桑枝枯菌核病病原菌的分离鉴定及生物学特性研究

桑枝枯菌核病是危害桑树叶片和枝条的严重真菌病害,其病原菌亦可导致桑椹染病,分离获得病原菌,并研究其生物学特性将有助于精准防控该类病害.利用平板分离法对染病桑枝进行桑枝枯菌核病病原菌的分离纯化,并通过回接实验对其致病性进行检测;利用形态学观察和分子生物学手段对菌株进行鉴定;通过检测菌株生长情况,明确其生物学特性及其侵染叶片时的特征.研究结果表明,分离获得的菌株GXS1接种桑叶36 h后,桑叶出现明显病斑;该菌在马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)上菌落呈白色,培养后期能产黑色菌核,基于18S rDNA和ITS rDNA序列的系统发育分析,菌株GXS1与核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)亲缘关系最近;该菌最适生长温度为20℃,最适pH值为5.0,最佳碳源为葡萄糖、蔗糖或果糖,最佳氮源为硝酸钠,最适培养基为PDA;该菌接种桑叶12 h后开始形成侵染垫,接种24 h后侵染垫数量明显增多.

福建省一种蓝莓枝枯病病原鉴定

【目的】明确福建省三明地区蓝莓枝枯病的病原菌,为该病害的有效防治提供理论依据。【方法】采集受害蓝莓枝条样品,通过常规组织分离法进行病原菌分离纯化,采用针刺法进行致病性测定完成柯赫氏法则验证,利用形态学特征并联合分子生物学,明确致病菌的分类地位。【结果】从病组织中分离获得菌株KW1-4,将其回接至健康蓝莓枝条后,接种部位出现干枯病斑,再次分离获得的菌株与接种菌株一致,表明该菌株是引起蓝莓枝枯病的病原菌。菌株KW1-4菌落圆形,白色至灰色,有2种类型分生孢子,α型分生孢子长椭圆形至梭形,具2个明显油球,(4.77~7.63)μm×(1.55~2.71)μm,β型分生孢子线形,无油球,(11.95~19.65)μm×(1.05~1.94)μm。采用ITS,TEF1-ɑ,β-tubulin3段基因联合构建系统发育树,供试菌株KW1-4与Diaporthe australiana聚在同一分支。对比形态学特征,确定菌株KW1-4为间座壳属真菌Diaporthe australiana。【结论】引起福建省三明市蓝莓枝枯病的病原菌是Diaporthe australiana,本研究首次报道Diaporthe australiana能够侵染蓝莓枝条。

红豆杉枝枯病病原鉴定及杀菌剂室内毒力测定

枝枯病是曼地亚红豆杉Taxus×media的重要病害。为明确其病原并筛选出有效的化学防治药剂,对曼地亚红豆杉枝条发病部位进行了组织分离,通过形态学观察、致病性测定,结合r DNA-ITS,β-tubulin,tef1多基因系统发育分析进行病原鉴定;采用菌丝生长速率法测定6种代表性杀菌剂对病原菌的毒力。结果表明:曼地亚红豆杉枝枯病的病原为棒状新拟盘多毛孢Neopestalotiopsis clavispora。50%多菌灵可湿性粉剂和250 g/L吡唑醚菌酯乳油对菌丝的EC50分别为0.065,0.548 mg/L,抑制效果较好且无显著差异。试验结果可为红豆杉枝枯病的科学诊断与有效防控提供参考。

桑疫病严重发生后的田间防效试验

对桑疫病严重发生桑园,采取剪伐病枝后用3种杀菌剂喷雾防治,结果表明:剪伐病枝45 d后,株发病率比剪伐前下降57.45%,枝发病率比剪伐前下降86.61%;3种杀菌剂间隔7 d喷雾3次,株校正控制效果分别为3%中生菌素可湿性粉剂1000倍38.14%、2%春雷霉素水剂250倍38.14%、30%噻唑锌悬浮剂400倍30.74%;枝校正控制效果分别为3%中生菌素可湿性粉剂1000倍35.85%、2%春雷霉素水剂250倍31.29%、30%噻唑锌悬浮剂400倍23.38%。

