云南干热区前茬收获后免耕对苦瓜杂交制种效果的影响

由于苦瓜人工授粉用工量较大,且成本较高,为了在云南干热区开发苦瓜杂交种子生产基地,且缩减人工成本。将番茄采收后免耕种植苦瓜杂交种子技术和传统苦瓜杂交种子技术相比较。结果表明,番茄种植后免耕种植苦瓜杂交种子技术,人工成本和其他支出减少1.71万元/hm~2,总收入增加1.22万元/hm~2。因此,利用番茄种植后免耕种植苦瓜是一种高效低成本的苦瓜杂交种子生产种植方式。本研究为高效低成本生产苦瓜杂交种子提供理论基础与技术支撑。

阴阳离子交换色谱串联分离纯化苦瓜籽核糖体失活蛋白

将阴阳离子交换色谱柱在灌注色谱工作站上串联,使苦瓜籽粗提液中未被阴离子色谱柱吸附的蛋白质直接在阳离子色谱柱上吸附,用盐线性梯度洗脱从阳离子色谱柱上分离出两个具有抗真菌活性的蛋白。两个抗真菌蛋白经鉴定都达到了电泳纯,相对分子质量均为30000左右,N 端氨基酸序列分别为DVSFRLSGADPRSYGMFI与DVNFDLSTATAK,表明所得到的两种蛋白为苦瓜籽中的2个Ⅰ型核糖体失活蛋白α 苦瓜素(α MMC)和β 苦瓜素(β MMC)。抗菌实验表明,α MMC对香蕉枯萎菌和果腐霉菌均具有较强的抑制作用,β MMC对果腐霉菌有较强的抑制作用,而α MMC和β MMC对白绢菌的抑制活性均不明显。采用串联色谱,α MMC和β MMC的质量回收率分别为13 8%和8 0%。

聚乙二醇对苦瓜种子萌发及相关生理指标的影响

研究不同浓度聚乙二醇(PEG)和不同PEG浸种时间对苦瓜种子萌发及相关生理指标的影响。结果表明,适宜的PEG浓度和浸种时间均能不同程度的促进苦瓜种子的萌发,其中以20%PEG浸种18 h效果最好,表现为能显著提高苦瓜种子的发芽势、发芽率、简易活力指数,增强与种子萌发相关的α-淀粉酶和脱氢酶的活性,降低种子的膜脂过氧化程度。

响应面法优化苦瓜籽蛋白质提取工艺

以苦瓜籽为原料,采用紫外光谱和响应面法研究盐溶法提取苦瓜籽蛋白质的最佳工艺。以苦瓜籽蛋白质的提取率为指标,考察NaCl浓度、pH、提取时间对苦瓜籽蛋白质提取率的影响。在单因素实验的基础上,通过Box-Benhnken中心组合设计和响应面分析法,确定苦瓜籽蛋白质的最佳提取工艺。结果表明:在料液比为1:6,提取温度为4℃下,NaCl浓度1.3mol/L,pH8.8,提取时间3.6h,苦瓜籽蛋白质的提取率为23.80%,较优化前提高了3.24倍,同时建立了盐提蛋白质的二次多项数学模型,对苦瓜籽蛋白质的提取具有很好的预测作用。此外,通过凯氏定氮法确定苦瓜籽中蛋白质含量为32.13%。

苦瓜籽黄酮对油脂的抗氧化研究

用超声波辅助法提取苦瓜籽中总黄酮,应用响应面法优化了提取条件。结果表明,最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数72.22%,超声提取时间38.67 min,液料比为42.22 mL/g,此条件下黄酮提取率达到3.89%。油脂抗氧化实验表明,苦瓜籽黄酮对花生油和芝麻油均具有抗氧化作用(以过氧化值为例),对芝麻油的抗氧化活性优于BHA,对花生油的抗氧化活性比BHA稍差。

苦瓜籽中脂肪酸的分离鉴定与比较

用浸泡和回流两种不同的方法来提取苦瓜籽中的粗脂肪并比较两种方式对脂肪酸提取的影响.发现回流对脂肪酸的提取是更为有效的方式.将粗脂肪经过皂化、酯化得脂肪酸及脂肪酸甲酯;;用气相色谱分离分析脂肪酸及其甲酯.比较产物谱图发现在脂肪酸图谱上低沸点的脂肪酸含量较高;;与脂肪酸甲脂的图谱有较大差异性.色质联用分析得到各脂肪酸与其甲脂的分布情况.证实甲酯定量脂肪酸的做法有待改进.结果表明不同种类的苦瓜籽所含脂肪酸种类几乎一样;;都存在大量不饱和脂肪酸;;但含量有差异.

