通调针刺法联合芪蛭三七汤治疗脑卒中后运动障碍及对血清BDNF、NPY水平的影响

目的探讨通调针刺法联合芪蛭三七汤治疗脑卒中后运动障碍的效果及对血清脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、神经肽Y(neuropeptide,NPY)水平的影响。方法选取2019年9月—2022年8月医院收治的102例脑卒中后运动障碍患者,依照随机数表法分为研究组(n=51例)和对照组(n=51例),对照组采用基础康复训练治疗,研究组另给予通调针刺法联合芪蛭三七汤治疗,比较两组患者中医症状评分,临床疗效,Fugl-Meyer运动功能量表(Fugl Meyer Motor Function Assessment,FMA)评分、Berg平衡量表(Berg Balance Scale,BBS)评分、改良Barthel指数、美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分,血清BDNF、NPY水平及不良反应。结果治疗后,两组患者半身不遂、偏身障碍、意识模糊、口舌歪斜、气短乏力、手足肿胀评分均降低(P<0.05),且研究组半身不遂、偏身障碍、意识模糊、口舌歪斜、气短乏力、手足肿胀评分均低于对照组(P<0.05);研究组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组患者FMA评分和BBS评分均升高(P<0.05),且研究组更高(P<0.05);治疗后,两组患者改良Barthel指数均升高(P<0.05),且研究组更高(P<0.05),两组NIHSS评分均降低(P<0.05),且研究组更低,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组血清BDNF水平均升高(P<0.05),且研究组更高,差异有统计学意义(P<0.05),两组血清NPY水平均降低(P<0.05),且研究组更低,差异有统计学意义(P<0.05);不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论通调针刺法联合芪蛭三七汤用于治疗脑卒中后运动障碍患者疗效确切,能够改善运动障碍及BDNF、NPY水平。

减重步行训练结合督脉电针对脊髓损伤大鼠运动功能和脑源性神经营养因子的影响

目的:研究减重步行训练、督脉电针及两者联合治疗对横断性脊髓损伤大鼠运动功能及脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法:对72只成年SD大鼠建立胸10脊髓横断损伤模型,随机分为对照组、减重步行训练组(BWSTT)、督脉电针组(电针组,EA)和训练+电针(联合组,BWSTT+EA)各18只,每组再分为8d、15d和30d3个小组(n=6)。对各组大鼠进行BBB评分并用免疫组织化学法测定脊髓损伤尾端组织中BDNF的表达。结果:单纯减重步行训练或/和督脉电针均能使不同时间点脊髓损伤大鼠BBB评分、脊髓组织BDNF表达水平提高(P<0.05);减重步行训练和督脉电针对BBB评分、脊髓组织BDNF表达存在交互作用(P<0.05),提示减重步行训练和督脉电针联合干预对促进脊髓损伤的康复效果更佳。各治疗组随着干预时间的增加表现出不同程度的BBB评分、脊髓组织BDNF表达水平提高(P<0.01);尽量长时间的应用减重步行训练和督脉电针的联合治疗对促进横断脊髓损伤大鼠运动功能恢复的疗效最佳。结论:减重步行训练结合督脉电针可以促进横断性脊髓损伤大鼠的运动功能恢复,干预时间越长疗效越佳,且3者间存在协同作用,这种运动功能恢复可能与脊髓组织中BDNF的增加有关。

眼针对急性脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑组织脑源性神经因子表达的影响

目的探讨眼针治疗急性脑缺血再灌注损伤的机制。方法应用线栓法复制急性脑缺血再灌注损伤大鼠模型,采用眼针治疗,于再灌注后3 h进行神经功能缺损评分,采用免疫组化、Western印迹、实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)方法测定脑组织脑源性神经因子(BDNF)蛋白及mRNA表达的变化。结果与模型组比较,眼针组大鼠神经功能缺损评分明显下降,脑组织BDNF蛋白及mRNA表达明显上调(P<0.05)。结论眼针具有明显改善大鼠脑缺血再灌注损伤的作用;其机制与上调脑组织BDNF表达有关。

