针刺对VD大鼠记忆障碍及c-fos mRNA和蛋白表达的影响

目的 :探讨针刺对血管性痴呆大鼠 (VD)学习记忆障碍的改善及其与c -fos的关系。方法 :采用 4-血管阻断全脑缺血再灌注制备VD大鼠模型 ,针刺脑、肾耳穴后 ,作原位分子杂交、免疫组化、行为学检测、图像分析。结果 :治疗后VD大鼠海马CA1区c -fosmRNA和蛋白表达增加与学习记忆成绩呈正相关。结论 :耳针改善VD大鼠学习记忆 ,可能与针刺加强c -fos的表达 。

大鼠脑局部缺血再灌流后c-fos mRNA及c-Fos蛋白的表达

线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌流动物模型 ,于缺血 1h后分别再灌流 1h及 2h。原位杂交及免疫组化染色显示 ,再灌流 1h及 2h ,缺血侧额叶及顶叶皮质、海马各区以及齿状回c fosmRNA及c Fos蛋白表达均有不同程度诱导 ,于再灌流前电针“百会”及“风府”2穴 3 0min ,c fosmRNA和c Fos蛋白的诱导于再灌流 1h及 2h在缺血侧额叶、顶叶皮质 (P <0 .0 0 1 )及齿状回 (P <0 .0 1 )均显著增加 ;海马各区c Fos蛋白表达于再灌流 2h亦有显著增加(CA1与CA4:P <0 .0 5 ;CA2与CA3 :P <0 .0 1 )。该区c fosmRNA表达增加仅见于再灌流 1h的CA1及CA4区 (P <0 .0 5 )。HE染色示缺血区的神经元变性亦减轻。结果表明 :再灌流前给予电针处理使c fosmRNA及其产物c Fos蛋白表达增加 。

甲基汞急性暴露下大鼠脑c-fos mRNA表达

目的探讨即刻早期基因c fos在甲基汞神经毒性分子机制中的作用。方法应用RT PCR方法研究大鼠注射甲基汞急性暴露后,中枢神经系统c fosmRNA表达。结果甲基汞在剂量为0.05mg/(kg·d)暴露60min和剂量为0.5mg/(kg·d)暴露20min就能够显著诱导大鼠脑即刻早期基因c fos表达;c fosmRNA表达量与汞的浓度没有明显正比关系。结论甲基汞能够显著诱导大鼠脑c fosmRNA表达,c fosmRNA表达变化在甲基汞神经毒性分子机制中具有重要作用,即刻早期基因c fos参与了甲基汞对中枢神经系统损害的毒性过程。

急救穴刺血对实验性脑缺血大鼠大脑皮层、海马区c-fos mRNA表达的影响

目的观察急救穴刺血疗法对实验性脑缺血再灌流大鼠大脑皮层和海马c-fos mRNA的影响。方法结扎双侧颈总动脉复制大鼠全脑缺血再灌注模型,在再灌注不同时间点取相应穴位刺血治疗,以RT-PCR法检测相关脑区c-fos mRNA含量。结果 大鼠全脑缺血后缺血+刺血组不同时间点大脑皮层和海马区c-fosmRNA表达明显增加。结论刺血可促进脑内c-fos mRNA表达,它可能通过与DNA的结合而调节其他基因的表达,从而成为对外界各种刺激的第三信使,影响细胞的生长、分化及再生等控制而达到神经保护作用。

亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆及大脑皮质c-fos mRNA和c-Fos蛋白表达的影响

目的:探讨亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆能力的影响,分析大脑皮质即刻早基因表达变化,初步探索铝对认知功能损害的毒性作用及机制。方法:随机将孕大鼠分为对照组和低、中、高染铝组,染毒组仔鼠出生后首日连续染毒3个月,然后各组大鼠进行水迷宫测试,铝含量检测,皮质神经细胞病理学观察,皮质c-fos mRNA和蛋白表达水平检测。结果:铝含量随染毒剂量增加而升高;染铝组学习记忆能力明显低于对照组,并呈剂量-效应关系;染铝组皮质神经细胞呈现神经纤维稀疏、神经元细胞脱失甚至空泡样变性等病理改变;中、高剂量组皮质区c-fos mRNA表达水平分别低于对照组和低剂量组。染铝组皮质区c-Fos蛋白表达水平低于对照组。随染毒剂量增加,c-fos mRNA和蛋白表达水平降低并具有一定的相关性。结论:亚慢性铝暴露损害大鼠学习记忆能力,其机制可能与铝造成皮质神经细胞功能减弱(即刻早基因c-fos mRNA和蛋白表达水平下降)有关。

