Insight into synergistic antioxidation mechanisms of butyl hydroxyanisole with common synthetic antioxidants

Butyl hydroxyanisole(BHA) is usually blended with other synthetic antioxidants to improve the antioxidative property due to synergistic antioxidation. However, the synergistic antioxidation mechanisms of BHA with synergists have not been revealed yet. Thus, the antioxidation of BHA with butylated hydroxytoluene(BHT), tert-butylhydroquinone(TBHQ), or propyl gallate(PG) was investigated in the 2,2-azobis(2-amidino-propane) dihydrochloride oxidizing system. The contents of BHA, BHT, TBHQ,PG, and transformation products were measured by high-performance liquid chromatography. Transformation products were identified with liquid chromatography-mass spectrometry and gas chromatography–mass spectrometry. Results showed that synergistic antioxidation occurred between BHA and BHT, TBHQ, or PG. The synergistic antioxidation effect of BHA and BHT was attributed to the regeneration of BHA by BHT. Transformation products of BHA and BHT(compounds 6 and 7, dimers of BHA and BHT) had little contribution due to the relatively low content(<0.6%). The synergistic antioxidation effect of BHA and TBHQ or BHA and PG was attributed to the protective mechanism of TBHQ or PG on BHA. No transformation products were detected of BHA and TBHQ. Transformation products of BHA and PG(compounds 9 and 10, dimers of BHA and PG) had limited contribution due to the relatively low percentage(<7%). Therefore, BHA and BHT performed competitive antioxidation,while BHA and TBHQ or PG performed protective antioxidation.

气相色谱-质谱法测定XO酱中BHA、BHT和TBHQ

采用气相色谱 -质谱 (全扫描方式 )测定XO酱中丁基羟基茴香醚 (BHA)、二丁基羟基甲苯 (BHT)和叔丁基对苯二酚 (TBHQ)。样品用甲醇振荡萃取 ,以DB - 5MS为分析柱。 3种组分的回收率在 85 %～ 99%之间 ,相对标准偏差小于 8.4 % ;样品中BHA、BHT和TBHQ的检测限分别为 0 .0 5、0 .0 5和 0 .10 (mg/kg)。该法简单、快速、准确 ,可用于XO酱等基质复杂的富油食品中BHA。

加热条件下大豆油中BHA的损耗及其对大豆油品质影响

以不含外源性抗氧化剂大豆油为原料,采用烘箱法,结合HPLC和HPLC-MS,研究加热条件下丁基羟基茴香醚(BHA)的挥发、转化规律及其对大豆油品质的影响,并对其挥发和转化产物A进行分析研究。结果表明:不同加热温度下,BHA添加量(≥200 mg/kg)与其抗氧化效果呈正比;高温下BHA抗氧化效果明显减弱,与其会发生损耗有关。BHA损耗率随加热温度的升高和时间的延长而增加,而添加量对损耗率影响较弱;加热条件下大豆油中的BHA主要以挥发形式损耗,少量转化为其他产物:3,3'-二羟基-4,4'-二叔丁基-6,6'-二甲氧基联苯、2',6-二叔丁基-4',4-二甲氧基二苯醚和两者的部分同分异构体。因此,在加热条件下,BHA对大豆油具有一定的抗氧化性,同时也会发生挥发和转化损耗。

反相高效液相色谱法同时测定食品中抗氧化剂TBHQ、BHA与BHT

建立了同时测定特丁基对苯二酚(TBHQ)、丁基羟基茴香醚(BHA)和二丁基羟基对甲酚(BHT)的高效液相色谱法。考察了流动相组成、柱温等因素对分析效率的影响。样品经甲醇提取后,以E-clipse plus C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱为分析柱,0.02mmol/L乙酸铵水溶液-甲醇为流动相,线性梯度淋洗,紫外二极管阵列检测器检测,波长280nm。结果表明:TBHQ、BHA与BHT在0.5～20mg/L范围内有良好的线性关系,方法的检出限(S/N=3)分别为0.03,0.03和0.05mg/kg,加标回收率为83.45%～108.42%,相对标准偏差不大于12.79%。