苦瓜籽粗多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性

目的:优化苦瓜籽粗多糖的提取工艺,并对苦瓜籽粗多糖进行体外抗氧化活性研究。方法:采用水提醇沉法提取苦瓜籽粗多糖,通过苯酚-硫酸法测定多糖含量,以多糖提取率为考察指标,考察提取温度、时间、料液比以及提取次数4个因素对苦瓜籽粗多糖提取率的影响。在单因素实验基础上,进行L9(34)正交实验设计,优化苦瓜籽粗多糖的提取工艺。检测苦瓜籽粗多糖对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除率及总还原能力。结果:温度是影响苦瓜籽粗多糖提取率的重要因素,确定了最佳提取工艺条件是提取温度为90℃,料液比为1∶30,提取时间为2.5 h,提取3次,苦瓜籽粗多糖的提取率为5.61%。苦瓜籽粗多糖对DPPH自由基和羟自由基的清除能力接近于维生素C,而对超氧阴离子自由基清除能力和总还原能力不及维生素C。结论:该优化工艺适用于苦瓜籽粗多糖的提取,高浓度苦瓜籽粗多糖具有较好的抗氧化活性。

苦瓜籽蛋白MAP30的聚乙二醇化学修饰及抗肿瘤活性研究

采用硫酸铵分级沉淀、SP-Sepharose FF离子交换层析和Blue Sepharose CL-6B亲和层析获得苦瓜蛋白MAP30;采用(mPEG)2-Lys-NHS修饰MAP30;对修饰后的MAP30-PEG结合物与MAP30的抗肿瘤活性进行了比较分析。结果发现:MAP30对多数肿瘤细胞株具有明显的抑制作用,而且抑制效果在一定范围内具有剂量和时效依赖关系。但是在相同条件下,MAP30对人正常胚肺二倍体细胞株WI-38的毒性极小。MAP30和MAP30-PEG结合物对小鼠黑色素瘤(B16)、人宫颈癌细胞(Hela)和人表皮癌细胞(A431)细胞均表现出抑制作用,且这种作用在一定范围内呈时效和量效依耐性。但在相同浓度下PEG-MAP30对小鼠黑色素瘤(B16)、人宫颈癌细胞(Hela)和人表皮癌细胞(A431)的抑制作用低于MAP30,约占65%～70%左右。

苦瓜籽活性成分的药理研究进展

苦瓜籽是葫芦科植物苦瓜的种子,来源广泛且安全有效,具有较高的药用价值。通过对近10年国内外研究苦瓜籽活性成分的药理作用现状进行综述,总结有效活性成分是苦瓜籽核糖体失活蛋白质及多肽、油脂、黄酮、皂苷和微量元素等,具有抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗氧化、减肥以及抗病毒真菌的活性,并指出了苦瓜籽在药品、功能性食品及保健品方面中的应用前景。

苦瓜籽油脂肪酸成分的GC-MS分析

利用索氏抽提法提取苦瓜籽油,对苦瓜籽油的碘值、皂化值、不皂化物、熔点等理化性质进行了测定,并用氢氧化钾-甲醇室温酯化法对苦瓜籽油甲酯化,通过GC-MS对其脂肪酸成分进行分析。结果表明,苦瓜籽脂肪含量(36.81%)和蛋白含量(43.05%)都较高,苦瓜籽油常温下呈蜡状白色固体,同时有特殊的刺鼻苦涩气味。熔点为53℃,不皂化物为0.9%,碘值(I)为131 g/100 g,皂化值(KOH)196 mg/g。苦瓜籽油中共鉴定出8种脂肪酸,其中硬脂酸(33.6%)、α-桐酸(42.3%)、β-桐酸(16.5%)、棕榈酸(1.8%)、油酸(2.3%)、亚油酸(2.9%)、花生酸(0.4%)和花生一烯酸(0.2%)。

苦瓜单瓜种子数与种皮颜色的遗传分析

以苦瓜自交系29和惠州大顶为亲本构建6个世代(P1、P2、F1、B1、B2、F2)群体,分别对苦瓜单瓜种子数和苦瓜种皮颜色进行遗传分析。结果表明,苦瓜单瓜种子数的遗传符合2对等显性主基因+加性-显性多基因混合遗传模型(E-6模型),由主基因和多基因共同控制,多基因显性效应较大,F1表现出超亲优势。苦瓜种皮颜色的黑色对棕黄色表现为1对基因控制的显性遗传。

