为综合利用牛副产物,丰富牛肝产品的种类,采用均匀试验设计对金银腊牛肝生产过程中原料去腥、腌制及干制工艺参数进行优化筛选,为其产品开发提供科学依据。结果表明,金银腊牛肝最佳去腥工艺参数为陈皮添加量1.5%(质量分数),时间3 h,牛肝与去腥剂质量比为1∶2;腌制工艺参数为食盐3.0%(质量分数),红曲红0.030%(质量分数),腌制时间40 h、脂肪6%(质量分数)、异抗坏血酸钠0.04%(质量分数);干制工艺参数为时间11 d,温度40℃,湿度70%。经验证,此工艺条件下的金银腊牛肝成品口感良好,风味独特。

微生态制剂对肉牛生长性能、养分消化率、抗氧化性能和肝功能的影响

试验旨在研究微生态制剂对肉牛生长性能、养分消化率、抗氧化和肝功能的影响。选择体重相近[(340±20)kg]的西门塔尔杂交肉牛20头,按体重随机分为4个处理组,每个处理5个重复,分别在基础饲粮中添加0(对照组)、3 g/(头·d)植物乳杆菌制剂(试验Ⅰ组)、3 g/(头·d)酶制剂(试验Ⅱ组)、植物乳杆菌和酶制剂各3 g/(头·d)(试验Ⅲ组)。预试期14 d,正试期30 d。结果表明:与对照组比较,试验组的平均日采食量和平均日增重均显著提高(P<0.05),料重比均显著降低(P<0.05);干物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率显著提高(P<0.05),试验Ⅱ组、Ⅲ组的CP表观消化率分别显著增加了4.16%和4.46%(P<0.05);试验组丙二醛含量显著降低(P<0.05),过氧化氢酶和总抗氧化能力显著提高(P<0.05),试验组与对照组之间超氧化物歧化酶差异均不显著(P>0.05);试验组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、碱性磷酸酶和乳酸脱氢酶含量差异均不显著(P>0.05)。综上可知,微生态制剂(植物乳杆菌及酶制剂)在肉牛生产中具有积极的促进作用,其中以植物乳杆菌与酶制剂组合利用效果最好。

牛肉对小白鼠体质量及运动能力的影响

目的:探讨牛肉对小白鼠运动能力的影响。方法:雄性小白鼠50只,随机分为2组,对照组20只、牛肉组30只,单笼饲养。限制采食量,初始量为6.0g/(d·只),喂养4周。测小白鼠力竭运动时间、抓力、体质量,取肝组织和后腿肌肉测定肝糖原、肌糖原含量。结果:牛肉组与对照组相比。有降低体质量,增加速度,提高游泳力竭时间和抓力的趋势,但无显著差异。采食牛肉后,不论对小白鼠是否施加负荷,都能提高肝糖原、肌糖原、血清SOD水平(P<0.05),能显著降低MDA水平(P<0.05)。结论:在日粮蛋白质和能量摄取量相同条件下,牛肉日粮具有控制小白鼠体质量和提高小白鼠的抓力和游泳力竭时间的趋势。不论是否附加负荷,都能提高肝脏和肌肉组织的糖原水平,并且显著提高机体的抗氧化能力。