BHA诱导人脐带间充质干细胞分化为神经细胞

目的:探讨丁基羟基茴香醚(BHA)能否将人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)诱导分化为神经细胞。方法:正常培养的第4代hUC-MSCs利用200μmol.L-1BHA加2 mmol.L-1巯基乙醇(β-ME)进行诱导。每12 h观察细胞形态变化,并于诱导后24和72 h收集细胞,提取RNA,RT-PCR检测基因表达情况,于第3天进行免疫荧光染色。结果:诱导12 h后即有少量细胞发生形态变化,随着时间的推移变化越来越明显,72 h时绝大部分细胞都已变成神经细胞形态。免疫荧光染色nestin、GFAP及NSE阳性。RT-PCR检测诱导后24 h开始有nestin、MAP及NF-L表达,72 h后nestin和NF-L表达减少,MAP表达增强,同时NeuroD1也有较强表达,表明此时已分化为成熟的神经元细胞。结论:BHA能快速地将hUC-MSCs诱导分化为神经细胞。

高效液相色谱法同时测定油炸食品中TBHQ、BHA、BHT

建立了高效液相色谱同时测定油炸食品中TBHQ、BHA、BHT的方法。用石油醚提取试样中的油脂,并以空白植物油预先溶解标样,再用甲醇提取油脂中的TBHQ、BHA、BHT,过滤后进高效液相色谱仪,经反相色谱分离后,根据保留时间和峰面积进行定性和定量。方法线性范围在0.5～200 mg/kg之间,检出限为1.0 mg/kg,回收率在81.7%～91.8%之间,RSD均小于2。本方法与现有标准相比,前处理简便、快速准确,可作为实验室油炸食品中抗氧化剂的常规检测方法。

高效液相色谱法测定植物油中TBHQ、BHA和BHT方法优化研究

优化了农业部标准NY/T1602-2008中色谱条件和样品前处理过程,建立以空白植物油预先溶解标样,以甲醇为提取剂,通过液相色谱法同时测定植物油中TBHQ、BHA、BHT的方法。该方法前处理简单、经济环保、检测快速准确,有效解决了农业部标准NY/T1602-2008方法回收率偏低的问题,有助于日常检测中快速、准确测定植物油中TBHQ、BHA、BHT含量。

BHA通过ERK信号转导途径促进小鼠胎肝细胞神经组织细胞特异基因表达的研究

目的:了解丁羟回香醚(BHA)对小鼠胎肝(FL)细胞神经组织特异基因表达的影响及其信号途径。方法:采用MACS试剂盒分离小鼠胚胎肝Sca-1+细胞,以DMEM+10%胎牛血清培养液培养;第4d后,加入或者不加入细胞外信号调节蛋白激酶特异抑制剂PD98059(25μmol/L)处理24h,再加入BHA处理24h(0.2mmol/L)。然后在无血清培养基中培养5d。用Westernblotting和半定量RT-PCR方法分析BHA处理前后基因表达。结果:经BHA诱导处理后,细胞表达神经组织细胞特异蛋白显著增加如神经丝轻链(NF-L)、神经丝重链(NF-H)、脑因子1(BF-1)和酪氨酸羟化酶(TH)。NF-L、NF-H、BF-1和TH分别增加6.32倍、2.73倍、3.37倍、2.68倍。而PD98059能明显抑制BHA诱导的神经组织细胞特异蛋白NF-L、NF-H、BF-1和TH的表达。结论:BHA通过细胞外信号调节蛋白激酶途径促进小鼠FLSca-1+细胞表达神经组织细胞特异抗原、结构和功能基因。

PI3K活性与BHA诱导小鼠胎肝细胞表达神经组织细胞特异基因有关

目的:了解丁羟回醚(BHA)对小鼠胎肝(FL)细胞神经组织特异基因表达的影响及其信号途径。方法:小鼠胎肝细胞,以DMEM/F12+10%胎牛血清培养液培养;第4 d后,去悬浮细胞,留黏附细胞,加入或者不加入磷酸肌醇3羟基激酶(PI3K)抑制剂LY294002(20μmol/L)处理24 h,再加入BHA至终浓度0.2 mmol/L,然后继续培养5d。用Western blot和半定量RT-PCR方法分析BHA处理前后神经组织细胞特异基因表达。结果:胎肝细胞本身表达神经组织特异基因水平较低或者不表达。BHA则促进了胎肝细胞内神经组织特异基因表达:NF-L mRNA增加5.8倍、NF-H mRNA增加8.0倍、TH mRNA增加30倍、BF-1 mRNA增加2.68倍;NF-L蛋白增加11.29倍、NF-H蛋白增加5.5倍、BF-1蛋白增加2.53倍、TH蛋白增加4.76倍。而LY294002能明显抑制BHA诱导的神经组织细胞特异蛋白NF-L、NF-H、BF-1和TH的表达。结论:PI3K活性与BHA诱导小鼠胎肝细胞表达神经组织细胞特异结构和功能基因有关。

