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雌二醇通过Calpain 2有限水解integrinβ4促进乳腺癌SK-Br3细胞迁移浸润的相关机制
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作者 杨琼 王婧雅 +6 位作者 王璐 周培富 何可群 严敏 毛大华 陈腾祥 张金娟 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第2期147-152,共6页
目的研究雌二醇通过calpain 2/integrinβ4促进人表皮生长因子受体(Her2)阳性的乳腺癌SK-Br3细胞迁移和浸润的相关机制。方法常规培养乳腺癌SK-Br3细胞,calpain 2的特异性抑制剂或雌二醇(E2)处理细胞,并对汇合度为60%(低密度)和90%(高密... 目的研究雌二醇通过calpain 2/integrinβ4促进人表皮生长因子受体(Her2)阳性的乳腺癌SK-Br3细胞迁移和浸润的相关机制。方法常规培养乳腺癌SK-Br3细胞,calpain 2的特异性抑制剂或雌二醇(E2)处理细胞,并对汇合度为60%(低密度)和90%(高密度)的细胞进行培养;通过细胞划痕实验检测SK-Br3细胞的迁移能力,Transwell-Matrigel实验检测SK-Br3细胞的浸润能力,免疫细胞化学技术和激光共聚焦扫描显微镜观察integrinβ4和Her2的表达与共定位,免疫共沉淀技术检测integrinβ4和Her2的相互作用,Western blot技术检测相关蛋白或蛋白片段的表达及蛋白磷酸化水平。结果划痕和浸润实验显示,相对于对照组,Calpain2抑制剂处理的SK-Br3细胞迁移和浸润能力减弱(P<0.05);免疫细胞化学成像显示,Her2和integrinβ4的共定位主要在细胞膜上,在胞浆也有少量共定位,用calpain inhibitorⅣ处理后,Her2和integrinβ4的表达减少,共定位也明显减少;免疫共沉淀实验发现,在Her2免疫沉淀物中可检测到integrinβ4,在integrinβ4免疫沉淀物中可检测到Her2;给予calpain inhibitorⅣ处理,可以减少Her2和integrinβ4之间的免疫共沉淀;Western blot检测发现,高密度培养乳腺癌SK-Br3细胞中的integrinβ4比低密度培养的水解程度高;在高密度培养条件下,E2可以促进这些integrinβ4水解片段的产生,上调calpain 2的表达,也伴随着integrinβ4水解程度的增加,同时使Src的Y418位点的磷酸化水平增高。结论高密度培养条件下,E2可通过上调和激活calpain2,促进integrinβ4的有限水解,促进integrinβ4和Her2的相互作用,磷酸化激活Src,促进SK-Br3细胞的迁移和浸润。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 雌二醇 人表皮生长因子受体2 钙激活中性蛋白酶2
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Calpain 2调节自噬相关基因ATG7的表达在非酒精性脂肪性肝病中的作用 被引量:3
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作者 陈洁 熊吉 +4 位作者 陈潇迪 牟歌 王军 樊丽琳 陈东风 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第20期2162-2165,共4页
目的明确Calpain 2及自噬相关基因7(autophagy related gene 7,ATG7)在非酒精性脂肪性肝病中的表达变化及意义。方法应用高脂饮食喂养SD大鼠建立非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)在体模型,并按时相点分为4... 目的明确Calpain 2及自噬相关基因7(autophagy related gene 7,ATG7)在非酒精性脂肪性肝病中的表达变化及意义。方法应用高脂饮食喂养SD大鼠建立非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)在体模型,并按时相点分为4、8、12周及16周组,同时设立正常饮食组为对照组,每组6只。检测各组大鼠血清ALT、AST、FFA水平,通过HE染色观察肝脏脂肪变情况,利用Real-time PCR及Western blot检测Calpain 2及ATG7的表达变化。结果①HE染色提示肝脏脂肪变程度随高脂饮食喂养时间的延长而加重。NAFLD大鼠模型各时相点血清ALT、AST、FFA水平均较对照组有不同程度的升高,在16周组时分别为(165.95±7.24)U/L、(249.52±4.20)U/L、(0.83±0.05)mmol/L,与对照组比较均有明显的升高(P<0.01)。②以正常饮食组为对照组,肝组织Calpain 2 mRNA相对表达量在高脂饮食喂养后开始上调,在16周时升高最为明显(9.83±0.85,P<0.01);ATG7的mRNA相对表达量在4周组(0.82±0.02)即开始下降,在16周组(0.20±0.03)降至最低,与对照组比较降低显著(P<0.01)。③与对照组比较,Calpain 2蛋白相对表达水平与mRNA表达水平一致,4周组(2.32±0.45)时开始上调,16周组明显上升(9.87±1.20,P<0.01)。而ATG7的蛋白相对表达水平则随肝脏脂肪变性的进展明显下降,16周时降低最为明显(0.18±0.05,P<0.01)。结论脂肪肝发生过程中,Calpain 2的表达上调抑制了自噬相关基因ATG7的表达,进而减弱了自噬对细胞的保护作用,导致肝细胞的损伤加重,自噬可能参与了NAFLD的发生。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 calpain2 自噬相关基因7 大鼠
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针刀对肌性斜颈模型兔胸锁乳突肌中calpain-1、CD45、MMP-2、TIMP-2蛋白表达的影响
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作者 高国莉 《西部中医药》 2024年第4期13-16,共4页
