甜味剂乙酰磺胺酸钾的致突变性评价

目的:评价甜味剂乙酰磺胺酸钾的致突变性。方法:细菌回复突变试验(Ames试验)计数各组回复突变菌落数,小鼠精原细胞染色体畸变试验观察各组染色体畸变类型并计算畸变率,小鼠骨髓红细胞微核试验计数各组红细胞微核发生率。结果:Ames试验显示,加或不加S9时,受试物各剂量组、溶剂对照组与空白对照组比较,两次检测各菌株的回复突变数均小于空白对照组2倍;小鼠精原细胞染色体畸变试验显示,受试物各剂量组精原细胞染色体畸变率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);小鼠骨髓红细胞微核试验显示,受试物各剂量组微核细胞率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:乙酰磺胺酸钾未见明显的致突变性。

荚膜甲基球菌蛋白遗传毒性研究和被动皮肤过敏试验

荚膜甲基球菌蛋白(Methylococcus capsulatus bacteria meal,MBM)拟开发为新饲料原料。本研究旨在通过遗传毒性研究和被动过敏试验评价其毒理学安全性,为其未来的应用奠定基础。本研究包括四个试验:鼠伤寒沙门氏菌回复突变(Ames)试验采用平板掺入法,每皿剂量在0.625~10.000 mg范围内,采用TA97、TA98、TA100、TA102和TA1535五种菌株进行回复突变试验;小鼠骨髓细胞微核试验和精子畸形试验均设2500、5000、10000 mg/kg三个MBM剂量组,微核试验采用30 h两次给药法,精子畸形试验连续染毒5 d,分别在既定的时间采样制片;大鼠被动皮肤过敏试验设250、500、1000 mg/kg三个MBM剂量组,制备抗血清后背部皮内注射致敏,24 h和/或48 h后进行抗原激发,考察蓝色反应斑直径。所有试验均根据要求设置阴性、阳性对照组。结果表明:在有或无代谢活化系统结果(S9)时,MBM的鼠伤寒沙门氏菌回复突变(Ames)试验结果均为阴性;小鼠骨髓细胞微核和精子畸形试验结果均为阴性;大鼠皮肤被动过敏试验结果为阴性。说明在设置的试验系统和剂量下MBM未显示遗传毒性和潜在的致敏性。

鱼油软胶囊的毒理安全性评价

为评价鱼油软胶囊的毒理安全性,对鱼油软胶囊进行小鼠急性毒性试验、遗传毒性试验和30天喂养试验,遗传毒性试验包括鼠伤寒沙门氏菌/哺乳动物微粒体酶试验、骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验。小鼠急性毒性试验结果显示,最大耐受量不低于53.7 g/kg;遗传毒性试验结果显示,在5.0 g/皿及以下剂量时均未出现有直接或者间接的致突变作用,在10.0 g/kg及以下剂量,骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验结果均为阴性;在3.333 g/kg及以下剂量,30天喂养试验大鼠未出现与鱼油软胶囊相关毒性作用。表明鱼油软胶囊基本无毒性。

微核直径测试作为非整倍体诱发剂的分析手段

以小鼠骨髓红细胞微核直径测试,比较了秋水仙素(COL)与昆明山海棠(THH)、对苯二酚(HQ)在哺乳动物体细胞中的非整倍体诱发效应,丝裂霉素C(MMC)作为多功能染色体断裂剂引入实验,为诱发非整倍体的阴性对照,结果发现,COL组,71％的微核直径(d)大于或等于所在细胞直径(D)的五分之一(d≥D/5);THH诱发微核中,54％的微核d≥D/5;HQ及MMC组,分别有47％及14％的微核相对直径达此阈限,暗示THH及HQ具有类似COL的某种非整倍体诱发效应。微核直径测试可作为非整倍体诱发剂检测的辅助手段。

