破壁灵芝孢子粉中多种重金属元素及硒含量检测方法探讨

采用微波消解进行前处理,三重四极杆-电感耦合等离子体质谱法测定破壁灵芝孢子粉中镉、铬、镍、砷、铅、汞及硒元素含量,对方法条件进行优化和讨论,并对20批次破壁灵芝孢子粉进行测定。结果表明,镉、铬、镍、砷、铅和汞元素在氦气碰撞模式,硒元素在氧气反应模式下,采用内标校正定量,可达到良好的测定效果。在优化的条件下,各元素线性关系良好,检出限均可达μg·kg^(-1)级别;镉、铬、镍、砷、铅及硒元素的加标回收率在90.3%~105.0%,汞的加标回收率在82.1%~92.5%;方法精密度在5%以内。此方法前处理操作简便,检测灵敏度高,稳定性好,给灵芝孢子粉多元素测定提供了良好的技术支撑。

Breaking and Characteristics of Ganoderma Lucidum Spores by High Speed Entrifugai Shearing Pulverizer

The spores of Ganoderma lucidum were ground and broken to ultrafine particles by high speed centrifugal shearing（HSCS） pulverizer. The characteristics of Ganoderma lucidum spores were analyzed by scanning electron microscope （SEM）, Fourier transform infrared spectrophotometry （FTIR）. Ultraviolet-visible pectrophotometer was used to determine the extraction ratio of aqueous solubility polysaccharide between the raw and broken spores. The immunological function on the mice before and after the breaking of spores wan investigated. The experimental results show that after being ground, the sporoderm-broken ratio reachs 100%, the original active ingredients of ganoderma lucidum spores do not change, and the extraction ratio of aqueous solubility polysaccharide is greatly increased by 40.08%. The broken spores show much higher immunological activity comparing with original spores of Ganoderma lucidum.

破壁灵芝孢子的体外模拟消化特性研究

为探究破壁灵芝孢子在口腔和胃肠道中的消化吸收情况以及对肠道环境的影响。以机械碾压法、微波法和超声法破壁的灵芝孢子(Ganoderma lucidum spore,GLS)为研究对象,经体外模拟人体口腔、胃、小肠消化系统及透析模型,随后将消化后的底物进行体外发酵。测定消化各个阶段的灵芝孢子失质量率、多糖和三萜化合物释放量、生物可接受率和透析率以及小肠消化底物在0、6、12、24、48 h体外发酵过程中pH变化。结果显示,胃和小肠是灵芝孢子的主要消化场所,破壁组平均失质量率达到23.84%,其中机械碾压组更易被消化,其失质量率为29.46%。97%的多糖在胃肠液中溶出,机械碾压组多糖的生物可接受率具有最高水平,为87.33%。三萜只在破壁组小肠模拟消化中有微量溶出,平均约1.50±0.04 mg/g,95.2%的三萜随沉淀进入结肠。体外发酵结果显示,发酵液pH在0~12 h持续下降,并在12 h基本到达发酵终点。对比三种破壁灵芝孢子的消化特性,机械碾压法破壁的品质可观,不失为企业规模化破壁生产的优选。综上所述,破壁有利于提高灵芝孢子的有效成分在人体消化环境内释放量和生物可接受率,促进结肠发酵产酸,有助于调节人体肠道环境。

灵芝破壁孢子粉的抗肿瘤活性研究

目的研究灵芝破壁孢子粉对乳腺癌和口腔癌生长的抑制作用。方法采用灵芝破壁孢子粉乙醇提取物处理乳腺癌MCF-7细胞、口腔癌KB细胞和宫颈癌HeLa细胞,检测三种细胞的增殖情况。构建裸鼠乳腺癌MCF-7移植瘤和口腔癌KB移植瘤模型,评价灵芝破壁孢子粉进行灌胃治疗后的肿瘤生长抑制情况。结果灵芝破壁孢子粉乙醇提取物显著抑制MCF-7、KB和HeLa细胞的增殖,且该抑制效应呈剂量依赖性。在MCF-7移植瘤模型中,低、中、高3组灵芝破壁孢子粉给药剂量均有显著的肿瘤生长抑制作用,肿瘤抑制率分别为50.35%、65.72%和80.55%;但在KB移植瘤模型中,低剂量组没有显示显著的肿瘤生长抑制作用,而中剂量组和高剂量组表现出明显的抗肿瘤作用,3组肿瘤抑制率分别为4.03%、37.63%和40.59%。结论灵芝破壁孢子粉能够抑制MCF-7乳腺癌和KB口腔癌荷瘤裸鼠肿瘤的生长。

