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应用多重PCR在肠杆菌科细菌中检测blaTEM、blaSHV、blaOXA-1基因 被引量:3
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作者 李虹玲 刘文恩 +3 位作者 张运丽 陈腊梅 梁湘辉 吴清阳 《中国感染控制杂志》 CAS 2008年第6期377-380,共4页
目的应用多重聚合酶链反应(PCR)法在肠杆菌科细菌中检测blaTEM、blaSHV、blaOXA-1基因。方法收集2004年10月—2005年7月湖南地区中南大学3所附属医院临床标本分离的多重耐药肠杆菌科细菌171株,以美国临床实验室标准化研究所(CLSI)规定... 目的应用多重聚合酶链反应(PCR)法在肠杆菌科细菌中检测blaTEM、blaSHV、blaOXA-1基因。方法收集2004年10月—2005年7月湖南地区中南大学3所附属医院临床标本分离的多重耐药肠杆菌科细菌171株,以美国临床实验室标准化研究所(CLSI)规定的方法进行超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型确证试验,多重PCR进一步进行blaTEM、blaSHV、blaOXA-1三种耐药基因的检测。结果171株多重耐药的肠杆菌科细菌中,142株(83.04%)ESBLs表型检测阳性,经多重PCR扩增,105株获得阳性结果。根据扩增片段大小判断:检出携带blaTEM菌株85株,携带blaSHV菌株26株,携带blaOXA-1菌株10株,其中15株菌同时携带多种耐药基因。结论多重PCR可以快速、准确地检测出ESBLs表型阳性肠杆菌科细菌是否携带blaTEM、blaSHV、blaOXA-1基因。 展开更多
关键词 多重聚合酶链反应 肠杆菌科 blatem blaSHV blaOXA-1 耐药基因 抗药性 微生物
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产β-内酰胺酶伤寒杆菌与痢疾杆菌blaTEM耐药基因研究 被引量:2
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作者 周东辉 黄丽琴 张淑华 《大理学院学报(综合版)》 CAS 2011年第2期22-23,共2页
目的:研究新余市产β-内酰胺酶伤寒杆菌与痢疾杆菌blaTEM-1D型耐药基因流行特征。方法:收集新余新钢中心医院、新余市人民医院、新余市中医院、新余市妇幼保健院2008年1月—2010年6月分离出的伤寒杆菌产酶株6株和痢疾杆菌产酶株13株共19... 目的:研究新余市产β-内酰胺酶伤寒杆菌与痢疾杆菌blaTEM-1D型耐药基因流行特征。方法:收集新余新钢中心医院、新余市人民医院、新余市中医院、新余市妇幼保健院2008年1月—2010年6月分离出的伤寒杆菌产酶株6株和痢疾杆菌产酶株13株共19株,用头孢哨噻吩滤纸片法做β-内酰胺酶的定性检测,确定为产酶株后,采用PCR技术扩增质粒blaTEM-1D耐药基因,用Mark标记量出扩增子的大小(bp),统计blaTEM-1D耐药基因阳性率。结果:伤寒杆菌、痢疾杆菌产酶株blaTEM-1D耐药基因阳性率分别为66.7%(4/6)、76.9%(10/13)。结论:blaTEM-1D型耐药基因在本地区各家医院间存在水平传播和医院内垂直传播。 展开更多
关键词 伤寒杆菌 痢疾杆菌 Β-内酰胺酶 blatem-1D型耐药基因1
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细菌中blaTEM耐药基因研究现状及展望
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作者 肖林林 龙雨霖 董庆利 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期918-924,共7页
β-内酰胺类抗生素是临床上广泛应用的一类抗生素,其抗菌机制是通过抑制细菌的细胞壁合成来达到杀菌的效果。然而,由于β-内酰胺类耐药基因在菌株间的广泛传播,导致β-内酰胺类抗生素的使用受到了极大的挑战。其中,blaTEM耐药基因是β-... β-内酰胺类抗生素是临床上广泛应用的一类抗生素,其抗菌机制是通过抑制细菌的细胞壁合成来达到杀菌的效果。然而,由于β-内酰胺类耐药基因在菌株间的广泛传播,导致β-内酰胺类抗生素的使用受到了极大的挑战。其中,blaTEM耐药基因是β-内酰胺酶的主要编码基因之一,迄今已鉴定出243个blaTEM亚型,其在抗生素耐药性研究中具有极其重要的地位。本文将从blaTEM基因的发现、结构及启动子,blaTEM基因的分布和传播,blaTEM基因的耐药机制以及研究现状进行综述,旨在为细菌中β-内酰胺类耐药基因亚型的研究提供借鉴。 展开更多
