华法林相关基因CYP2C9、VKORC1、CYP4F2的多态性分布

目的研究CYP2C9、VKORC1、CYP4F2基因多态性在陕西省宝鸡地区汉族人群中的分布情况,为华法林个体化用药提供遗传依据。方法选取2022年1月至2023年5月在宝鸡市中医医院心内科接受华法林治疗并进行相关基因检测的住院患者475例,采用飞行时间质谱仪对华法林药物相关基因CYP2C9、VKORC1、CYP4F2分别进行检测,然后对检测结果的基因多态性进行分析。结果华法林药物相关各基因分布频率符合Hardy-Weinberg equilibrium规律,475例患者VKORC1基因型分别是AA型、AG型、GG型,基因频率分别为83.79%,15.58%,0.63%;CYP2C9基因型分别是*1/*1型、*1/*3型、*1/*2型,基因频率分别为95.17%,4.74%,0.11%,未检出*2/*2、*2/*3、*3/*3基因型;CYP4F2基因型分别是*1/*1型、*1/*3型、*3/*3型,基因频率分别为52.40%,39.37%,8.21%。各基因型分布在患者不同性别、年龄之间无统计学差异。结论陕西宝鸡地区汉族人群华法林药物基因VKORC1(c.-1639G>A)以变异型为主,包括纯合变异和杂合变异,而CYP2C9(*1、*2、*3)和CYP4F2(*1,*3)以野生型为主。

CYP2C9对肝细胞癌的迁移、侵袭和增殖的影响

目的探究CYP2C9是否参与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的发生发展及其对肝癌细胞迁移、侵袭和增殖的影响。方法从TCGA数据库中提取HCC的转录组数据,分析CYP2C9在HCC中的表达和预后相关性;构建HepG2和MHCC97H的CYP2C9稳定过表达细胞系,通过Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验和Western Blot实验分别检测过表达CYP2C9对肝癌细胞系迁移、侵袭能力以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程的影响;通过CCK-8实验、平板克隆形成实验和Western Blot实验检测过表达CYP2C9对肝癌细胞系增殖能力的影响。结果通过生信分析发现,CYP2C9在HCC中的表达显著下调,且CYP2C9的表达与HCC患者的临床预后呈正相关;细胞及分子实验结果显示,过表达CYP2C9显著抑制HepG2细胞和MHCC97H细胞的迁移、侵袭能力和EMT过程,而对细胞的增殖能力没有显著影响。结论CYP2C9可能通过抑制肝癌细胞的迁移、侵袭以及EMT过程,进而影响HCC的进展。

血清HOXC9在肝细胞癌患者中的表达及其对预后的评估价值

目的探讨血清同源盒基因C9(HOXC9)在肝细胞癌(HCC)患者中的表达及其对预后的评估价值。方法选取2020年3月至2021年2月于南京医科大学康达学院附属连云港东方医院就诊的79例HCC患者(HCC组)和72例良性肝病患者(良性肝病组)作为研究对象。另选取同期在该院75例体检健康者作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验法对血清HOXC9水平进行检测,采用化学发光法对血清甲胎蛋白(AFP)水平进行检测。分析血清HOXC9水平与HCC患者临床病理特征的关系,并采用Kaplan-Meier生存曲线分析血清HOXC9水平与HCC预后的关系,绘制受试者工作特征曲线分析其诊断效能。结果HCC组HOXC9和AFP水平明显高于良性肝病组和健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。HOXC9阳性组与肿瘤分化程度、TNM分期、血管浸润和淋巴结转移有关(χ^(2)=4.521、3.526、2.758、3.787,均P<0.05)。HOXC9阳性组患者3年生存率为64.71%(44/68),阴性组患者3年生存率为81.82%(9/11)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,HOXC9阳性组患者3年生存率低于HOXC9阴性组,HOXC9阳性组患者预后更差,差异有统计学意义(χ^(2)=5.367,P<0.05)。Cox多因素分析结果显示:病灶个数多发、有血管浸润、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期和HOXC9≥100 mAU/mL是影响HCC患者预后不良的独立危险因素。HOXC9和AFP联合检测的曲线下面积为0.946(95%CI:0.876~0.979),显著高于单项检测,差异均有统计学意义(Z=0.871、0.511,P<0.05)。结论血清HOXC9水平检测有助于评估HCC患者预后,可作为HCC患者预后判断的生物标志物。