目的:应用肌性斜颈兔动物模型,探讨针刀治疗肌性斜颈的作用机制及意义。方法:无水酒精注射制备动物肌性斜颈兔子模型后,选取模型兔子48只,随机分为正常组、模型组、针刀组、按摩组,每组12只。分别给予各组对应治疗,治疗2个月后各组分别... 目的:应用肌性斜颈兔动物模型,探讨针刀治疗肌性斜颈的作用机制及意义。方法:无水酒精注射制备动物肌性斜颈兔子模型后,选取模型兔子48只,随机分为正常组、模型组、针刀组、按摩组,每组12只。分别给予各组对应治疗,治疗2个月后各组分别取部分胸锁乳突肌制作标本,免疫组化法观察钙蛋白酶1(calpain-1)、分化抗原决定簇45(CD45)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子2(tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)在各组肌纤维中的表达情况。结果:与正常组比较,其余各组实验动物明显出现颈部活动受限、斜颈、头颈不对称症状,而治疗结束后,针刀组和按摩组实验动物颈部活动受限改善,无明显头颈不对称症状。calpain-1、CD45、TIMP-2的表达,与正常组比较,模型组、按摩组上调(P<0.01);与模型组比较,针刀组、按摩组下调(P<0.01);与针刀组比较,按摩组上调(P<0.01)。MMP-2表达,与正常组比较,模型组下调(P<0.01),与模型组比较,针刀组、按摩组上调(P<0.05)。结论:针刀治疗肌性斜颈效果显著,其作用机制可能与减少calpain-1、CD45、TIMP-2表达,增加MMP-2表达有关。 展开更多
关键词 肌性斜颈 胸锁乳突肌 动物模型 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶抑制因子2 分化抗原决定簇45 钙蛋白酶1
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心房颤动病人IL-1β、Calpain-2水平与心脏结构重构的相关性研究 被引量:2
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作者 卢园园 李浩宇 +4 位作者 耿嘉逸 雷思思 刘晨阳 康品方 张宁汝 《蚌埠医学院学报》 CAS 2023年第1期95-99,共5页
目的:探讨心房颤动(房颤)病人血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、钙蛋白酶-2(Calpain-2)表达水平及与心脏结构重构的相关性。方法:选取确诊为房颤的病人150例为观察组,依据2020年ESC/EACTS房颤诊断和管理指南将其分为非阵发性房颤组和阵发... 目的:探讨心房颤动(房颤)病人血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、钙蛋白酶-2(Calpain-2)表达水平及与心脏结构重构的相关性。方法:选取确诊为房颤的病人150例为观察组,依据2020年ESC/EACTS房颤诊断和管理指南将其分为非阵发性房颤组和阵发性房颤组;选取同时段健康体检者120名作为对照组。分别检测血清IL-1β、Calpain-2以及超声心动图中左心室舒张期内径(LVDd)、左心房内径(LAD)、左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(FS)等指标,比较3组不同指标是否存在差异;运用Pearson相关性分析血清IL-1β、Calpain-2与超声心动图检查结果的相关性;采用二元logistic回归分析,探寻房颤的危险因素。结果:观察组中IL-1β、Calpain-2含量显著高于对照组(P<0.05),而且非阵发性房颤病人明显高于阵发性房颤病人(P<0.05)。在超声心动图指标中非阵发性房颤组LAD、LVDd均高于阵发性房颤组以及对照组(P<0.05),LVEF、FS均低于阵发性房颤组及对照组(P<0.05)。二元logistic回归分析显示IL-1β、Calpain-2是房颤发生的危险因素。Spearman相关性分析显示IL-1β、Calpain-2与LAD、LVDd呈正相关关系(P<0.01),而与LVEF、FS呈显著负相关关系(P<0.01)。结论:IL-1β、Calpain-2与LAD、LVDd呈正相关关系,参与了心脏结构重构过程,进而促进了房颤的发生与发展。 展开更多
关键词 心房颤动 白细胞介素-1Β 钙蛋白酶-2 心脏结构重构
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Calpain10基因多态性与中国人2型糖尿病遗传易感性的相关性研究 被引量:34
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作者 纪立农 陈陵霞 +1 位作者 韩学尧 祝方 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 2002年第1期7-10,共4页
目的 了解 Calpain 10基因对中国汉族人 2型糖尿病遗传易感性的影响。方法 采用病例对照研究方法 ;以聚合酶链式反应 -限制性内切酶长度多态性 (PCR- RFL P)技术 ,对 2 11例 2型糖尿病患者及 12 7例正常对照 Calpain10基因 SNP4 3及 S... 目的 了解 Calpain 10基因对中国汉族人 2型糖尿病遗传易感性的影响。方法 采用病例对照研究方法 ;以聚合酶链式反应 -限制性内切酶长度多态性 (PCR- RFL P)技术 ,对 2 11例 2型糖尿病患者及 12 7例正常对照 Calpain10基因 SNP4 3及 SNP19多态性进行基因分型。结果 同对照组相比 ,SNP4 3的 G等位基因频率在 2型糖尿病人群中显著升高 (91.9% vs 85 .8% ,P=0 .0 1)。但 SNP19位点等位基因频率在上述两组中的频率分布无显著差异。此外 ,本研究还观察到在正常对照组中 ,SNP4 3GG基因型与体重指数和腰 -臀围比值增加相关。结论  Calpain 10基因 SNP4 3位点 G等位基因可直接或与其他糖尿病基因相互作用决定汉族人 展开更多
关键词 中国人 相关性研究 2型糖尿病 calpain 10基因 遗传易感性
