基于酶催化沉积放大的阻抗免疫传感器

提出一种基于酶催化沉积底物和生物素——亲和素两步放大的超灵敏免疫检测方法.抗体通过单层蛋白A固定到金电极表面,预先处理好的生物素化抗体和辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素形成的网状复合物作为免疫反应信号的放大探针.在有H2O2存在的情况下,通过辣根过氧化物酶(HRP)催化氧化DAB(3,3’—联苯二胺)在金电极上沉积一层不溶物,引起阻抗的显著增大.该传感器用于人IgG检测,检测下限为1.0×10-8g.采用法拉第阻抗和压电石英晶体微天平分别表征了该传感器的特性.

基于ssDNA适配子的慢性粒细胞白血病K562细胞检测方法的建立

目的建立基于ssDNA适配子的慢性粒细胞性白血病K562细胞的检测方法。方法利用Cell-SELEX(Sys-tematic evolution of ligands by exponential enrichment)技术获得针对K562细胞的高特异性ssDNA适配子,以双位点结合模式试验原理,结合生物素链霉亲和素磁珠技术,建立K562细胞的特异性检测方法,并验证其特异性及灵敏度。结果利用建立的方法分别检测K562细胞、HL-60细胞及空白对照细胞,K562组与HL-60组和空白对照组荧光强度值差异有统计学意义(P<0.01),HL-60组与空白对照组差异无统计学意义(P>0.05),表明该方法特异性强;该方法能检测出数量小于100个的K562细胞,检测阈值低,灵敏度高。结论已成功建立了基于ssDNA适配子的检测K562细胞的新方法,为慢性粒细胞性白血病的分子诊断提供了一种新方法,也为分离K562细胞表面物质提供了新的思路。