肝硬化患者胰高糖素负荷的血c-AMP及血糖反应性观察

目的 :观察肝硬化患者对胰高糖素负荷后的血c -AMP及血糖反应能力。方法 :38例肝硬化患者按Child -Pugh肝功能分级 ,分为A级 (10例 ) ,B级 (14例 ) ,C级 (14例 )三个亚组。 11例健康者为对照组。清晨空腹静卧 ,套管针肘静脉穿刺并固定 15min后采集基础血c -AMP和血糖标本 ,即刻以每公斤体重 2 .5 μg胰高糖素快速静脉注射 (30s内 ) ,分别于注射后 5 ,15 ,30及 45min采集血c -AMP和血糖标本。以放射免疫法测定血浆c -AMP浓度。以葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。结果 :肝硬化各组与对照组比较 ,基础血浆c-AMP浓度均显著高于对照组 ,而基础血糖无显著差异。胰高糖素负荷后 5min血浆c -AMP浓度即明显增高 ,于 10～ 15min达高峰 ,多数达峰时间在 10min ;血糖于 5min开始升高 ,15～ 30min达高峰 ,多数达峰时间在30min ,肝硬化各组的血c-AMP及血糖反应曲线均低于对照组 ,且肝硬化严重程度愈重 ,血c -AMP及血糖反应曲线愈低 ,峰值血浆c -AMP及峰值血糖浓度 ,肝硬化总体 (12 2 .0 8± 84.39pmol/ml,5 .71± 0 .75mmol/LA级 (148.0 7± 85 .0 8pmol/ml,6 .2 5± 0 .48mmol/L)、B级 (12 0 .47± 173 .34pmol/ml,5 .84± 0 .6 0mmol/L)及C级 (83 .0 4± 5 0 .96 pmol/ml,5 .11± 0 .6 7mmol/L)均显著低于对照组 (2 19.

癫癎持续状态对发育期大鼠学习记忆及海马磷酸化的c-AMP反应元件结合蛋白表达的影响

目的探讨癫癎持续状态(SE)对发育期大鼠学习记忆功能及海马磷酸化的c-AMP反应元件结合蛋白(pCREB)表达的影响。方法6周龄SD大鼠32只随机分为SE组和9g/L盐水对照组(NS组)。戊四氮(PTZ)诱导发育期大鼠SE。采用Morris水迷宫和Y迷宫观察大鼠学习记忆功能的改变,应用免疫组织化学方法检测大鼠海马各区pCREB的表达。结果与NS组比较,SE组在Morris水迷宫测试中平均逃避潜伏期明显延长(P<0.05),原平台所在象限的游泳时间明显缩短(P<0.05);Y迷宫中达标所需的训练次数显著增多(P<0.05),24h记忆保持率明显降低(P<0.05)。海马CA1区和齿状回(DG)区pCREB表达显著下调(P<0.05)。结论SE可使发育期大鼠学习记忆功能受损,其机制可能与海马pCREB表达减少有关。

钙离子对新生大鼠脑缺氧缺血后C-AMP反应元件结合蛋白磷酸化的影响

目的:探讨新生大鼠脑缺氧缺血(HI)后钙离子对c-AMP反应元件结合蛋白(CREB)磷酸化的影响,为临床治疗缺血缺氧性脑病和研制新药提供理论依据。方法:7d龄SD鼠(n=126),完全随机分为3组:假手术组42只(仅作颈正中切口,游离右颈总动脉不结扎);缺氧缺血组42只、钙离子拮抗剂加缺氧缺血组(干预组)42只。后两组用0号线结扎右颈总动脉2h,予以低氧2h,制备成缺氧缺血(HI)脑损伤模型。干预组动物分别在模型制成前、后腹腔内注射钙离子拮抗剂尼莫地平。用免疫组化法测各组HI后不同时间点右侧海马CA1区P-CREB阳性细胞数。结果:HI组右侧海马CA1区P-CREB表达较对照组明显增强(P<0.01),4h达高峰后逐渐下降;干预组新生大鼠右侧海马CA1区P-CREB表达较HI组无明显减少(P=0.452>0.05)。结论:钙离子对CREB磷酸化无明显影响。钙离子拮抗剂可用于缺氧缺血性脑病治疗。