长途运输影响安格斯育肥牛肝脏功能关键基因的筛选

【目的】研究长途运输对育肥牛体重、屠宰率及肝脏mRNA表达谱的影响,筛选长途运输影响肝脏功能的关键基因。【方法】选用体重相近的安格斯育肥公牛22头,随机分为2组,对照组9头就地屠宰,试验组13头经长途运输后屠宰,观察长途运输对体重和屠宰率的影响;此外,两组分别采集3头体重相近牛的肝脏组织,进行转录组测序(RNA-Seq),筛选差异表达基因,并对其进行GO功能和KEGG通路富集分析。【结果】长途运输后牛活体重降低4.5%,屠宰率较对照组无显著差异(P>0.05);RNA-Seq结果发现,长途运输组肝脏组织有182个基因显著上调表达,91个基因显著下调表达。GO功能与KEGG通路富集分析显示,182个上调表达基因显著富集在刺激反应的调节、过氧化物酶体和氧化还原酶活性,以及cAMP、MAPK和长寿调控通路等,与能量代谢及肝细胞损伤密切相关。根据GO功能与KEGG通路富集分析结果,筛选出4个与育肥牛长途运输后肝脏能量代谢变化、肝脏细胞损伤及损伤后适应性保护机制密切相关的基因:ACOX 3、FOS、HSPA 1 A、HSPA 6。【结论】安格斯育肥牛经长途运输后,活体重较运输前降低4.5%,筛选得到4个长途运输影响安格斯育肥牛肝脏功能的关键基因:ACOX 3、FOS、HSPA 1 A与HSPA 6。研究结果为今后肉牛运输应激发生机理、预防和治疗研究提供参考。

提高厌气肉肝胃酶消化汤澄清度的试验

为了提高厌气肉肝胃酶消化汤澄清度,在生产中进行了一些试验,对此进行分析、总结。

奶牛与肉牛不同生长发育阶段肝脏转录组比较分析

为探究奶牛与肉牛肝脏组织在不同生长发育阶段中的差异,利用RNA-seq技术和生物信息学的研究方法,分别对海福特肉牛与荷斯坦奶牛6、9和12月龄3个不同生长发育阶段的肝脏组织进行基因差异表达及表达趋势分析。结果表明:1)海福特肉牛与荷斯坦奶牛之间在6、9和12月龄分别获得的差异表达基因为699、486和769个;2)对海福特肉牛与荷斯坦奶牛之间的差异表达基因进行功能注释,发现细胞色素P450信号通路和PPAR信号通路中差异表达基因的表达量在肉牛与奶牛之间存在差异,并且在不同生长阶段表达也不同。其中与脂肪细胞增殖和脂质代谢有关的功能基因:ACOX1、APOA1和ACADM,与天然免疫相关的通路中BoLA-DQB、BLA-DQB和BoLA-DQA这3个基因在海福特肉牛中的表达均高于荷斯坦奶牛;3)STEM分析结果显示荷斯坦奶牛与海福特肉牛肝脏组织在生长发育阶段中具有相同表达趋势中,奶牛与肉牛的时序性表达基因与代谢途径相关信号通路上存在差异。综上,本研究表明与脂质代谢和脂肪生成等代谢过程有关的途径可能在协同调控奶牛与肉牛生长发育阶段中发挥的作用及表达模式存在差异,这为深入研究奶牛与肉牛在生长发育阶段中的比较提供了一定的基础数据。

肉牛肝脏miR-31对运输应激的响应及生物学功能预测

旨在探究运输应激肉牛肝脏中miR-31的表达变化,并对其进行生物学功能预测,从多个方面探讨运输应激与miR-31间的关系。试验将10头体况相似的健康肉牛分为运输0 h组和运输6 h组,以速度为80 km/h进行公路运输应激。运用qRT-PCR方法检测肉牛肝脏组织中miR-31的表达,采用生物信息学分析方法对miR-31进行生物学功能预测。结果表明,与运输0 h组相比,运输6 h组肝脏中miR-31表达量极显著升高(P<0.01)。应用Targetscan、miRWalk、miRDB和miRTarBase 4款软件对miR-31靶基因进行预测,分别预测到427,1 261,122,307个靶基因。通过GO富集分析发现miR-31主要参与细胞过程,生物调节,代谢过程,多细胞生物过程,对刺激的反应等生物过程。其中,RAB27A,PPP2R2A,ARID1A可能是与应激联系密切的靶基因。结果提示,运输应激肉牛肝脏miR-31的上调能够对细胞生长发育、增殖和凋亡等方面产生重要影响。