在中国北方汉族人群中血管紧张素转换酶基因I/D多态与G蛋白beta3亚基基因C825T多态对原发性高血压的联合作用(英文)

原发性高血压是一种复杂的多基因疾病,被认为是多个变异了的基因遗传交互以及环境因素共同作用的结果.证据表明,血管紧张素转换酶基因和G蛋白beta3亚基基因各自都是重要的原发性高血压的易感基因,并且可能存在共同的通路来导致高血压疾病的发展.为了探索这两个基因在中国北方汉族人群中是否对高血压有影响,挑选血管紧张素转换酶基因I/D多态与G蛋白beta3亚基基因C825T多态,在一个包含502个高血压病例和490个健康对照的样本中做了关联研究.连锁不平衡分析揭示,仅仅在男性中有显著性的非随机性分布,表明血管紧张素转换酶基因与G蛋白beta3亚基基因倾向在男性中造成高血压.调整了的单位点的多变量逐步回归分析展示,在男性显性模型中DD/ID对Ⅱ的比值比达到显著性水平(OR1.57;95%CI,1.09～2.27;P=0.016).在对性别进行分层后的联合分析中,在男性中经过调整后的比值比具有弱显著性水平:在血管紧张素转换酶基因的DD基因型中,TT对CC的比值比是0.11;95%CI,0.01～0.99;P=0.049;在G蛋白beta3亚基基因的CC+CT基因型中,DD/ID对Ⅱ的比值比是1.52;95%CI,1.01～2.29;P=0.047.结果暗示,血管紧张素转换酶基因或附近的某个基因是具有男性性别倾向的高血压易感侯选基因,同时,在血管紧张素转换酶基因基因的D等位基因和G蛋白beta3亚基基因的825C等位基因之间,可能存在具有上位效应的基因-基因相互作用.

人整合素β3亚基真核表达载体的构建及αIIbβ3在细胞表面的表达

目的 :构建人整合素 β3亚基真核表达载体 ,并探讨如何使人整合素αIIbβ3在CHO细胞表面有效表达 ,为进一步研究整合素β3亚基作为汉坦病毒 (hantavirus,HV)受体的特异性奠定基础。方法 :构建编码人整合素 β3真核表达载体 pcDNA3.1 β3。将其与编码人整合素αIIb亚基真核表达载体 ,分别及共转染至中国仓鼠卵巢 (Chinahamsterovary ,CHO)细胞中进行表达。采用间接免疫荧光法 (IFA)检测外源基因的表达。结果 :共转染组目的蛋白呈高效的细胞膜表达。pcDNA3.1 β3单独转染组 β3亚基在细胞膜的表达较共转染组弱 ;而pBJ1 αIIb单独转染组则未见有效的细胞膜表达。结论 :人整合素αIIbβ3在CHO细胞表面的有效表达需要两个亚基共同参与。

整合素β3亚基真核表达载体的构建及αvβ3的表达

目的 :构建人整合素 β3亚基真核表达载体 ,并探讨如何使人整合素αvβ3在CHO细胞表面有效表达 .方法 :构建编码人整合素β3真核表达载体 pcDNA3.1 β3;将其与编码人整合素αv亚基真核表达载体分别及共转染至中国仓鼠卵巢 (Chinahamsterovary,CHO)细胞中进行表达 ;采用间接免疫荧光法 (IFA)检测外源基因的表达 .结果 :共转染组目的蛋白呈高效的细胞膜表达 ;pcDNA3.1 β3单独转染组 β3亚基细胞膜表达较共转染组弱 ;而 pcDNA3 αv单独转染组则未见有效的细胞膜表达 .结论 :人整合素αvβ3在CHO细胞表面的有效表达需要