小型猪冠状动脉球囊扩张术后MAPKs活性及c-fos mRNA增加

目的 :观察小型猪冠状动脉球囊扩张术后丝裂素活化蛋白激酶 (MAPKs)活性及c -fosmRNA的变化。方法 :小型猪 17头 ,6头作为正常对照 ,其余小型猪左冠状动脉前降支和回旋支行球囊过度扩张术。静脉麻醉处死动物 ,通过病理染色切片分析目标血管组织的形态学变化 ;采用反转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)方法 ,定量检测目标血管组织c-fosmRNA的表达 ;并测定血管组织MAPKs活性。结果 :球囊扩张术后 3天血管组织MAPKs活性及c -fosmRNA的表达均明显增加 (5 1 5 % ,P <0 0 1;318 7% ,P <0 0 1) ,术后 30d出现新生内膜的增厚和管腔狭窄。结论 :早期MAPKs活性升高和c

液压冲击脑损伤对大鼠c-fos mRNA表达的影响

为研究大鼠中度侧位液压冲击脑损伤对c－fos mRNA表达的影响,将雄性SD大鼠，随机分为正常对照组、手术对照组和损伤组。损伤组动物均给0.2MPa液压冲击造成脑损伤，按冲击后处死时间不同再分为5分钟、15分钟、30分钟、1小时、2小时组。应用RT－PCR方法半定量观察c－fos在大脑皮层和脑干的表达。结果显示，对照组顶叶皮层和脑干均有低水平c－fos mRNA表达，冲击后5分钟, 表达逐渐增强,冲击后2小时表达最强，表明侧位液压冲击脑损伤可诱导大脑皮层和脑干c－fos mRNA表达迅速增强,c－fos mRNA在大脑皮层和脑干表达的变化趋势基本一致。

芎芷地龙汤不同时间预防给药对偏头痛动物模型iNOS mRNA、c-fos mRNA表达的影响

目的观察芎芷地龙汤不同时间预给药对偏头痛动物模型iNOS mRNA、c-fos mRNA表达的影响。方法将健康雄性SD大鼠36只,随机分为0.9%氯化钠注射液组(6只)、模型组(6只)、舒马普坦组(6只)、中药1d预给药组(6只),中药3d预给药组(6只)、中药7d预给药组(6只),按照预定给药,造模结束后2 h取材,real-time PCR法测定三叉神经节、三叉神经脊束核丘脑、硬脑膜c-fos mRNA、iNOS mRNA表达情况。结果与0.9%氯化钠注射液组比较,模型组iNOS mRNA在三叉神经节、三叉神经脊束核、硬脑膜表达水平明显升高,在丘脑表达水平明显降低(P<0.01),给药干预后,三叉神经节、三叉神经脊束核、硬脑膜iNOS mRNA表达水平均降低,其中以预防给药7日组和舒马普坦组明显降低(P<0.01);丘脑iNOS mRNA表达水平有所升高,但各组与模型组差异均无统计学意义(P>0.05)。与0.9%氯化钠注射液组比较,模型组c-fos mRNA在三叉神经节、三叉神经脊束核表达水平明显升高,在丘脑、硬脑膜表达水平降低;给药干预后,c-fos mRNA在三叉神经节、三叉神经脊束核表达水平降低,以预防给药7d组和舒马普坦组降低明显(P<0.05或P<0.01);c-fos mRNA在丘脑、硬脑膜表达水平升高,其中以预防给药7d组和舒马普坦组升高幅度显著(P<0.05)。结论芎芷地龙汤预防给药可以减少NTG诱发的三叉神经节、三叉神经脊束核c-fos mRNA、iNOS mRNA表达,可以减少硬脑膜iNOS mRNA表达,而以预防给药7d效果好于预防给药3d、1d。

