双链蛋白聚糖Biglycan在骨退行性疾病中的作用机制研究进展

Biglycan是最近发现的一种富含亮氨酸的双链蛋白聚糖,广泛存在于各类结缔组织当中,在许多器官和系统中具有关键作用,通过参与细胞的生长、凋亡的全过程,进而导致多种疾病的发生和发展。近年来,随着研究不断的深入,Biglycan被证实可通过调控细胞外基质的表达、抑制成骨细胞的分化和促进破骨细胞前体细胞的活化等方面导致骨退行性疾病的发生发展。本文通过对Biglycan在骨退行性疾病(骨质疏松症、骨关节炎、椎间盘退行性病变)中扮演的角色进行阐述,旨在为临床诊疗活动提供新的思路。

β-catenin、Biglycan蛋白在结肠癌中的表达及临床意义

目的观察β-链蛋白(β-catenin)、双糖链蛋白聚糖(Biglycan)蛋白在结肠癌中的表达特点及临床意义,探讨两项指标与结肠癌临床表现、病理特征的关系及β-catenin阳性表达率与微卫星状态的关系。方法选取2019年1月至2020年6月孝感市中心医院收治的80例结肠癌患者作为研究对象,收集其根治术后结肠癌标本及其癌旁正常肠组织,采用免疫组织化学染色方法检测β-catenin、Biglycan蛋白,以癌旁正常肠组织为对照,光镜下评估各项指标表达情况。采用PCR方法检测分析微卫星状态并分组。结果与癌旁正常组织相比,Biglycan蛋白在结肠癌组织中的阳性表达率明显升高,Biglycan蛋白表达与结肠癌组织的组织学分级、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,表达率差异有统计学意义(P<0.05)。与癌旁正常组织相比,β-catenin蛋白在结肠癌组织中的阳性表达率明显升高,β-catenin蛋白阳性表达与癌组织的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,表达率差异有统计学意义(P<0.05)。β-catenin阳性表达率升高与Biglycan蛋白阳性表达存在一定的相关性(r=0.922)。β-catenin蛋白阳性表达在结肠癌中MSI-H与MSI-L/MSS两组间无明显相关性,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Biglycan与β-catenin在结肠癌组织中阳性表达率明显高于癌旁正常组织,二者表达与癌组织的浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关,可作为评估结肠癌预后指标,用于指导临床治疗,且二者表达相互间存在一定相关性,可能参与结肠癌的WNT信号通路激活。

Biglycan对地塞米松诱导血管平滑肌细胞钙化的作用

【目的】初步探讨地塞米松导致VSMCs钙化的分子机制。【方法】用地塞米松(Dex)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs),检测其双链蛋白聚糖(BGN)的表达。并通过10-8mol/LDex诱导BGN重组腺病毒Ad/BGN感染的VSMCs,分别检测VSMCs钙化程度,BGN、osteocalcin、cbfa1、骨形态生成蛋白4(BMP4)的表达。实验分4组(n=3):Ad/Bgl-BGP组:用空载体Ad/Bgl感染细胞;Ad/BGN-BGP组:用Ad/BGN感染细胞;Ad/Bgl-Dex组:用Dex诱导Ad/Bgl感染的VSMC;Ad/BGN-Dex组:用Dex诱导Ad/BGN感染的VSMCs。【结果】Ad/BGN转染后,VSMCs钙化增强,osteocalcin、cbfa1和BMP4蛋白水平较之相应对照组表达明显增多(P<0.05),而Dex诱导组在转染Ad/BGN后osteocalcin、cbfa1、BMP4蛋白表达更多。Dex诱导后,Ad/BGN转染的VSMCs,其BGN蛋白的表达量较未加Dex的相应对照组显著增加(P<0.05)。【结论】BGN能促进地塞米松诱导的血管平滑肌细胞钙化。