胰高糖素负荷的血c-AMP及血糖值与肝硬化患者肝功能状况的关系

目的 :了解胰高糖素负荷后的血c-AMP及血糖反应值与肝硬化患者肝功能状况的关系。方法 :38例肝硬化患者按Child -Pugh肝功能分级 ,分为A级 (10例 )、B级 (14例 )及C级 (14例 )三个亚组。 11例健康者为对照组。清晨空腹静卧 ,套管针肘静脉穿刺并固定 15min后采集基础血c -AMP及血糖标本 ,即刻以每公斤体重 2 .5 μg胰高糖素快速静脉注射 ,分别于注射后 5、10、15、30及 4 5min采集血c -AMP及血糖标本。以放射免疫法测定血浆c-AMP浓度 ,以葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度。结果 :肝硬化各组的血浆c -AMP峰值浓度及血糖峰值浓度均显著低于对照组 (P <0 .0 0 1～ 0 .0 5 ) ,且随肝硬化严重程度增加而降低。血c -AMPP/B值及血糖P/B值 ,肝硬化总体为 7.5 6± 3.4 5和 1.2 2± 0 .6 4mmol/l,A级为 9.5 2± 2 .6 3和 2 .13± 0 .2 0mmol/L ,B级为 8.11± 2 .5 5和 1.17± 0 .2 9mmol/L ,C级为 5 .2 0± 4 73.79和 0 .6 3± 0 .2 4mmol/l,均显著低于对照组的 16 .2 7± 4 .72和 2 .5 0± 0 .4 8mmol/l(P <0 .0 0 1～ 0 .0 5 ) ,且随肝硬化严重程度的增加而降低。血c -AMPP/B值及血糖P -B值与血清白蛋白浓度呈显著正相关 (r =0 .5 8,P <0 .0 0 1;r =0 .79,P <0 .0 0 1) ,与血清总胆红素浓度 (R =0 .4 3,P <0 .0 1;R

表皮生长因子对HT-29细胞内游离Ca^(2+)和C-AMP的影响

本文应用荧光比色法和放射免疫法动态检测了表皮生长因子对大肠癌HT-29细胞内Ca^(2+)和C-AMP水平的影响。结果发表EGF可呈剂量依赖性升高Ca^(2+)水平,而EGF-R抗体则可阻断此作用;EGF可短时降低C-AMP水平,提示Ca2+和C-AMP参于EGF作用的信息传递。

c-AMP/PKA信号通路在γ-氨基丁酸抑制胆管癌细胞株QBC939生长中的作用研究

目的探讨c-AMP/PKA信号通路在γ-氨基丁酸(GABA)抑制胆管癌细胞株QBC939生长中发挥的作用。方法分别以GABA、GABA+8Br(c AMP激动剂)、GABA+H89(PKA拮抗剂)孵育胆管癌细胞株QBC939 48 h,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞的增殖及凋亡,ELISA法检测c AMP、蛋白激酶A(PKA)表达情况,Western blot法检测PKA I/PKA II蛋白表达。结果 MTT及流式细胞术检测结果显示8Br协同GABA所导致的增值抑制(20.30%±0.57%vs 16.11%±0.73%,t=8.977,P<0.05)和凋亡效应(32.62%±2.45%vs 28.38%±1.53%,t=2.929,P<0.05),而H89拮抗此效应;ELISA检测结果显示GABA明显上调c AMP及PKA的含量,8Br协同GABA增加c AMP含量(26.08±0.15 vs 25.88±0.06,t=8.565,P<0.05),H89拮抗GABA所导致PKA的含量(933.13±3.13 vs 947.71±6.51 t=2.512,P<0.05);Western blot检测结果显示,GABA较对照组能明显下调PKA I(0.0878±0.003 vs.0.1521±0.003,t=29.687,P<0.05),上调PKA II蛋白的表达(0.2042±0.012 vs 0.1461±0.072,t=8.152,P<0.05)。结论 GABA可能通过c AMP/PKAII信号通路发挥抑制胆管癌细胞株QBC939生长的作用。