红枝鸡爪槭枝枯病病原鉴定及防治

为了明确浙江省红枝鸡爪槭枝枯病的病原种类，在浙江省四明山区域采集红枝鸡爪槭枝枯病样品，以组织分离法进行病原物的分离培养，对分离得到的炭疽病菌落进行纯化和单菌丝段分离后，以形态学为基础，参照 Sutton分类系统进行鉴定。结果表明：从病样中共分离到6个炭疽病菌菌株。菌株的分生孢子圆柱形，单孢无色，具1个油球，两端钝圆，大小（18.23～11.76）μmx（4.46～2.94）μm（平均14.79μm x4.06μm）；附着孢淡褐色，近圆形或不规则形，边缘平滑，大小为8.67μm x4.52μm，与胶孢炭疽病菌相似。按照柯赫氏法则对红枝鸡爪槭植株上的当年生枝进行致病性测定，证实胶孢炭疽菌对红枝鸡爪槭的致病性。将菌株 Z92011的 rDNA-ITS序列与 GenBank 中相关菌株的ITS序列进行同源性比较，与胶孢炭疽病菌[GenBank登录号 KF787111]的同源性达到100%。确定浙江省红枝鸡爪槭枝枯病的病原菌为胶孢炭疽病菌。试验表明用40%咪鲜胺乳油800倍液喷雾防治效果达92.6%。

桃枝枯病的症状及其病原鉴定

近年来,在浙江省重要的水蜜桃产区嘉兴凤桥镇、慈溪掌起镇等地发生了一种新的桃树病害———桃枝枯病。该病害引起桃树新梢嫩枝的基部位置出现环状棕褐色至黑褐色病斑,致使枝条病部以上叶片快速枯萎脱落,病害蔓延扩展迅速,可造成老枝的大量枯死,造成约20%～50%的产量损失,严重的致使桃树整株死亡。按柯赫氏法则对桃树病枝进行分离、纯化和致病性试验,明确桃枝枯病的病原为一种真菌,该真菌在PSA培养基上生长旺盛,菌丝为白色至淡橄榄色、短、微絮状,产生黑色球形分生孢子器,有孔口,产生两型分生孢子,α型分生孢子长纺锤形,无色,单孢,含有1～2个油球,(5.2～8.7)μm×(1.3～2.7)μm;β型分生孢子无色,线形,单孢,1～3个油球,(11.5～26.2)μm×(0.9～2.1)μm。对该菌的rDNA ITS进行PCR扩增,获得长度为611 bp的序列,经比对GenBank上的ITS序列数据,并结合形态特征,鉴定该病原真菌为半知菌亚门拟茎点霉属核果果腐拟茎点菌(Phomopsis amygdali Delacr.J.J.Tuset&M.T.Portilla)。

克菌丹、嘧菌酯等药剂组合防治桃主要病害药效试验

采用80%克菌丹WG、30%嘧菌酯SC、29%戊唑·嘧菌酯SC等药剂组合进行桃主要病害防控示范试验。田间试验结果初步表明:采用克菌丹、嘧菌酯等药剂组合在桃谢花2/3、幼果期、硬核期、膨大期等关键生育期进行防控,对桃褐腐病有较好的防治效果,防效为88.68%;对桃流胶病、枝枯病有一定的控制作用,防效分别为41.02%、64.49%,优于农户自防区的防效(P<0.05),且安全性好。该药剂组合施用后对提高桃TSS含量和单果重作用明显,具有显著的增产效益。

桉树枯枝病病害研究

按树枯枝病 Botryodiplodia theobromae Pat主要为害 2～ 3龄雷林 1号桉 3 3 ,造成枯枝落叶和死亡。病原菌周年为害 ,以当年 1 2月份至翌年 3月份表现最严重。

龟甲冬青枝枯病及其病原菌鉴定

于2002-2005年连续3年观察了杭州龟甲冬青枝枯病的症状,该病害先在嫩枝枝条发病,病斑初为水渍状斑点,后扩大成暗褐色的不规则形病斑。从发病部位分离培养出病原菌,根据其分生孢子的形态、大小和核糖体DNA内转录间隔区的序列,鉴定为褐纹拟茎点霉[Phomopsis vexans(Sacc.et Syd.)Harter]。本文对该病害症状和病原形态特征进行了描述。