孕期咖啡因暴露所致雌性子代胎鼠肾脏宫内发育迟缓及其发生机制

目的观察孕期咖啡因暴露(PCE)♀胎肾发育病理学变化和皮质酮(CORT)处理对原代后肾间充质细胞基因表达的影响,探究PCE影响胎鼠肾脏发育的可能机制。方法受孕Wistar大鼠于孕9-20 d(GD 9-20)经口灌胃咖啡因(30、120 mg·kg^(-1)·d^(-1)),孕鼠于GD20处死,取♀胎鼠并收集肾脏,检测肾脏病理学变化和基因表达;在原代后肾间充质细胞上给予不同浓度CORT(250、500、1 000μg·L^(-1))处理24 h,检测细胞基因表达。结果与对照组相比,PCE组♀胎肾肾小球的球囊空虚,鲍曼囊腔变大,毛细血管网发育不良,GDNF/c-Ret信号通路抑制;CORT处理原代后肾间充质细胞下调AT_1R/AT_2R及GDNF/c-Ret信号通路的表达。结论 PCE♀胎鼠肾脏发育不良,其机制与PCE所致高血CORT下胎肾局部AT_1R/AT_2R及GDNF/c-Ret信号通路的表达抑制有关。

rTMS及MECT在不同时间点对抑郁症疗效和BDNF的影响及相关性研究

目的探讨重复经颅磁刺激（rTMS）及无抽搐电休克治疗（MECT）在不同时间点对抑郁症疗效和血清脑源性神经营养因子（BDNF）的影响及其相关性研究。方法将抑郁症患者分成rTMS组、MECT组和药物组。治疗前及治疗2、4、12周后分别评定3组患者的汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评分，测定血清BDNF水平并分析其相关性。结果治疗2周后，rTMS组和MECT组患者的HAMD评分低于药物组，差异均有统计学意义（P〈0．01），rTMS组与MECT组的差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗2周和4周后rTMS组及MECT组患者的血清BDNF水平高于药物组，差异均有统计学意义（P〈0．05），而rTMS组与MECT组的差异无统计学意义（P〉0．05）。治疗4周后患者的血清BDNF水平与其HAMD评分呈正相关（r=0．407，P〈0．05）。结论单纯抗抑郁药物治疗2周后对抑郁症状的改善及血清BDNF水平升高的效果不及抗抑郁药物加rTMS、MECT治疗。

胶质细胞源性神经营养因子体内转基因对皮质脊髓束再生的影响

目的 通过非病毒载体阳离子脂质体介导 ,探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因体内转染对成年大鼠脊髓损伤后皮质脊髓束再生的影响。方法 采用NystrOm法制备大鼠胸髓后路压迫损伤模型 ,压迫重量为 5 0 g ,时间为 5min ,造成大鼠胸段脊髓急性重度损伤。用微量注射器将阳离子脂质体DC Chol 6μl和重组质粒pEGFP GDNFcDNA 2 μg混合后注入大鼠损伤脊髓。应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术和荧光显微镜检测GDNF体内转基因后在局部的表达 ,通过辣根过氧化物酶 (HRP)顺行追踪技术和神经微丝 (NF)免疫组织化学活性的变化来评价GDNF基因体内转染对大鼠皮质脊髓束再生的影响。结果 GDNF基因体内转染 1周后显示在基因注射局部有转录和蛋白水平表达。脊髓损伤后 4周在损伤区可见较多的皮质脊髓束再生 ,损伤区NF阳性轴突数 ( 5 2 4.33± 80 .5 5 ) /低倍视野较对照组 ( 30 9.84± 5 6.65 ) /低倍视野明显增多( P <0 .0 1)。结论 阳离子脂质体介导GDNF体内转基因能促进近端皮质脊髓束再生和神经骨架蛋白的修复。