Biglycan和细胞因子在小牛椎间盘组织中的信息编码

目的:评估biglycan对表皮生长因子、成骨蛋白-1和白细胞介素-1信息编码和信号转导的影响。方法:从小牛尾椎获取椎间盘纤维环和髓核细胞。先用3种不同方式处理这些细胞(都基于不同的时间点和不同的浓度梯度):biglycan;细胞因子(表皮生长因子、成骨蛋白-1和白细胞介素-1);biglycan联合细胞因子。然后应用Western印迹实验技术研究biglycan和细胞因子对小牛椎间盘细胞的信息编码,以及biglycan对小牛椎间盘组织中细胞因子信息编码和转导的影响。对所得数据应用SPSS统计软件进行统计学分析。结果:Biglycan能促进纤维环和髓核细胞的细胞外信号调节蛋白表达,比对照组升高3～4倍,最佳作用时间在10 min,最佳作用浓度为20μmol/L;3种细胞因子也能促进细胞外信号调节蛋白表达;biglycan分别与3种细胞因子联合应用时,可明显降低细胞因子的蛋白表达,且随着biglycan浓度的递增,细胞因子的蛋白表达递减,纤维环和髓核细胞之间差异无统计学意义。结论:Biglycan能黏附椎间盘细胞并激活细胞外调节蛋白通路,这种影响具有时间与浓度依赖性;biglycan既可降低表皮生长因子和成骨蛋白-1对椎间盘组织合成代谢的影响,也可降低白细胞介素-1对椎间盘组织分解代谢的影响。Biglycan可能对退变椎间盘组织的自我修复具有重要意义。

非小细胞肺癌中Biglycan高表达与肺癌的恶性程度相关

目的研究Biglycan在人非小细胞肺癌中的表达，并分析其表达与肺癌临床病理特征及恶性程度的关系。方法采用免疫组织化学（sP）法检测102例非小细胞肺癌石蜡包埋组织中Biglycan蛋白的表达情况，分析其表达与临床病理因素之间的相关性。应用Western blot法及RT—PCR方法检测肺癌细胞中Biglycan的表达情况，采用脂质体介导法将Biglycan干扰片段Biglycan siRNA转染入肺癌细胞系A549和SK—MES-1后，利用RT—PCR和Westernblot法检测Biglycan在mRNA和蛋白水平的表达情况，并应用MTT法、Transwell法检测干扰Biglycan表达后对肺癌细胞增殖和侵袭的影响。结果Biglycan在非小细胞肺癌中高表达，其高表达与肺癌高TNM分期（P=0．022）、低分化（P=0．034）和淋巴结转移（P=0．028）显著相关。Biglycan在肺癌细胞系中呈高表达。在干扰Biglycan表达后，与未处理组及转染对照片段control siRNA组相比，Biglycan的mRNA（P〈0．05）和蛋白（P〈0．05）表达均明显下降，细胞生长增殖能力[P〈0．01（2～4天）；P〈0．01（2～4天）]减弱，细胞侵袭数目（8．41±1．03，11．24±1．21，P〈0．05）减少。结论非小细胞肺癌中Biglycan存在普遍高表达现象，并且Biglycan的高表达可能参与了肺癌恶性表型的形成过程。

Biglycan 及 FAK 信号通路对结肠癌细胞侵袭、转移能力的影响及机制

目的 观察Biglycan对局部黏着斑激酶（ Focal adhesion kinase,FAK）活化的影响,探索其是否通过调控FAK信号通路影响结肠癌细胞的侵袭和迁移. 方法 构建过表达Biglycan的人结肠癌细胞系HCT116并施加FAK抑制剂处理. 实验设置空白对照组（HCT116）、空载体对照组（Vector）,空载体抑制剂处理组（Vector＋PF-562271）、Biglycan过表达组（Biglycan）和Biglycan过表达抑制剂处理组（Bigly-can＋PF-562271）. 抑制剂处理24 h后,采用Western blot技术检测FAK、p-FAK在各组结肠癌细胞中的表达;采用Transwell实验分析各组结肠癌细胞的侵袭和迁移能力. 结果 Biglycan过表达后会显著提高FAK的磷酸化水平,促进HCT116细胞的侵袭和迁移（P〈0.01）;FAK抑制剂PF-562271能够明显降低p-FAK的表达,逆转Biglycan对结肠癌细胞侵袭和迁移能力有影响（ P〈0.01）. 结论 Biglycan通过激活FAK信号通路影响结肠癌细胞系HCT116的侵袭和转移.