岗梅枝枯病病原鉴定

岗梅是一种具有重要药用价值的植物,在我国主要分布于广西、广东、福建、江西、湖南和台湾等地。岗梅枝枯病是岗梅生产上的重要病害。根据Koch’s法则,对岗梅枝枯病病原分离物进行致病性测定,并利用真菌通用引物ITS1和ITS4对该病原菌的r DNA间隔转录区(ITS)进行扩增和序列分析,结果显示,在Gen Bank上,与该病菌ITS序列相似度在99%以上的均是葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)。因此,初步将岗梅枝枯病病原鉴定为葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothidea)。

忍冬枝枯病对金银花绿原酸合成相关酶基因LjHQT和LjC4H2转录水平的影响

目的:通过对比忍冬枝枯病感病植株和健康植株4个花期金银花中绿原酸含量与绿原酸合成相关酶编码基因转录水平,初步探究了忍冬枝枯病影响金银花品质的分子机制。方法:以5年生忍冬枝枯病感病植株和健康植株头茬花4个花期花蕾为材料,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)比较绿原酸含量差异;从本实验室的忍冬-枝枯病互作的转录组数据中挑选出与绿原酸合成相关的差异表达基因LjHQT和LjC4H2,通过real-time RT-PCR技术分析了枝枯病对2个基因转录水平的影响。结果:感病植株4个花期金银花中绿原酸的含量均高于健康植株对应花期。对比健康植株、感病植株4个花期中LjHQT基因转录水平下调表达;LjC4H2基因转录水平则为上调表达,其中在青花期,感病植株中LjC4H2基因的相对表达量是健康植株青花期的36.50倍。结论:忍冬枝枯病可以通过影响苯丙素生物合成途径中桂皮酸途径相关酶基因LjHQT和LjC4H2的转录水平来影响金银花中绿原酸的合成。

鄂西红豆枝干枯萎病病原菌分离与鉴定

为了明确鄂西红豆枝干枯萎病的病原菌,对福建省华安县采集获得的鄂西红豆枝干枯萎病样本进行分离、纯化,共分离出23株菌株,将分离到的菌株依据菌落生长特征、菌丝生长状态和孢子特征等进行比较和分类,23株菌株归为6种菌株:HA-1、HA-3、HA-5、HA-7、HA-16和HA-18。经致病性分析,HA-1能够使鄂西红豆产生枝干枯萎病症状,发病症状与野外发病症状相同。结合形态学特征鉴定、及核糖体基因内转录间隔区(ITS)构建系统进化发育树,初步鉴定为砖红镰刀菌,后又结合RPB1基因和RPB2基因串联构建系统进化树的结果,最终将HA-1菌株鉴定为束梗镰刀菌(Fusariumstilboides Wollenw.),此病菌侵染鄂西红豆树尚属首次发现。

矮化核桃枝枯病病原菌的形态与分子鉴定

为了明确河南省洛阳地区核桃枝条一种新病害的病原种类,对采自田间的典型症状枝条进行了常规组织分离,对单孢菌株进行了形态鉴定、rDNA ITS序列分析及致病性测定。结果表明,病原菌在PDA培养基上菌落初为白色,随着色素的积累,由中心向边缘变为灰绿色,再变成墨绿色,最终全部变成黑色;气生菌丝棉絮毛状,菌落边缘不整齐,近圆形或不规则形。分生孢子器散生或聚生,呈黑色小粒状,分生孢子器球形或近球形,深褐色,具孔口;分生孢子梗短缺,无色,杆状,末端产生分生孢子;分生孢子梭形、纺锤形,无色,无隔,基部钝圆,顶部稍尖,单孢(24.5～29.0)μm×(4.8～7.5)μm。离体枝条接种结果表明,该菌能侵染核桃枝条引起与田间相同的症状。据此将分离物鉴定为葡萄座腔菌Botryosphaeria dothidea。