气相色谱法测定食用油中BHA和BHT残留量的对比研究

目的建立气相色谱法测定食用油中叔丁基羟基茴香醚(butyl hydroxyanisole,BHA)和二丁基羟基甲苯(butylated hydroxytoluene,BHT)的残留量。方法使用无水乙醇萃取样品,经中性氧化铝吸附杂质,HP-5毛细管柱分离,使用气相色谱仪定量分析BHA和BHT在食用油中的残留量。同时,与GB/T 5009.30中的方法进行对比,考察了本方法的线性、重现性、回收率和精密度。结果本方法中BHA和BHT的线性范围分别为2.02~40.48 ng和2.07~41.36 ng,标准曲线方程分别为Y=16.61X+10.03(r=0.9996)和Y=20.14X+16.56(r=0.9997);BHA和BHT的检出限分别为92.4 ng/kg和108.6 ng/kg,加标回收率分别为98.94%(相对标准偏差为0.33%)、98.69%(相对标准偏差为0.34%)。结论本实验建立的方法灵敏度高、定量准确,和国标法相比,具有简单实用的特点,适合食用油中BHA和BHT残留量的检测。

高效液相色谱法测定油脂食品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)含量的不确定度评定

目的:评价液相色谱法测定油脂食品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)的不确定度;方法:分析不确定度来源,建立分析结果的数学模型,计算不确定度分离、结果的合成不确定度及扩展不确定度。结论:测量不确定度可用于高效液相色谱法测定油脂食品中叔丁基羟基茴香醚(BHA)含量测定结果的评定。

气相色谱-质谱选择离子法测定化妆品中抗氧化剂丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯

采用气相色谱 质谱 (选择离子方式 )测定化妆品中抗氧化剂丁基羟基茴香醚 (BHA)和二丁基羟基甲苯(BHT) ,样品用甲醇振荡萃取 ,以SupelcoWAXTM 10 (30m× 0 2 5mmi.d .× 0 2 5 μm)为分析柱。该方法对样品中BHA和BHT的检测限分别为 2 5 μg/g和 0 5 μg/g。方法简便、快速、灵敏 ,可用于多种化妆品的检验。

猴头菇提取液抑菌及抗氧化活性研究

应用琼脂扩散法、铁离子还原法(FRAP)和自由基清除实验法(DPPH)分别研究了猴头菇四种提取液的抑菌能力、抗氧化活性和自由基清除能力。发现发酵上清液和菌丝开水提取液的抑菌效果较差(p>0.05),菌丝乙醇提取液的抑菌效果较好(p<0.05),菌丝超声提取液具有较强的抑菌效果(p<0.01);菌丝超声破碎液抗氧化活性最高(p<0.01),其次是乙醇提取液和开水提取液(p<0.05),发酵上清液的抗氧化活性最低(p>0.05);超声破碎提取液远大于其他几种提取液的自由基清除能力。结果表明,利用超声波提取的猴头菇提取液抗氧化和抗菌活性最高。

气相色谱-质谱法测定化妆品中抗氧化剂

提出了气相色谱-质谱法测定化妆品中丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、特丁基对苯二酚3种抗氧化剂含量的方法。化妆品试样用甲醇溶解,涡旋振荡3min,超声提取10min,用气相色谱-质谱法测定。分别以质荷比(m/z)165,205,151作为定量离子。3种抗氧化剂回收率在73.8%～114.0%之间,测定下限(10S/N)分别为4,3,10mg·kg^(-1)。

流动注射化学发光法测定食品中叔丁基茴香醚与2,6-二叔丁基对甲酚

基于叔丁基茴香醚(BHA)与2,6 二叔丁基对甲酚(BHT)与铬(Ⅵ)的还原反应,产生的铬(Ⅲ)催化Luminol(鲁米诺) 过氧化氢化学发光体系的研究,结合流动注射技术,建立了一种高灵敏度的快速测定BHA与BHT的新方法。方法的线性范围为2.0×10-9～4.0×10-5g·ml-1和2.8×10-9～1.0×10-5g·ml-1,检出限为6.0×10-10g·ml-1和8.0×10-10g·ml-1,相对标准偏差为1.2%和1.4%(1.0×10-7g·ml-1BHA和BHT,n=11)。方法应用于食品中痕量BHA和BHT的测定,结果满意。