千里光提取物的镇痛作用及致突变性分析

将千里光全草粉用体积分数70%乙醇浸泡,经超声波-微波处理,用乙醚萃取脱色,冷冻真空干燥,制备千里光提取物冻干粉(SCE)。以对乙酰氨基酚为对照,采用醋酸扭体法和热板法研究不同剂量SCE的镇痛作用;采用骨髓微核试验研究不同剂量SCE的致突变作用。结果发现,122.72 m g/kg SCE具有显著的镇痛作用,而130.90 m g/kg SCE对雌雄小白鼠均不具有致突变作用。说明122.72-130.90 m g/kg SCE能同时满足无致突变作用和显著镇痛作用的双重条件。

麦麸多肽的毒性研究及安全性评价

目的:探讨麦麸多肽的毒性作用。方法:应用急性毒性试验、Ames试验、骨髓细胞微核试验、睾丸精母细胞染色体畸变试验、彗星试验对麦麸多肽进行毒性研究。结果:麦麸多肽灌胃,对小鼠LD50>20g/kg,属无毒级。Ames试验中TA97、TA98、TA100和TA102的4个标准菌株无论代谢活化与否,皆为阴性结果;骨髓细胞微核试验、睾丸精母细胞染色体畸变试验、彗星试验2.5、5.0、10.0g/kg bw3个剂量组与阴性对照组比较差别无统计学意义。因此,Ames试验、骨髓细胞微核试验、睾丸精母细胞染色体畸变试验、彗星试验结果均为阴性。结论:麦麸多肽是一种无毒物质。

麦冬水煎剂的遗传毒性研究

目的采用小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)和小鼠骨髓微核试验(MNT)研究麦冬水煎剂的遗传毒性。方法在MLA中,3.36、6.73、13.45、26.90mg(原药材)/mL4个浓度组在非代谢活化(-S9)和代谢活化(+S9)条件下与L5178Y细胞作用3h,表达2d,制备突变频率平板并培养12d,计数大、小细胞集落的孔数,计算总突变率(MF)和小集落突变百分率(SC%);在MNT中,每组10只ICR小鼠,雌雄各半,13.35、6.68、3.34g(原药材)/kg3个剂量组间隔24h灌胃给药2次,制作骨髓涂片,计数每只小鼠2000个嗜多染红细胞中含微核的嗜多染红细胞数,计算每组动物嗜多染红细胞微核率的平均值。结果MLA4个浓度组在+/-S9条件下诱发的MF呈现剂量相关性增加,与阴性对照组比较有统计学意义(P<0.01),SC%与阴性对照组相仿;MNT各剂量组未显示骨髓抑制作用,诱发的微核率与阴性对照组比较未见明显增加。结论麦冬水煎剂在+/-S9条件下均可诱发L5178Y细胞tk位点突变,提示其可能存在诱变物质;但该供试品对小鼠骨髓细胞染色体无损伤,经体内代谢活化后未显示遗传毒性作用。

取样时间对小鼠骨髓和外周血嗜多染红细胞微核率的影响

目的 :比较一次给药后不同采样时间对鼠外周血和骨髓嗜多染红细胞微核率的影响。方法 :ICR小鼠一次腹腔注射 (IP)MMC 2 0mg/kg .bw或CP 40mg/kg .bw ,后 12h、18h、2 4h、32h、48h、72h采外周血及骨髓涂片 ,Giemsa染色 ,计数嗜多染红细胞及其微核数。结果 :一次IPMMC或CP后 12h即可观察到小鼠骨髓PCE微核率增高 ,分别在给药后 2 4h、32h达到高峰 ,此后逐渐下降 ,到 72h已接近对照组水平 ;而外周血PCE微核率的显著增高则出现在给药后的 2 4h ,在 48h达到高峰。结论 :外周血PCE作为微核试验靶细胞与骨髓PCE的检测敏感性相同 ,但外周血PCE微核高峰出现较骨髓延迟约 12～ 2 4h ;在检测化学物对骨髓细胞毒性方面 ,外周血与骨髓的检测灵敏性也相同。