关键词 blatem Β-内酰胺酶 耐药机制 启动子
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一株多重耐药大肠杆菌全基因组测序及其耐药性分析
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作者 李海利 徐引弟 +3 位作者 王治方 朱文豪 张立宪 马春江 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期113-121,共9页
为了解大肠杆菌携带的粘菌素耐药基因并筛选敏感药物,解决多重耐药和动物临床无药可选的困局,采用16S rRNA菌种全基因组测序,PCR筛查mcr-4、mcr-5、blaTEM和AmpC酶耐药基因,应用BLAST和MEGA软件进行生物信息学和系统进化树分析,并对该... 为了解大肠杆菌携带的粘菌素耐药基因并筛选敏感药物,解决多重耐药和动物临床无药可选的困局,采用16S rRNA菌种全基因组测序,PCR筛查mcr-4、mcr-5、blaTEM和AmpC酶耐药基因,应用BLAST和MEGA软件进行生物信息学和系统进化树分析,并对该菌株进行了78种抗生素抗菌药物敏感性测试及4种天然植物提取物(黄藤素、黄连素、黄芩苷和博落回)的抑菌、杀菌效果试验。结果表明,从2021年(1—12月)和2022年(1—6月)猪临床腹泻病例肠道中分离鉴定的145株大肠埃希菌(Escherichia coli,E.coli)中,鉴定出1株同时携带粘菌素耐药基因(mcr-4,mcr-5)和β内酰胺酶blaTEM、AmpC基因的猪源大肠埃希氏菌临床菌株HN2149。78种抗生素药敏试验结果显示,HN2149菌株对头孢吡肟、头孢地嗪、磷霉素、头孢克肟、头孢唑林、头孢哌酮、美洛培南、头孢西丁、头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、替卡西林/克拉维酸、头孢哌酮/舒巴坦、氨曲南、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟/克拉维酸、头孢唑肟、头孢美唑、头孢他啶/克拉维酸和头孢他美敏感,对其余57种抗菌药物表现为耐药。4种植物提取物的药敏结果显示,博落回对菌株HN2149的抑菌、杀菌效果较好,其余3种提取物均对该菌株无抑菌和杀菌效果。以上研究结果为猪大肠杆菌病的防控提供参考。 展开更多
关键词 碳青霉烯酶 Β-内酰胺酶 mcr-4 mcr-5 blatem AMPC 大肠埃希氏菌 细菌耐药
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中国部分地区淋球菌耐药监测点产青霉素酶淋球菌及其 blaTEM-135突变体的流行调查 被引量:4
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作者 陈绍椿 尹跃平 +9 位作者 戴秀芹 郑和平 顾伟鸣 郑钟洁 吴兴中 曹文苓 胡丽华 朱邦勇 孙厚华 陈祥生 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期312-316,共5页
目的:了解中国不同地区淋球菌耐药监测点产青霉素酶淋球菌(PPNG)的比例及 blaTEm-135突变体在 PPNG 中的分布,比较 PPNG 及 blaTEm-135突变体淋球菌多抗原测序分型(NG-MAST)的型别分布,了解不同地区 PPNG blaTEm-135突变体的差... 目的:了解中国不同地区淋球菌耐药监测点产青霉素酶淋球菌(PPNG)的比例及 blaTEm-135突变体在 PPNG 中的分布,比较 PPNG 及 blaTEm-135突变体淋球菌多抗原测序分型(NG-MAST)的型别分布,了解不同地区 PPNG blaTEm-135突变体的差异与联系。方法2012年在江苏、上海、浙江、天津、广东、广西6个淋球菌耐药监测点共收集572株淋球菌,经过分离纯化及鉴定后,采用头孢噻吩纸片法测定 PPNG;菌株培养后利用试剂盒提取 DNA,通过错配扩增突变分析 PCR(MAMA PCR)鉴定 blaTEm-135突变体,采用 NG-MAST 进行分型研究。结果572株淋球菌中 PPNG 总阳性率为38.1%(218/572),PPNG 中相应 blaTEm-135突变体的总比例为52.3%(114/218)。