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In Silico Evaluation of the Potential Interference of Boceprevir, Calpain Inhibitor II, Calpain Inhibitor XII, and GC376 in the Binding of SARS-CoV-2 Spike Protein to Human Nanobody Nb20
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作者 Yuri Alves de Oliveira Só Marcelo Lopes Pereira Junior +3 位作者 Wiliam Ferreira Giozza Rafael Timóteo de Sousa Junior Ricardo Gargano Luiz Antônio Ribeiro Júnior 《Open Journal of Biophysics》 2023年第3期35-49,共15页
Virtual screening can be a helpful approach to propose treatments for COVID-19 by developing inhibitors for blocking the attachment of the virus to human cells. This study uses molecular docking, recovery time and dyn... Virtual screening can be a helpful approach to propose treatments for COVID-19 by developing inhibitors for blocking the attachment of the virus to human cells. This study uses molecular docking, recovery time and dynamics to analyze if potential inhibitors of main protease (M<sup>pro</sup>) of SARS-CoV-2 can interfere in the attachment of nanobodies, specifically Nb20, in the receptor binding domain (RBD) of SARS-CoV-2. The potential inhibitors are four compounds previously identified in a fluorescence resonance energy transfer (FRET)-based enzymatic assay for the SARS-CoV-2 M<sup>pro</sup>: Boceprevir, Calpain Inhibitor II, Calpain Inhibitor XII, and GC376. The findings reveal that Boceprevir has the higher affinity with the RBD/Nb20 complex, followed by Calpain Inhibitor XII, GC376 and Calpain Inhibitor II. The recovery time indicates that the RBD/Nb20 complex needs a relatively short time to return to what it was before the presence of the ligands. For the RMSD the Boceprevir and Calpain Inhibitor II have the shortest interaction times, while Calpain Inhibitor XII shows slightly more interaction, but with significant pose fluctuations. On the other hand, GC376 remains stably bound for a longer duration compared to the other compounds, suggesting that they can potentially interfere with the neutralization process of Nb20. 展开更多
关键词 SARS-CoV-2 Main protease Mpro BOCEPREVIR calpain Inhibitor II calpain Inhibitor XII GC376 Nanobody Nb20 In Silico
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电刺激对压力性尿失禁鼠模型阴道前壁Calpain 2和胶原的影响 被引量:2
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作者 王婷婷 李洋 +3 位作者 阳莲 刘耀丹 李素廷 洪莉 《中国计划生育和妇产科》 2019年第11期44-47,63,共5页
目的通过模拟临床盆底电刺激(electrical stimulation,ES)治疗压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的方法,分析ES对小鼠阴道前壁中Calpain 2和胶原的代谢影响。方法实验分为对照组(CON组)、SUI组、SUI+ES 50 Hz组,每组20只... 目的通过模拟临床盆底电刺激(electrical stimulation,ES)治疗压力性尿失禁(stress urinary incontinence,SUI)的方法,分析ES对小鼠阴道前壁中Calpain 2和胶原的代谢影响。方法实验分为对照组(CON组)、SUI组、SUI+ES 50 Hz组,每组20只小鼠。构建小鼠SUI模型并进行造模评价,ES后取阴道前壁组织,应用Western Blot和RT-PCR方法比较3组组织中Calpain 2和胶原的表达变化,并在蛋白水平分析各组中Calpain 2与胶原Ⅰ、胶原Ⅲ相关性。结果 SUI+ES 50 Hz组小鼠阴道前壁Calpain 2的蛋白表达含量及mRNA均较SUI组显著升高(P<0.05),SUI组胶原Ⅰ、Ⅲ的蛋白表达、mRNA水平与CON组相比较显著降低(P<0.05),SUI+ES 50 Hz组经ES治疗后胶原Ⅰ、Ⅲ蛋白、mRNA表达水平有所升高(P<0.05)。且在蛋白水平SUI+ES 50 Hz组中Calpain 2与胶原Ⅰ、胶原Ⅲ呈明显正相关(r=0.7251,P=0.0003;r=0.6869,P=0.0008)。结论 ES治疗可激活SUI盆底组织中Calpain 2蛋白,增加胶原含量;且在ES治疗SUI中,Calpain 2的变化与胶原变化密切相关,可能参与其治疗机制。 展开更多