黄芪多糖对缺血脑损伤大鼠海马神经递质及c-fos mRNA表达的影响

目的:观察黄芪多糖(astragalan,AG)对缺血性脑损伤大鼠海马乙酰胆碱(ACh)、去甲肾上腺素(NE)、5-羟色胺(5-HT)及c-fos mRNA表达的影响。方法:取Wistar雄性大鼠100只,随机分成假手术组(sham-operated group,SOG)、模型组(model group,MG)、低剂量黄芪多糖治疗组(low-dose astragalan treatmentgroup,L-AGTG)、高剂量黄芪多糖治疗组(high-dose astragalan treatment group,H-AGTG),每组10只。所有MG和AGTG组颈部切开阻断右侧大脑中动脉,造成缺血性脑损伤后,AGTG组腹腔注射AG(5 mg.kg-1和15 mg.kg-1)。于1 d、3 d和7 d分别脑血流再灌注,随即评分神经功能缺损情况后取材,测定海马匀浆中ACh、NE和5-HT的含量,采用RT-PCR法半定量分析大鼠海马c-fos的mRNA水平。结果:AG能减轻脑缺血引起的海马损伤。L-AGTG 7 d和H-AGTG 3 d、7 d海马匀浆ACh、5-HT和NE的含量均显著高于MG而低于SOG(P<0.05或P<0.01),且呈现剂量递增趋势;SOG的c-fos mRNA表达低于MG(P<0.05或P<0.01),提示脑缺血因素造成了c-fos基因表达增强,加速了下游基因表达,有利于神经细胞的保护;H-AGTG 3 d、7 d c-fos mRNA表达均高于MG(P<0.05),提示黄芪多糖具有上调c-fos mRNA表达的作用。结论:黄芪多糖能减轻脑缺血再灌注引起的神经细胞损伤、改善海马神经功能,其作用机制与提高海马ACh、NE、5-HT含量和促进c-fos基因表达有关。

c-myc、c-fos mRNA及相关蛋白在糖尿病大鼠心肌细胞中的表达

目的观察2型糖尿病状态下大鼠心肌细胞中c-myc、c-fos mRNA及相关蛋白的变化。方法50只雄性SD大鼠随机分为对照组(15只)和糖尿病组(35只)。对照组喂养标准饲料,糖尿病组喂养高脂饲料。喂养8w后,检测空腹血糖、口服糖耐量试验、胰岛素抵抗指数(IRI)及血糖钳技术,证实糖尿病组大鼠产生了胰岛素抵抗。大鼠腹腔内注射STZ25mg/kg,血糖>7.8mmol/L为糖尿病大鼠模型,继续用高脂饲料喂养6w。14w时,用RT-PCR方法检测两组大鼠心肌c-myc、c-fos mRNA变化,用Western blot方法检测心肌相关c-myc、c-fos蛋白变化。结果高脂饲料喂养8w时,糖尿病组空腹血糖高于对照组(P<0.05);IRI较对照组明显升高(P<0.05)。14w时,糖尿病组体重和空腹血糖高于对照组(P<0.05),c-myc mRNA表达水平与对照组比较无显著性差异,c-fos mRNA表达水平较对照组明显降低(P<0.05),c-myc蛋白表达水平与对照组比较无显著性差异,c-fos蛋白表达水平较对照组明显降低(P<0.05)。结论c-myc、c-fos mRNA及其蛋白在糖尿病心肌中的表达可能存在时相性,c-fos mRNA及其蛋白在糖尿病心肌病变的分子水平信号通路中异常表达,可能与糖尿病心肌病的发生发展相关。

金雀异黄素对MCP-1诱导人脐静脉血管平滑肌细胞增殖及c-fos mRNA转录的影响

目的研究金雀异黄素对单核细胞趋化蛋白1(MCP1)诱导的人脐静脉血管平滑肌细胞(hUVSMC)增殖及cfosmRNA转录的影响。方法用不同浓度(10,30,90μmol·L-1)金雀异黄素预作用hUVSMC2h后加入终浓度为10μg·L-1的MCP1作用30min;采用逆转录聚合酶链反应检测细胞中cfos基因的表达;作用48h,用细胞计数检测细胞增殖的情况。结果金雀异黄素在低剂量(10μmol·L-1)即能抑制平滑肌细胞的增殖(P<0.05),在高剂量(30,90μmol·L-1)才能抑制细胞内cfosmRNA的表达(P<0.01,P<0.01)。结论金雀异黄素能抑制MCP1诱导的hUVSMC增殖,其机制可能与降低cfos的表达有关。