监测点中 PPNG 阳性率从高至低分别为:浙江(45/87,51.7%)、上海(36/79,45.6%)、广东(78/205,38.0%)、广西(12/32,37.5%)、江苏(24/77,31.2%)、天津(23/92,25%);PPNG 中相应 blaTEm-135突变体的阳性率从高至低分别为:浙江(31/45,68.9%)、江苏(14/24,58.3%)、广东(39/78,50.0%)、上海(17/36,47.2%)、天津(9/23,39.1%)、广西(4/12,33.3%)。 NG-MAST 分型研究显示,blaTEm-135突变体中流行菌株型别有 ST2318、ST1768、ST1866、ST1053、ST8726等,其中 ST1768、ST1053和 ST8726与 blaTEm-135突变体有较强的对应关系。天津 PPNG 菌株及 blaTEm-135突变体 ST 分布与其他各监测点有显著差异,江浙沪地区菌株 ST 有一定联系。结论中国淋球菌耐药监测点 PPNG 及相应 blaTEm-135突变体阳性率处于较高水平,不同地区间 PPNG 及相应 blaTEm-135突变体阳性菌株 ST 型别分布差异有统计学意义。 展开更多
关键词 奈瑟球菌 淋病 Β内酰胺酶类 流行病学 blatem-135突变体 NG—MAST
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携带新德里金属β-内酰胺酶的猪源大肠杆菌全基因组测序及植物提取物药物筛选
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作者 李海利 张青娴 +5 位作者 朱文豪 游一 王治方 郎利敏 张立宪 王克领 《中国兽药杂志》 2023年第6期23-34,共12页
为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物。采用16S rRNA菌种鉴定,PCR筛查菌耐药基因,bla NDM、bla TEM和AmpC酶耐药基因的确认,全基因组测序,BLAST和MEGA软... 为了解大肠杆菌携带新德里金属β-内酰胺酶(New Delhi metallo-β-lactamase,NDM)NDM耐药基因情况及筛选敏感植物提取物。采用16S rRNA菌种鉴定,PCR筛查菌耐药基因,bla NDM、bla TEM和AmpC酶耐药基因的确认,全基因组测序,BLAST和MEGA软件对序列进行生物信息学分析、系统进化树分析、NDM亚型鉴定和6种植物提取物药敏药物筛选研究。结果表明,从2021年(1-12月)临床猪腹泻病例中分离鉴定的91株大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)中鉴定出1株同时携带新德里金属β-内酰胺酶NDM4、NDM5和β内酰胺酶blaTEM、AmpC酶的大肠杆菌(HN2187)。对其进行11种抗生素和6种植物提取物药物敏感性测试,结果显示HN2187菌株对其均耐药。而HN2187对血根碱、贯叶连翘提取物敏感,对黄芩、姜黄素、千里光和大蒜提取物耐药。HN2187产B类酶,携带NDM4、NDM5、bla TEM、AmpC酶耐药基因,其中bla NDM-4位于质粒pNDM4-HN2187(Plasmid B)上,bla NDM-5位于质粒pNDM5-HN2187(Plasmid A)上,bla TEM1位于质粒pTEM1-HN2187(Plasmid B)上,AmpC酶耐药基因位于染色体上,分别介导bla NDM-4、bla NDM-5、bla TEM和AmpC耐药基因,是耐药菌传播的重要载体。以上研究表明,携带NDM4和NDM5的多重耐药菌已在养殖场传播和流行,应加强该类耐药基因的流行调查、监测和新药物研究,为临床超级细菌和多重耐药菌感染的流行和防治提供理论基础。 展开更多
关键词 碳青霉烯酶 Β内酰胺酶 新德里金属β-内酰胺酶 NDM5 NDM4 blatem AMPC 大肠埃希氏菌 细菌耐药
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TEM-1型β-内酰胺酶及CarO蛋白介导的耐舒巴坦鲍曼不动杆菌临床株耐药机制研究 被引量:3
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作者 李楠 张豪杰 +5 位作者 王悦 祁萌 郭文学 王哲 祁伟 李国琪 《天津医药》 CAS 北大核心 2018年第3期246-250,共5页