苦瓜籽皂苷的提取工艺及抑菌活性

主要研究了苦瓜籽皂苷的提取工艺及抑菌活性。通过正交试验确定苦瓜籽皂苷的最佳工艺条件,即超声波功率为240W,超声波提取时间为40 min,乙醇浓度为85%,液料比为15,此条件下苦瓜籽皂苷提取率达到1.85%。苦瓜籽皂苷具有较好的抑菌活性,对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、黑曲霉和根霉的MIC为6.25%,对大肠杆菌的MIC为12.5%,对沙门氏菌和酿酒酵母的MIC为25%。

不同方法对苦瓜核糖体失活蛋白的PEG化学修饰后蛋白浓度测定的差异

目的探究PEG化学修饰对4种常用蛋白浓度测定方法的影响。方法采用福林-酚试剂法（Lowry法）、二喹啉甲酸法（BCA法）、考马斯亮蓝法（Bradford法）和紫外分光光度法（UV法）分别测定样品中α-苦瓜素和抗人类免疫缺陷病毒植物蛋白MAP30经PEG修饰前、后的蛋白含量;并用Lowry法和BCA法对低浓度游离PEG修饰前、后的样品蛋白含量进行测定。结果发现考马斯亮蓝不与样品发生颜色反应,PEG修饰后会使UV法测定值变大,Lowry法测定值略有变大,BCA法基本不受影响;低浓度的游离PEG对测定方法无影响,但高浓度的PEG会吸附Folin-酚,形成黄色絮状物。结论 PEG化学修饰对蛋白浓度测定方法影响最小的为BCA法,Lowry法最灵敏,Bradford法不适用;而PEG化学修饰会使UV法测定值增大20%~30%,可作为快速测定时的校准参考。

苦瓜籽脂肪酸的提取分离及分析应用

本文综述了苦瓜籽脂肪酸的提取分离及定性定量分析方法,其中含有的α-桐酸和β-桐酸等重要活性物质的生理功能及应用相关的研究进展,以期为扩大食品工业的油料来源和提升苦瓜的营养保健价值提供一定依据。

癞葡萄籽油脂肪酸组成的GC/MS分析

采用2-氨基-2-甲基丙醇(AMP)衍生化,GC/MS法分析癞葡萄籽油的脂肪酸组成。测定结果为:软脂酸1.65%,硬脂酸31.78%,油酸5.52%,亚油酸3.86%,十八碳共轭三烯酸55.13%,未定出成分2.07%。癞葡萄籽油的主要成分为十八碳脂肪酸,其中十八碳不饱和脂肪酸占64.51%。AMP衍生化GC/MS法可对不饱和脂肪酸双键的位置准确定位,将癞葡萄籽油中的3种共轭三烯酸的顺反异构体分开。

蚕豆、大巢菜籽及苦瓜籽饲料对草鱼生长、肌肉成分、组织生化指标和消化酶活性的影响

分别以常规配合饲料(配合饲料组)、浸泡蚕豆(浸泡蚕豆组)、含75%蚕豆(蚕豆饲料组)、60%大巢菜籽(巢菜籽饲料组)、60%苦瓜籽(苦瓜籽饲料组)的饲料饲喂体重为(59.0±0.6)g的草鱼(Ctenopharyngodon idella),养殖8周后,配合饲料的增重率显著高于其他各组(P<0.05),饲料系数显著低于其他各组(P<0.05);与浸泡蚕豆组相比,蚕豆饲料组的增重率提高56.9%,而巢菜籽饲料组、苦瓜籽饲料组的增重率则分别下降30.6%、21.2%(P<0.05);浸泡蚕豆组、蚕豆饲料组、巢菜籽饲料组、苦瓜籽饲料组的肌肉胶原蛋白含量较配合饲料组显著提高,而肌肉脂肪含量显著下降(P<0.05);苦瓜籽饲料组的肌肉总氨基酸(TAA)、鲜味氨基酸(DAA)含量显著高于配合饲料组和浸泡蚕豆组(P<0.05)。在生化指标方面,与配合饲料组相比,投喂蚕豆、巢菜籽饲料及浸泡蚕豆显著降低了肝胰脏超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),提高了肝胰脏丙二醛(MDA)含量和肌肉肌酸激酶(CK)活性(P<0.05),但蚕豆饲料组的肝胰脏丙二醛(MDA)含量低于浸泡蚕豆组(P<0.05);在消化酶方面,投饲蚕豆、巢菜籽、苦瓜籽饲料和浸泡蚕豆显著降低了前肠脂肪酶活性(P<0.05),提高了α-淀粉酶活性(P<0.05),蚕豆饲料组、巢菜籽饲料组及浸泡蚕豆组的碱性蛋白酶活性较对照组显著降低(P<0.05)。上述结果表明,饲喂以蚕豆、大巢菜籽、苦瓜籽为主要成分的配合饲料及浸泡蚕豆可改变草鱼肌肉组成,但也降低了草鱼生长性能;综合生长性能和肌肉组成,蚕豆饲料较巢菜籽饲料、苦瓜籽饲料和浸泡蚕豆在脆化草鱼生产养殖上更具有可行性。

