平衡透析法测定加米霉素与猪、牛和羊的血浆蛋白结合率

为测定加米霉素与常见家畜的血浆蛋白结合率(PPBR),本试验建立猪、牛和羊血浆中加米霉素的高效液相色谱-串联质谱检测方法,并对该方法的专属性、检测限、定量限、标准曲线、提取回收率和精密度进行考察。采用平衡透析法测定不同浓度(0.1、0.5和2.5μg/mL)加米霉素与猪、牛和羊的PPBR。结果显示,在考察浓度范围内,加米霉素在猪、牛和羊血浆中的专属性较好,检测限和定量限分别为0.5和1.0 ng/mL,标准曲线呈现良好的线性关系(r>0.997)。加米霉素在猪、牛和羊血浆中的提取回收率介于91.2%~107.8%,日内和日间精密度相对标准偏差(RSD)分别小于6.59%和9.16%。加米霉素与猪、牛和羊的平均PPBR分别为(21.86±4.19)%、(27.51±6.95)%和(19.64±3.58)%,且在考察的浓度范围内无浓度依赖特征。本试验所建方法准确可靠,可用于测定加米霉素与猪、牛和羊的PPBR。本试验结果可为加米霉素的药物代谢动力学研究及其在兽医临床中的科学用药提供参考依据。

平衡透析法测定人体外血浆中原花青素B2、表儿茶素蛋白结合率

目的建立检测原花青素B2、表儿茶素在血浆中药物浓度的方法,并测定其体外血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法测定血浆蛋白结合率,建立HPLC法测定各成分的血药浓度及游离药物浓度,生物样本用乙酸乙酯溶液提取的方法。结果在低、中、高3种浓度下,原花青素B2和表儿茶素在人体外血浆中的蛋白结合率分别为(44.21±2.80)%,(52.60±1.92)%,(48.11±3.09)%和(47.12±2.85)%,(55.03±2.47)%,(43.69±1.53)%。结论采用HPLC法对原花青素B2、表儿茶素进行分离,方法简便、可靠、稳定。体外实验中原花青素B2和表儿茶素与人血浆属中等结合型药物,且蛋白结合率随着药物浓度的增加无明显的浓度依赖性。

超滤法测定磷酸川芎嗪的血浆蛋白结合率

目的:测定磷酸川芎嗪的血浆蛋白结合率。方法:采用超滤法和高效液相色谱法对磷酸川芎嗪的血浆蛋白结合率进行测定。结果:磷酸川芎嗪与人血清白蛋白、人血浆和大鼠血浆的蛋白结合率分别为(64.64±0.68)%、(65.85±7.35)%及(73.65±2.35)%。结论:磷酸川芎嗪与血浆蛋白具有中等强度的结合。

丹红注射液7种药效物质基础的人血浆蛋白结合率

目的建立同时测定丹红注射液中7种主要药效物质基础丹参素、原儿茶醛等体外人血浆蛋白结合率的方法,并将结果与同等浓度条件下每个单体化合物的人血浆蛋白结合率进行比较,以考察两者是否存在显著性差异,由此推测多组分之间是否存在血浆蛋白竞争性结合。为丹红注射液主要药效物质基础的体内药动学,及其在临床联合用药时的体内药动学相互作用研究提供参考依据。方法采用平衡透析法测定血浆蛋白结合率,HPLC测定丹红注射液中7种成分,及每种成分单独透析平衡时的血药浓度及游离药物浓度。结果在3种浓度的丹红注射液中,丹参素、原儿茶醛、p-香豆酸、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B的人血浆蛋白结合率分别为(11.88±0.58)%、(78.35±1.72)%、(63.48±2.17)%、(87.72±0.78)%、(82.77±2.83)%、(71.59±0.81)%和(70.55±1.34)%;而同等浓度条件下,这7种单体化合物的人血浆蛋白结合率分别为(23.34±1.06)%、(79.32±1.41)%、(78.97±0.08)%、(92.37±0.66)%、(84.95±0.38)%、(79.15±5.47)%和(75.49±0.75)%。与单体化合物的血浆蛋白结合率相比,丹参素、p-香豆酸和紫草酸在丹红注射液样品中的人血浆蛋白结合率差异有显著性;在本实验的药物浓度范围内,只有紫草酸的人血浆蛋白结合率与浓度呈线性;原儿茶醛、丹酚酸D、迷迭香酸和丹酚酸B的人血浆蛋白结合率差异没有显著性。结论该测定方法简便易行,准确度、稳定性均较好。实验条件下,原儿茶醛、p-香豆酸、丹酚酸D、迷迭香酸、紫草酸和丹酚酸B的人血浆蛋白结合率均>60%,且在样品体系中这7种成分的血浆蛋白结合率均比单独给药的血浆蛋白结合率低,组分之间可能存在竞争性结合,但竞争影响可能较弱。考察血浆蛋白竞争性结合对该药的药物相互作用影响时,其组分间的相互竞争影响较小。