关键词 电刺激 SUI calpain 2 胶原蛋白Ⅰ 胶原蛋白Ⅲ
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细胞培养密度对MCF7细胞calpain2和FAK的水解及活性影响 被引量:1
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作者 陈腾祥 霍建云 +8 位作者 王宁 王金利 王晋星一 陈妮 陈林 崔唱 张金娟 毛大华 胡晓霞 《贵阳医学院学报》 CAS 2014年第4期466-469,474,共5页
目的:探讨细胞培养密度对乳腺癌MCF7细胞钙激活中性蛋白酶2(calpain 2)和焦点黏附蛋白(FAK)的水解及活性的影响。方法:常规培养乳腺癌细胞MCF7,分别以1×106、5×106、1×107个细胞传代于不同的6 cm皿中,培养36 h后,形成不... 目的:探讨细胞培养密度对乳腺癌MCF7细胞钙激活中性蛋白酶2(calpain 2)和焦点黏附蛋白(FAK)的水解及活性的影响。方法:常规培养乳腺癌细胞MCF7,分别以1×106、5×106、1×107个细胞传代于不同的6 cm皿中,培养36 h后,形成不同的培养密度(分别为低密度、正常密度和高密度),裂解细胞,提取蛋白行Western blot检测calpain 2和FAK的表达,用磷酸化抗体检测FAK的Y397位点磷酸化水平;MCF7细胞高密度培养并calpain 2抑制剂处理后,用Western blot法检测FAK水解情况和磷酸化水平。结果:不同密度培养对calpain 2的表达没有明显影响,但可影响calpain 2的水解,培养密度加大,水解程度加强;培养密度也可以影响FAK的水解模式,低密度培养细胞的FAK以较大的水解片段为主,高密度培养的FAK则以较小片段为主,高密度培养细胞FAK Y397磷酸化水平比低密度的低;给予calpain 2特异性抑制剂后,高密度培养细胞FAK大片段增多,小片段减少,其Y397位点的磷酸化水平增高。结论:细胞高密度培养可使MCF7细胞calpain 2的活性增强,FAK的水解程度加大,降低FAK的磷酸化。 展开更多
关键词 钙激活中性蛋白酶 焦点黏附激酶 细胞密度 细胞培养 蛋白水解产物
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Calpain10基因多态性与昆明地区人群2型糖尿病相关性研究 被引量:4
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作者 张茂镕 许冰莹 +5 位作者 邱俊 龚鹤琴 李云涛 杨昭 鄢志梅 马景孚 《中国慢性病预防与控制》 CAS 2005年第6期263-265,共3页
目的探讨Calpain10基因多态性与昆明地区人群2型糖尿病遗传易感性的关系。方法采用病例鄄对照研究设计,以聚合酶链式反应鄄等位基因特异性扩增法(PCR鄄ASA),检测Calpain10基因单核苷酸多态性(SNP)43G/A位点和SNP44T/C位点基因型,并进行... 目的探讨Calpain10基因多态性与昆明地区人群2型糖尿病遗传易感性的关系。方法采用病例鄄对照研究设计,以聚合酶链式反应鄄等位基因特异性扩增法(PCR鄄ASA),检测Calpain10基因单核苷酸多态性(SNP)43G/A位点和SNP44T/C位点基因型,并进行关联分析。结果对131例2型糖尿病患者和131例正常对照进行了Calpain10基因SNP43和SNP44基因分型,与对照组相比,SNP43的G等位基因频率和SNP44的C等位基因频率在昆明地区2型糖尿病人群中显著升高(分别为93.13%,86.26%,P=0.0097;18.70%,9.92%,P=0.004)。结论Calpain10基因SNP43位点G等位基因和SNP44位点C等位基因可能与昆明地区人群2型糖尿病的发病相关。 展开更多
关键词 糖尿病 2 calpain10基因 遗传易感性
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Cav3.2基因在盆底电刺激治疗小鼠压力性尿失禁中的作用及其机制
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作者 刘剑锋 汤剑明 +2 位作者 阳莲 张舒飞 洪莉 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期557-564,共8页
目的:探讨Cav 3.2基因在盆底电刺激(PES)治疗小鼠压力性尿失禁(SUI)中的作用,并阐明其相关机制。方法:30只C57BL/6小鼠按干预措施随机分为对照组[未进行阴道扩张(VD)造模]、VD组(VD造模)和VD+PES组(VD造模联合PES),每组10只;按照基因型... 目的:探讨Cav 3.2基因在盆底电刺激(PES)治疗小鼠压力性尿失禁(SUI)中的作用,并阐明其相关机制。方法:30只C57BL/6小鼠按干预措施随机分为对照组[未进行阴道扩张(VD)造模]、VD组(VD造模)和VD+PES组(VD造模联合PES),每组10只;按照基因型和干预措施将小鼠分为WT-VD组(野生型VD造模)、WT-VD+PES组(野生型VD造模联合PES)、KO-VD组(Cav 3.2敲除型VD造模)和KO-VD+PES组(Cav 3.2敲除型VD造模联合PES)。