几株霍乱弧菌体内c-AMP含量与菌体产毒量的关系

用放射免疫分析法测定了4株致病性弧菌(Vibrio cholerae)体内c-AMP(环磷酸腺苷)的含量,并提取了霍乱肠毒素。又用中国仓鼠卵巢细胞(CHO)测毒法测定了4株弧菌的肠毒素含量。结果表明,弧茵体内c-AMP的含量与菌体产毒量有关,即产毒量高的菌株体内c-AMP含量低,反之则c-AMP含量高。

含椭圆悬钩子提取物的c-AMP磷酸二酯酶抑制剂

椭圆悬钩子RubusellipticusSmith提取物具有c—AMP磷酸二酯酶抑制作用。用作减肥剂、赋形剂、稳定剂和调味剂，也可作为基础化妆品（如霜剂、洗剂）、软膏、外用液体制剂、沐浴液和粘合剂等。本品有效、安全，可预防皮肤松弛、下垂、肿胀，促进脂肪分解。

嗜热链球菌c-di-AMP合成酶的结构预测

作为一种新兴第二信使分子,c-di-AMP具有全局调控胞内渗透压平衡、DNA损伤和生物膜形成等生理功能。本实验室在实验前期筛选出了一株高产胞外多糖的嗜热链球菌菌株S-3,但未对其进行c-di-AMP信号通路研究。本研究在嗜热链球菌S-3全基因组中筛选出c-di-AMP合成酶(StDAC),对其二级结构进行预测,结果显示St DAC二级结构包含42.98%α-螺旋、15.32%β-折叠和38.30%无规则卷曲。利用SWISS-MODEL和Modeller对StDAC进行单模板和多模板同源建模,由SWISS-MODEL建立的模型通过了Ramachandran、Errat和Verify-3D评估,表明其结构较为合理;而Modeller建立的模型仅通过了Ramachandran评估,总体结构评分较低。本研究预测的嗜热链球菌StDAC三维模型为解析其结构和功能奠定了基础。

乳酸菌第二信使分子c-di-AMP研究进展

微生物依赖信号识别和信号传递来感知并响应外界环境变化。c-di-AMP作为第二信使分子在信号传导过程中发挥着关键作用,其通过酶、转录调控因子和核糖开关等受体靶标来调控细胞生长、生物膜形成、K^(+)稳态、DNA完整性、细胞壁合成和脂肪酸合成等与生理功能相关的基因和蛋白的表达。尽管对于c-di-AMP代谢调控在枯草芽孢杆菌、单增李斯特氏菌和金黄色葡萄球菌等细菌中的研究较为深入,但对其在乳酸菌中的研究却相对较少。基于此,文章重点关注乳酸菌中cdi-AMP的代谢及其在K^(+)稳态和抑制甘氨酸甜菜碱转运中的信号传导作用;同时,通过总结现有研究中的乳酸菌c-di-AMP代谢调控,深化对乳酸菌第二信使分子信号调控的认知。

Ca^(2+)对新生大鼠脑缺氧缺血后CREB磷酸化及神经元凋亡的影响

目的 :探讨Ca2 + 对新生大鼠脑缺氧缺血 (HI)后c AMP反应元件结合蛋白 (CREB)磷酸化及神经元凋亡的影响 ,为临床治疗缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)提供理论依据 .方法 :7d龄SD鼠 (n =1 2 6 ) ,完全随机分为 3组 :假手术组 4 2只 (仅作颈正中切口 ,游离右颈总动脉不结扎 ) ;缺氧缺血组 4 2只、Ca2 + 拮抗剂加缺氧缺血组 (干预组 ) 4 2只 .后两组用 0号线结扎右颈总动脉 2h ,予以低氧 2h ,制备成缺氧缺血 (HI)脑损伤模型 .干预组动物分别在模型制成前、后腹腔内注射Ca2 + 拮抗剂尼莫地平 .用免疫组化法观察各组HI后不同时间点右侧海马CA1 区P CREB阳性细胞数 ;用TURNEL法观察各组HI后不同时间点右侧海马CA1 区凋亡细胞数 .结果 :HI组右侧海马CA1 区P CREB表达增强 (P <0 .0 1 ) ,4h达高峰后逐渐下降 ;HI组的凋亡细胞数增多 ,4 8h达高峰后逐渐下降 .干预组右侧海马CA1 区P CREB的表达较HI组无明显减少(P >0 .0 5 ) ,但凋亡细胞数较HI组明显减少 (P <0 .0 1 ) .结论 :Ca2 + 对CREB磷酸化无明显影响 ;Ca2 + 参与HI后神经元损伤 ;Ca2 + 拮抗剂可减轻神经元损伤 .