基于启发式方法和支持向量机方法预测药物与人血浆蛋白结合率

应用启发式方法和支持向量机方法建立了70种药物与血浆蛋白结合率的定量构效关系模型,研究了分子结构对药物与血浆蛋白结合率的影响.两种方法均得到了较好的结果,交互检验的相关系数平方分别为0.80和0.82;通过对模型的稳定性和预测能力比较,支持向量机建立的QSAR模型能够更好地预测药物与血浆蛋白结合率.

超滤法测定甲基原薯蓣皂苷的血浆蛋白结合率

目的:测定甲基原薯蓣皂苷的血浆蛋白结合率。方法:采用超滤法结合高效液相色谱-串联质谱联用法(HPLC-MS-MS)对甲基原薯蓣皂苷与大鼠血浆以及健康人血浆的蛋白结合率进行测定。结果:甲基原薯蓣皂苷与大鼠血浆在20.0,100,200μg.mL-1下的血浆蛋白结合率分别为(94.6±0.16)%,(91.6±0.35)%,(86.10±0.60)%。甲基原薯蓣皂苷在以上3个浓度下与健康人血浆的血浆蛋白结合率分别为(82.11±5.12)%,(84.54±0.32)%,(88.52±1.02)%。结论:甲基原薯蓣皂苷与血浆蛋白具有较强的结合。

三七皂苷中人参皂苷Rg_1与Rb_1口服吸收及其体内药代动力学的研究和比较

分别考察三七总皂苷(PNS)在大鼠灌胃和静脉给药后的人参皂苷Rg1(Rg1)、人参皂苷Rb1(Rb1)的胆汁排泄;采用平衡透析法测定药物的血浆蛋白结合率;并结合药代动力学的实验结果,研究和比较Rg1与Rb1的口服吸收及其体内药代动力学性质。结果表明,静脉给药后10 h,Rg1及Rb1胆汁排泄累积量分别为给药剂量的(61.48±18.30)%和(3.94±1.49)%;灌胃给药后12 h,Rg1及Rb1胆汁排泄累积量分别为给药剂量的(0.91±0.51)%和(0.055±0.02)%。Rg1及Rb1的血浆蛋白结合率分别为6.56%~12.74%和80.11%~89.69%。Rg1的胃、肠和肝的通过率(FS,FI和FH)分别为49.85%,13.05%和50.56%;Rb1分别为25.82%,4.18%和65.77%。因此,肠壁吸收差是Rg1和Rb1生物利用度低的主要原因。Rg1具有较高的胆汁排泄和较低的血浆蛋白结合率,Rb1的胆汁排泄较低,而血浆蛋白结合率较高。Rb1的肠黏膜透过性和体内消除速度都低于Rg1,但前者的平均滞留时间(MRT)和血药浓度曲线下面积(AUC)均大于后者。

西瑞香素与大鼠血浆蛋白结合率的测定

目的采用HPLC法对西瑞香素与大鼠血浆蛋白结合率进行研究。方法采用平衡透析法,结合HPLC法测定西瑞香素的大鼠血浆蛋白结合率。结果西瑞香素在低(0.50 mg.L-1)、中(1.0 mg.L-1)、高(2.0 mg.L-1)3个质量浓度下,其血浆蛋白结合率分别为(91.7±1.8)%、(91.6±1.4)%和(90.7±0.81)%。结论西瑞香素具有较强的血浆蛋白结合率。

高效液相色谱法测定美林洛尔与人血浆蛋白的结合率

目的：建立人标准血浆中美林洛尔（MELE）浓度的测定方法，测定美林洛尔在人标准血浆中的蛋白结合率，并计算相关参数。方法：用平衡透析法测定血浆蛋白结合率，用高效液相-荧光检测法测定血浆中药物总浓度及游离药物浓度。结果；美林洛尔与人标准血浆的蛋白结合率随药物浓度发生变化约为7．02％～18．75％。MELE与白蛋白结合的表观最大能力岛为0.016μmol·g^-1,药物-蛋白复合物的解离常数Kdp为1．734μmol·g^-1,结合常数Kp为1．2719×10μmol·g^-1,结合位点n为0.0016。结论：在体外美林洛尔与人标准血浆的蛋白结合率较低，并随着药物浓度的增加结合率下降。