饮用水中二溴乙酸遗传毒性研究

二溴乙酸 (DBA)是饮用水氯化消毒副产物中的一种 ,属于氯乙酸类 ,臭氧消毒也可产生。本次试验采用Ames试验、程序外DNA合成 (UDS)试验、小鼠体内微核试验、NIH3T3细胞微核试验对其遗传毒性进行了研究。在Ames试验中 ,TA10 0菌株在加与不加S9的情况下均表现出致突变性。在大鼠肝细胞UDS试验中 ,DBA表现出明显的DNA损伤作用 ,导致程序外合成增加。在小鼠体内微核试验中 ,DBA在一定剂量范围内可引起染色体损伤。在NIH3T3细胞微核试验中 ,DBA可诱导细胞微核数增加。上述结果表示 ,DBA具有明确的DNA损伤作用。

环磷酰胺剂量、取样时间对小鼠骨髓微核率的影响

背景与目的:观察NIH小鼠在给予不同剂量环磷酰胺(Cyclophosphamide,CP)后不同取样时间点的骨髓嗜多染红细胞(Polychromatic erythrocytes,PCE)微核率的变化。材料与方法:小鼠一次性腹腔注射CP40、80mg/kg后,于18、24、48h取胸骨骨髓涂片,Giemsa染色,计数1000个PCE中含有微核的细胞数(微核率)及200个红细胞中PCE与正染红细胞(Normochromatic erythrocytes,NCE)的比值。结果:小鼠在给予40mg/kg和80mg/kgCP后的骨髓微核率随取样时间的变化趋势是一致的,给药后一段时间逐渐升高,24h达高峰,之后又逐渐下降。给药组各时间点的微核率与对照组相比差异均有统计学意义,而给药组PCE与NCE比值与对照组的比较差异均无统计学意义,提示小鼠一次腹腔注射40mg/kg和80mg/kgCP后对骨髓细胞无明显抑制作用。80mg/kgCP剂量组各时间点上的微核率显著高于40mg/kg剂量组,表现出明显的剂量_反应关系。结论:在本实验室条件下,40mg/kg和80mg/kgCP均可致小鼠骨髓嗜多染红细胞的微核率显著增加,具有剂量_反应关系。在一次性腹腔注射环磷酰胺后24h观察所得微核率最高。故认为环磷酰胺可用作微核试验的阳性对照,剂量范围为40～80mg/kg,给药后24h取材最佳。

玛咖细粉毒理安全性实验研究

目的检测玛咖细粉作为保健食品的安全性。方法小鼠经口急性毒性、二项致突变试验(小鼠骨髓微核试验、小鼠精子畸形试验)以及90 d喂养试验。结果玛咖细粉对两种性别的SPF级昆明种小鼠急性经口毒性试验,24 h累积两次灌胃总量为10 g/kg.BW(相当于人群推荐日摄入量0.033 g/kg.BW的300倍),观察两周内动物未见明显中毒症状,无动物死亡,按急性毒性分级标准评价,该受试物属实际无毒级。二项致突变试验(骨髓细胞微核、小鼠精子畸变)结果均为阴性。90 d喂养试验结果表明:以1.5%、3.0%、6.0%比例将玛咖细粉加入基础饲料中进行90 d喂养实验,连续经口给予13周。低、中、高剂量组雌、雄性大鼠实际摄入受试物的量分别为1.51 g/kg.BW、3.05 g/kg.BW、6.16 g/kg.BW和1.42 g/kg.BW、2.87g/kg.BW、5.78 g/kg.BW(分别相当于人群推荐日摄入量0.033 g/kg.BW的46、93、187倍和43、87、175倍),对Wistar大鼠的临床检查、血液学、生化学、脏器重量和系数以及病理组织学等指标无明显影响,未发现该受试物有明显的毒性作用。结论玛咖细粉作为保健食品是安全的。