G蛋白β3亚单位基因825C/T多态性与中国人群原发性高血压相关性的Meta分析

目的系统评价G蛋白β3亚单位（GNB3）基因825C/T多态性与中国人群原发性高血压（EH）发病风险的关系。方法由两名评价者独立检索PubMed、EMbase、CNKI、CBM和WanFang数据库,收集探讨GNB3基因825C/T多态性与中国人EH相关性的病例-对照研究,检索时限均为建库至2013年9月30日。文献筛选及资料提取后,对纳入文献按NOS进行质量评价,然后采用Stata12.0软件行Meta分析。结果最终纳入30个病例-对照研究,包括EH患者5054例,对照人群5565例。Meta分析结果显示,与对照组相比,GNB3基因825C/T多态性与中国人EH发病风险间无统计学差异[TT vs.CC：（OR=1.13,95%CI：0.89～1.43,P=0.33）;TT vs.CT＋CC：（OR=1.04,95%CI：0.86～1.26,P=0.70）;CT vs.CC：（OR=1.08,95%CI：0.98～1.19,P=0.11）;TT＋CT vs.CC：（OR=1.11,95%CI：0.96～1.29,P=0.15）;T vs.C：（OR=1.06,95%CI：0.95～1.20,P=0.30）]。结论当前证据表明中国人群GNB3基因825C/T多态性与EH发病无关。

人整合素αvβ3在CHO细胞表达的研究

目的 使人整合素αvβ3在CHO细胞表面有效表达 ,为从分子水平了解汉坦病毒 (han tavirus ,HV)的感染及致病机制。方法 构建含人整合素 β3ORF区基因的真核表达载体pcDNA3.1 β3;将其与含人整合素αv全长cDNA的质粒pcDNA3 αv分别及共转染至CHO细胞中进行表达 ;采用间接免疫荧光法、流式细胞仪、免疫沉淀及免疫印迹实验对外源基因的表达进行定性、定位及定量检测 ,并确证表达产物的免疫反应性。结果 人整合素αv、β3基因在共转染组细胞中有高效表达 ,目的蛋白主要定位于细胞膜上 ;β3基因在pcDNA3.1 β3单独转染组细胞中的表达明显弱于共转染组 ;而pcDNA3 αv单独转染组则未见有效的表达。结论 人整合素αvβ3在CHO细胞表面的有效表达需要 2个亚基共同参与。

γ-氨基丁酸A型受体β3亚基在2,3,7,8-四氯二苯并二英诱导胎鼠腭裂模型中表达的研究

目的利用2,3,7,8-四氯二苯并二英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)诱导C57BL/6J胎鼠腭裂,检测γ-氨基丁酸A型受体β3亚基(gamma-aminobutyric acidt ype Areceptor beta 3 subunit,GABRB3)在TCDD诱导胎鼠腭裂模型中的表达变化情况,探讨腭裂的发生机制。方法将60只孕鼠按随机数字表法分为实验组和对照组,每组30只。妊娠第10.5天(gestation day 10.5,GD10.5)实验组以28μg/kg的TCDD单次灌胃,对照组以5.6ml/kg玉米油单次灌胃。分别在GD13.5、GD14.5、GD15.5、GD16.5、GD17.5处死孕鼠12只,每组处死6只。行胎鼠腭部形态学和组织学观察;应用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测胎鼠腭部组织中GABRB3mRNA及蛋白表达;免疫组织化学及免疫荧光染色检测GABRB3蛋白的表达部位。结果实验组共36只胎鼠,GD17.5腭裂的发生率为100%(36/36);对照组共47只胎鼠,无腭裂发生(0/47)。实验组胎鼠腭突上抬在GD15.5完成,较对照组腭突上抬延迟1d;GD14.5、GD15.5、GD16.5、GD17.5实验组中GABRB3基因mRNA(分别为0.561±0.073、0.728±0.104、0.782±0.137、0.686±0.145)和蛋白表达(分别为0.288±0.013、0.404±0.017、0.399±0.012、0.307±0.010)均显著低于对照组GABRB3基因mRNA(分别为0.818±0.088、0.865±0.086、1.021±0.054、1.163±0.179)和蛋白表达(分别为0.481±0.017、0.456±0.009、0.474±0.016、0.529±0.015)(P<0.05);免疫组化及免疫荧光结果显示,GABRB3主要表达于腭突间质细胞和腭突中嵴上皮缝。结论TCDD诱导胎鼠腭突上抬延迟并最终导致腭裂发生可能与GABRB3降低有关;GABRB3可能在腭部发育的上抬和融合期发挥重要作用。