高效液相色谱法测定抗病毒颗粒中射干苷、绿原酸和苦参碱

目的采用反相高效液相色谱法,建立抗病毒颗粒(鱼腥草、川射干、山豆根、忍冬藤、板蓝根、贯众、白芷、重楼和青蒿)中射干苷、绿原酸和苦参碱的定量测定方法。方法 Diamonsil C18(200 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.4%磷酸溶液(20∶80)(射干苷)、甲醇-0.4%磷酸溶液(35∶65)(绿原酸)和乙腈-0.1%磷酸溶液(用三乙胺调节pH值至8.0)(20∶80)(苦参碱)为流动相,检测波长265 nm(射干苷)、327 nm(绿原酸)和210 nm(苦参碱),柱温30℃,体积流量0.8mL/min。结果射干苷、绿原酸和苦参碱分别在0.04～2.01μg(r=0.999 9)、0.08～4.05μg(r=0.999 9)和0.20～5.01μg(r=0.999 8)范围内呈良好线性关系;平均回收率分别为100.6%(RSD为1.64%)、99.9%(RSD为1.86%)和99.0%(RSD为1.81%)。结论本法简便可行,结果准确,无干扰,可用于抗病毒颗粒的质量控制。

止咳祛痰口服液质量标准的建立

目的:建立止咳祛痰口服液的质量标准。方法:采用TLC法对桔梗、甘草进行定性鉴别;采用HPLC法对射干的有效成分射干苷进行定量测定,色谱柱为Waters Symmetry C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为乙腈-水(14∶86),流速1.0 ml·min^(-1),柱温35℃,检测波长为265 nm。结果:薄层色谱斑点清晰,阴性无干扰。射干苷在0.115~2.880μg范围内线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为92.44%,RSD为1.83%(n=6)。结论:所建立的方法简便、快速、重复性好,可用于止咳祛痰口服液的质量控制。

正交试验法优化射干扶正口服液的提取工艺

目的:优选射干扶正口服液提取工艺的最佳条件。方法:以方中君药射干的主要有效成分射干苷为指标,用正交实验法对射干口服液进行制备工艺的筛选。结果:射干口服液的最佳提取工艺为A1B2C2D2,即每次加水8倍,煎煮2次,第1次2小时,第2次1.5小时,醇沉浓度为50%。结论:优选出的射干口服液的提取工艺科学、合理。

高效液相色谱法测定复方黑参颗粒中射干苷的含量

目的：建立HPLC法测定复方黑参颗粒中射干苷的含量。方法：色谱柱：DiamonsiffMC18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相：乙腈-0．05％磷酸，梯度洗脱；流速：1．0mL／min，检测波长：266nm；柱温：30℃。结果：射干苷在21．12—105．6μg／mL范围内线性关系良好（r=0．9998）。平均加样回收率为98．3％，RSD为1．7％（n=9）。结论：该方法简便快速，适用于复方黑参颗粒中射干苷的含量测定。

HPLC法测定射干扶正口服液中射干苷的含量

目的:建立射干扶正口服液中射干苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),色谱柱为Agilent Eclipse Plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(28:72)为流动相,流速为1.0 m L/min,检测波长265 nm,柱温30℃进行检测。结果:射干苷的线性范围为:18.40~184.00μg/m L,线性方程为:Y=44.21X-0.6,r=0.999 8,r=0.999 8;平均加样回收率为99.75%(RSD%=1.11%)。结论:该法稳定、快速、简便,结果准确、可靠,可用于射干扶正口服液中射干苷的含量测定。

正交试验法优选川射干的提取工艺

目的:探讨川射干水提的最佳提取工艺。方法:以射干苷为检测指标,高效液相色谱法测定射干苷,采用正交试验考察各因素对射干苷含量的影响。结果:影响因素主要为浸泡时间,其次是加水量,再次是提取次数。川射干水提最佳提取工艺为药材加水量为10倍,浸泡时间为8小时,提取次数(每次2h)为3次。结论:水提取技术具有省时、高效、节能等优点,适用于川射干中射干苷的提取。