CYP2C9和COX-2基因多态性对非甾体类抗炎药治疗强直性脊柱炎临床疗效的影响

目的探讨细胞色素P450同工酶2C9(CYP2C9)和环氧化酶-2(COX-2)基因多态性对非甾体类抗炎药治疗强直性脊柱炎(AS)临床疗效的影响。方法选择2020年1月至2021年6月在该院就诊的117例AS患者作为观察组;根据“性别相同、年龄±1岁”的原则,选择同期在该院健康体检的受试者作为117例作为对照组。观察两组受试者CYP2C9*3和COX-2基因启动子区域中的1190A/G和-1195G/A基因多态性,观察AS患者治疗前后的临床资料变化,观察CYP2C9*3、COX-2-1190A/G、COX-2-1195G/A等不同基因型AS患者基于ASAS20改善标准和ASAS40改善标准的疗效是否存在差异。结果两组受试者CYP2C9*3基因型和等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。两组受试者COX-2-1290A/G基因型和等位基因频率以及COX-2-1195G/A基因型和等位基因频率的差异均存在统计学意义(P<0.05)。治疗后,AS患者晨僵持续时间、周围关节受累、指地距、枕墙距、Schober测试、ESR、CRP、BASDAI(VAS)、BASDAI≥4、BASFI(VAS)、总体评价(VAS)等指标数值均较治疗前显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。117例患者中,有68例(58.12%)符合ASAS20改善标准,30例(25.64%)符合ASAS40改善标准。不同CYP2C9*3基因型(AA、AC+CC)之间的ASAS20、ASAS40改善情况差异均无统计学意义(P>0.05);不同COX-2-1290A/G基因型之间的ASAS20、ASAS40改善情况差异存在统计学意义(P<0.05),其中AA基因型患者的ASAS20和ASAS40改善率均显著高于AG+GG基因型患者(P<0.05);不同COX-2-1195G/A基因型之间的ASAS20、ASAS40改善情况差异存在统计学意义(P<0.05),其中GG+AA基因型的ASAS20和ASAS40改善率显著高于GG患者(P<0.05)。结论COX-2-1290A/G和COX-2-1195G/A多态性可增加AS患者预后不良的风险,可能是预测非甾体类抗炎药治疗AS疗效的生物学指标,而CYP2C9*3多态性与非甾体类抗炎药治疗AS疗效的关系尚有待进一步研究。

基于C9高校转移转化专利价值特征探索高校知识产权信息服务策略

文章以C9高校(北京大学、清华大学、浙江大学、复旦大学、上海交通大学、南京大学、中国科学技术大学、西安交通大学、哈尔滨工业大学)法律状态为转移、许可的专利为研究对象,对其相关价值特征进行分析,主要包括转移转化趋势、合作特征、合作申请与非合作申请专利,与企业合作申请专利和与非企业合作申请专利在被引用专利数量、被引用次数、同族专利数量、权利要求数量等指标的统计学差异。结果表明:近10年来,C9高校专利转移转化率大幅提升,合作申请组专利在简单同族成员数量、被引用专利数量、5年内被引用次数、权利要求数等指标方面均明显优于非合作申请组,且与企业申请组专利在本次所分析指标方面均明显优于与非企业合作组。最后,从高校专利转移转化角度,结合高校知识产权信息服务中心实际情况,提出高校知识产权信息服务中心在提高专利质量、促进成果转化过程中可更多扮演中介桥梁角色的服务策略。