树锦鸡儿枯枝病病原菌的分离鉴定

树锦鸡儿枯枝病(Caragana arborescens (Amm.) Lam. branch blight)是在树锦鸡儿枝干上发现的一种新病害,在自然条件下于老龄树枝上多发,产生橙黄色子实体并导致枝条枯死。为明确该病害的病原菌,了解其发生和侵染,本文根据柯赫氏证病法,对该病害进行分离、接种和再分离确定病原菌,结合形态学和分子生物学对病原菌进行鉴定。研究结果表明:在室内用烧伤、划伤和无伤3种方法接种健康3～5 a生水培枝条,30 d后仅烧伤接种表现出典型症状,说明该病原菌不能从寄主的自然孔口或直接穿透表皮入侵,属于一种弱寄生病害。经形态学特征比对和r DNA-ITS序列分析将引起该病害的病原菌鉴定为树锦鸡子座丛赤壳菌(Stromatonectria caraganae (H?hn.) Jaklitsch&Voglmayr.)。

岗梅枝枯病病原鉴定

为明确引起岗梅Ilex asprella枝枯病的病原,对从广东梅州采集的岗梅枝枯病病部分离的致病菌株Gangmei 2进行了形态学观察,并运用MEGA-X构建了病原菌株rDNA内转录间隔区(internal transcribed spacer, ITS)的系统发育树。结果显示:病原菌的形态学特征与拟盘多毛孢属Pestalotiopsis真菌相似,在系统发育树中该菌株与小孢拟盘多毛孢菌Pestalotiopsis microspora在同一分支上。因此,初步将岗梅枝枯病病原菌鉴定为小孢拟盘多毛孢菌P.microspora。

贵州核桃枝枯病病原菌的初步鉴定

在贵州省龙里县某核桃种植基地,近几年来枝枯病一直严重发生危害,病原菌主要侵染梢、枝甚至主干,导致枝梢枯萎甚至全株死亡。通过一系列的实验研究,包括病菌的分离培养、致病性接种、形态特征观测以及r DNA-ITS序列分析,证实引起该病的病原菌为越橘间座壳(Diaporthe vaccinii Shear)。由该菌引起的核桃枝枯病在国内外系首次报道。

桑园暴发枝枯菌核病的原因及防治对策

枝枯菌核病严重危害桑园生产。文章总结桑园暴发桑枝枯菌核病的为害症状、病源、发病特点,分析其发病原因,根据多年桑蚕生产技术经验,提出防治措施,以供参考。

镇安县核桃枝枯病发生规律及防治技术

针对镇安县核桃树主要病害枝枯病,依据试验研究结果,提出了以林业防治为基础,林业防治与药剂防治相结合的核桃枝枯病综合防治技术。

蓝莓枝枯病综合防治技术

蓝莓是一种可食用浆果,其独特的风味以及较高的营养价值受到消费者的广泛青睐。近几年皖南地区的蓝莓种植规模不断扩大,病虫害的发生情况也越来越严峻,尤其是枝枯病的流行更是会引起蓝莓整株枯萎死亡,因此必须要重视起枝枯病的综合防治工作,以便保障蓝莓产业的健康发展。文章就蓝莓枝枯病的综合防治进行了分析,以期能够为当前的蓝莓种植提供科学的参考依据。

蓝莓枝枯病病原菌鉴定、生物学特性及对杀菌剂敏感性研究

以蓝莓为试材,采用组织分离法获得蓝莓枝枯病的病原菌,进行形态学和分子生物学鉴定;并基于不同碳源、氮源、温度、pH开展病原菌的生物学特性研究,最后采用菌丝生长速率法测定了病原菌对4种常用化学杀菌剂的敏感性的研究方法,研究了该病原菌分类地位、生物学特性及敏感杀菌剂,以期为严重影响蓝莓经济价值的枝枯病的流行预测和科学防控提供参考依据。结果表明:蓝莓枝枯病致病菌为棒状新拟盘多毛孢(Neopestalotiopsis clavispora),其最适碳源为麦芽糖,最适氮源为磷酸二氢铵,最适pH为8,最适温度为25℃。抑菌敏感性测定结果显示,戊唑·咪鲜胺对病原菌的抑制效果最好。