新生鼠缺氧缺血再灌注后海马p-CREB c-fos表达的变化(英文)

目的 探讨新生鼠脑缺氧缺血再灌注后的神经保护机制。方法7d龄SD新生鼠7窝(每窝选用8只,共56只),随机分为假手术对照组、缺氧缺血脑损伤组。经弹性管穿线阻断右颈总动脉3h,低氧(8％O_2和92％N_2混合气)1h,制备HIBD模型。3h后剪开扎线予再灌注,彩色多普勒监测右侧颈总动脉血流。免疫组化检测磷酸化的CREB和c-fos在不同时间点(再灌注3h,6h,12h,24h,48h,72h和7d及假手术后24h)海马区的表达。Thionin染色观测神经元凋亡情况。结果 HIBD再灌注3h,24h新生鼠右侧海马p-CREB表达达高峰,7d后下降至假手术组水平;c-fos表达6h达高峰,24h稍降,48h又升高,7d后显著降低但仍高于对照组(P< 0.01)。Thionin染色发现:再灌注24h右侧海马CA1区已有明显的凋亡,但7d后神经元无明显丢失。结论 缺氧缺血再灌注后CREB磷酸化可能经信号转导调节c-fos的表达,这对保护损伤侧海马锥体神经元,尤其是敏感的CA1区神经元是非常重要的。 [中国当代儿科杂志,2003,5(1):12—16]

降钙素基因相关肽对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CREB和磷酸化CREB的上调作用

目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CREB和磷酸化CREB(p- CREB)表达的影响。方法:制作局灶性脑缺血再灌注模型实验组并给予CGRP,应用免疫组织化学、Western印迹和图像分析方法检测大鼠海马CA1区CREB和p-CREB表达。结果:缺血再灌注组CA1区CREB表达较假手术组减少,CGRP组CA1区的CREB表达高于缺血再灌注组。缺血再灌注组CA1区p-CREB表达高于假手术组,CGRP组p-CREB表达多于缺血再灌注组。结论:CGRP上调局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CREB和p-CREB的表达,CGRP对缺血神经元的保护作用可能是通过上调神经元内CREB和p-CREB来实现的。

新生鼠海马缺氧缺血再灌注后p-CREB、c-Jun与神经保护

目的 探讨缺氧缺血再灌注后海马神经元的存活机制。方法 5 6只SD 7日龄鼠随机分入假术对照组、缺氧缺血脑损伤 (HIBD)组。制备HIBD模型。多普勒监测动脉血流。免疫组织化学测磷酸化的CREB、c Jun在海马区的表达。Thionin染色观察神经元凋亡。结果 HIBD再灌注 3、2 4h仔鼠右侧海马各区p CREB达高峰 ,7d后降至对照组水平 ;对照组两侧p CREB有基础表达 ,但无差异。c Jun 6h达高峰 ,2 4h稍降 ,48h又升高 ,7d后显著降低 ,但仍显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;对照组两侧低表达。再灌注 2 4h右侧海马CA1区神经元已有明显凋亡 ,但 7d后神经元无明显丢失。假手术组海马极少数神经元凋亡。结论 CREB磷酸化可能经信号转导调节c Jun的表达促进神经元损伤后修复。这对保护CA1区锥体神经元是非常重要的。