狼疮性肾炎患者血清补体C9、凝溶胶蛋白与肾功能及疾病转归的关系

目的分析狼疮性肾炎患者血清补体C9、凝溶胶蛋白(GSN)与肾功能及疾病转归的关系。方法选择2020年7月至2022年4月该院收治的101例狼疮性肾炎患者作为研究对象,根据入院时肾小球滤过率(eGFR)分为肾功能正常组[eGFR≥90 mL/(min·1.73 m^(2)),n=57]和肾功能不全组[eGFR<90 mL/(min·1.73 m^(2)),n=44]。所有患者入院后24 h内检测血清补体C9、GSN,并进行组间比较。采用Pearson相关法分析血清补体C9、GSN与狼疮性肾炎患者肾功能的关系。随访后根据疾病转归情况分为恶化组(n=35)和好转组(n=66)。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清补体C9、GSN对狼疮性肾炎患者疾病转归的预测价值,多因素Logistic回归分析探讨狼疮性肾炎患者疾病转归的相关因素。结果肾功能正常组患者血清补体C9低于肾功能不全组,血清GSN水平高于肾功能不全组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析发现,血清补体C9与狼疮性肾炎患者的肾功能呈显著负相关(r=-0.554,P<0.001),血清GSN与狼疮性肾炎患者的肾功能呈显著正相关(r=0.448,P<0.001)。恶化组血清补体C9水平高于好转组,GSN水平低于好转组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清补体C9预测狼疮性肾炎疾病转归的曲线下面积(AUC)为0.826(95%CI:0.776~0.876);血清GSN预测狼疮性肾炎疾病转归的AUC为0.830(95%CI:0.780~0.880);二者联合检测预测狼疮性肾炎疾病转归的AUC为0.905(95%CI:0.855~0.955)。多因素Logistic回归分析发现,血清补体C9(OR=3.480,95%CI:1.983~6.108)、GSN(OR=4.225,95%CI:2.050~8.708)及eGFR(OR=3.762,95%CI:2.069~6.840)、24 h尿蛋白(OR=1.939,95%CI:1.442~2.642)均为影响狼疮性肾炎疾病转归的危险因素(P<0.05)。结论血清补体C9、GSN水平变化与狼疮性肾炎肾功能、疾病转归密切相关,且均可作为评估狼疮性肾炎患者疾病转归的有效指标,二者联合检测具有更好的预测价值。

高校学风建设的价值逻辑与行动策略——基于C9高校的政策文本分析

教育政策能够展现重要话语结构意义,体现价值导向。以C9高校的学风建设政策文本为研究对象进行的量化分析和质性阐释表明,制度改革、环境优化和特色彰显是改善学风建设的重要力量。基于政策的综合分析,高校在制定学风建设政策文本时应当坚持以国家对高质量人才需求和高校自身高质量发展为导向,紧扣立德树人根本宗旨,采取改革驱动、环境协同、特色发展的共性行动策略,有效规避学风建设执行过程中的“唯指标化”“去改革化”“过度管理主义”倾向。

中美顶尖高校图书馆数字资源政策比较研究——以C9高校和常青藤高校为例

文章以我国C9高校和美国常青藤高校图书馆为调查对象,从数字资源政策网上公开情况、数字资源馆藏内容概况、数字资源长期保存战略、数字资源版权保护及数字资源馆员5个方面,对中美顶尖高校图书馆数字资源政策进行对比分析,发现C9高校在数字资源专职政策公开度、数字资源建设发展水平、数字资源的长期保存等方面逊于常青藤高校,指出未来我国高校图书馆数字资源发展可借鉴常青藤高校数字资源发展经验,并从政策制定、数字资源建设、保存、版权保护以及数字资源专员设置方面提出针对性建议。