胃癌组织中多巴胺受体亚型D_4和c-fos mRNA的表达

目的:检测胃癌组织中多巴胺受体亚型D4和癌基因c-fos mRNA的表达,探讨2者在胃癌发生、发展中的作用。方法:应用原位杂交技术检测42例胃癌和35例正常胃黏膜组织中的D4和c-fos mRNA的表达,并分析2者与临床病理指标的关系及2者的相关性。结果:与正常胃黏膜比较,胃癌组织中D4阳性率明显降低(P<0.01),c-fos阳性率明显升高(P<0.01)。D4在肿瘤直径≥5cm组中的阳性率明显低于<5cm组(P<0.05),但与肿瘤分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移无关(P>0.05);c-fos在高中分化及肿瘤直径≥5cm胃癌组中的阳性率分别高于低分化组(P<0.01)和<5cm组(P<0.05),而与肿瘤浸润深度及有无淋巴结转移无关(P>0.05);胃癌组织中D4和c-fos的表达呈负相关(P<0.05),D4表达阳性的胃癌组织中c-fos阳性率明显低于D4阴性组。结论:D4和c-fos在胃癌发生及癌细胞增殖中起重要作用,且c-fos与胃癌分化密切相关。胃癌组织中D4低表达与c-fos高表达可能协同参与了胃癌的发生发展。

c-fos mRNA在围产期缺血缺氧脑损伤后的表达特点

为探讨围产期缺血缺氧脑损伤的发病机制，本实验对c-fos在脑缺血缺氧后的表达变化规律进行了研究。通过结扎Wistar孕鼠一侧子宫角血管的方法（未结扎侧子宫角作为对照），建立围产期缺血缺氧脑损伤动物模型。采用原位杂交方法观察了剖宫产后存活不同时间的大鼠大脑c-fosmRNA的表达，结果发现，缺血后即刻，大脑皮层和海马即出现c-fosmRNA的表达。随时间延长，表达量逐渐增加，至1h时，杂交信号最强，维持到2、4h后逐渐减弱。但到24h时.c-fosmRNA又出现第二次高表达，以后又逐渐减低，48h表达极微，3d后各组都未检出其表达。对照组仅在生后1h海马有较少量c-fosRNA的表达。结果表明，宫内缺血缺氧引起了即刻早期基因c-fosmRNA的表达增强，且具有一定规律性。c-fos的改变可能会引起其后续靶基因尤其是一些与细胞死亡相关基因的转录，从而引起脑组织的病理损害。

动员造血干细胞对局灶性缺血再灌注大鼠脑组织C-FOS mRNA表达的影响

目的探讨应用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员自体造血干细胞(HSC)对大脑中动脉栓塞/再灌注大鼠(MCAO/R)脑组织C-FOSmRNA表达的影响。方法制作MCAO/R模型;免疫组化双标记法鉴定HSC向神经元样细胞分化;RT-PCR法检测C-FOSmRNA表达水平。结果模型+G-CSF组再灌注后24 h出现CD34/Brdu双标记,48 h时双标记最为显著;再灌注后48 h出现CD34/NSE双标记。模型组各时间点C-FOSmRNA表达显著高于假手术组;G-CSF致再灌注48 h后C-FOSmRNA表达显著下调。结论应用G-GSF动员大鼠自体HSC可促进脑缺血再灌注损伤修复,调节C-FOSmRNA表达水平可能为其作用机制之一,而部分HSC来源的细胞分化为神经元样细胞可能参与缺血损伤修复过程。

斜视性弱视猫视皮质17区c-fos mRNA在治疗前后的表达

目的 检测斜视性弱视猫视皮质 c- fos m RNA在治疗前后的表达变化 ,探讨生后关键期内 ,弱视猫视皮质神经元的兴奋性在治疗前后的变化规律。方法 正常幼猫 15只随机分成 3组 :治疗组和斜视组共 9只 ,于 4周龄时行眼外直肌切除术造成人工斜视 ,经图形视觉诱发电位 (pattern visual evoked potential,P- VEP)确定形成弱视后 ,治疗组 3只猫于术后 4周缝合对侧眼。正常对照组 6只。采用原位杂交技术 ,分别检测 15只猫的 c- fosm RNA在不同时限的表达状况 ,并同时纪录 P- VEP的变化。结果 斜视猫视皮质的阳性染色细胞较正常猫减少 ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ,治疗后阳性染色细胞较治疗前有显著性的增加 ,与图象倒转视诱发电位 (pattern reversal visual evoked potential,PRVEP)反应的视皮质神经元的兴奋性变化大体一致。结论 测定 c- fos m RNA的改变可以从分子生物学的角度进一步证实弱视电生理学和形态学改变的基础 。