HPLC法测定川射干配方颗粒中射干苷的含量

目的建川射干配方颗粒中射干苷的含量测定方法。方法采用HPLC法，C18色谱柱，以乙腈-水（20：80）为流动相，检测波长为265nm。结果射干苷溶液在7．52～67．68μg·ml。范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9999），平均回收率为100．16％，RSD为1．39％。结论该方法简便易行，重复性好，结果可靠，适合于川射干配方颗粒的质量控制。

射干甙抑制嗜酸性粒细胞脱颗粒实验研究

目的:研究射干甙是否具有抑制嗜酸性粒细胞(EOS)脱颗粒作用。方法:哮喘病人外周血采用Percoll液密度梯度分离,收集EOS培养后检测射干甙作用前后主碱蛋白(MBP)及EOS阳离子蛋白(ECP)含量的变化。结果:射干甙作用后MBP和ECP含量降低。结论:射干甙具抑制嗜酸性粒细胞脱颗粒作用。

RP-HPLC法测定射干和鸢尾中射干甙、鸢尾甙的含量

用RP－HPLC法测定射手和鸢尾中射干甙、鸢尾甙的含量．色谱柱以十八烷基键合硅胶为填料，流动相为甲醇－0．2％磷酸溶液（23：77），检测波长265nm。射干甙、鸢尾甙的平均回收率分别为99．40％、100．23％，RSD分别为2．6％、2．2％。结果射干中含射干甙0．24％、鸢尾甙0．35％，鸢尾中含射干甙2．66％、鸢尾甙0．07％。该方法操作简单，结果准确可靠。

射干苷抑制破骨细胞分化的作用与机制

背景:核因子κB受体激活因子配体介导的Calcium/NFATc1通路激活在破骨细胞分化中发挥重要作用。射干苷可通过激活雌激素受体达到雌激素样作用,但目前尚缺乏其对破骨细胞分化及功能影响的相关报道。目的:探讨射干苷对破骨细胞的作用及其机制。方法:体外培养小鼠骨髓巨噬细胞分化成熟后种入96孔板中(每孔为6×103个),分别加入5,10,20,30,40μmol/L的射干苷,观察对破骨细胞分化抑制作用,筛选出作用最强的射干苷浓度。分别以不同浓度的射干苷干预核因子κB受体激活因子配体诱导的破骨细胞体外分化过程,进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色,观察射干苷对破骨细胞形成和功能的影响。通过钙离子振荡实验、Western Blot及RT-qPCR等实验,观察Calcium/NFATc1信号通路中上下游基因和蛋白的表达情况。实验方案经广州中医药大学第一临床医学院动物实验伦理委员会批准。结果与结论:(1)射干苷可抑制破骨细胞形成,且抑制作用呈剂量依赖性,40μmol/L的射干苷对破骨细胞分化抑制作用最强;(2)射干苷可抑制与破骨细胞形成相关的Acp5(TRAcP)基因以及c-Fos、Integrinβ3蛋白的表达,同时抑制与骨吸收功能相关的Ctsk、基质金属蛋白酶9基因以及转录蛋白的表达;(3)射干苷可抑制钙离子信号通道的开放频率及强度、抑制Ctr(Calcitonin Receptor)、Nfatc1基因及转录蛋白的表达;(4)结果说明:射干苷可通过核因子κB受体激活因子配体诱导的钙离子信号通道抑制Nfatc1基因及转录蛋白的表达,从而抑制破骨细胞的形成及骨吸收功能。