拟原白头翁素A毒性试验研究

目的为了对拟原白头翁素Ａ进行初步毒理学安全性评价。方法采用大鼠急性经口和经皮毒性试验，大鼠皮肤和大白兔眼粘膜刺激试验，Ａｍｅｓ试验，小鼠骨髓微核试验，小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验。结果大鼠急性经口ＬＤ５０４．６７３９（ＩＣ４．０６１４～５．３７８７）ｇ·ｋｇ－１，经皮ＬＤ５０＞２．０ｇ·ｋｇ－１，根据化合物毒性分级为低毒；对大鼠皮肤无刺激作用，对大白兔眼粘膜有中等刺激；Ａｍｅｓ试验、小鼠骨髓微核试验和小鼠睾丸初级精母细胞染色体畸变试验阴性。结论拟原白头翁素Ａ为低毒、致突变试验阴性的化合物。

盐肤木油致突变性研究

根据《食品安全性毒理学评价程序与方法》要求,采用小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验及Ames试验研究盐肤木油的致突变性。结果表明:盐肤木油各剂量组对小鼠骨髓细胞微核试验为阴性(P>0.05),对小鼠精子无致畸作用(P>0.05);对Ames试验中的TA97、TA98、TA100、TA102未显示致突变性。说明在试验条件下,盐肤木油无致突变作用。

槲皮素作为饲料添加剂的急性毒性和致突变性评价

本试验采用急性毒性试验、污染物致突变性检测(Ames试验)、小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验对槲皮素作为饲料添加剂的安全性进行评价。结果表明:槲皮素半数致死剂量(LD50)>10 g/kg BW;Ames试验鼠伤寒沙门菌突变型各菌株在加与不加肝微粒体多氯联苯诱导剂(S9)情况下,经过2次试验结果均呈阴性;小鼠骨髓细胞微核试验结果为阴性,各槲皮素剂量组动物未见细胞毒性作用;小鼠精子畸形试验结果表明槲皮素剂量组与阴性对照组相比差异均不显著(P>0.05),且没有剂量反应关系。试验结果提示,槲皮素是一种安全的饲料添加剂。

熊果酸对小鼠体细胞的遗传毒性研究

目的:探讨熊果酸对小鼠体细胞的遗传毒性,为其应用提供安全性毒理学评价依据。方法:用小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核实验,检测小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率;利用小鼠染色体畸变实验,观察不同浓度的熊果酸致小鼠畸形的数目。结果:小鼠骨髓嗜多染红细胞微核实验显示,熊果酸三个剂量组的微核发生率均在正常范围内,与阴性对照组比较无显著性差异(p>0.05),与阳性对照组比较差异显著(p<0.05);小鼠染色体畸变实验可见,熊果酸3个剂量组的小鼠染色体率均在正常范围内,与阴性对照组比较无显著性差异(p>0.05),与阳性对照组比较差异显著(p<0.05)。结论:熊果酸对小鼠体细胞无诱变性。

流式细胞仪检测γ射线照射后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率的研究

目的应用流式细胞仪检测γ射线照射后小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,建立本实验室快速检测微核率的自动化实验方法。方法将48只雄性BALB/c小鼠随机分为4个照射剂量组,分别给予60Coγ射线一次性全身照射00、.51、和2Gy,于照射后24、48h取骨髓标本,每个剂量和每个时间点均为6只小鼠。采用流式细胞术检测受照小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率,以传统显微镜检微核的方法作为对照。结果流式细胞术及显微镜检方法检测的小鼠骨髓嗜多染红细胞微核率均呈良好的剂量依赖性及时间依赖性,并且两种方法的检测结果呈显著正相关(r=0.987,P<0.01)。流式细胞仪检测速度为人工阅片的40倍以上,且能够避免人工镜检人员阅片的主观性,检测结果更为客观。结论采用流式细胞仪检测小鼠骨髓红细胞微核较传统的人工显微镜检测,更加简便、易行、快速,检测结果准确、可信、客观,适用于大规模核辐射伤员的高通量快速生物剂量诊断。