异育银鲫体内盐酸双氟沙星血浆蛋白结合率的变化与其药代动力学研究

为了研究盐酸双氟沙星(Difloxacin,DIF)在异育银鲫体内血浆蛋白结合率的变化及其与药代动力学之间的关系,实验采用超滤法测定了DIF在异育银鲫体内血浆蛋白结合率,运用HPLC测定其对应时间点药物浓度,并分析了血浆蛋白结合率变化对DIF体内处置的影响。实验以感染嗜水气单胞菌的异育银鲫为感染组,健康异育银鲫为对照组。结果显示:感染组各时间点DIF血浆蛋白结合率均高于对照组,感染组与对照组DIF血浆蛋白结合率与总药物浓度呈对数关系:y=9.01ln x+74.34和y=4.81ln x+65.15,DIF血浆蛋白结合率与游离药物浓度的对数关系式分别为:y=6.36ln x+64.91和y=4.36ln x+60.63;感染组和对照组血浆药时曲线均可使用开放性二室模型描述;感染组DIF的吸收和消除慢于对照组,其表观分布容积和曲线下面积大于对照组。结果显示异育银鲫体内感染嗜水气单胞菌促使DIF血浆蛋白结合率升高;血浆蛋白结合率升高导致药物以结合药物的形式储存于血液中可能是导致药物组织分布受限、消除缓慢、长时间滞留于血液原因之一。

蛇床子素在兔体内的药动学研究

目的:研究蛇床子素在兔体内的药代动力学特点。方法:18只新西兰兔分成3组经ip分别给15、30和60mg/kg蛇床子素,以RP-HPLC法测定家兔在5、10、20、30、45、60、75、90、110和125min时血浆中蛇床子素浓度,用3P87软件处理血药浓度-时间数据,分析房室模型和药代动力学参数。结果:家兔ip蛇床子素15、30、60mg/kg的时量曲线属一室开放一室模型。AUC有明显的剂量依赖关系,半衰期、峰浓度和AUC相邻剂量间有显著性差异(P<0.05),剂量越大消除越快。家兔iv本品15mg/kg的时量曲线属二室模型,但其消除快于ip。蛇床子素血浆蛋白结合率为76%。结论:蛇床子素在家兔体内吸收快、起效快、蛋白结合率较高、消除快。在考察浓度范围内,蛇床子素ip在兔体内符合线性动力学过程。

黄芩提取物中黄酮类成分血浆蛋白结合率的测定

目的建立同时测定黄芩总黄酮部位中4种黄酮类成分在大鼠血浆中药物浓度的方法,并测定其体外血浆蛋白结合率。方法平衡透析法测定黄芩黄酮类成分血浆蛋白结合率,以高丽槐素为内标,生物样本用甲醇沉淀蛋白进行预处理,采用HPLC法测定4种黄酮类成分在透析内、外液中的浓度。结果在低、中、高3种浓度下,黄芩苷(BL)和汉黄芩苷(WL)的血浆蛋白质结合率随给药浓度的增大而降低(BL:82.03%→77.25%→67.17%;WL:82.24%→76.08%→69.87%),而汉黄芩素(W)和千层纸素A(OA)则呈现非质量浓度依赖性,其平均血浆蛋白结合率分别为(89.66±1.19)%、(88.56±1.87)%。结论该文所建立的测定方法简便、灵敏、专属性强。4个黄酮类成分在大鼠体外均有较高的血浆蛋白结合率。

毛细管电泳电化学发光用于丙吡胺及其与血浆蛋白结合率的测定

本实验利用透析袋平衡透析、毛细管电泳Ru(bpy)32+电化学发光检测技术测定了丙吡胺和人血浆蛋白的结合率。在恒电位1.3V;进样电压10kV持续10s,分离电压15kV,运行缓冲液30mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5),检测池中为5mmol/LRu(bpy)32+稀释于50mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.5)中等最优化的条件下,丙吡胺的检出限为10μmol/L(S/N=3)。对蛋白结合率的测定结果表明,人血浆中的药物浓度为1.6～8.2mmol/L,丙吡胺与血浆蛋白的结合是呈线性的,其线性回归方程为y=-0.07+0.93x,线性相关系数r为0.9999,丙吡胺与人血浆蛋白的结合率约为90.4%。

微透析法测定青藤碱大鼠体外血浆蛋白结合率

Aim To determine in vitro the rat plasma protein binding rate by using microdialysis method.Methods The binding rate was determined by using microdialysis probe as sampling tools and zero-net flux method as calibrating method.The regression equation was made by the difference of concentrations between the dialysis sample and the perfusate.The（x-intercept） of regression equation was the free drug concentration（Cf）.The plasma protein binding rate was calculated by using the following equation: f=（C0-Cf）/C0.Result The binding rate was kept relatively stable in the studied concentration range.Conclusion It is feasible that the plasma protein binding rate can be determined by using microdialysis method.