高效液相色谱法测定射干利咽口服液中射干苷、次野鸢尾黄素的含量

目的建立高效液相色谱同时测定射干利咽口服液中射干苷、次野鸢尾黄素含量的方法。方法采用Dia-monsil C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈（A）-0.1%磷酸（B）（pH=2.25）,进行梯度洗脱,0 min：20%（A）;20 min：60%（A）;40 min：20%（A）;流速：1.0 mL·min^-1;进样量：20μL;紫外检测波长：265 nm;柱温：室温。结果射干苷和次野鸢尾黄素保留时间分别为20.5和35.5 min,与各自相邻峰的分离度均〉1.5。以峰面积对进样浓度（ng·mL^-1）线性回归,射干苷回归方程：Y=7 485.5X＋82.95,r=0.999 7,线性范围：150-3 000 ng·mL^-1;次野鸢尾黄素回归方程：Y=2 031X-78.14,r=0.999 9,线性范围：50-1 000 ng·mL^-1。射干苷和次野鸢尾黄素的回收率分别为97.2%和98.7%、RSD分别为2.1%和2.8%。结论本方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于射干利咽口服液中射干苷、次野鸢尾黄素的含量测定。

HPLC法测定黔北引种射干中射干苷的的含量研究

目的：为了控制黔北引种射干中射干苷的含量,建立高效液相色谱测定方法。方法：色谱柱Hyperil C18（250 mm×5.0 mm,5μm）,以乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾（用磷酸调pH=3.0）（19：81）为流动相,流速1.0 ml.min-1,检测波长265 nm。结果：射干苷在0.20~1.40μg范围内,可得良好的线性关系,r=0.9992,平均加样回收率为97.63%,RSD%=0.46%。结论：本法简便,快速,准确,适用于GAP药材基地对黔北引种射干药材的质量监控。

HPLC法同时测定七味清咽气雾剂中苦参碱、射干苷和次野鸢尾黄素的含量

目的 建立HPLC法测定七味清咽气雾剂中苦参碱、射干苷和次野鸢尾黄素的含量。方法 色谱柱为Agilent Zorbas Stablebond C18柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相组成为乙腈（A）-甲醇（B）-0.1%磷酸水溶液（C）,梯度洗脱,检测波长为251nm,柱温为30℃,流速为1m L·min-1。结果 苦参碱、射干苷和次野鸢尾黄素分别在0.25~125μg·m L-1,0.10~101μg·m L-1,0.12~234μg·m L-1范围呈良好的线性关系,与峰面积积分值的线性关系良好,平均回收率为98.5%~100.6%之间。结论 本方法 可用于测定七味清咽气雾剂中苦参碱、射干苷和次野鸢尾黄素的含量,结果 准确,重复性好。

HPLC法同时测定通脉颗粒中7种成分的含量

目的:建立同时测定通脉颗粒中丹参素、原儿茶酸、葛根素、大豆苷、阿魏酸、射干苷、丹酚酸B含量的方法。方法:采用高效液相色谱法测定。采用Agilent Zorbax SB-Aq色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,流速1.2ml/min,柱温25℃。检测波长:丹参素、葛根素、大豆苷、丹酚酸B为287nm;原儿茶酸、射干苷为260nm;阿魏酸为322nm。结果:丹参素、原儿茶酸、葛根素、大豆苷、阿魏酸、射干苷、丹酚酸B的质量浓度分别在3.539~177.0μg/ml、0.3392~16.96μg/ml、2.755~137.8μg/ml、3.723~186.2μg/ml、1.699~84.96μg/ml、0.9440~47.20μg/ml、3.282~164.1μg/ml内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系,平均回收率在92.4%~98.9%。结论:本方法简便、快速、可靠,可用于通脉颗粒的质量控制。

射干苷标准品质量标准研究

目的:建立射干苷标准品的质量标准。方法:采用定性、定量分析方法,依照2005年版《中国药典》(二部)附录有关规定,对射干苷各项指标进行检测。结果:3批射干苷标准品的比旋度为—28°～—30°([α]2D5,c0.11,吡啶),百分吸收系数(E11%cm)为790～830,熔点为252～254℃,灰分<0.5%,高效液相色谱法测定射干苷含量>99.5%。结论:各项指标均符合标准物质的相关规定,所建标准可用于射干苷标准品的质量控制。