Masson染色观察各组小鼠尿道和阴道前壁组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)和Ⅲ型胶原(ColⅢ)的胶原纤维沉积情况和胶原纤维表达水平,测定各组小鼠尿动力学参数最大膀胱容积(MBC)和漏尿点压力(LPP),Western blotting法检测各组小鼠尿道和阴道前壁组织中整合素β1、钙蛋白酶2、ColⅠ和ColⅢ蛋白表达水平。结果:与VD组比较,VD+PES组小鼠尿道和阴道前壁组织中ColⅠ和ColⅢ胶原纤维表达水平明显升高(P<0.01);与WT-VD组比较,WT-VD+PES组小鼠尿道和阴道前壁组织中ColⅠ及ColⅢ胶原纤维表达水平明显升高(P<0.01);与WT-VD+PES组比较,KO-VD组和KO-VD+PES组小鼠尿道和阴道前壁组织中ColⅠ及ColⅢ胶原纤维表达水平明显降低(P<0.01)。与对照组比较,VD组小鼠MBC和LPP均降低(P<0.05);与VD组比较,VD+PES组小鼠MBC和LPP均升高(P<0.05)。Western blotting法检测,与VD组比较,VD+PES组小鼠尿道和阴道前壁组织中ColⅠ及ColⅢ蛋白表达水平均明显升高(P<0.01);与WT-VD组比较,WT-VD+PES组小鼠尿道和阴道前壁组织中ColⅠ及ColⅢ蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与WT-VD+PES组比较,KOVD组和KO-VD+PES组小鼠尿道和阴道前壁组织中ColⅠ及ColⅢ蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与WT-VD组比较,WT-VD+PES组小鼠尿道和阴道前壁组织中整合素β1及钙蛋白酶2蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:PES可改善小鼠尿动力学功能,并通过Cav 3.2基因及其下游整合素β1和钙蛋白酶2促进盆底胶原的生成,促进盆底修复。 展开更多
关键词 盆底电刺激 Cav 3.2基因 整合素β1 钙蛋白酶2 小鼠 C57BL/6 压力性尿失禁
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Calpain-10基因43位点单核苷酸多态性与2型糖尿病及胰岛素抵抗相关性的研究 被引量:6
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作者 王丹 苏本利 +4 位作者 李昌臣 杜健玲 白然 杨郁 巴颖 《中华糖尿病杂志(1006-6187)》 CSCD 北大核心 2005年第3期190-191,共2页
Calpain10基因的第43单核苷酸的GG基因型频率,119例2型糖尿病组为91%,121例空腹血糖正常组为86%,二组间差异无统计学意义。
关键词 calpain-10基因 43位点 单核苷酸 多态性 2型糖尿病 胰岛素抵抗 内分泌
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二硫苏糖醇通过激活calpain-2/caspase-12信号通路诱导BRL-3A细胞凋亡 被引量:1
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作者 罗轩 韩冰 +7 位作者 田甜 余蕾 郑璐 汤雷 杨婷 杨勤 谢汝佳 黄建钊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第10期1820-1826,共7页
目的:探讨二硫苏糖醇(DTT)诱导大鼠正常肝细胞株BRL-3A发生内质网应激时细胞内葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、钙蛋白酶2 (calpain-2)、caspase-12及caspase-3的表达变化及对细胞凋亡的影响。方法:采用2. 5 mmol/L DTT分别处理BRL-3A细胞12 h... 目的:探讨二硫苏糖醇(DTT)诱导大鼠正常肝细胞株BRL-3A发生内质网应激时细胞内葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、钙蛋白酶2 (calpain-2)、caspase-12及caspase-3的表达变化及对细胞凋亡的影响。方法:采用2. 5 mmol/L DTT分别处理BRL-3A细胞12 h和24 h,应用real-time PCR检测细胞内GRP78、calpain-2、caspase-12及caspase-3的mRNA水平;采用细胞免疫荧光检测细胞内GRP78、calpain-2、caspase-12及caspase-3的蛋白表达;应用Western blot检测cleaved caspase-12及cleaved caspase-3的表达变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:BRL-3A细胞经DTT处理12 h及24 h后,GRP78、calpain-2及caspase-12的mRNA表达较正常对照组显著升高(P <0. 01),而caspase-3的mRNA水平与正常对照组比较无显著变化;细胞免疫荧光及Western blot检测发现,DTT处理细胞12 h及24 h后,BRL-3A细胞内GRP78、calpain-2、caspase-12及caspase-3的蛋白表达均较正常对照组显著增高,同时,cleaved caspase-12及cleaved caspase-3的表达也较正常对照组明显增多(P <0. 05);流式细胞术检测发现,经DTT处理后BRL-3A细胞的凋亡率较正常对照组显著增加(P <0. 05)。结论:二硫苏糖醇诱导BRL-3A细胞凋亡可能与calpain-2/caspase-12信号通路激活有关。 展开更多
关键词 钙蛋白酶2 CASPASE-12 内质网应激 细胞凋亡 二硫苏糖醇
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运动神经损伤早期脊髓Calpain-2的上调促进IL-6的异常表达 被引量:1
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作者 陈少霞 姚沛汶 +2 位作者 王少坤 那晓东 臧颖 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期641-647,共7页
