苦蒿素改善新生大鼠急性肺损伤的作用机制

目的分析苦蒿素改善急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的机制。方法60只新生大鼠随机等分为假手术组、模型组、苦蒿素低、中、高剂量组和地塞米松组。血氧分压(PaO_(2))和肺干湿重比(W/D)评估肺水肿;HE染色检测肺组织病理损伤;ELISA检测大鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中氧化应激和炎性水平;蛋白质印迹法检测大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1 protein,HMGB1)/核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信号通路相关蛋白表达。结果与模型组相比,苦蒿素高剂量组PaO_(2)明显上升,W/D和肺损伤评分、BALF炎症和氧化应激水平、肺组织HMGB1、TLR4和p-NF-κB P65/NF-κB P65表达明显下降(P<0.05)。结论苦蒿素通过提高抗氧化抗炎活性及阻断HMGB1/NF-κB信号通路改善ALI。

金龙胆草化学成分及其抗溃疡活性研究(Ⅰ)

目的研究金龙胆草Conyza blinii的化学成分及其抗溃疡活性。方法采用溶剂提取、重结晶和硅胶、聚酰胺柱色谱方法分离纯化，根据氢谱、碳谱、质谱以及与对照品共薄层色谱鉴定化合物的结构。用幽门结扎大鼠模型进行抗溃疡活性筛选。结果从金龙胆草的乙醇提取物中分离鉴定了8个化合物：5，8，3’，4’-四羟基-7-甲氧基黄酮（Ⅰ）、5，8，4’-三羟基-7，3＇-二甲氧基黄酮（Ⅰ）、β-谷甾醇（Ⅲ）、菠甾醇（Ⅳ）、正二十六烷酸（Ⅴ）、5，7-二羟基-3，3’，4＇-三甲氧基黄酮（Ⅵ）、5，7-二羟基-3，8，4’-三甲氧基黄酮（Ⅵ）和苦蒿素（Ⅶ）。苦蒿素能明显减少模型大鼠胃溃疡面积，明显减少胃黏膜组织中的MDA的水平。结论化合物Ⅰ～Ⅲ和Ⅴ～Ⅵ为首次从该植物中分离得到。苦蒿素对幽门结扎大鼠胃溃疡的形成有明显抑制作用，其可能作用机制与抑制胃黏膜组织中MDA的生成有关。

藏药十味豆蔻丸的质量标准研究

目的:建立与完善十味豆蔻丸的质量标准。方法:用显微镜检测十味豆蔻丸处方中的光明盐;采用薄层色谱法鉴别处方中的荜茇;采用HPLC法测定处方中乔松素、桤木酮、胡椒碱等的含量。流动相为甲醇-水,选用梯度洗脱;流速为1mL·min-1,检测波长为300nm,柱温为40℃。结果:成药鉴别与对照品显相同颜色的荧光斑点,阴性无干扰。十味豆蔻丸中山姜素0.138,4~0.692mg范围内呈良好线性关系(r=0.999,9),平均回收率为99.02%,RSD%=0.61%;乔松素在0.110,4~0.552mg范围内呈良好线性关系(r=0.999),平均回收率为99.67%,RSD%=0.97%;小豆蔻明在0.098,4~0.492mg范围内呈良好线性关系(r=0.999,9),平均回收率为98.88%;RSD%=0.68%;桤木酮在0.180,8~0.904mg范围内呈良好线性关系(r=0.999,9),平均回收率为99.72%,RSD%=0.48%。胡椒碱在0.201,6~1.008mg范围内呈良好线性关系(r=0.999,8),平均回收率为99.68%,RSD%=0.45%。结论:该方法专属性强、灵敏度高、操作简便,可用于十味豆蔻丸的定性及定量分析,为其质量标准的研究与提高提供了实验基础。

金龙胆草组培快繁体系的建立及苦蒿素含量的测定

为建立快速高效的金龙胆草Conyza blinii H.Lév.组培快繁体系,考察不同生长时期组培样叶片中苦蒿素含量,合理利用并保护金龙胆草药材种质资源,本研究筛选野生金龙胆草幼嫩叶片为外植体,以MS和1/2 MS为基本培养基,探究组织培养各个阶段的最适培养条件。在此基础上,采用HPLC法测定不同生长时期组培样同一叶位叶片中苦蒿素的含量。结果表明,诱导愈伤组织的最适培养基配方为MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.1 mg/L,诱导不定芽的最佳培养基配方为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,诱导不定根的最佳培养基配方为1/2 MS+GA30.1 mg/L+IBA 0.1 mg/L。炼苗后移栽的最佳基质是腐殖质和珍珠岩2:1混合。以高效液相色谱仪对不同生长时期金龙胆草组培样叶片鲜样苦蒿素含量进行分析,结果表明移栽3个月>5个月>7个月>1个月>炼苗14 d>未炼苗。本试验建立了稳定高效的金龙胆草组培快繁体系,并成功获得再生植株,为丰富金龙胆草种资质源提供了理论依据。

HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中苦蒿素质量浓度及药动学研究

目的:建立高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定大鼠血浆中苦蒿素质量浓度,并进行大鼠体内的的初步药动学研究。方法:大鼠血浆经甲醇沉淀蛋白处理后,选用Phenomenex C18色谱柱(100 mm×2.0 mm,5μm),以水-甲醇为流动相梯度洗脱进行分离,采用电喷雾离子源(ESI),在负离子扫描下,采用多反应监测模式(MRM)对苦蒿素及内标化合物进行检测。结果:苦蒿素血浆标准曲线在50~5000ng·mL-1范围内线性良好;准确度在95.76%~110.9%之间,批内、批间精密度相对标准偏差(RSD)均<9.98%,满足分析要求。苦蒿素和内标的基质效应及各项稳定性考察结果均符合分析要求。结论:建立的HPLC-MS/MS法具有分析时间短、准确度高、灵敏度高、专属性强、稳定性好、基质效应小的特点,适用于大鼠血浆中苦蒿素药动学研究。

金龙胆草产苦蒿素内生真菌的筛选鉴定

金龙胆草是中国西南地区传统道地药材,含有特征化合物苦蒿素,但由于药材资源稀缺,该方面的研究一直停滞不前。本研究从金龙胆草内生真菌出发,试图通过研究金龙胆草内生真菌来发现是否具有产苦蒿素的内生真菌。本研究从野生金龙胆草中分离得到22株内生真菌,其中叶中分离得到12株真菌,茎中分离得到10株内生真菌。将各株真菌发酵后,将发酵液萃取浓缩后,利用苦蒿素作为标品,利用HPLC技术检测各发酵液中苦蒿素的产生情况,成功筛选到菌株CBL12具有产苦蒿素的能力,经形态学鉴定和分子生物学ITS序列分析将菌株CBL12鉴定为Xylariales。本研究分离得到产苦蒿素的内生真菌,将极大的促进苦蒿素研究与开发,为金龙胆草中药现代化发展提供一定的理论基础。

金龙胆草研究进展

金龙胆草Conyza blinii为我国川滇黔地区的一种道地中药材,具有清热解毒、止咳平喘的功效,主要用于治疗慢性支气管炎引起的咳嗽及其他炎症。整理金龙胆草国内外文献报道,对其资源分布、化学成分、药理作用、遗传多样性、次生代谢物合成途径及应用等方面的研究进展进行综述,为该药材的资源开发利用及新药产品的研发提供参考。