腺病毒介导脑源性神经营养因子基因在培养的雪旺细胞中的表达

目的:观察腺病毒介导人脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)基因在培养的雪旺细胞(Schwanncell,SC)中的表达,为视神经损伤修复提供可靠的组织工程用的种子细胞。方法:在293细胞中培养扩增BDNF重组腺病毒(adenovirallydeliveredBDNF,Ad-BDNF),采用蚀斑形成试验测定其感染滴度。体外培养SD大鼠源性的SC,以Ad-BDNF感染培养的SC,用逆转录—聚合酶链反应(reversetranscriptasepolymersechainreaction,RT-PCR)检测BDNFmRNA的表达,用免疫印迹技术(immunoblotassay,WesternBlotting)和酶联免疫反应检测(enzyma-linkedimmumosorbentassay,ELISA)培养液上清中BDNF的表达。结果:Ad-BDNF经扩增后可获得较高感染滴度的重组腺病毒载体。在正常培养条件下未经Ad-BDNF感染的SC低表达BDNF,而感染3d后的SC其BDNF表达明显升高,表达量随时间延长而增加,并能在感染21d后仍维持高表达趋势。结论:Ad-BDNF可以介导BDNF基因转染到培养的SC中,后者可以在较长时间内高效表达BDNF。

中枢组胺能神经介导异氟烷麻醉后认知功能障碍

目的:探讨组胺能神经元是否参与异氟烷麻醉引起的认知功能障碍。方法:采用抑制性回避记忆模型研究成年雄性SD大鼠异氟烷麻醉后记忆功能变化,通过下丘脑结节乳头核(TMN)微量注射GABAA受体拮抗剂荷包牡丹碱(BMI)研究组胺能核团参与异氟烷麻醉后记忆受损的神经环路机制,免疫印迹法观察组胺能神经通路对海马BDNF表达的调节作用。结果:异氟烷麻醉导致大鼠抑制性回避测试期的步入潜伏期缩短、海马BNDF表达降低;抑制性回避训练期前给予BMI,可增加麻醉大鼠在测试期的步入潜伏期及海马BNDF的表达。结论:中枢组胺能神经环路以及受该环路支配的BDNF信号通路可能为吸入麻醉后记忆受损的机制之一。

认知护理干预对脑卒中后抑郁症病人血清S-100β、NSE、BDNF及认知功能的影响

目的探讨认知护理干预对脑卒中后抑郁症(PSD)病人抑郁状况、神经和认知功能、睡眠及生活质量的影响。方法取脑卒中后PSD病人120例,随机分为对照组和研究组。对照组给予一般护理,研究组在此基础上给予针对性认知护理干预,疗程均为4周。观察并比较两组病人干预前后血清S-100β、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白浓度的变化。观察并记录两组病人干预前后抑郁状况、神经和认知功能、睡眠质量、疲劳程度和生活能力的变化。结果与对照组比较,研究组病人干预结束3d和3个月汉密尔顿抑郁量表和美国国立卫生研究院卒中量表评分显著降低,简易智力状态检查量表评分显著升高(F=2.5~7.6,P<0.05)。与对照组比较,研究组病人干预结束3d匹兹堡睡眠质量指数、疲劳严重程度量表和日常生活能力量表评分均显著降低(t=4.4~8.3,P<0.05)。与对照组比较,研究组病人干预结束3d血清S-100β和NSE蛋白水平均显著降低,血清BDNF蛋白水平显著升高(t=11.8~21.4,P<0.05)。结论认知护理干预能显著改善脑卒中后PSD病人的抑郁状况,促进神经和认知功能的恢复,改善睡眠质量和疲劳状况,提高生活能力。

携带脑源性神经营养因子基因人脐带干细胞改善脑损伤大鼠神经功能的实验研究

目的研究携带脑源性神经营养因子（BDNF）基因的人脐带间充质千细胞（UCMSC）脑内移植对脑损伤大鼠神经行为学恢复的影响。方法建立大鼠自由落体颅脑损伤动物模型；培养纯化UCMSC，构建BDNF—pcDNA3重组质粒载体，并转染UCMSC；休外检测UCMSC携带BDNF基因的表达水平，并进行生物活性分析。将成功表达BDNF的UCMSC移植入大鼠损伤局部脑组织。2周进行神经功能缺损评分，探讨BDNF转基因UCMSC移植对脑损伤大鼠神经行为学的影响。结果大鼠脑损伤后2周，神经功能[（10．50±0．53）分]障碍明显。UCMSC在损伤脑区存活，迁移；BDNF转基因UCMSC移植后神经功能[（5．50±0．76）分]与单纯UCMSC移植组[（7．75±0．71）分]比较明显改善，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论携带BDNF基因的UCMSC脑内移植对脑损伤大鼠神经行为学恢复有明显促进作用。

灵芝孢子油对抑郁小鼠行为学的影响及其神经生理机制

目的考察灵芝孢子油对慢性轻度不可预见刺激模型小鼠行为学影响及可能的神经生理机制。方法采用13种不同慢性轻度不可预见刺激对雄性BALB/C小鼠连续刺激建立小鼠抑郁模型。从第3周开始连续灌胃给予3个剂量的灵芝孢子油(850、283、141.5 mg·kg^(-1)),盐酸氟西汀(10 mg·kg^(-1))或空白溶媒(植物油)2周后,测定各组小鼠行为学变化,同时采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定海马谷氨酸(GLU)和γ-氨基丁酸(GABA),酶联免疫法测定脑源性神经营养因子(BDNF)的含量。结果与模型组比较,灵芝孢子油能增加抑郁小鼠的体重、糖水偏好率和旷场实验得分(P<0.01),缩短悬尾实验和强迫游泳实验的不动时间(P<0.05,P<0.01),明显降低海马GLU的含量(P<0.01),增加BDNF含量(P<0.01),但对GABA含量无影响(P>0.05)。结论灵芝孢子油对抑郁模型小鼠表现出明显的抗抑郁作用,其抗抑郁作用可能与其降低GLU和增加BDNF相关。

有序胶原材料联合CBD-BDNF对大鼠脊髓损伤的修复作用

目的联合有序胶原支架材料和胶原结合结构域-脑源性神经营养因子(CBD-BDNF)修复大鼠脊髓损伤。方法以大鼠脊髓半横断损伤模型观察有序材料联合CBD-BDNF对脊髓损伤的修复效果。大鼠分为3组:Control组即损伤后自动恢复组、Collagen组即损伤部位植入有序材料组和CBD-BDNF/collagen组(CBC组)即损伤部位植入有序胶原材料联合CBD-BDNF组。通过神经丝免疫荧光染色、BBB评分和斜板实验观察修复效果。结果体外实验发现,有序材料能够引导神经元细胞方向性延伸轴突;体内实验发现,CBC组再生神经丝阳性的神经突起数量明显比Control组和Collagen组多(P<0.05),且再生神经丝延伸具有方向性。CBC组大鼠术后9周BBB评分为8(7,13),明显高于Control组[1(1,1)]和Collagen组[2(1,2)](P<0.05)。CBC组大鼠斜板耐受角度也要高于Control组和Collagen组(P<0.05)。结论 CBD-BDNF联合有序胶原支架材料促进脊髓损伤部位神经突起再生和方向性延伸,促进大鼠运动功能恢复,为临床上治疗脊髓横断损伤提供一定实验依据。