Biglycan在牙周损伤愈合中的免疫化学定位和表达

目的:研究biglycan在牙周组织损伤愈合过程中的免疫化学定位。方法:损伤成年鼠磨牙周围的牙周组织,跟踪28d,对biglycan和Ⅰ型、Ⅲ型胶原在愈合过程中的免疫组织化学分布进行分析。结果:biglycan在结缔组织中的免疫组织化学分布与I型胶原相似。在牙周损伤愈合早期,biglycan在损伤区炎性细胞和移行的牙龈上皮细胞有强烈表达。愈合中期,biglycan广泛表达于肉芽组织成纤维细胞及其基质。愈合晚期,biglycan在新骨成骨细胞中表达明显。结论:biglycan在牙周组织损伤区中的细胞内特征性表达,预示其在牙周损伤愈合过程中起着不可忽视的作用。

Biglycan及血管内皮生长因子对结肠癌细胞迁移、侵袭能力的影响及机制

目的:观察biglycan及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)对结肠癌细胞系HCT116迁移、侵袭能力的影响并探讨其可能的机制。方法:在稳定转染biglycan的结肠癌细胞系HCT116中转染VEGF siRNA,实验设置未转染对照组(mock组)、空载质粒和非特异性干扰片段转染对照组(vector+siRNA-NC组)、biglycan cDNA和非特异性干扰片段转染组(biglycan+siRNA-NC组)以及biglycan cDNA和VEGF siRNA共转染组(biglycan+siRNA-VEGF组)。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测biglycan和VEGF的mRNA表达;采用划痕实验检测细胞的迁移能力;采用Transwell法检测细胞的侵袭能力;采用蛋白质印迹(Western blotting)法检测SNAIL、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达;采用明胶酶谱法检测MMP-2、MMP-9的活性。结果:与mock组及vector+siRNA-NC组比较,biglycan+siRNA-NC组细胞的迁移、侵袭能力均显著提高(P<0.05),vimentin、MMP-2、MMP-9、SNAIL蛋白的表达水平显著提高,E-cadherin蛋白的表达水平则显著下降(P<0.05),MMP-2和MMP-9的活性显著提高(P<0.05)。与biglycan+siRNA-NC组比较,biglycan+siRNA-VEGF组细胞的迁移、侵袭能力均显著降低(P<0.05),SNAIL、vimentin、MMP-2、MMP-9蛋白的表达水平均显著下降,E-cadherin蛋白的表达水平显著提高(P<0.05),MMP-2、MMP-9的活性显著下降(P<0.05)。结论:biglycan通过促进VEGF的表达来促进结肠癌细胞系HCT116的迁移和侵袭,下调结肠癌细胞中VEGF的表达可逆转biglycan对HCT116迁移和侵袭的促进作用。

Biglycan 及 FAK 信号通路对结肠癌细胞增殖能力的影响及分子机制

目的 研究Biglycan及FAK信号通路对结肠癌细胞增殖的调控作用及其分子机制. 方法 构建Biglycan过表达的人结肠癌HCT116细胞并采用FAK抑制剂处理. 分为5组：正常对照组、空载体对照组、空载体抑制剂处理组、Biglycan过表达组和Biglycan 过表达抑制剂处理组,处理时间为24h .通过Western blot 及MTT 检测的方法,观察各组HCT116 细胞的增殖能力以及FAK、p-FAK、PCNA、p53 的表达情况.结果 过表达Biglycan 能够显著促进HCT116 细胞的增殖以及FAK 的磷酸化（P ＜0.01）,并导致PCNA 表达水平的显著升高和p53 表达水平的显著抑制（P ＜0.01）;而FAK 抑制剂PF-562271 作用能够明显抑制细胞的增殖能力,Biglycan对p-FAK、PCNA、p53 蛋白表达水平的调控被抑制（P ＜0.01）.结论 Biglycan通过促进FAK 信号通路的活化调控结肠癌细胞的增殖.