【目的】探讨L5前根切除损伤运动神经的慢性痛模型中早期脊髓内钙依赖性蛋白水解酶Calpain-2(CALP2)介导白细胞介素-6(IL-6)异常表达的病理生理。【方法】采用免疫荧光组织化学和蛋白免疫印迹法,观察L5-VRT后L5背根、脊髓内CALP2的表达... 【目的】探讨L5前根切除损伤运动神经的慢性痛模型中早期脊髓内钙依赖性蛋白水解酶Calpain-2(CALP2)介导白细胞介素-6(IL-6)异常表达的病理生理。【方法】采用免疫荧光组织化学和蛋白免疫印迹法,观察L5-VRT后L5背根、脊髓内CALP2的表达改变以及术前预处理calpain抑制剂MDL28170对脊髓内L5-VRT诱导的IL-6异常表达的影响,同时观察单纯给予外源性CALP2(rat recombinant calpain-2,rr-CALP2)对正常大鼠脊髓内IL-6表达的影响。【结果】(1)L5-VRT诱导邻近L5背根以及脊髓背角和前角内钙依赖性蛋白酶CALP2表达升高;(2)通过术前预处理calpain抑制剂MDL28170(25 mg/kg)部分阻断L5-VRT诱导的双侧脊髓IL-6异常表达;(3)在正常大鼠单侧L5背根表面给予rr-CALP2可直接诱导双侧脊髓IL-6蛋白水平升高。【结论】运动神经损伤早期可能首先通过损伤处CALP2的激活,诱导脊髓IL-6异常表达,参与慢性痛的产生。 展开更多
关键词 白细胞介素-6 calpain-2 脊髓 神经病理性疼痛
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缺氧诱导Calpain 2表达可促进胰腺癌细胞迁移和侵袭 被引量:1
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作者 曾智锐 雷珊 +6 位作者 张金娟 杨宇石 薛燕 兰金芝 孙远梅 胡晓霞 陈腾祥 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期595-605,共11页
目的:探讨缺氧微环境中卡配因即钙蛋白酶(Calpain)1和Calpain 2蛋白表达情况,以及调控Calpain 2蛋白表达对胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的影响。方法:通过公共数据库GEPIA(Gene Expression Proling Interactive Analysis)分析Calpain 1和... 目的:探讨缺氧微环境中卡配因即钙蛋白酶(Calpain)1和Calpain 2蛋白表达情况,以及调控Calpain 2蛋白表达对胰腺癌PANC-1细胞迁移和侵袭的影响。方法:通过公共数据库GEPIA(Gene Expression Proling Interactive Analysis)分析Calpain 1和Calpain 2 mRNA在胰腺癌组织中的表达情况,以及它们与患者生存预后的相关性。采用蛋白质印迹法和实时荧光定量PCR法分别检测在常氧(21%O2)和缺氧(1%O2)条件下,胰腺癌PANC-1细胞中Calpain 1、Calpain 2 mRNA和蛋白的表达水平。将靶向Calpain 2编码基因CAPN 2的siRNA转染胰腺癌PANC-1细胞,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法验证CAPN 2基因沉默效果。分别在常氧和缺氧条件下培养Calpain 2低表达组和阴性对照组细胞,然后采用划痕愈合实验和Transwell小室法分别检测各组细胞的迁移和侵袭能力,再采用蛋白质印迹法检测各组细胞中Calpain 2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,最后用倒置显微镜观察各组细胞的形态学变化。结果:相对于正常胰腺组织,胰腺癌组织中Calpain 1和Calpain 2 mRNA表达水平明显增高(P值均<0.01),并且Calpain 2高表达与胰腺癌患者的不良预后有明显相关性(P=0.013)。相对于常氧条件,缺氧条件下胰腺癌PANC-1细胞中Calpain 1 mRNA和蛋白表达水平变化不明显,而Calpain 2 mRNA和蛋白表达水平明显上调(P值均<0.01)。成功构建Calpain 2低表达的PANC-1细胞株。在常氧条件下,下调Calpain 2表达可明显抑制PANC-1细胞的迁移和侵袭能力(P值均<0.05);缺氧培养可促进PANC-1细胞迁移和侵袭(P值均<0.05);而在缺氧条件下,下调Calpain 2表达可以逆转缺氧培养对PANC-1细胞迁移和侵袭的促进作用(P值均<0.05)。常氧条件下,下调Calpain 2表达的胰腺癌PANC-1细胞中,E-cadherin表达量增多(P <0.05),Vimentin表达量减少(P <0.05),而且PANC-1细胞轮廓变大,部分细胞有凋亡样改变;缺氧条件下,E-cadherin蛋白表达量减少(P <0.05),Vimentin表达量增多(P <0.05),大部分细胞有类间质细胞样改变,呈长梭型;而下调Calpain 2表达可明显逆转缺氧培养对细胞上皮-间质转化表型的影响(P值均<0.05)。结论:缺氧微环境可以通过诱导Calpain 2表达,介导E-cadherin表达下调和Vimentin表达上调,从而促进胰腺癌细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 细胞低氧 肿瘤微环境 卡配因2 上皮-间质转化 肿瘤侵润
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基于ERK-Calpain2通路探讨黄连素对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响 被引量:6
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作者 朱娜 曹雪明 《天津中医药》 CAS 2019年第1期75-78,共4页