吗啡成瘾戒断对大鼠海马CA1区P-CREB表达的影响

目的探讨吗啡成瘾戒断后大鼠海马CA1区P-CREB的表达变化。方法48只健康雄性成年SD大鼠,随机分为实验组和对照组:实验组腹腔注射吗啡起始剂量5mg/kg,1d2次,逐日递增,连续10d;对照组:以生理盐水代替吗啡。停药后7d、14d和21d处死。用免疫组织化学方法(ABC法)检测海马CA1区P-CREB的表达,图像分析系统测定阳性反应产物的平均灰度值。结果P-CREB表达在7d、14d实验组与对照组相比表达上调(P<0.05),21d与对照组比较无显著差异(P>0.05)。结论海马CA1区CREB磷酸化在吗啡依赖的形成中发挥作用。

用c-AMP处理吉田腹水肉瘤进行体外培养,其中α-胎儿球蛋白的生成增加

作者将 UYSCL-38的吉田肉瘤无性繁殖细胞系,在37℃条件下进行体外培养。然后加入不同浓度的 c-AMP(3′,5′环一磷酸腺苷)和茶硷(分解 c-AMP 的磷酸二酯酶的抑制物)。用血球计测定细胞增殖数;用放射免疫分析测定α-胎儿球蛋白;用同位素标记胸腺嘧啶核苷、脲嘧啶核苷和亮氨酸的参入法以观察 DNA、RNA 和蛋白质的合成速度。

电针对环-磷酸腺苷所致皮层痫样电活动的抑制作用

我们以前的工作提出了侧脑室注入环-磷酸腺苷(C-AMP)诱发家兔皮层的痫样电活动,同时此痫样电活动可被某些中枢递质的受体阻断剂—α、DA 受体阻断剂所阻断,表明 cAMP 的致痫作用可能与单胺类的一些递质有关。有关电针制痫方面已有不少报导,但所用致痫因素多以青霉素直接施于大脑皮层的作用。我们的实验是以侧脑室注入 cAMP 后,诱发皮层产生痫样发作波,试图观察电针双测“足三里”穴对此制痫效应。材料和方法20只成年健康家兔,体重1.8～2.5kg,雌雄不拘。在10%含水氯醛静脉麻醉下,埋藏侧脑室套管,并在相当于左。

8-氯-腺嘌呤核苷-3′,5′-环磷酸酯及环磷酸胺的合成

2′-对甲苯磺酰基腺苷在醋酸和DMF溶液中用N-氯代琥珀酰亚胺氯化,可得到49％8-氯-2′-对甲苯磺酰基腺苷。后者经环亚磷酰化反应可得到相应的3′,5′-环亚磷酸酯或酰胺,再经氧化或硫化和脱去2′-位保护基得到目标产物。反应中发现3′,5′-环磷酸酯衍生物主要产物是烷氧基处于竖键的异构体,而磷酰胺衍生物则是以胺基处于横键为主要产物。

苓甘五味姜辛汤对哮喘大鼠环腺苷酸、环腺苷酸依赖性蛋白激酶A及水通道蛋白5的影响

目的观察苓甘五味姜辛汤对寒饮伏肺型哮喘大鼠环腺苷酸(c AMP)、环腺苷酸依赖性蛋白激酶A(PKA)及水通道蛋白5(AQP5)含量的影响,探讨其对寒饮伏肺型哮喘的作用机制。方法采用卵清蛋白腹腔注射和雾化激发+寒冷刺激建立哮喘模型。将90只大鼠随机分为空白组、模型组、地塞米松组及苓甘五味姜辛汤低、中、高剂量组,各治疗组给予相应药物干预,ELISA检测大鼠c AMP、PKA、AQP5含量。结果与空白组比较,模型组大鼠c AMP、PKA、AQP5含量降低(P<0.05);与模型组比较,各治疗组大鼠c AMP、PKA、AQP5含量升高(P<0.05),其中苓甘五味姜辛汤高剂量组作用显著(P<0.05)。结论苓甘五味姜辛汤可调节寒饮伏肺型哮喘大鼠c AMP、PKA、AQP5正常分泌,增加气道液体分泌,降低黏蛋白浓度,从而起到治疗哮喘的作用。