丹参对大鼠心肌缺血再灌注损伤后血浆一氧化氮和心肌c-fos mRNA表达的作用

目的 探讨丹参 (SM)对大鼠心肌缺血再灌注损伤 (IRI)后血浆一氧化氮 (NO)和心肌c fosmRNA表达等的作用。方法 采用结扎左冠状动脉前降支 30min ,再灌注复制大鼠心肌IRI的模型 ,结扎前 10min注射丹参 ,检测心肌再灌注 4 0min时血浆NO、内皮素 (ET)的含量和心肌组织乳酸脱氢酶 (LDH)、磷酸肌酸激酶 (CK) ,并用原位杂交方法观测左室心肌c fosmRNA的表达。结果 SM组 ( 4 g/kg)较IRI组 ,能显著减少心肌酶的漏出 [LDH :( 10 92± 5 7)U/Lvs ( 1977± 6 4 )U/L ;CK :( 185± 6 )U/Lvs ( 2 0 6± 4 )U/L ,(均为P <0 0 1) ];明显提高血浆NO含量 [( 5 8 3± 4 2 ) μmol/Lvs ( 2 1 8± 2 7) μmol/L ,(P <0 0 1) ],减少ET的生成 [( 2 2 8± 10 ) pg/mlvs ( 313± 13) pg/ml,(P <0 0 1) ],血浆NO与ET比值也明显升高 [( 0 30± 0 0 2 )vs ( 0 0 7± 0 0 1) ,(P <0 0 1) ];IRI组心肌组织c fosmRNA表达的光密度值为 0 2 1± 0 0 3,而SM组光密度值为 0 12± 0 0 3,c fosmRNA的表达明显减少(P <0 0 5 )。结论 SM对心肌的保护作用机制之一与提高血浆NO含量、减少ET的生成 ,下调c

次声作用引起大鼠下丘脑c-fos mRNA与CRF mRNA的表达

目的：了解次声引起应激反应的中枢机制．方法：采用反转录ＰＣＲ方法，研究了８Ｈｚ，１２０ｄＢ次声作用后不同时间引起大鼠下丘脑ｃ－ｆｏｓｍＲＮＡ及促肾上腺皮质激素释放因子（ＣＲＦ）ｍＲＮＡ的表达情况．结果：８Ｈｚ，１２０ｄＢ次声作用２ｈ，于作用后０．５ｈｃ－ｆｏｓ与ＣＲＦｍＲＮＡ均开始明显表达，随时间延长，表达渐增强，ｃ－ｆｏｓ于２ｈ达高峰，至４ｈ基本消失；ＣＲＦ于３ｈ达高峰，至５ｈ基本消失．结论：次声作用后ｃ－ｆｏｓ与ＣＲＦｍＲＮＡ的表达可能是次声引起应激反应的中枢分子机制．

慈菇对镉致肝脏脂质过氧化及c-fos mRNA表达的影响

目的 探讨慈菇对镉致肝脏脂质过氧化及c -fosmRNA表达的影响。方法 3 6只雄性SD大鼠随机分为 6组 (n =6) ,分别用 2 5 %、5 0 %、75 %的慈菇 (2ml/ 10 0g体重 ) ,维生素E(5 0mg/ 10 0g体重 )及等体积蒸馏水灌胃 ,连续 10d ,末次灌胃 2 4h后 ,腹腔注射CdCl2 (2 0 μmol/kg体重 ) ,染毒 2 4h后 ,比较各组肝脏丙二醛 (MDA)、谷胱甘肽 (GSH)含量及谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH -PX)活性 ;并利用反转录聚合酶链式反应 (RT -PCR)对肝脏c -fosmRNA进行半定量测定。结果 VE和中、高剂量慈菇都降低了镉所升高的MDA含量 (P <0 0 5 ) ,中、高剂量的慈菇还提高了氯化镉所降低的肝脏GSH含量 (P <0 0 5 ) ;而VE和各剂量慈菇都不能纠正氯化镉所升高的c -fosmRNA水平 (P >0 0 5 )。结论 镉对肝脏c

降钙素基因相关肽和神经生长因子对短暂性脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fos mRNA及蛋白表达的影响

目的:探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)和神经生长因子(NGF)对短暂性脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fosmRNA及蛋白表达的影响。方法:在脑缺血后再灌注模型上,应用原位杂交和免疫组织化学结合显微图像分析方法检测c-fosmRNA及蛋白表达。结果:缺血组大鼠纹皮质较假手术组c-fosmRNA和蛋白表达非常显著增加;CGRP组和NGF组c-fosmRNA和蛋白表达分别显著弱于缺血组;CGRP和NGF合用组c-fosmRNA和蛋白表达非常明显弱于缺血组、CGRP组和NGF组。结论:CGRP和NGF分别抑制脑缺血后再灌注大鼠纹皮质c-fosmRNA及蛋白表达,联合应用则能显著抑制脑缺血后再灌注大鼠纹皮质cfosmRNA及蛋白表达,二者对保护缺血神经元可能有协同作用。