[目的]研究黄连素(BBR)对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响及ERK-Calpain2信号通路在其中的作用。[方法]以高脂饮食喂养并注射脑垂体后叶素建立冠心病大鼠模型。大鼠分为实验组(模型大鼠)、对照组(模型大鼠)和空白组(正常大鼠),实验组大鼠... [目的]研究黄连素(BBR)对冠心病大鼠心肌细胞凋亡的影响及ERK-Calpain2信号通路在其中的作用。[方法]以高脂饮食喂养并注射脑垂体后叶素建立冠心病大鼠模型。大鼠分为实验组(模型大鼠)、对照组(模型大鼠)和空白组(正常大鼠),实验组大鼠予以BBR 80 mg/(kg·d)灌胃,对照组和空白组予以等量双蒸水灌胃,治疗周期为12周。采用TUNEL免疫荧光检测心肌细胞凋亡情况。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测心肌组织葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及钙蛋白酶2(Calpain2)m RNA水平。采用蛋白质印迹法检测心肌组织GRP78、CHOP、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)、Caspase-12及Calpain2蛋白表达水平。[结果]心肌TUNEL染色后发现,与对照组比较,实验组细胞凋亡显著减少(P<0.01)。与对照组比较,实验组大鼠Caspase-12、Caspase-3、GRP78和CHOP蛋白均有不同程度下调(P<0.01),p-ERK和Calpain2蛋白表达下调,Capastatin蛋白表达升高(P<0.01)。与对照组比较,实验组大鼠GRP78、CHOP、Calpain2 mRNA表达下降(P<0.01)。[结论] BBR能抑制冠心病大鼠心肌细胞发生内质网应激凋亡,该作用可能与抑制ERK-Calpain2信号通路有关。 展开更多
关键词 黄连素 冠心病 心肌 凋亡 ERK-calpain2通路 机制
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Calpain 10基因与新疆维吾尔族2型糖尿病遗传易感性研究 被引量:4
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作者 褚志华 张君 +5 位作者 袁红玲 田世坤 徐文静 陆环 李爱琴 谢建新 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第3期312-316,共5页
研究Calpain 10基因单核苷酸多态性(SNP)43G-A和63C-T两个位点与新疆地区维吾尔族人群2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)之间的关系。采用1∶1病例——对照研究方法,以聚合酶链式反应——限制性内切酶长度多态性(PCR-RFLP)技术,... 研究Calpain 10基因单核苷酸多态性(SNP)43G-A和63C-T两个位点与新疆地区维吾尔族人群2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)之间的关系。采用1∶1病例——对照研究方法,以聚合酶链式反应——限制性内切酶长度多态性(PCR-RFLP)技术,对120例T2DM患者和120例正常对照者Calpain 10基因SNP43、SNP63多态性位点进行基因分型。SNP43多态性位点的基因型和等位基因频率在病例组和正常对照组中的分布存在差异,T2DM组中GG基因型和等位基因频率均低于对照组,但是A等位基因频率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.005);SNP63多态性位点的基因型频率和等位基因频率在病例组和正常对照组中的分布无显著差异,(P>0.005)。结果表明:(1)Calpain 10基因SNP43多态性位点与新疆地区维吾尔族人群T2DM有明显相关性;(2)SNP63多态性位点与新疆地区维吾尔族人群T2DM无明显相关性。 展开更多
关键词 2型糖尿病 calpain 10基因 单核苷酸多态性
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Calpain2在FN诱导的口腔鳞癌细胞上皮间质转化中的作用
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作者 张玉莲 龚靖淋 +3 位作者 刘一秀 李真华 周晓红 叶果 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期638-641,共4页
目的:探讨Calpain2在FN诱导的口腔鳞癌细胞上皮间质转化(EMT)中的作用。方法:以口腔鳞癌Tca8113细胞为研究模型,FN诱导模型细胞48 h;侵袭小室实验考察细胞的侵袭能力;siRNA转染沉默Calpain2蛋白表达;应用蛋白质印记法检测各蛋白表达水... 目的:探讨Calpain2在FN诱导的口腔鳞癌细胞上皮间质转化(EMT)中的作用。方法:以口腔鳞癌Tca8113细胞为研究模型,FN诱导模型细胞48 h;侵袭小室实验考察细胞的侵袭能力;siRNA转染沉默Calpain2蛋白表达;应用蛋白质印记法检测各蛋白表达水平。结果:FN(15μg/ml)处理Tca8113细胞12、24、48 h发现,Calpain2和Twist蛋白表达逐渐增加(P<0.05或P<0.01);E-cadherin蛋白表达逐渐降低(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组相比,FN处理组细胞侵袭数增加了(116.7±5.1)%(P<0.01)。与siRNA-NC组相比,siRNA-Calpain2组Calpain2蛋白表达下调(90.3±3.3)%(P<0.01)。FN处理细胞48 h,与siRNA-NC组相比,siRNA-Calpain2组E-cadherin蛋白表达下调和Twist蛋白表达上调被逆转(P<0.01);siRNA-Calpain2组细胞侵袭数下降(51.3±4.5)%(P<0.01)。结论:FN能诱导口腔鳞癌Tca8113细胞发生EMT,该作用可能与Calpain2蛋白表达上调相关。 展开更多
关键词 钙激活中性蛋白酶2(calpain2) 口腔鳞癌 侵袭 上皮间质转化(EMT) 纤连蛋白(FN)
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钙蛋白酶2通过诱导三阴乳腺癌细胞上皮间质转化抵抗紫杉醇的机制探讨