麻杏二陈汤煮散质量标准

目的：建立麻杏二陈汤煮散质量标准。方法：采用薄层色谱法（TLC）对煮散处方中的炙麻黄、苦杏仁、射干、陈皮进行定性鉴别,采用高效液相色谱法（HPLC）对煮散中的射干苷和橙皮苷含量进行同时测定。结果：TLC法能定性检出炙麻黄、苦杏仁、射干、陈皮,斑点清晰,且阴性对照无干扰。HPLC法测定射干苷在12.0~120.0 mg·L^-1呈良好的线性关系（r=0.999 8）,平均回收率100.00%（RSD 1.9%）;橙皮苷在6.6~66.0 mg·L^-1呈良好的线性关系（r=0.999 9）,平均回收率98.16%（RSD 1.8%）。结论：该研究所建立的定性、定量检测方法操作简便,结果准确可靠,重复性好,能有效地控制麻杏二陈汤煮散的质量。

射干药材HPLC指纹图谱研究

目的:建立射干药材的HPLC指纹图谱。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法建立指纹图谱,色谱柱为Lichrospher C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为1%醋酸乙腈-1%醋酸水溶液,流速为1mL.min-1,柱温为30℃;以峰面积为量化特征值进行聚类分析,用逐步分类法建立射干指纹图谱的典则判别函数和Fisher's判别函数。结果:构建了射干药材的指纹图谱;两类函数对样品判别分类结果与原分类完全相同,判别相符率为100%。结论:两类判别函数的建立,对未知样品的鉴别提供了一个准确、快捷的工具,为中药的质量控制提供了一种新的模式,具有理论意义和实用价值。

波长切换高效液相色谱法同时测定青翘抗毒颗粒中7个成分的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定青翘抗毒颗粒中绿原酸、马钱苷、连翘苷、葛根素、（R,S）-告依春、射干苷、咖啡酸的含量。方法：采用岛津InertSustain C18柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇-0.3%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱;流速为1.0mL·min-1;进样量为5μL;检测波长为240 nm（0-25 min,检测（R,S）-告依春）、327 nm（25-39 min,检测绿原酸和咖啡酸）、240 nm（39-45 min,检测葛根素和马钱苷）、265 nm（45-53 nm,检测射干苷）、228 nm（53-65 min,检测连翘苷）;柱温为30℃。结果：绿原酸、马钱苷、连翘苷、葛根素、射干苷、咖啡酸、（R,S）-告依春7个成分的进样质量浓度分别在4.56-228μg·mL-1（R2=0.999 9）、4.04-202μg·mL-1（R2=0.999 8）、8.10-405μg·mL-1（R2=0.999 9）、8.06-161μg·mL-1（R2=0.999 9）、2.10-105μg·mL-1（R2=0.999 9）、3.46-173μg·mL-1（R2=0.999 9）、4.58-229μg·mL-1（R2=0.999 9）与峰面积呈良好的线性关系;各组分分离度良好;加样回收率（n=6）分别为99.35%（RSD为2.6%）、100.76%（RSD为1.5%）、100.34%（RSD为0.9%）、100.63%（RSD为1.5%）、100.31%（RSD为1.7%）、100.70%（RSD为1.6%）、99.03%（RSD为1.7%）。结论：本研究建立的含量测定方法符合方法学验证要求,可用于青翘抗毒颗粒7个指标性成分的同时测定。

HPLC法测定射干配方颗粒中射干苷的含量

目的:测定射干配方颗粒中射干苷的含量。方法:采用高效液相色谱方法,使用Diamonsil C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水(78∶22),流速1.0mL·min-1,检测波长265nm,柱温35℃。结果:射干苷进样量在0.06～0.48μg范围内与峰面积线性关系良好,r=0.9999。高、中、低3个剂量组平均回收率(n=3)分别为99.05%,100.1%,100.0%;RSD分别为0.51%,1.4%,0.55%。结论:本文建立的高效液相色谱方法操作简便,准确度高,可用于射干配方颗粒中射干苷的含量测定。