肝细胞癌组织HOXC9和KIF4A表达及其临床意义探讨

目的探讨肝细胞癌(HCC)患者癌组织同源盒基因C9(HOXC9)和驱动蛋白家族成员4A(KIF4A)蛋白表达及其临床意义。方法2018年1月~2021年1月我院收治的86例HCC患者,行肝叶手术治疗,取癌组织和癌旁肝组织,采用免疫组织化学染色法检测组织HOXC9和KIF4A蛋白表达。随访2年。结果HCC癌组织HOXC9和KIF4A高表达阳性率分别为69.8%和51.2%,均显著高于癌旁肝组织的15.1%和16.3%,差异具有统计学意义(P<0.05);56例肿瘤细胞低/中分化、40例Ⅱb/Ⅲb期TNM分期、38例有肿瘤包膜侵犯和37例微血管侵犯患者癌组织HOXC9蛋白高表达阳性率分别为78.6%、85.0%、71.1%和83.8%,均显著高于30例高分化、46例Ⅰa/Ⅱa期TNM分期、48例无肿瘤包膜侵犯和49例无微血管侵犯患者癌组织(分别为53.3%、56.5%、47.9%和59.2%,P<0.05);肿瘤细胞低/中分化、Ⅱb/Ⅲb期TNM分期、肿瘤包膜侵犯和微血管侵犯患者癌组织KIF4A蛋白高表达阳性率分别为60.7%、80.0%、60.5%和89.2%,也显著高于对应组癌组织表达(分别为33.3%、26.1%、43.8%和22.4%,P<0.05);在随访结束时,86例患者生存38例(44.2%),死亡48例(55.8%);60例癌组织HOXC9蛋白高表达患者生存时间为14.0(7.8,26.7)个月,显著短于26例HOXC9蛋白低表达患者【27.0(18.8,30.5)个月,P<0.05】;44例癌组织KIF4A蛋白高表达患者生存时间为9.0(7.0,26.3)个月,也显著短于42例HOXC9蛋白低表达患者【15.3(26.0,28.8)个月,P<0.05】。结论HCC患者癌组织HOXC9和KIF4A蛋白高表达可能与肿瘤细胞恶性程度相关,并影响肝叶手术治疗后预后,值得深入研究。

数字版权背景下高校图书馆知识产权素养教育实践与优化策略——以C9联盟成员高校为例

以我国C9联盟成员高校图书馆为研究对象,全面探析了数字版权背景下高校馆知识产权素养教育现实进展与主要矛盾,结果发现,样本馆在用户需求分析与教育载体建设方面取得了长足进步,但仍存在教育主体单一、教育内容粗糙与教育模式呆板问题。以其为依据,建议高校馆应会同校内外机构建立知识产权素养教育“大服务”格局,分层分类设计契合用户真实需求的知识产权素养教育内容,构建线上、线下一体化融合的知识产权素养教育模式,据此提高知识产权素养教育全要素生产率。

乙烯裂解C9冷聚合成石油树脂实验研究

以C9馏分,苯乙烯类树脂油,茚类树脂油为原料,按一定的比例配成混合液,并以三氟化硼-乙醚络合物为催化剂,进行冷聚实验合成石油树脂。研究发现:当固定反应液中各活性组分含量的配比不变的情况下,增加反应液中活性组分的总含量,产物石油树脂的收率、色号及软化点随之增加;增加催化剂的量,石油树脂的收率、色号及软化点也随之增加;随着反应温度的增加,石油树脂的色号和收率随着增加,但是软化点随着反应温度的增加而减小。

CYP2C9*3和VKORC1基因位点突变对华法林稳定剂量及PT-INR达标天数的影响

目的探讨CYP2C9*3和VKORC1基因位点突变对华法林稳定剂量及凝血酶原时间-国际标准化比值(PT-INR)达标天数的影响。方法收集应用华法林抗凝治疗住院患者69例,采用焦磷酸测序检测CYP2C9*3和VKORC1基因位点多态性,同步检测患者PT-INR,查阅并收集患者病历资料、用药剂量及实验室检验数据。结果VKORC1野生型占85.51%(59/69),突变型占14.49%(10/69)。CYP2C9*3野生型占89.86%(62/69),突变型占10.14%(7/69)。两种基因位点均为野生型占78.26%(54/69),一种基因位点突变占18.84%(13/69),两种基因位点均突变占2.90%(2/69)。VKORC1基因型AA+CYP2C9*3基因型AC的华法林稳定剂量均低于其他VKORC1+CYP2C9*3基因型组合,VKORC1基因型AG/GG+CYP2C9*3基因型AA的华法林稳定剂量高于其他VKORC1+CYP2C9*3基因型组合,差异有统计学意义(P<0.05)。VKORC1基因型AA+CYP2C9*3基因型AA的PT-INR达标天数少于其他VKORC1+CYP2C9*3基因型组合,差异有统计学意义(P<0.05)。结论VKORC1和CYP2C9*3两个基因位点突变影响华法林稳定剂量,并造成PT-INR达标天数延长。

