生物方法制备D-泛酸研究进展

概述了生物方法制备D-泛酸的研究情况,主要介绍了发酵葡萄糖生成D-泛解酸,添加β-丙氨酸,直接发酵生产D-泛酸的方法;酶法转化或拆分,特别是不对称还原酮基泛解酸（或内酯）,立体选择性水解拆分DL-泛解酸内酯的拆分方法,并对其发展前景进行了评论。

SFPQ在肝细胞癌组织中的表达及其对BEL-7402细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响

目的探讨SFPQ在肝细胞癌组织中的表达特点及其对BEL-7402细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法收集原发性肝细胞癌患者的癌组织和对应癌旁组织各30例,采用免疫组织化学法检测SFPQ蛋白的表达。采用OncoLnc数据库分析SFPQ和肝细胞癌患者总生存预后的相关性。采用小干扰RNA(siRNA)技术敲低肝癌细胞BEL-7402中SFPQ的表达量,继而分别采用CCK8、Transwell以及Western-blot实验检测细胞增殖、迁移、侵袭能力以及上皮-间质转化(EMT)相关标志物的变化。结果 30例肝细胞癌患者中,癌组织SFPQ蛋白的染色评分为(5.37±0.64),显著高于癌旁组织[(3.27±0.43),P<0.01]。高表达SFPQ提示肝细胞癌患者的总生存时间缩短(P<0.001)。敲低SFPQ表达可以抑制BEL-7402细胞的增殖、迁移和侵袭能力,逆转细胞EMT进程。结论 SFPQ可能作为肝细胞癌患者潜在的预后指标,并可能通过调控细胞增殖、迁移、侵袭以及EMT特性影响肝细胞癌的转移复发。

纤维素酶及其在中药发酵中的运用

纤维素酶广泛产生于各种微生物的分泌物中,能够分解全球最丰富的可再生资源——纤维素,这为纤维素资源的利用提供了有利条件。作为我国传统的中药药材,通过微生物纤维素酶的降解,可以将其中有效成分提取出来。同时,结合现代一些生物转化技术,将分离到的产纤维素酶微生物用于发酵中药资源,达到高效利用中草药的目的。

3-甾酮-9α-羟基化酶基因在分枝杆菌中的异源表达与9α-羟基雄烯二酮的制备

9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD)是制备甾体类药物的重要中间产物。3-甾酮-9α-羟基化酶(KSH)能够转化雄烯二酮(AD)产生9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD),该酶由Ksh A和Ksh B两个亚基构成。为获得高效积累9-OH-AD的重组菌株,本研究选择耻垢分枝杆菌Mycobacterium smegmatis mc2155和戈登氏菌Gordonia neofelifaecis NRRL B-59395,对其在胆固醇为唯一碳源条件下表达明显上调的ksh A和ksh B候选基因进行克隆,插入到分枝杆菌表达载体p NIT中,构建共表达质粒,并将它们导入分枝杆菌Mycobacterium sp.NRRL B-3805中,获得重组菌株。利用重组菌株分别对植物甾醇、胆固醇和谷甾醇进行生物转化,分离纯化转化产物,采用光谱学方法鉴定其化学结构,确定该转化产物为9α-羟基雄烯二酮,说明分枝杆菌Mycobacterium sp.NRRL B-3805由积累雄烯二酮变为积累9α-羟基雄烯二酮(9-OH-AD),进而证明导入的候选基因ksh A和ksh B确实为有功能的基因。生物转化实验表明,与胆固醇、谷甾醇相比,植物甾醇作为底物更易于转化;而用来源于耻垢分枝杆菌的ksh A、ksh B构建的重组菌转化率更高,可达90%,具有较高的应用价值。本研究通过对KSH编码基因的异源表达,成功地进行了分枝杆菌生物转化特性的改造,为探索各种甾体药物中间体的工业生产奠定了基础。

去氢茯苓酸在大鼠体外肝微粒体中的生物转化研究

本文主要研究蒙药材茯苓中主要化学成分之一的去氢茯苓酸在大鼠肝微粒体中的生物转化。用大鼠肝微粒体体外温孵法进行去氢茯苓酸的生物转化,高效液相色谱法检测和制备原形化合物去氢茯苓酸及其生物转化产物,核磁共振波谱法和质谱法确定生物转化产物的结构。优化了温孵体系;去氢茯苓酸在苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体药物代谢酶作用下,产生2个转化产物,即茯苓酸和25-羟基茯苓酸。去氢茯苓酸可被苯巴比妥诱导的大鼠肝微粒体药物代谢酶转化为茯苓酸和25-羟基茯苓酸。