芫菁体内斑蝥素的含量及存在形式

目的测定芫菁体内斑蝥素的含量及其存在形式。方法利用气相色谱法测定了8种芫菁和作为对照的黑翅红蝉体内总斑蝥素和游离斑蝥素的含量,总斑蝥素含量是通过酸水解法测得的,游离斑蝥素含量是通过直接浸提法测得的,以总斑蝥素与游离斑蝥素含量之差作为结合斑蝥素含量;并比较了结合斑蝥素与钙、镁含量之间的相关性。结果芫菁体内总斑蝥素的含量为游离斑蝥素含量的1~9倍,总斑蝥素的含量一般多于虫体干重的2.0%,而游离斑蝥素的含量均低于虫体干重的1.7%。黑翅红蝉体内不含任何形式的斑蝥素。斑芫菁属和豆芫菁属昆虫中的结合斑蝥素含量与钙元素呈正相关,斑芫菁属中结合斑蝥素含量与镁元素呈正相关,而豆芫菁属中结合斑蝥素含量与镁元素呈负相关。斑芫菁属昆虫体内钙元素的摩尔量要低于结合斑蝥素的摩尔量。结论芫菁体内总斑蝥素含量远高于游离斑蝥素的含量;结合斑蝥素可能是以斑蝥素酸钙和斑蝥素酸镁形式存在。

芫菁体内斑蝥素和结合斑蝥素抗肿瘤活性的比较研究

目的比较提取自眼斑芫菁体内的斑蝥素和结合斑蝥素的体外抗肿瘤活性。方法将提取自眼斑芫菁体内的斑蝥素和结合斑蝥素作用于人结肠癌细胞HT-29、人肝癌细胞PLC/PRF/5、人肝癌细胞BEL-7404;采用WST-1比色法进行体外细胞抑制实验,测定斑蝥素和结合斑蝥素对上述三种肿瘤细胞的生长抑制率。结果斑蝥素对HT-29结肠癌细胞的抑制作用不稳定,对PLC/PRF/5和BEL-7404肝癌细胞的抑制作用随用药浓度的增加而增强,但在高浓度作用下仍表现出较低抑制率。结合斑蝥素对HT-29、PLC/PRF/5、BEL-7404三株肿瘤细胞均表现出明显的抑制效果,且随药物浓度升高其抑制作用增强,呈剂量效应关系;其半数抑制浓度分别为:28.51,86.77,21.27μmol/L。结论芫菁体内结合斑蝥素对人结肠癌细胞HT-29、人肝癌细胞PLC/PRF/5、人肝癌细胞BEL-7404的抑制作用远好于斑蝥素,提示结合斑蝥素的抗癌效果极可能好于斑蝥素。

芫菁体内结合斑蝥素与金属元素含量的比较

通过气相色谱法测定了12个不同地域不同种类的芫菁体内的游离斑蝥素、结合斑蝥素、总斑蝥素,并比较分析了结合斑蝥素含量与其体内的钾、镁、钙、钠和锌等5种元素含量的关系。结果显示,芫菁体内总斑蝥素的含量都超过0.35%,部分芫菁体内的游离斑蝥素和结合斑蝥素含量超过0.35%;在芫菁科昆虫体内二钾元素的摩尔量和镁元素的摩尔量要高于结合斑蝥素的摩尔量,而钠元素和锌元素的摩尔量都低于结合斑蝥素的摩尔量;在豆芫菁属昆虫体内钙元素的摩尔量都高于结合斑蝥素的摩尔量。结果表明,在芫菁体内结合斑蝥素可能以斑蝥素酸镁、斑蝥素酸钾和斑蝥素酸钙的形式存在。

南方大斑蝥体内结合斑蝥素对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响

利用水提法从来自罗甸县茂井镇的南方大斑蝥中提取得到结合斑蝥素,作用于人肝癌HepG2细胞后,分别利用Annexin V-FITC/PI双染法检测HepG2细胞的凋亡率,RT-PCR法检测Bax、Bcl-2mRNA相对表达情况,利用Western blot法检测HepG2细胞中Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。实验结果表明罗甸县茂井镇产的南方大斑蝥体内结合斑蝥素可诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,其机制可能与上调Bax和下调Bcl-2表达有关。

不同炮制方法对斑蝥体内有效物质的影响

在采用不同炮制方法处理3种斑蝥后,测定它们体内的游离斑蝥素和结合斑蝥素的损失率。结果显示:在浅程度炮制方法的处理下,3种斑蝥体内的游离斑蝥素损失率均小于60%,而结合斑蝥素损失率均大于60%;深程度炮制方法的处理下,3种斑蝥体内的游离斑蝥素损失率均小于80%,而结合斑蝥素损失率均大于80%。结合斑蝥素的损失率及损失的量均超过游离斑蝥素。浅程度炮制下的斑蝥中,眼斑芫菁Mylabris cichorii Linnaeus的游离斑蝥素含量为0.57%,符合药典的要求,而大斑芫菁Mylabris phalerata Pallas和Mylabris sp.体内的游离斑蝥素均不符合要求;深程度炮制下的斑蝥中,这3种斑蝥体内的游离斑蝥素均不符合药典的要求。