C5/DCPD/C9共聚石油树脂热聚合成反应研究

为了降低热聚石油树脂的色号,本文以C5馏分、双环戊二烯(DCPD)和C9馏分为原料,采用两段热聚合成法进行共聚反应,制备C5/DCPD/C9共聚石油树脂。首先C5馏分为原料,在温度为240℃、压力为5.5MPa的条件下,热聚合反应6h,得到C5低聚物,然后再将C5低聚物、DCPD、C9馏分三者的混合物,在压力为0.35~0.45MPa、温度为240℃的条件下,反应6~10h,得到色号为2.5~3.5#的浅色石油树脂,同时确定了240°C反应7h为最佳反应条件。经检测,C5/DCPD/C9共聚石油树脂产品的色度、软化点、酸值、灰分、稳定性等主要性能指标均达到优级品质量标准。这种两段热聚合成方法将C5馏分制备成低聚物,减少C5馏分的挥发,便于保存,工艺更安全环保,同时降低了树脂聚合反应压力,使操作更安全。

DnaJ热休克蛋白家族成员C9在肺腺癌中的表达及预后价值

目的探讨DnaJ热休克蛋白家族成员C9(DNAJC9)在肺腺癌(LUAD)组织中的表达、预后、甲基化情况及与肿瘤免疫浸润的关系。方法利用肿瘤基因组计划(TCGA)中LUAD的表达及临床数据分析DNAJC9的差异表达及预后价值。采用免疫组化法检测40例LUAD患者的癌组织及配对正常组织DNAJC9的蛋白表达;利用UALCAN数据库及TCGA Wanderer数据库对DNAJC9启动子区域甲基化位点进行分析;利用TIMER数据库和单样本基因集富集分析(ssGSEA)对DNAJC9表达与LUAD免疫浸润水平的关系进行分析;根据String数据库分析与DNAJC9相互作用的蛋白,利用FUNRICH富集分析工具对这些基因进行功能富集分析。结果DNAJC9在LUAD组织中的表达水平高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.01)。免疫组化法显示,DNAJC9蛋白在LUAD组织中的表达率为80.0%(32/40),高于癌旁组织的45.0%(18/40),差异有统计学意义(P<0.05)。高表达患者的总生存率、无疾病生存率和无进展生存率均低于低表达者,差异有统计学意义(P<0.05)。DNAJC9的表达与是否存在TP53突变显著相关(P<0.05)。DNAJC9基因启动子区域甲基化水平在肿瘤组织中低于正常组织,且和该基因序列表达相关的甲基化位点与其表达水平呈负相关(P<0.05)。DNAJC9表达与LUAD免疫细胞浸润水平相关。蛋白相互作用网络分析发现,微小染色体维持复合物成分6(MCM6)、核糖核苷酸还原酶催化亚基M1(RRM1)、核自身抗原精子蛋白(NASP)、皮瓣结构特异性内切酶(FEN1)、脱氧尿苷三磷酸酶(DUT)、复制因子C亚基4(RFC4)、序列相似的家族149成员B1(FAM149B1)、MutS同源2(MSH2)、染色体的结构维持2(SMC2)、小染色体维持复合体成分2(MCM2)等蛋白与DNAJC9密切相关。富集分析显示,这些基因参与DNA合成、G2/M检查点等信号通路及多种致癌过程。结论DNAJC9的低甲基化水平使DNAJC9在LUAD组织中呈高表达,其高表达提示预后不良,与免疫细胞的浸润相关。