CO_2超临界萃取法提取苦瓜籽油及其GC-MS分析

一种野生品种苦瓜的籽用索氏提取法提取苦瓜油,测得含油率为38.0%;苦瓜籽仁粉末在CO2超临界状态下,通过正交试验法对萃取压力、温度、时间和CO2流量等因素进行筛选,确定苦瓜籽油萃取工艺参数为萃取压力37 MPa、萃取温度40℃、CO2流量40 L/h、萃取时间为2 h时苦瓜籽油得率为97.2%;超临界状态下萃取的苦瓜籽油经GC-MS分析结果表明,苦瓜籽油多种不饱和脂肪酸含量达79.60%,高含量多不饱和脂肪酸的存在使其具有生物活性产品的开发价值。

西瓜枯萎病病原菌分离纯化及生物防治

目的:分离纯化并鉴定西瓜枯萎病病原菌,探索苦瓜籽蛋白粗提液对病原菌的防治作用。方法:利用平板划线法从西瓜枯萎病株中分离出枯萎病病原菌,采用病原菌孢子液对正常的西瓜幼苗进行盆栽转染,并观察苦瓜籽蛋白粗提液对西瓜枯萎病病原菌的抑制情况。结果:经鉴定西瓜枯萎病病原菌为尖孢镰刀菌。枯萎病菌孢子悬液可快速导致具有1~2片真叶的西瓜幼苗快速患上枯萎病。苦瓜籽蛋白粗提液浸泡的打孔滤纸出现抑菌圈。结论:西瓜枯萎病原菌为一种尖孢镰刀菌,苦瓜籽蛋白粗提液对西瓜枯萎病病原菌具有非常有效的抑菌作用。

α桐酸对舌鳞状细胞癌CAL-27细胞的体外抑制作用

目的:探讨苦瓜籽油中的α桐酸(α-eleostearic acid,α-ESA)对舌鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖、迁移、凋亡的影响。方法:将0、70、80、90、100、110、120μmol/L的α-ESA培养CAL-27细胞后,用CCK-8法和流式细胞术分别检测加药24、48、72 h后细胞增殖抑制率和加药48 h后细胞凋亡率。再分别以0、80、100μmol/L的α-ESA培养CAL-27细胞不同时间后,用细胞划痕实验检测加药24 h后细胞的迁移能力,Hoechst 33258染色在荧光显微镜下观察加药48 h后凋亡细胞形态。采用SPSS 21.0软件包对实验数据进行统计学分析。结果:α-ESA对CAL-27细胞的增殖抑制作用呈明显时间和浓度依赖性(P<0.05)。作用24、48、72 h后,半数抑制浓度(IC50)逐渐降低,分别为(123.48±1.00)、(80.22±0.03)和(69.27±80.34)μmol/L。流式细胞检测结果显示,细胞凋亡率随着α-ESA浓度的增加而大幅增高(P<0.05)。培养24 h后,加入80、100μmol/L的α-ESA的细胞划痕愈合率分别为(40.08±2.19)%、(22.06±2.04)%,显著低于对照组(74.74±2.17)%(P<0.01)。荧光显微镜下观察到致密浓染或碎块状亮蓝色荧光的细胞凋亡现象。结论:α-ESA能够抑制CAL-27细胞的体外增殖及迁移能力,并可诱导细胞凋亡,从而产生一定的抗肿瘤生长作用。

苦瓜籽中一种抗胰蛋白肽的分离及抗真菌作用观察

利用凝胶过滤层析Sephadex G-75、强阳离子交换色谱SP-650M,从苦瓜籽中分离纯化出一种活性多肽.该多肽在Tricine-SDS-PAGE上显示为单一的谱带,分子量约为6.8 kDa.在经还原剂二硫苏糖醇(DTT)处理后的电泳结果表明该多肽不含有分子间的二硫键.此多肽是一种胰蛋白酶抑制剂,同时具有抗植物致病菌活性,是一种具有双功能作用的多肽.