灵芝破壁孢子粉中粗多糖含量测定的不确定度评估及控制

为明确用于食用菌粗多糖含量测定的苯酚-硫酸分光光度法中对结果可靠性的影响因素,根据标准NY∕T 1676—2008中的方法对一个灵芝破壁孢子粉样品的粗多糖进行测定,分析该方法在测定过程中的不确定度来源,计算各分量的不确定度和合成不确定度,并对各分量不确定度对合成不确定度的贡献大小进行排名。结果表明:灵芝破壁孢子粉样品的粗多糖含量为2.71%±0.09%(k=2),影响不确定度的主要来源是标准品溶液配制和稀释、标准曲线拟合、样品重复性。增加标准工作溶液的配制量可有效降低苯酚-硫酸分光光度法的不确定度,并能提高其可靠性。

响应面法提取优化破壁灵芝孢子粉多糖及其分级醇沉组分的抗氧化活性研究

目的:对破壁灵芝孢子粉多糖(BGP)的最佳提取工艺、各分级醇沉多糖组分的抗氧化性进行探究。方法:以破壁灵芝孢子粉为原料,采用内部沸腾法探究提取温度、提取时间、料液比对BGP得率的影响;利用响应面法分析优化BGP的提取参数。用不同浓度的乙醇醇沉多糖,通过测定其DPPH自由基以及羟自由基的清除力,测定其抗氧化性。结果:根据回归模型分析预测结果,最佳提取工艺参数为提取温度83℃、提取时间7 min、料液比1:21。在此条件下BGP的得率为9.10%。以不同浓度的乙醇分级醇沉BGP,得到5种醇沉BGP组分。乙醇浓度为90%时,所得BGP的得率最高。抗氧化实验表明各醇沉BGP都具有一定的抗氧化活性。90%-BGP的抗氧化性稍强于其他醇沉多糖,并且随着多糖浓度的增加,各醇沉多糖的抗氧化性均有一定的增加的趋势。结论:利用最佳提取参数提取,不同乙醇浓度醇沉的BGP均具有一定的抗氧化活性。

武夷山赤芝GL8栽培子实体鉴定及其孢子粉成分检测

通过形态鉴定及ITS序列比对证实武夷山GL8栽培子实体为赤芝正品,在其ITS2区域中发现单碱基突变和插入位点。扫描电镜观察到原木栽培采收得到的GL8孢子粉纯度高,呈完整而饱满的椭圆形,而在破壁样品中可见其孢壁结构均已崩裂、破损。检测结果表明,破壁孢子粉中17种氨基酸总量可达13.04 g·100^(-1)·g^(-1),其中甲硫氨酸含量占比高达56.21%~57.64%;其粗脂肪含量高达32.1~32.4 g·100^(-1)·g^(-1),主要成分为以不饱和脂肪酸为主,包括油酸(C18∶1,61.4%)、亚油酸(C18∶2,13.3%)、棕榈酸(C16∶0,14.6%)和硬脂酸(C18∶0,4.2%)。通过临界CO_(2)流体萃取、采用气相色谱-质谱联用和高效液色谱分析,可以进一步确定孢子油中脂肪酸组分及是否存在齐墩果酸、熊果酸。

响应面法优化破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯提取工艺

目的:优化破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯的提取工艺。方法:利用超声波法提取破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯,以甘油三油酸酯提取率为响应值,在提取条件单因素试验的基础上,根据响应面Box-Behnken试验设计,优化壁灵芝孢子粉的提取工艺。结果:破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯最佳提取参数为料液比0.1:25(g·mL-1),超声功率560W,超声时间30min。在此最优提取条件下,破壁灵芝孢子粉中甘油三油酸酯提取率为5.01%。结论:本方法利用超声波提取法可以有效提取破壁灵芝孢子粉中的甘油三油酸酯。