CYP2C9及CYP2C19基因多态性在非瓣膜性心房颤动患者抗凝治疗中指导作用分析

目的:探究CYP2C9,CYP2C19基因多态性在非瓣膜性心房颤动患者抗凝治疗中的指导作用。方法:收集我院于2021年11月至2022年11月收治的非瓣膜性心房颤动患者202例临床资料,按照基因多态性检测结果分组治疗,将CYP2C9*1*1合并CYP2C19*1*1常规治疗的患者作为对照组,CYP2C9*3、CYP2C19*2、CYP2C19*3基因指导下的个体化治疗的患者为观察组。比较患者一般资料、华法林起效时间、起效剂量、平均剂量、INR达标时间、凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ活性、不良事件发生情况。多元线性回归分析抗凝剂量的影响因素。结果:CYP2C9*1*1、CYP2C9*3发生率分别为88.4%、11.6%,CYP2C19*1*1、CYP2C19*2、CYP2C19*3发生率分别为68.5%、23.8%、7.6%,CYP2C9*3合并CYP2C19*2/CYP2C19*3、CYP2C9*1*1合并CYP2C19*1*1发生率分别为1.3%、67.2%。其中对照组占比60.6%,观察组占比39.4%。两组年龄、性别、高血压、高血脂、糖尿病、冠心病、BMI、饮酒、吸烟比较,差异无统计学意义(P>0.05)。观察组华法林起效时间、起效剂量、平均剂量、INR达标时间均显著低于对照组(P<0.05)。观察组凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ活性显著高于对照组(P<0.05)。两组不良事件发生情况比较,差异有统计学意义(P>0.05)。CYP2C9*1抗凝剂量显著高于CYP2C9*3,CYP2C19*1抗凝剂量显著高于CYP2C19*2/CYP2C19*3,≥70岁患者抗凝剂量显著低于<70岁患者,BMI≥25 kg/m2患者抗凝剂量显著高于BMI<25 kg/m2患者(P>0.05)。将抗凝剂量作为因变量,CYP2C9、CYP2C19基因分型、年龄、BMI作为自变量进行多元线性回归分析,结果显示,CYP2C9*3、CYP2C19*2、CYP2C19*3、BMI≥25 kg/m2为华法林抗凝剂量的危险因素,年龄<70岁为保护因素,年龄与抗凝剂量呈负相关关系,BMI与抗凝剂量呈正相关关系。Log(P)=0.520×CYP2C9*3+0.225×CYP2C19*2+0.293×CYP2C19*3-0.160×年龄+0.394×BMI+4.522。结论:CYP2C9,CYP2C19基因多态性的检测能够对非瓣膜性心房颤动患者抗凝治疗具有良好的临床指导意义,CYP2C9*3、CYP2C19*2、CYP2C19*3均为华法林抗凝剂量的危险因素,影响药物疗效。通过基因指导下的治疗能够降低华法林起效剂量,缩短起效天数,增加抗凝因子的活性,提高华法林的抗凝效果。

血清非编码RNA C9orf147和BSN-AS2联合检测对嗜铬细胞瘤的诊断价值

目的探讨血清非编码RNA C9orf147和BSN-AS2联合检测对嗜铬细胞瘤的诊断价值。方法纳入嗜铬细胞瘤患者70例为嗜铬组、肾上腺腺瘤患者70例为肾上组、70例健康体检者为对照组。检测3组人员血清中非编码RNA C9orf147和BSN-AS2的表达水平。用受试者的工作特征曲线(ROC)的AUC分析血清中非编码RNA C9orf147和BSN-AS2水平在嗜铬细胞瘤中的诊断意义。结果血清中非编码RNA C9orf147和BSN-AS2的相对表达量在嗜铬组、肾上组和对照组中有显著差异(P<0.05)。血清中非编码BSN-AS2和RNA C9orf147单项诊断嗜铬组与肾上组的灵敏度为92.86%、92.86%,特异度分别为92.86%、91.43%;血清中非编码BSN-AS2和RNA C9orf147单项诊断嗜铬组与对照组的灵敏度为94.29%、94.29%,特异度分别为94.29%、92.86%。血清中非编码RNA C9orf147和BSN-AS2联合诊断对嗜铬细胞瘤的灵敏度为92.86%,特异度为93.57%,准确度为93.33%。结论血清中非编码RNA C9orf147和BSN-AS2的表达水平可作为嗜铬细胞瘤的诊断指标。