结肠癌组织Biglycan的表达与上皮间质转化的相关性

目的:探讨结肠癌组织中双糖链蛋白聚糖(Biglycan)的表达与上皮间质转化(EMT)的关系。方法:收集8对结肠癌同患者的癌及癌旁组织,采用免疫组织化学、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测组织中Biglycan、上皮标志物E-钙黏素(E-cadherin)、间质标记物N-钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达,分析结肠癌组织中Biglycan与细胞EMT的相关性。结果:与癌旁组织相比,结肠癌组织中Biglycan的表达显著上调(P<0.05);E-cadherin的表达显著降低(P<0.05);间质标记物N-cadherin、vimentin表达显著升高(P<0.05)。结论:Biglycan在结肠癌组织的表达上调可能是通过启动EMT的发生来实现,并促进肿瘤的侵袭转移。

Biglycan及VEGF对结肠癌细胞增殖、凋亡能力的影响及分子机制

[目的]观察Biglycan及VEGF对结肠癌细胞系HCT116增殖、凋亡的影响并探讨其可能机制。[方法]向转染Biglycan的细胞系HCT116中转染VEGF siRNA,设对照组(Mock)、空载和干扰对照组(Vector+siRNA-NC)、Biglycan cDNA和干扰对照组(Biglycan+siRNA-NC)及Biglycan cDNA和VEGF干扰组(Biglycan+siRNA-VEGF)。Western Blot检测Biglycan、VEGF及Ki67、PCNA、P21的表达;MTT检测细胞增殖情况;流式细胞术检测细胞凋亡及周期。[结果]过表达Biglycan后,Ki67、PCNA和VEGF显著上调,P21显著下调。干扰VEGF后,上述3种周期蛋白的表达正好相反;Biglycan上调后,细胞增殖能力显著提高,下调VEGF后增殖能力又显著降低(P<0.05);Biglycan过表达后S期细胞总数(44.39%±1.80%)较Mock组(31.41%±1.81%)和Vector+siRNA-NC组(32.56%±1.07%)显著提高(P<0.01),凋亡率(0.12%±0.01%)较Mock组(1.75%±0.17%)和Vector+siRNA-NC组(1.83%±0.16%)显著下降(P<0.01);下调VEGF后S期细胞(20.76%±1.23%)显著降低(P<0.01),凋亡率(8.30%±0.71%)显著上升(P<0.01)。[结论]Biglycan通过促进VEGF的表达来促进结肠癌细胞的增殖并抑制其凋亡。