化学视角下破壁灵芝孢子粉工艺研究

为了研究破壁灵芝孢子粉生产的关键技术,建立灵芝孢子粉制备破壁灵芝孢子粉胶囊生产工艺,测定了其20项指标,并依据国标和中国药典对试样进行了风险评估。结果表明:精深加工后的灵芝孢子粉呈棕褐色,有细微清淡的独特香味,孢子粉比较分散疏松,无颗粒感,无结块。按照指标要求中的国标方法检测发现破壁灵芝孢子粉胶囊中的水分为3.72%<8.0%、总灰分为0.89%<3.0%、过氧化值未检出、菌落总数为2.1×10^(3) CFU/g<10000、大肠菌群为0.3 MPN/g<0.92 MPN/g、霉菌和酵母为5 CFU/g<20 CFU/g、沙门氏菌未检出、金黄色葡萄球菌未检出、As为0.6 mg/kg<1.0 mg/kg、Ni为0.11 mg/kg<1.0 mg/kg、Pb为0.154 mg/kg<2.0 mg/kg、Cd为0.034 mg/kg<0.5 mg/kg、Cr未检出、Hg为0.036 mg/kg<0.1 mg/kg,说明中药饮片破壁灵芝孢子粉胶囊理化指标符合国家标准。

灵芝孢子化学成分及相关药理作用研究进展

灵芝孢子是灵芝生长成熟期从菌盖弹射出来的极其细小的孢子,含有多种活性物质,如多糖、核苷、三萜类、生物碱、脂肪酸等,具有抗肿瘤、调节免疫、保肝、降血糖、降血脂等药理作用,对肿瘤、肝硬化、高血脂、糖尿病等疾病具有一定治疗作用。该药物目前尚未被《中华人民共和国药典》收录,基于此,此文使用PubMed、CNKI、万方数据库检索灵芝孢子近10年相关研究性文献,从化学成分-药理作用2个方面对灵芝孢子目前的研究进行系统分析阐释,为该药物的进一步研究开发提供实验依据。

棘托竹荪孢子粉抗氧化活性研究

采用水提与醇提两种方法,通过DPPH自由基、羟基自由基、还原力、超氧自由基和对Fe2+的螯合力五种评价模型研究破壁与未破壁竹荪孢子粉的抗氧化活性。结果表明:不同的提取方法抗氧化效果不同,水提与醇提DPPH自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率和还原力较强,尤其超氧阴离子自由基清除率最高,可达88.10%;在羟基自由基清除率和对Fe2+的螯合力中,醇提比水提的抗氧化效果明显;破壁孢子粉相比未破壁的抗氧化活性强;不同极性有机溶剂对破壁竹荪孢子粉的抗氧化活性有影响;破壁竹荪孢子粗多糖有较好的DPPH自由基清除效果;初步测定了孢子粉的粗多糖、总黄酮和总多酚的含量,为开发竹荪孢子粉提供基础依据。

破壁灵芝孢子粉破壁率测定的研究

通过筛选,得到7%的硫酸锌溶液与无水乙醇以10:1(体积比)的混合溶液能使灵芝孢子更好的悬浮。利用该悬浮体系,辅以超声60 min和涡旋处理30 s,通过血球计数板对不同质量的孢子粉进行计数,建立未破壁灵芝孢子粉质量和孢子数之间的标准曲线,对同批未知破壁率的破壁孢子粉的破壁率进行检测,并人为混合7个标准破壁率的破壁孢子粉对该方法的准确度和精密度进行试验。结果表明:在该悬浮体系下,灵芝孢子粉在0.01～0.05 g/25 mL与孢子数线性关系良好。

破壁提取法的灵芝孢子破壁

提出了将灵芝孢子破壁和有效成分提取结合起来,经过一次加工处理就能同时完成灵芝孢子的破壁和提取的破壁提取法。详细阐述了该方法中灵芝孢子的破壁情况。实验结果表明:最佳破壁提取工艺的参数为:5%酒精为溶剂,超声波处理10min,高压处理的压力为400MPa,保压5min。