ANLN、CYP2C9、HMMR在乙型肝炎病毒相关肝细胞癌中的表达及其对预后的影响

目的研究肌动蛋白结合蛋白(ANLN)、细胞色素P450(Cytochromes P 450,CYPs)亚家族成员CYP2C9、透明质酸介导运动因子受体(HMMR)在乙型肝炎病毒相关肝细胞癌(HBV-HCC)组织中的表达及对其预后的影响。方法收集手术切除的25份HCC标本。采用免疫组织化学方法分析ANLN、CYP2C9、HMMR蛋白表达水平在癌组织及癌旁组织的差别,采用Log-Rank检验评估三者对HCC患者术后复发及远期存活的影响。结果HCC患者癌组织的ANLN、CYP2C9免疫反应性评分(IRS)低于癌旁组织分别为(2.4±2.5)分比(3.7±2.7)分(t=2.18,P=0.039)和(4.2±2.8)分比(8.6±1.4)分(t=6.21,P<0.01),癌组织中的HMMR IRS高于癌旁组织为8.0(4.0,8.0)分比4.0(2.5,4.0)分(Z=3.94,P<0.01)。但不同ANLN、CYP2C9、HMMR蛋白表达水平对HCC患者术后复发时间及5年存活率影响差异无统计学意义(中位复发时间高水平比低水平:ANLN 38.6月比33.3月,CYP2C936.5月比35.5月,HMMR 33.1月比41.3月;中位生存时间高水平比低水平:ANLN 56.3月比51.1月,CYP2C955.1月比51.5月,HMMR 53.0月比55.2月;均P>0.05)。多因素Cox回归分析提示,BCLC、家族史对术后复发时间的影响差异有统计学意义(HR=2.435,P=0.025;HR=0.165,P=0.009),AFP、家族史与术后5年存活率独立相关(HR=229.488,P=0.041;HR=0.054,P=0.014)。结论ANLN、CYP2C9、HMMR蛋白表达水平在HCC患者癌组织及癌旁组织存在差异,但对预后未产生影响,提示其可作为HCC诊断的潜在标志物。

二甲双胍改善由C9ORF72肌萎缩侧索硬化/额颞叶痴呆相关多聚甘氨酸-精氨酸诱导的线粒体损伤

目的·探索C9ORF72肌萎缩侧索硬化/额颞叶痴呆(amyotrophic lateral sclerosis/frontotemporal dementia,ALS/FTD)相关的多聚甘氨酸-精氨酸(poly-glycine-arginine,poly-GR)对线粒体形态及功能的影响,并分析二甲双胍对由poly-GR诱导的线粒体损伤的修复作用及其可能的机制。方法·采用慢病毒感染法分别构建能够稳定表达50个重复甘氨酸-精氨酸序列[(glycine-arginine)50,(GR)_(50)]和绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的SK-N-SH细胞,即(GR)_(50)-SK细胞株和GFP CTRL-SK细胞株。采用蛋白质印迹法(Western blotting)验证已构建细胞中(GR)_(50)蛋白的表达水平,并采用荧光显微镜观察GFP CTRL-SK细胞的GFP表达。采用碘化丙啶(propidium iodine,PI)染色分别检测(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞的凋亡水平。利用免疫荧光(immunofluorescence,IF)染色分析(GR)_(50)蛋白在细胞内的定位情况。采用超氧化物指示剂MitoSOX Red分别对(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞的氧自由基进行染色,并利用荧光显微镜观察红色荧光强度以评估线粒体活性氧水平的变化。采用透射电镜分别观察(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞的线粒体形态。采用Western blotting检测(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞的蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)及其磷酸化水平。利用SC79激活(GR)_(50)-SK细胞中的AKT,并采用MitoSOX Red染色及PI染色实验分析AKT磷酸化后细胞的线粒体活性氧水平及凋亡水平。利用二甲双胍处理(GR)_(50)-SK、GFP CTRL-SK细胞,随后通过上述方法以及ATP检测试剂盒检测细胞的凋亡水平、线粒体活性氧水平、线粒体形态、AKT及其磷酸化水平、ATP浓度情况。结果·Western blotting结果提示(GR)_(50)-SK细胞构建成功,荧光显微镜的观察结果显示GFP CTRL-SK细胞构建成功。PI染色结果显示,(GR)_(50)-SK细胞较GFP CTRL-SK细胞的凋亡水平更高(P=0.016)。IF结果提示,(GR)_(50)-SK细胞中(GR)_(50)蛋白与线粒体存在部分共定位。与GFP CTRL-SK细胞相比,(GR)_(50)-SK细胞的线粒体形态及结构存在明显异常,其活性氧水平明显上升。(GR)_(50)-SK细胞中的AKT水平与GFP CTRL-SK细胞相仿,但磷酸化AKT水平显著下降。SC79处理(GR)_(50)-SK细胞后,可显著上调其AKT磷酸化水平,并下调其活性氧水平及凋亡水平。二甲双胍处理可明显上调(GR)_(50)-SK细胞中的磷酸化AKT水平,但对AKT水平无影响;可重塑该细胞中的部分线粒体形态结构、降低活性氧水平、增加ATP的生成(P=0.000),并下调细胞的凋亡水平(P=0.000)。结论·(GR)_(50)可通过下调AKT磷酸化引起线粒体形态及功能异常,并促进细胞凋亡;而二甲双胍则可抑制由(GR)_(50)蛋白诱导的上述病理事件的发生。