Biglycan在SD大鼠牙胚发育中的表达

目的探讨大鼠牙胚发育过程中Biglycan的表达情况。方法健康雌性和雄性SD大鼠各15只,按雌∶雄=1∶1同笼饲养,精子涂片检查阳性时为受孕,按取材时间将15只孕鼠分为妊娠17.5d组、妊娠19.5d组、出生后1.5d组、出生后5.5d组和出生后9.5d组,每组3只。分别在妊娠第17.5天、第19.5天时取胎鼠及在出生后第1.5、5.5、9.5天时取新生鼠两侧下颌第一磨牙牙胚部位后的下颌骨组织,采用组织病理检查确定各组大鼠牙胚发育时期,采用免疫组织化学法检测大鼠牙胚Biglycan蛋白多糖的表达和定位情况,采用图像分析软件分析各组Biglycan蛋白多糖的累计光密度、有效目标分布区域面积和平均光密度。结果妊娠17.5d组胎鼠第一磨牙牙胚处于帽状期,Biglycan表达情况为牙板细胞(+)、牙囊细胞(■)、内釉上皮(■)及牙乳头细胞(■);妊娠19.5d组处于钟状早期,Biglycan表达情况同妊娠17.5d组;出生后1.5d组处于钟状期,Biglycan表达情况为压板细胞(■)、牙囊细胞(+)、内釉上皮(+)及牙乳头细胞(+);出生后5.5d组处于钟状末期,Biglycan表达情况为牙囊细胞(+)、内釉上皮(+)及牙乳头细胞(±);出生后9.5d组第一磨牙牙胚釉基质蛋白分泌基本结束,Biglycan表达情况为压板细胞(±)、牙囊细胞(+)及牙乳头细胞(±);随着发育进行,成釉细胞和成牙本质细胞中Biglycan表达逐渐减弱;妊娠17.5d组Biglycan蛋白多糖累计光密度值为1.470 0±0.001 1,有效目标分布区域面积为4.323 5±0.001 6,平均光密度值为0.340 0±0.002 3,妊娠19.5d组依次为1.460 0±0.001 7,4.424 2±0.001 5,0.034 0±0.004 5,出生后1.5d组依次为1.440 0±0.001 4,4.363 6±0.001 3,0.310 0±0.002 2,出生后5.5d组依次为1.430 0±0.001 3,4.612 9±0.001 1,0.300 0±0.000 1,出生后9.5d组依次为1.410 0±0.001 5,7.421 1±0.001 4,0.190 0±0.002 8,各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论正常大鼠牙胚发育过程中Biglycan表达呈一定的时间和空间分布,随着发育的不同阶段而有所改变,Biglycan可能参与了牙胚的正常发育。

子宫内膜异位症患者细胞外基质相关基因筛选的生物信息学分析

目的:通过生物信息学工具筛选子宫内膜异位症(EMS)相关的差异表达基因(DEGs),为阐明EMS的病因提供理论依据,为EMS的诊断和治疗开辟新的研究方向。方法:从基因表达汇编(GEO)数据库检索“endmetriosis”,下载涉及EMS组织和正常子宫内膜组织的高通量芯片数据集GSE25628,GSE23339和GSE7305。使用GE02R在线分析工具筛选EMS组织和正常子宫内膜组织的DEGs,使用基因本体功能注释(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)对DEGs进行功能及通路富集分析,利用STRING数据库建立蛋白-蛋白互作(PPI)网络,最后通过Cytoscape软件对PPI网络进行可视化并筛选核心基因。结果:分析确定了27个上调DEGs和43个下调DEGs。GO富集分析,DEGs主要富集于细胞外基质、细胞外空间和细胞外区域等方面;KEGG通路分析,DEGs主要富集于磷酸肌醇代谢信号通路。通过STRING数据库和Cytoscape软件共筛选出核心蛋白聚糖(DCN)、上皮细胞黏附分子(EPCAM)、双链蛋白聚糖(BGN)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、神经酪氨酸激酶受体2(NTRK2)、磷脂酰肌醇聚糖3(GPC-3)、表皮生长因子受体3(ERBB3)、分化抗原簇蛋白24(CD24)、巢蛋白2(NID2)和血小板反应蛋白2(THBS2)连接度最高的前10个核心基因,其中DCN、BGN、NID2和THBS24种基因与细胞外基质的生物学功能有密切关联。结论:细胞外基质相关基因失调可能在EMS发生发展过程中起重要作用,且细胞外基质相关基因可能成为EMS早期诊断的生物标志物及治疗靶点。