目的研究TEM-1型β-内酰胺酶及Car O蛋白介导的鲍曼不动杆菌临床株对舒巴坦的耐药机制。方法将24株非重复鲍曼不动杆菌临床株通过琼脂稀释法分为舒巴坦非敏感组(18株)和敏感组(6株),用纸片扩散法(K-B)行药敏试验,PCR扩增bla_(TEM-1)和ca... 目的研究TEM-1型β-内酰胺酶及Car O蛋白介导的鲍曼不动杆菌临床株对舒巴坦的耐药机制。方法将24株非重复鲍曼不动杆菌临床株通过琼脂稀释法分为舒巴坦非敏感组(18株)和敏感组(6株),用纸片扩散法(K-B)行药敏试验,PCR扩增bla_(TEM-1)和car O基因,选取4株bla_(TEM-1)阳性菌株(A3、A5、1327、C1),对其扩增产物测序,BLAST软件分析;应用实时荧光定量RT-PCR技术检测2组菌株bla_(TEM-1)和car O基因m RNA转录情况。结果敏感组临床株对美罗培南、亚胺培南、头孢哌酮、环丙沙星、庆大霉素、氨苄西林耐药率分别为1/6、2/6、3/6、1/6、5/6、5/6;非敏感组分别为6/18、10/18、18/18、18/18、18/18。敏感组未检出bla_(TEM-1),非敏感组中16株临床株扩增出bla_(TEM-1);24株临床菌株全部扩增出car O基因。测序显示4株临床株bla_(TEM-1)基因均未出现有义突变;A3、A5、1327启动序列为P4,C1为P3。BlaTEM-1基因阳性菌株m RNA相对表达量与其对舒巴坦MIC值呈正相关(rs=0.551,P=0.027);car O基因m RNA相对表达在敏感组和非敏感组中无差异。结论临床分离鲍曼不动杆菌受试菌株耐药严重,其对舒巴坦的耐药机制与TEM-1型β-内酰胺酶高表达有关,而bla_(TEM-1)基因启动子调控可能是TEM-1型β-内酰胺酶高表达的原因之一。 展开更多
关键词 鲍氏不动杆菌 Β内酰胺酶类 微生物敏感性试验 carO基因 blatem-1基因 TEM-1型β-内酰胺酶
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Relationship of multidrug-resistant gene and extended-spectrum carbapenem-resistance in Staphylococcus aureus
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作者 YUAN LI YONGHYUN LEE +1 位作者 YIELHEA SEO YOUJIN HWANG 《BIOCELL》 SCIE 2019年第4期263-269,共7页
The aim of this study was to determine the relationship between phenotypic antimicrobial susceptibility patterns and extended-spectrum,carbapenem-resistance genes.A total of 109 clinical Staphilococcus aureus strains ... The aim of this study was to determine the relationship between phenotypic antimicrobial susceptibility patterns and extended-spectrum,carbapenem-resistance genes.A total of 109 clinical Staphilococcus aureus strains were subjected to 19 antimicrobial susceptibility tests.Resistance to methicillin(mecA),penicillin(blaTEM),and tetracycline(tetM)was detected.We compared the presence of the blaTEM genes with extended-spectrum,carbapenem-related genes and identified the types of SCCmec genes.Of 109 clinical S.aureus strains,62(56.88%)had methicillin resistance and 60 strains carried mecA.The prevalence of blaTEM and tetM genes was 81.65%and 37.61%,respectively.The most predominant SCCmec type was SCCmec type Ⅱ 28/60(46.67%),in 60 mecA-positive methicillin-resistant S.aureus(MRSA)isolates.The SCCmec prevalence rates were type ⅣA 30.00%(18/60),type Ⅳb 8.33%(5/60),type Ⅳd 6.67%(4/60),and non-typable 8.33%(5/60).Sixty of the 109(55.05%)MRSA isolates were positive for extended-spectrum carbapenems(31/60)(51.67%),cephalosporins 40/60(66.67%)and carbapenems 31/60(51.67%).The predominant SCCmec type II demonstrated more carbapenem-resistance than the ⅣA,Ⅳb and Ⅳd types. 展开更多