云南红河彝族人群CYP2C9和VKORC1基因突变频率与华法林维持剂量的关系

目的 研究云南红河彝族人群CYP2C9、VKORC1基因突变频率与华法林维持剂量的关系,为该地区少数民族心脏瓣膜置换术后的抗凝策略提供科学依据。方法 以心脏瓣膜置换术后的彝族和汉族患者为实验组及对照组,收集患者年龄、性别、体重、身高、INR值等基线资料,采集外周血实时荧光定量PCR检测CYP2C9和VKORC1基因分型,比较2组间遗传基础信息、INR值、CYP2C9和VKORC1-1639G>A基因分型的差异;分析2组间华法林实际用量的差异。结果 红河彝族患者体表面积、INR值、高血压与冠心病患病率均低于汉族人群(P<0.001)。2组人群均以CYP2C9*1/*1野生纯合型及VKORC1-1639 AA突变纯合基因型为主,AWD值总体分布在2.0~3.0mg/d,且在2组人群中无显著性差异;但彝族VKORC1-1639 AA纯合突变率低于汉族人群。结论 红河彝族VKORC1-1639 AA纯合突变率虽低于汉族人群,但仅靠CYP2C9和VKORC1代谢相关基因的遗传多态性并不能准确估算华法林实际剂量。

中国南方地区客家人群CYP2C9和VKORC1-1639G>A基因的遗传多态性

目的 探讨华法林药物反应相关基因细胞色素氧化酶P4502C9(cytochrome P450 family 2 subfamily C polypeptide,CYP2C9)和维生素K环氧化物还原酶复合体亚基1(vitamin K epoxide reductase subunit 1,VKORC1)-1639G>A遗传多态性在中国南方客家人群中的分布。方法 本研究共纳入2015年7月至2019年1月来梅州市人民医院门诊及住院口服华法林抗凝治疗的患者1 330例,提取患者外周血基因组DNA,通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)和DNA微阵列芯片法检测CYP2C9和VKORC1-1639G>A基因多态性。将中国南方客家人群CYP2C9和VKORC1-1639G>A基因型和基因频率与文献已报道的不同地区人群和民族的频率进行比较。结果 经Hardy-Weinberg Equilibrium遗传平衡定律检验,所有基因型均符合遗传平衡定律(P>0.05),所选取的研究对象具有群体代表性。CYP2C9基因分型结果显示,野生型CYP2C9*1/*1占92.1%(1 225例),杂合突变型CYP2C9*1/*2占0.5%(6例),杂合突变型CYP2C9*1/*3占7.3%(97例)和杂合突变型CYP2C9*2/*3占0.1%(2例)。CYP2C9*1、CYP2C9*2和CYP2C9*3 3种等位基因的频率分别为96.0%、0.3%和3.7%。男性和女性之间CYP2C9基因型(P=0.94)和等位基因频率(P=0.28)分布比较,差异无统计学意义。VKORC1-1639G>A基因分型检测结果显示,野生型VKORC1-1639GG占1.7%(22例),杂合突变型VKORC1-1639GA占19.7%(262例)和纯合突变型VKORC1-1639AA占78.6%(1 046例)。VKORC1-1639G>A位点G和A 2种等位基因频率分别为11.5%和88.5%。男性和女性之间VKORC1-1639G>A基因型(P=0.63)和等位基因频率(P=0.34)分布比较,差异无统计学意义。结论 中国南方客家人群CYP2C9和VKORC1-1639G>A基因遗传多态性与中国不同地区汉族人群和少数民族之间存在差异。基因分型检测可为指导梅州地区客家人群华法林个体化用药治疗提供重要分子遗传依据。