穴位注射骨瓜提取物注射液联合电针夹脊穴对兔骨质疏松性椎体压缩骨折二聚糖的影响

目的观察穴位注射骨瓜提取物注射液联合电针夹脊穴对骨质疏松性椎体压缩性骨折动物模型二聚糖及血清基质金属蛋白酶(MMPs)的影响。方法雌性新西兰兔40只,随机分为模型组、穴位注射组、电针组、联合治疗组,采用去势法手术切除新西兰兔卵巢,用混有糖皮质激素的饲料饲养4个月后造成动物骨质疏松,再采用手术方法造成骨质疏松性椎体压缩骨折动物模型,造模成功后电针组电针夹脊穴30 min;穴位注射组选夹脊穴多点穴位注射骨瓜提取物注射液;联合治疗组电针夹脊穴30 min后穴位注射骨瓜提取物注射液。采用酶免疫吸附试验测定血清基质金属蛋白酶(MMPs:MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9、MMP-10)阳性表达率,采用免疫荧光法测定腰椎间盘组织二聚糖中的表达。结果经21 d治疗,联合治疗组腰椎间盘组织二聚糖表达明显增高,血清MMP-1、MMP-3、MMP-9明显降低,与穴位注射组及电针组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论穴位注射骨瓜提取物注射液联合电针夹脊穴治疗兔骨质疏松性椎体压缩性骨折的作用机制可能为电针夹脊穴可激发经气、活经通络、提高二聚糖黏附椎间盘细胞数量、调节椎间盘成骨细胞及破骨细胞的动态平衡,骨瓜提取物注射液穴位注射吸收后降低MMP-1、MMP-3、MMP-9对腰椎间盘基质的降解,抑制椎间盘组织退行性变,调节退变椎间盘细胞的代谢平衡,促进骨折愈合的作用。

电针夹脊穴对兔退变腰椎间盘组织中二聚糖表达的影响

目的:通过研究电针夹脊穴对兔退变的腰椎间盘中二聚糖表达的影响,探讨其作用机制。方法:选用36只清洁级成年新西兰大白兔,建立椎体间压力诱导椎间盘退变的模型,随机分为4组:正常组、假手术组、模型组和治疗组,治疗组给予电针夹脊穴治疗。每组内又分为3个时间点:术前、术后28d、56d;取出椎间盘组织,应用免疫荧光技术检测各组不同时间点二聚糖蛋白的表达。结果:术后28d,模型组、治疗组二聚糖蛋白免疫荧光平均光密度均较假手术组显著下降(均P<0.01);术后56d,治疗组二聚糖蛋白免疫荧光平均光密度较术后28d时明显升高,且较模型组术后56d明显升高(均P<0.05)。结论:椎间盘退变的发生可使二聚糖阳性表达下调,电针夹脊穴可以通过增加二聚糖的阳性表达,纠正基质合成与分解代谢失衡,达到防治椎间盘退变的效果。

青少年特发性脊柱侧凸患者髂骨中双糖链蛋白多糖和核心蛋白聚糖的表达

目的:观察非胶原骨基质蛋白中双糖链蛋白多糖(Biglycan)和核心蛋白聚糖(Decorin)在青少年特发性脊柱侧凸(adolescentidiopathicscoliosis,AIS)患者髂骨中的表达情况。方法:从10例行后路自体骨融合的AIS女性患者(AIS组)和6例无骨代谢性疾病需行髂骨自体骨移植的其它骨科疾病女性患者(对照组)获取髂骨标本。AIS组患者年龄11.9￣19.1岁,平均14.9岁,Cobb角55°(45°￣61°);对照组平均年龄40.8岁。标本于10%缓冲福尔马林液中固定6h,在福尔马林酸中脱钙3周。切片厚度为5!m,行免疫组化染色。用半定量方法分析双糖链蛋白多糖和核心蛋白聚糖在单位视野骨细胞与骨基质中的表达。结果:AIS组髂骨中骨细胞与骨基质表达核心蛋白聚糖各6例,表达双糖链蛋白多糖各6例。对照组核心蛋白聚糖在骨细胞与骨基质中均为阳性表达;双糖链蛋白多糖在骨基质中均为阳性表达,在骨细胞中阳性表达5例。!2检验显示AIS组上述两种非胶原骨基质蛋白多糖的阳性表达率明显低于对照组(P<0.05)。结论:双糖链蛋白多糖和核心蛋白聚糖在AIS患者髂骨中的表达较对照组低,研究其在AIS患者骨骼中的表达和分布,有助于研究AIS的骨质密度和骨生长发育异常的分子基础,进一步认识该病的病因与发病机理。