气相色谱-质谱法同时测定食品中3种脂溶性抗氧化剂

目的：建立食品中丁基羟基茴香醚（BHA）、二丁基羟基甲苯（BHT）和叔丁基对苯二酚（TBHQ）3种脂溶性抗氧化剂的气相色谱-质谱仪器方法和样品前处理方法。方法：样品经乙腈提取后,进行气相色谱-质谱分析,采用外标法定量。结果：在0.1-10.0 mg/kg添加水平范围内,3种抗氧化剂的添加回收率在69.1%-111.1%之间,相对标准偏差4.0%-7.5%,方法的测定低限（LOQ）为0.1 mg/kg。

PSE-HPLC法测定食品中叔丁基羟基茴香醚和2,6-二叔丁基羟基甲苯

目的:建立测定食品中抗氧化剂叔丁基羟基茴香醚(BHA)和2,6-二叔丁基羟基甲苯(BHT)加压溶剂萃取-高效液相色谱法(PSE-HPLC法)。方法:采用正交试验对影响PSE萃取效率的温度、压力、萃取溶剂、萃取时间进行优化,联合HPLC进行测定,并确定分别以BHA提取量、BHT提取量以及总量为评价指标的最优条件。结果:PSE-HPLC法测定BHT和BHA的相对标准偏差(RSD)为0.5%～3.1%,并且在1.0～200.0μg/mL范围内色谱峰面积与组分质量浓度均有很好的线性相关性(r≥0.9997),检出限为0.05μg/mL,在最优条件下的回收率为92.60%～97.80%。结论:PSE-HPLC法简便、快速、效率高,方法的重现性、线性相关性以及检出限理想,适用于食品中BHT和BHA含量及两者总量的同时快速检测。

包装材料中三种抗氧化剂的快速检测

建立食品和药品包装材料中3种抗氧化剂2,6-二叔丁基对甲基苯酚、丁基羟基茴香醚和特丁基对苯二酚的气相色谱检测法。样品以环己烷和异丙醇的混合液为提取溶剂,采用微波辅助萃取法进行提取。以Rtx?-5为分析柱,氢火焰离子化检测器检测,外标法定量。3种抗氧化剂在5.0～100.0mg/L范围内线性关系良好(r2>0.998)。在3个添加水平下,3种抗氧化剂的回收率范围为81.0%～95.2%,相对标准偏差小于10%。方法检出限范围为0.16～0.41mg/kg。该方法操作便捷,灵敏度高,可用于食品和药品包装材料中抗氧化剂的快速检测。

蛋白核小球藻对叔丁基对羟基茴香醚的毒性响应

以蛋白核小球藻（Chlorella pyrenoidosa）为实验生物，从急性毒性及生化指标方面研究饲料添加剂叔丁基对羟基茴香醚（Butylated hydroxyanisole，BHA）对浮游植物毒性的影响，为该药物的生态毒性评价提供参考依据．结果表明BHA对小球藻生长有一定影响．BHA对小球藻的48hEC50为3．25mg／L，其安全质量浓度为0．33mg／L，毒性较大，属于中毒．BHA对小球藻体内谷胱甘肽硫转移酶（GST）和过氧化氢酶（CAT）产生明显的影响，对GSH和EROD的影响较弱．小球藻CAT活性受BHA诱导作用较显著，并随BHA暴露质量浓度的升高存在先诱导后抑制的现象，表现为典型“钟形曲线”．BHA质量浓度在1-10mg/L时，GST活性受到显著诱导，但随质量浓度进一步增高，当〉10mg/L后，GST活性趋于饱和．在低质量浓度BHA暴露条件下，CAT和GST适合作为BHA暴露的生物标记物．

2(3)-叔丁基-4-羟基茴香醚对乙醇诱发大鼠胃粘膜损伤的保护作用

目的：研究叔丁基４羟基茴香醚（ＢＨＡ）对乙醇诱发胃粘膜损伤的保护作用。方法：通过给大鼠ｉｇ无水乙醇制备胃粘膜损伤模型，测定胃粘膜内一些酶的活性和ＭＤＡ含量。结果：ｉｇＢＨＡ２０和１００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１连续３ｄ，能显著防止乙醇诱发的胃粘膜损伤，并降低由乙醇所致的ＭＤＡ含量增加。ＢＨＡ有诱导醌还原酶、谷胱甘肽还原酶活性增加的作用，且能阻止由乙醇引起的醌还原酶、谷胱甘肽还原酶和ＳＯＤ活性的降低。结论：ＢＨＡ对乙醇诱发大鼠胃粘膜损伤有保护作用。