灵芝孢子破壁技术的研究

通过对灵芝孢子破壁技术的研究,确定了适合灵芝孢子油提取的前处理方法。分别采用萌发、超微粉碎、酶解进行灵芝孢子的破壁,效果不理想;将三种方法综合进行灵芝孢子破壁,取得了较好的效果,破壁率达到85.38%。因此,采用综合破壁法作为灵芝孢子油提取的前处理手段较为合适。

破壁灵芝孢子粉的质量探讨

研究和探讨破壁灵芝孢子粉的质量标准,利用性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别和主要成分含量测定的方法,初步掌握破壁孢子粉质量特性。薄层色谱鉴别可见清晰荧光斑点,其醇溶液加入硫酸后可见棕色环。总灰分测定显示:采自岫岩灵芝孢子粉和山东一等孢子粉灰分较低,山东三等孢子粉灰分含量较高。不同来源的样品总三萜类含量各不相同,高者达2.24%,低者1.26%。综合各项检测结果,初步确定了破壁灵芝孢子粉质量评价指标,方法稳定,可操作性强。

超高压超临界撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的机理分析

从灵芝孢子粉破壁的过程出发,结合灵芝孢子粉的结构,分析了采用超高压超临界撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的机理。分析结果表明:高速射流引起的撞击是造成灵芝孢子破壁的最主要原因。

灵芝孢子粉破壁技术、质量分析与深加工相关研究进展

破壁灵芝孢子粉为一种灵芝深加工产品,具有多种药理学活性,更易被人体吸收。灵芝孢子的破壁方法包括生物化学法、物理法和机械法等,工业生产多综合利用多种方法。破壁灵芝孢子粉的质量分析还没有统一的国家标准,灵芝孢子粉质量可以参考地方标准进行综合评价,还可以参考近期发表的一些分析方法。灵芝孢子粉提取物产品以孢子油为主,其它产品也有研发并推出市场。药理学研究表明,灵芝孢子油、灵芝孢子粉水提物和醇提物均具有抗癌活性,有良好的应用前景。

灵芝孢子合剂的安全性毒理学及保健功能评价

灵芝孢子合剂的主要成分为原木灵芝破壁孢子粉和原木灵芝浸膏粉 ,本研究对其安全性毒理学及保健功能进行评价。结果表明 ,灵芝孢子合剂对两种性别昆明种小鼠口投LD50 均大于 10 g/kg体重 ,且无任何病变、致突变作用 ,对SD大白鼠生长发育无不良影响 ,属实际无毒物。口饲不同剂量 (3g、1g、0 .33g/kg)的孢子合剂 ,昆明种小鼠S - 180和H - 2 2瘤重均显著低于对照组 ,高剂量组抑瘤率分别为 34.8%～ 39.7%和 32 .5%～ 37.7% ;而BALB/C小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率及脾脏自然杀伤细胞活性均明显高于对照组 (P <0 .0 1,P <0 .0 5)。本研究认为灵芝孢子合剂口服安全且无毒副作用 ,具有抑制肿瘤和免疫调节作用 。

凯氏定氮法测定灵芝破壁孢子粉中粗蛋白质含量的不确定度评定

对采用凯氏定氮法测定灵芝(Ganoderma lucidum)破壁孢子粉中粗蛋白含量的不确定度进行评定,结果表明合成相对标准不确定度为0.02%,扩展不确定度为0.04%。在本次孢子粉粗蛋白质测定中,引入不确定度的主要因素有盐酸标准溶液的浓度及样品测定中实际消耗的标准溶液体积。

超高压超临界流体撞击流方法制备破壁灵芝孢子粉的工艺研究

介绍了超高压超临界撞击流技术制备破壁灵芝孢子粉的方法及基本原理,对制备工艺进行了研究。加载压力、系统加热温度、保压时间及撞击靶距是影响灵芝孢子粉破壁率的因素,通过正交试验及对加热温度和撞击靶距所做的后续试验,确定了采用自行研制开发的试验系统进行灵芝孢子粉破壁的最佳工艺条件是加载压力300MPa,系统加热温度250°C,保压时间1h,撞击靶距10mm。在此工艺条件下,灵芝孢子粉的破壁率为88.48%。