五味子水煎剂的遗传毒性研究

背景与目的:采用小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)和小鼠骨髓微核试验(MNT)研究五味子水煎剂的遗传毒性。材料与方法:在MLA中,设五味子0.97、1.94、3.88、7.77 mg/ml(生药)等4个浓度组,在非代谢活化(-S9)和代谢活化(+S9)条件下处理L5178Y细胞3 h,表达2 d,制备基因突变频率平板并培养12 d,计数含大、小突变细胞集落的孔数,计算基因突变频率(MF)和小集落突变百分率(SC%);在MNT中,设3.13、6.25、12.50 g/kg(生药)3个剂量组,每组10只ICR小鼠,雌雄各半,间隔24 h实施2次小鼠灌胃给予五味子水煎剂,制作骨髓涂片,计数每只小鼠2 000个嗜多染红细胞中含微核的嗜多染红细胞数(MNPCE),计算每组动物嗜多染红细胞微核率。结果:在-S9条件下,7.77 mg/ml(生药)浓度组诱发的MF是阴性对照组的2倍以上(P<0.01),SC%随五味子浓度增加而升高。+S9条件下的各浓度组诱发的MF存在剂量-反应关系,7.77 mg/ml(生药)浓度组的MF明显增加(P<0.01),其MF、SC%与阳性对照组相近;五味子水煎剂各剂量组未显示骨髓抑制作用,所诱发的微核率与阴性对照组比较未见明显增加(P>0.05)。结论:五味子水煎剂在+/-S9条件下均可诱发L5178Y细胞tk位点突变并导致染色体损伤,提示对人体具有潜在的遗传毒性;但对小鼠骨髓细胞染色体无损伤,经体内代谢活化后未显示遗传毒作用。

玉米须急性毒性及致突变性

考察了玉米须对小鼠急性毒性及致突变作用。利用最大耐受量法对小鼠的急性毒性进行研究,采用常用的小鼠精子畸形,骨髓微核,Ames试验考察玉米须/玉米须水提液对小鼠是否有致突变作用。结果表明,玉米须的LD50≥15g/kg,按照国家标准规定属于实际无毒物质;玉米须对抑制小鼠精子畸形有一定抑制作用,并且对小鼠雄性器官、摄食量及体重变化无影响;骨髓微核试验及Ames试验均表明玉米须无致突变作用。

玉米胚芽抗氧化肽的急性毒性和致突变性

研究玉米胚芽抗氧化肽在小鼠体内的急性毒性及致突变性,为其开发应用提供安全保障。采用最大耐受量法、小鼠精子畸形实验、骨髓微核实验和Ames实验对玉米胚芽抗氧化肽进行急性毒性和致突变性研究。结果表明:玉米胚芽抗氧化肽对小鼠的急性经口最大耐受剂量(maximum tolerated dose,MTD)大于34 g/kg(以体质量计);3项致突变实验结果均为阴性,故玉米胚芽抗氧化肽无急性毒性和致突变性。

环氧乙烷的遗传毒性研究──Ⅵ小鼠骨髓多染红细胞微核试验

应用骨髓多染红细胞微核试验研究了环氧乙烷（ｅｔｈｙｌｅｎｅｏｘｉｄｅ，Ｅｔｏ）的遗传毒性作用。本研究通过亚急性及亚慢性二种方法对Ｅｔｏ的毒性进行了检测。通过实验证明Ｅｔｏ在亚急性条件下，染毒组与对照组比较微核率呈现出极显著的差异。在亚慢性实验条件下，染毒组与对照组比较微核率也呈现极显著差异，说明环氧乙烷确是一个有效的诱变剂。