产前补充牛磺酸对宫内生长受限胎鼠脑组织PKA-CREB通路及GDNF mRNA表达的影响

目的探讨牛磺酸对宫内生长受限(IUGR)胎鼠大脑蛋白激酶A-cAMP反应元件结合蛋白(PKA-CREB)通路及胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA表达的影响。方法采用妊娠期全程饥饿法制作IUGR模型,将20只孕鼠随机分为4组(n=5):对照组、IUGR组、小剂量(每天100mg/kg)及大剂量(每天300mg/kg)牛磺酸用药组。利用逆转录-聚合酶链反应方法检测各组胎鼠大脑PKA、CREB及GDNF mRNA水平变化。结果与对照组相比,IUGR组胎鼠大脑PKA、CREB及GDNF mRNA表达均明显增多(P<0.05)。与IUGR组相比,小剂量和大剂量牛磺酸组胎鼠脑组织的PKA和CREB mRNA表达水平增高(P<0.05),大剂量牛磺酸组胎鼠脑组织GDNF mRNA水平亦明显增高(P<0.01)。结论牛磺酸可增加IUGR胎鼠大脑PKA-CREB通路及GDNF mRNA的表达,提示产前补充牛磺酸可能通过增强中枢神经系统神经发生能力、增加神经营养因子的分泌等途径来改善IUGR胎鼠脑损伤,发挥对脑组织的保护作用。

糖尿病视网膜病变患者血浆神经营养因子水平变化

目的探讨NGF、BDNF是否参与和促进糖尿病视网膜病变新生血管的形成。方法将研究对象分四组：正常健康（CG）组20例，糖尿病无视网膜病组（NDR）50例，非增生性糖尿病视网膜病变（NPDR）组50例，增生性糖尿病变视网膜病变（PDR）50例。收集临床资料：年龄、糖尿病类型、糖尿病病程、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、糖化血红蛋白（HbAlc）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr），采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测外周血血浆NGF、BDNF含量。结果PDR患者血浆中NGF、BDNF水平（5．014±0．536ng／ml，（2．679±0．637）ng／ml高于CG组（3．549±0．426）ng／ml，（1．135±0．394）ng/ml、NDR组（3．556±0．962）ng／ml，（1．375±0．944）ng／ml、NPDR组（3．732±1．363）ng／ml，（1．504±1．191）ng／ml，比较差异有统计学意义。血浆NGF、BDNF水平与糖尿病病程、HbAlc有正相关性（NGF：r=0．821，0．828；BDNF：r=0．876，0．902，P〈0．01）。结论糖尿病视网膜病变患者的外周血NGF、BDNF水平升高，并与糖尿病病程、HbAlc的水平成正相关。糖尿病视网膜病变患者的外周血NGF、BDNF水平的升高，可能参与促进了视网膜新生血管的形成。

覆盖人脐带间充质干细胞颗粒状壳聚糖支架制备的组织工程学研究

目的构建通过京尼平（GP）交联有脑源性神经营养因子（BDNF）并携带有人源性脐带间充质干细胞（hUC—MSCs）的复合壳聚糖支架，检测该复合支架对hUC-MSCs的影响，以及hUC-MSCs在复合支架上分化，为创伤性脑外伤（TBI）后利用hUC-MSCs移植进行相关神经修复提供实验基础。方法通过低温冻干技术制备颗粒状壳聚糖多孔支架，并通过GP在支架上交联BDNF，从而构建出复合壳聚糖支架（简称CGB支架）。检测CGB支架的孔径、孔隙率等理化特征；通过酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测CGB支架上30d经GP交联的BDNF的释放规律；通过Transwell实验系统研究支架释放的BDNF对神经干细胞（NSCs）分化的影响。结果细胞计数试剂盒（CCK-8）检测与CGB复合支架共培养的1、3、7、10d的脐带间充质干细胞（UC—MSCs）的活性分别为（87．3±6．1）％、（85．9±5．7）％、（86．1±7．5）％、（85．4±3．8）％，与阴性对照组（100．0％）比较差异无统计学意义（P〉0．05），与阳性对照组[（52．4±6．3）％、（38．0±2．1）％、（24．6±11．0）％、（11．9±3．5）％]比较差异有统计学意义（P〈0．05）。证实hUC—MSCs与CGB支架共培养后第1天的细胞黏附率明显高于其他时间段（P〈0．05）；支架通过GP交联BDNF后BDNF呈可控的稳定释放，可以持续30d以上，然而无GP交联剂的支架（CB支架）仅在前3d释放BDNF；同时，研究证实CGB支架上所释放的BDNF体外能促进NSCs的向神经元的分化。结论CGB与覆盖在其上的hUC—MSCs具有良好的生物相容性，这为TBI后通过CGB复合支架移植hUC-MSCs提供了可能。