Superarray法初步探讨转化生长因子β(TGF-β)对牙髓细胞分化的作用机理

目的探讨转化生长因子β(TGF-β)对牙髓细胞分化的作用机理。方法分离培养人的牙髓细胞,采用成骨相关因子的superarray方法,研究加入外源性的TGF-β对牙髓细胞分化的影响。结果加入外源性的TGF-β大大地影响了与成骨发生相关基因的表达,双糖链蛋白多糖基因被显著上调,而核心蛋白聚糖基因显著下调。基质金属蛋白酶2,成纤维细胞生长因子,annexinV以及热休克蛋白47等基因的表达也显著增强。结论TGF-β通过调节蛋白多糖等基因从而在牙髓细胞分化的早期起作用。

双糖链蛋白聚糖对大肠癌细胞生长作用研究

目的研究Biglycan对大肠癌细胞HT-29和SW480侵袭、凋亡等生长作用影响。方法采用Transwell方法检测Biglycan对大肠癌细胞HT-29和SW480的侵袭能力影响;AV/PI染色检测细胞凋亡情况;Western blot法检测加药处理前后细胞内Rb、pRb和Ras表达变化。结果 100 nmol/L Biglycan和50 nmol/L Biglycan可抑制大肠癌细胞HT-29和SW480侵袭转移,同时可诱导HT-29、SW480细胞发生凋亡;经Biglycan处理后,细胞内Rb总蛋白无显著性变化,pRb和Ras出现下调趋势。结论 Biglycan可抑制大肠癌细胞HT-29和SW480侵袭转移、诱导细胞凋亡,下调pRb和Ras的表达、调控细胞周期从而抑制细胞生长为其可能的作用机制。

双链蛋白聚糖对胃癌细胞生长作用研究

目的:研究双链蛋白聚糖(biglycan,BGN)对人胃癌细胞系SGC-7901的细胞增殖、周期及凋亡等生长作用影响。方法:构建重组质粒pIRES2-EGFP/BGN,转染胃癌细胞株SGC-7901,获得胃癌稳转细胞株SGC-7901/BGN。通过细胞增殖实验(CCK-8法)、平板克隆实验、流式细胞技术,分别检察BGN过表达对SGC-7901细胞增殖、克隆形成、周期及凋亡的影响。结果:SGC-7901/BGN组胃癌细胞较SGC-7901/空载组生长明显抑制(P<0.01),细胞培养板形成的克隆数明显减少[(209.7±12.6)比(326.0±15.1)];同时过表达BGN可促进胃癌细胞的凋亡[(10.7±1.5)%比(5.3±1.1)%],且将细胞周期阻止在G1期[(55.7±2.1)%比(37.6±1.8)%]。结论:胃癌细胞过表达BGN可抑制胃癌细胞的增殖、克隆形成。BGN可能通过将细胞周期阻滞在G1期、诱导细胞凋亡,从而发挥其生长抑制的生物学效应。

BGN基因在胃癌中的表达及与预后相关性

目的探讨双糖链蛋白多糖(BGN)基因在胃癌中的表达及与预后的相关性。方法收集Oncomine数据库中关于BGN的数据信息,对其在胃癌中的差异表达进行统计分析。利用GEPIA2数据库对BGN的表达情况进行验证。对胃癌中BGN参与的通路进行富集分析。利用TCGA数据库分析BGN与胃癌总生存期(OS)、肿瘤特异性生存期(DSS)和无疾病间隔(PFI)的相关性。结果从Oncomine数据库中纳入不同肿瘤BGN表达的研究共计421项。经过筛选,涉及BGN在胃癌组织和癌旁组织中具有表达差异的研究共5项(包含298例样本),对5项研究进行meta分析显示,与癌旁组织相比,BGN在胃癌组织中均呈高表达(P<0.05)。利用GEPIA2数据库进行分析验证,BGN在胃癌样本中呈现显著高表达。富集分析显示,BGN在胃癌中的表达可能与同种异体排斥、顶端连接、凋亡信号通路密切相关。自TCGA数据库中提取数据分析显示,BGN表达与OS、DSS、PFI呈负相关(P<0.05)。结论BGN在胃癌组织中高表达,且与胃癌预后显著相关,可能为肿瘤药物的开发提供分子靶点。