灯盏花素对豚鼠心室肌细胞I_(Ca)的影响

目的观察灯盏花素对豚鼠心室肌单细胞钙离子电流(ICa)的影响。方法采用全细胞膜片钳制技术。结果灯盏花素能使豚鼠心室肌细胞ICa减小,连续刺激后,对ICa的抑制作用加强,与给药前比较,差异显著(P<0.01);此作用具有明显的电压依赖性,在峰电流电压下作用最明显,而对其反转电位无明显影响;灯盏花素对ICa的作用随质量浓度升高而加强,在指令电压0 mV时,5、10和20 mg.L-1灯盏花素使ICa分别减小5.4%、22.9%和45.0%(P<0.01),且可以恢复;在不同的刺激频率下,灯盏花素均可使ICa减小,尤其对高频率刺激细胞产生的ICa作用更明显(P<0.05)。结论灯盏花素能抑制豚鼠心室肌细胞的Ca2+内流,此作用具有电压依赖性、质量浓度依赖性、药物使用-刺激频率依赖性和可恢复性。

急性分离大鼠心房肌细胞方法的改进及对钾、钠、钙电流的记录

目的:介绍1种改进的成年SD大鼠心房肌细胞分离方法。方法:SD大鼠麻醉后,快速取出心脏,将主动脉结扎在Langendorff灌流装置上,无钙台式液灌流5 min后换用酶液灌流10～12 min,剪取心耳组织于KB液中剪碎并吹打,200目细胞筛网过滤,将细胞滤液500 r离心2 min,梯度复钙后将细胞悬液置于4℃冰箱中静置1 h,应用全细胞膜片钳技术记录大鼠心房肌细胞瞬时外向钾电流(Ito)、快钠电流(INa)以及L型钙电流(ICa-L)。结果:本方法分离出的心房肌细胞存活率高,结构完整,具有良好的耐钙性,可成功记录出Ito、INa、ICa-L。结论:改进的实验方法可获得大量耐钙心肌细胞,并具有正常的电生理特性。

小檗碱对大鼠结肠上皮细胞钙依赖钾通道的影响

目的研究小檗碱对结肠上皮隐窝细胞基底膜钙依赖钾通道(IK(Ca))的影响,以探讨其治疗分泌性腹泻的机制。方法用EDTA溶液分离结肠上皮隐窝细胞,运用EPC10膜片钳放大器测量全细胞模式下50、100、500μmol/L的小檗碱对结肠上皮细胞基底膜IK(Ca)的影响。结果50、100、500μmol/L的小檗碱均可抑制大鼠结肠上皮隐窝细胞基底膜IK(Ca)(P<0.05),当阶跃刺激为+80 mV时,其IK(Ca)分别为生理盐水(PSS)对照组的(71.43±3.61)%、(54.56±5.13)%、(38.66±3.85)%(n=8,P<0.05)。结论小檗碱能抑制大鼠结肠上皮细胞基底膜钙依赖钾通道的开放,这可能是其治疗分泌性腹泻的机制之一。

黄连素对大鼠结肠上皮隐窝细胞基底膜钾通道的影响

目的研究黄连素对结肠上皮隐窝细胞基底膜钙依赖钾通道[I_K(Ca)]和环磷酸腺苷(cAMP)依赖钾通道[I_K(cAMP)]的影响,探讨其治疗分泌性腹泻的机制。方法用乙二胺四乙酸(EDTA)溶液分离结肠上皮隐窝细胞,运用EPC 10膜片钳放大器测量全细胞模式下50、100、500μmol/L黄连素对结肠上皮细胞基底膜I_K(Ca)和I_K(cAMP)的影响,并设PSS对照组。结果50、100、500μmol/L黄连素可抑制大鼠结肠上皮隐窝细胞基底膜I_K(Ca)和I_K(cAMP)(P值均<0.05),当阶跃刺激为+80mV时,其I_K(Ca)分别为对照组的(71.43±3.61)%、(54.56±5.13)%、(38.66±3.85)%(P<0.05);其I_K(cAMP)分别为对照组的(78.55±5.72)%、(60.42±6.33)%、(43.78±6.47)%(P<0.05)。结论黄连素能抑制大鼠结肠上皮细胞基底膜I_K(Ca)和I_K(cAMP)的开放,这可能是其治疗分泌性腹泻的机制之一。