关键词 MRSA blatem BlaNDM CCmec typeⅡ Type IVA Extended-spectrum carbapenems
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鸡源大肠杆菌TEM-57型β-内酰胺酶基因的原核表达及酶特性 被引量:3
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作者 吴华 刘保光 +3 位作者 潘玉善 胡功政 苑丽 刘建华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期32-37,共6页
对该临床菌株进行接合试验,采用PCR扩增获得blaTEM-57基因片段,定向克隆入表达载体pET-28a构建重组质粒,经酶切和DNA测序鉴定后进行诱导表达,用双紫外分光光度仪测定表达蛋白的底物水解特性和抑制剂的抑酶特性。结果显示,耐药质粒成功... 对该临床菌株进行接合试验,采用PCR扩增获得blaTEM-57基因片段,定向克隆入表达载体pET-28a构建重组质粒,经酶切和DNA测序鉴定后进行诱导表达,用双紫外分光光度仪测定表达蛋白的底物水解特性和抑制剂的抑酶特性。结果显示,耐药质粒成功从供体菌接合转移到大肠杆菌C600,接合子对青霉素类及氨基糖苷类药物耐药。PCR扩增产物电泳出现blaTEM-57目的条带。重组质粒经EcoRⅠ、XholⅠ双酶切及测序鉴定后,显示pET-28α/TEM-57原核表达载体构建成功。原核表达的最优条件为IPTG浓度0.8mmol/L、温度37℃、诱导时间4h。blaTEM-57能水解氨苄西林、阿莫西林、头孢氨苄、头孢噻呋钠、头孢曲松钠、头孢噻肟钠及头孢哌酮,对头孢氨苄的Km最小为2.4,对头孢噻呋钠的Km最大为121.5;抑制剂舒巴坦钠和他唑巴坦对blaTEM-57水解抗生素有不同程度的抑制作用。pET-28α/TEM-57重组质粒得到成功构建和诱导表达,为进一步研究酶的其他特性及制备特异性的单克隆抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 blatem-57型β-内酰胺酶 克隆 原核表达 酶特性
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散发肠道腹泻病人中副溶血弧菌表型及基因型特征分析 被引量:2
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作者 吴琪 邓志爱 +3 位作者 张欣强 张颖 黄芳 曾雅 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第8期1144-1147,共4页
目的分析广州市海珠区散发腹泻病人中副溶血弧菌临床分离株的表型及基因型特征,对缺乏聚集性信息的病例开展实验室分析。方法进行表型鉴定,同时进行毒力基因分析及PFGE分子分型。结果广州市海珠区腹泻病人中存在两种血清型:O3:K6(90.9%)... 目的分析广州市海珠区散发腹泻病人中副溶血弧菌临床分离株的表型及基因型特征,对缺乏聚集性信息的病例开展实验室分析。方法进行表型鉴定,同时进行毒力基因分析及PFGE分子分型。结果广州市海珠区腹泻病人中存在两种血清型:O3:K6(90.9%)和O1:KUT(9.09%,尿酶阳性);所有菌株至少对8种抗生素敏感,对氨苄西林耐药;毒力基因检测:tlh+,tdh+,trh-(81.81%),tlh+,tdh+,trh+(9.09%),tlh+,tdh-,trh-(9.09%);11株均不携带blaTEM基因;分为4种PFGE型别,分属于3个克隆群。结论海珠区腹泻病人中潜在流行的血清型是O3:K6,主要携带tdh基因,少数携带trh基因,PFGE图谱显示,该区域散发腹泻病人中副溶血弧菌有63.6%来自同一克隆起源。 展开更多
关键词 副溶血弧菌 毒力基因 blatem基因 药敏试验 脉冲场凝胶电泳
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