杠柳毒苷、杠柳次苷、杠柳苷元与人血浆蛋白结合率测定

目的:测定杠柳毒苷、杠柳次苷、杠柳苷元与人血浆蛋白的结合率。方法:采用平衡透析法结合HPLC,使用Zorbax SB-C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,5μm),杠柳毒苷、杠柳次苷、杠柳苷元分别采用乙腈-水(26∶74)、(30∶70)、(28∶72)为流动相,流速0.3 m L·min-1,检测波长220 nm。结果:在低、中、高不同质量浓度下,杠柳毒苷、杠柳次苷、杠柳苷元和人血浆蛋白的平均结合率分别为83.48%、94.19%、84.04%。结论:杠柳毒苷、杠柳次苷、杠柳苷元和人血浆蛋白的结合率大于80%,为高血浆蛋白结合的化合物。

红花黄色素粉针剂中羟基红花黄色素A血浆蛋白结合率的研究

目的测定红花黄色素粉针剂中羟基红花黄色素A的血浆蛋白结合率。方法采用超滤离心法除掉血浆蛋白,并用高效液相色谱法对低、中、高剂量静脉注射后的羟基红花黄色素A血药浓度进行测定。结果低、中、高剂量羟基红花黄色素A的血浆蛋白结合率分别为77.22%、78.31%、78.10%。结论羟基红花黄色素A血浆蛋白结合率较高,在静脉给予5～20 mg/kg范围内血浆蛋白结合率不具有质量浓度依赖性。

中药有效成分血浆蛋白结合率的研究进展与相关规律探讨

目的系统了解中药有效成分血浆蛋白结合率国内外研究进展,并探讨相关规律,为相关研究提供借鉴和参考,并为预测中药与其他药物联用时,是否会发生血浆蛋白结合介导的药物相互作用提供依据。方法通过文献检索,对中药有效成分血浆蛋白结合率的相关报道进行分析和总结。结果中药有效成分血浆蛋白结合率的研究国内外已有较多报道,显示不同结构的成分血浆蛋白结合率有较大差异,与结构类别、官能团位置、官能团数量等因素有关,且呈现一定的规律性。结论很多中药成分具有较高的血浆蛋白结合率,这些中药及其制剂与高血浆蛋白结合率的药物联用时,应关注可能会因为竞争血浆蛋白结合而产生药物相互作用,以保障患者用药安全。

清热养心颗粒中绿原酸在不同血浆中的蛋白结合率测定

清热养心颗粒是江苏省中医院制剂，具有补气养阴，清热解毒之功，临床主要用于病毒性心肌炎等的治疗。现代研究表明，该制剂中绿原酸有明显的抗炎、抗氧化、抗凝血等多种活性[1]，且是指标性成分[2]。

微透析-高效液相色谱法测定米诺环素大鼠血液和脑内的药动学

目的:研究米诺环素在大鼠血液和脑内的药动学。方法:采用微透析结合高效液相色谱技术,测定米诺环素大鼠血浆蛋白结合率;大鼠尾静脉注射米诺环素,测定给药后10h内不同时间点大鼠血液、海马CA1区中游离药物的浓度。结果:米诺环素大鼠血浆蛋白结合率为82.08%,给药后迅速进入脑组织,在给药后3.83h左右浓度达到峰值,其后缓慢下降,脑组织的游离药物-时间曲线下面积(AUC0-10h)可达血液的62.42%。结论:微透析结合高效液相色谱技术可以测定米诺环素的大鼠血浆蛋白结合率,并实现大鼠血液和脑组织中游离米诺环素浓度的动态监测。结果表明米诺环素易于透过血脑屏障,且能长时间维持较高浓度,从而发挥其神经保护作用。

香叶木苷的血浆蛋白结合率研究

研究香叶木苷的血浆蛋白结合率．以体外方式，用平衡透析法模拟香叶木苷在大鼠体内与血浆蛋白结合的过程，并以高效液相色谱法测定香叶木苷在透析袋内血浆中的药物质量浓度与透析袋外缓冲液中的质量浓度，计算血浆蛋白结合率．香叶木苷在血浆中药物质量浓度为1～90μg／mL范围内，其与大鼠血浆蛋白的结合率范围为29．83％～32．56％，波动较小，结果可靠．香叶木苷属于低血浆蛋白结合率药物，大部分药物分子以游离形式发挥药效．