抑制BCRP表达逆转肝细胞癌MDR的研究

目的:研究小片段RNA干扰对肝癌耐药细胞系HEPG2/ADM中BCRP基因及其蛋白产物BCRP表达的抑制作用和逆转其耐药性的效果.方法:构建针对BCRP基因pSUPER-RNAi质粒,转染肝癌耐药细胞HEPG2/ADM.通过RT-PCR和Western Blot在mRNA和蛋白水平评价RNAi对BCRP表达的影响.MTT法检测RNAi逆转HEPG2/ADM细胞耐药性的效果,按实验组和对照组细胞的半数抑制剂量(IC50)计算RNAi对各种细胞耐药倍数的改变.结果:在耐药肝癌细胞HEPG2/ADM中,RNAi明显抑制了BCRP mRNA和蛋白产物BCRP的表达水平,其表达仅为对照组细胞的22.55%和37.49%(P<0.01).在相同浓度化疗药物的作用下,RNAi组HEPG2/ADM细胞耐药性显著下降,对ADM的耐药逆转倍数为3.55倍.结论:针对多药耐药基因BCRP,RNAi具有强大的逆转肝癌耐药细胞HepG2多药耐药的作用.为从基因水平逆转MDR展示了良好的前景.