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作者 陈聪 吴元肇 +2 位作者 郑克思 应文兵 胡逸人 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第11期1176-1180,共5页
目的观察钙蛋白酶2(Calpain-2)在三阴乳腺癌细胞抵抗紫杉醇(PTX)中的作用及机制。方法人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞转染Calpain-2质粒及相应空载体,设为过表达组和空载体组,同时以未转染细胞作为空白组。MTT法检测PTX对各组细胞存活率... 目的观察钙蛋白酶2(Calpain-2)在三阴乳腺癌细胞抵抗紫杉醇(PTX)中的作用及机制。方法人三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞转染Calpain-2质粒及相应空载体,设为过表达组和空载体组,同时以未转染细胞作为空白组。MTT法检测PTX对各组细胞存活率的影响;免疫荧光实验检测YAP的分布情况;蛋白质免疫印迹实验检测Calpain-2、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、磷酸化大肿瘤抑制基因1(pLATS1)及磷酸化yes相关蛋白(p-YAP)表达。在过表达Calpain-2的基础上加用YAP抑制剂XMU-MP-1进行干预,观察YAP对PTX抵抗的介导作用。结果与空载体组相比,PTX处理后过表达组细胞存活率增加,半数抑制浓度(IC50)升高(P<0.05)。与空载体组相比,过表达组细胞N-cadherin和Vimentin蛋白表达上调,E-cadherin蛋白表达下调(P<0.05),p-LATS1和p-YAP蛋白表达上调(P<0.01),YAP在细胞核内分布减少。与过表达组相比,XMU-MP-1+过表达组N-cadherin和Vimentin蛋白表达下调,E-cadherin蛋白表达上调(P<0.01)。PTX处理后,与过表达组相比,XMU-MP-1+过表达组细胞存活率减少,IC50降低(P<0.01)。结论Calpain-2通过YAP诱导三阴乳腺癌细胞上皮间质转化,从而对PTX产生药物抵抗。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 上皮-间质转化 抗药性 肿瘤 紫杉醇 钙蛋白酶2
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钙中性蛋白酶2及Bax在肝纤维化大鼠肝组织中的表达变化及意义 被引量:4
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作者 谢汝佳 韩冰 +2 位作者 杨婷 温静静 杨勤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1603-1608,共6页
目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/k... 目的:探讨钙中性蛋白酶2(calpain 2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)在肝纤维化过程中的表达变化及其在肝纤维化过程中的可能作用。方法:雄性Wistar大鼠40只,随机分为正常对照4周、8周组和肝纤维化模型4周、8周组,每组各10只。肝纤维化组按3 mL/kg体重的剂量皮下注射40%CCl4植物油溶液,每隔3 d注射1次,造模时间分别为4周和8周;对照组大鼠皮下注射等量植物油溶液。采用TUNEL法检测肝组织中肝细胞凋亡情况;real-time PCR检测肝组织中calpain 2及bax mRNA的表达变化。免疫组织化学法及Western blotting检测肝组织中calpain 2及Bax蛋白的表达情况。结果:Real-time PCR检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中calpain2及bax mRNA表达较相应的正常对照组显著增加。免疫组化及Western blotting检测显示肝纤维化4周组大鼠肝组织中calpain 2蛋白的表达与正常4周组比较无显著差异;随着肝纤维化程度的加重,肝纤维化8周时大鼠肝组织中calpain 2的表达显著增加;而肝组织中Bax的表达从肝纤维化4周时就显著增加,肝纤维化8周时达到高峰。此外,通过TUNEL法检测发现肝纤维化4周和8周组大鼠肝组织中肝细胞凋亡的数目较正常组大鼠显著增加。结论:Calpain 2与Bax可能参与了肝纤维化的发生发展过程。 展开更多
关键词 肝纤维化 钙中性蛋白酶2 Bcl-2相关X蛋白
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钙蛋白酶10基因多态性与贵阳地区人群2型糖尿病的相关性研究 被引量:4
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作者 鲍丽雅 谢渊 +2 位作者 单可人 张婷 肖雁 《检验医学与临床》 CAS 2010年第16期1691-1692,共2页
目的探讨钙蛋白酶10(Calpain10)基因第3内含子SNP19多态性与贵阳地区人群2型糖尿病(T2DM)遗传易感性的关系。方法采用病例-对照研究设计,对74例T2DM患者和72例健康对照应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测Calpai... 目的探讨钙蛋白酶10(Calpain10)基因第3内含子SNP19多态性与贵阳地区人群2型糖尿病(T2DM)遗传易感性的关系。方法采用病例-对照研究设计,对74例T2DM患者和72例健康对照应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测Calpain10基因SNP19位点多态性,并与不同人群进行比较分析。结果与对照组相比病例组SNP19基因型频率、等位基因频率均无显著差异,与其他研究人群的结果相近。结论 Calpain10基因SNP19位点多态性可能与贵阳地区人群T2DM的发生无关。 展开更多
关键词 2型糖尿病 钙蛋白酶10基因 基因多态性 贵阳
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