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针刀对肌性斜颈模型兔胸锁乳突肌中calpain-1、CD45、MMP-2、TIMP-2蛋白表达的影响
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作者 高国莉 《西部中医药》 2024年第4期13-16,共4页
目的:应用肌性斜颈兔动物模型,探讨针刀治疗肌性斜颈的作用机制及意义。方法:无水酒精注射制备动物肌性斜颈兔子模型后,选取模型兔子48只,随机分为正常组、模型组、针刀组、按摩组,每组12只。分别给予各组对应治疗,治疗2个月后各组分别... 目的:应用肌性斜颈兔动物模型,探讨针刀治疗肌性斜颈的作用机制及意义。方法:无水酒精注射制备动物肌性斜颈兔子模型后,选取模型兔子48只,随机分为正常组、模型组、针刀组、按摩组,每组12只。分别给予各组对应治疗,治疗2个月后各组分别取部分胸锁乳突肌制作标本,免疫组化法观察钙蛋白酶1(calpain-1)、分化抗原决定簇45(CD45)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制因子2(tissue inhibitor of metalloproteinases-2,TIMP-2)在各组肌纤维中的表达情况。结果:与正常组比较,其余各组实验动物明显出现颈部活动受限、斜颈、头颈不对称症状,而治疗结束后,针刀组和按摩组实验动物颈部活动受限改善,无明显头颈不对称症状。calpain-1、CD45、TIMP-2的表达,与正常组比较,模型组、按摩组上调(P<0.01);与模型组比较,针刀组、按摩组下调(P<0.01);与针刀组比较,按摩组上调(P<0.01)。MMP-2表达,与正常组比较,模型组下调(P<0.01),与模型组比较,针刀组、按摩组上调(P<0.05)。结论:针刀治疗肌性斜颈效果显著,其作用机制可能与减少calpain-1、CD45、TIMP-2表达,增加MMP-2表达有关。 展开更多
关键词 肌性斜颈 胸锁乳突肌 动物模型 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶抑制因子2 分化抗原决定簇45 钙蛋白酶1
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Calpain-1通过诱导内质网应激加速肺动脉高压的内皮细胞凋亡 被引量:5
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作者 孙鹤宁 鲁美丽 +3 位作者 田小雪 邓海艳 刘欢 王洪新 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期723-730,共8页
目的 探究calpain-1通过内质网应激促进低氧诱导肺动脉高压肺动脉内皮细胞凋亡的作用机制。方法 C57BL/6野生型(WT)和calpain-1基因敲除小鼠(KO)低氧仓中(10%O2)饲养4周诱导肺动脉高压模型,分为WT常氧对照(WT Con)、WT低氧模型(WT Hypox... 目的 探究calpain-1通过内质网应激促进低氧诱导肺动脉高压肺动脉内皮细胞凋亡的作用机制。方法 C57BL/6野生型(WT)和calpain-1基因敲除小鼠(KO)低氧仓中(10%O2)饲养4周诱导肺动脉高压模型,分为WT常氧对照(WT Con)、WT低氧模型(WT Hypoxia)、KO常氧对照(KO Con)和KO低氧(KO Hypoxia)4组。HPAECs在低氧(3%O2)培养箱中培养24 h模拟体内肺高压微环境,分为对照(Con)、模型(Hypoxia)、低氧+MDL28170(Hypoxia+MDL)和低氧+4-PBA(Hypoxia+4-PBA)4组。应用HE染色、TUNEL、免疫组化、免疫荧光、流式、Western blot检测组织形态、细胞凋亡,calpain-1,pPERK,CHOP,GRP78,caspase-12,caspase-3,Bax, Bcl-2表达水平。结果 与WT Con组相比,WT Hypoxia组小鼠血流动力学指数、肺组织中血管壁厚度比率和血管壁面积比率明显升高,calpain-1上调、内质网应激加重(pPERK,CHOP,GRP78升高)、内皮细胞凋亡增多,caspase-12、caspase-3、Bax增加,Bcl-2降低,而KO Hypoxia组逆转上述指标异常表达,凋亡和内质网应激减轻。与HPAECs Con组相比,Hypoxia组calpain-1上调,细胞凋亡、内质网应激明显,MDL28170处理后,上述效应逆转。4-PBA处理Hypoxia组细胞,calpain-1水平变化无意义但凋亡相关蛋白受到抑制。结论 Calpain-1通过促进内质网应激加速低氧诱导肺动脉高压肺动脉内皮细胞的凋亡。 展开更多
关键词 calpain-1 低氧 肺动脉高压 肺动脉内皮细胞 内质网应激 凋亡
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Calpain-1 Mediated Mitochondria ROS/NLRP3 Inflammasome in Atherosclerosis
3
作者 Futian Tang Mohamed Ali Awad 《Journal of Biosciences and Medicines》 2023年第4期50-59,共10页
Calpains are calcium-activated cysteine proteases. There are two main isoforms of calpain that are ubiquitously expressed in tissues, calpain μ or calpain 1, which requires micromolar Ca<sup>2+</sup> for ... Calpains are calcium-activated cysteine proteases. There are two main isoforms of calpain that are ubiquitously expressed in tissues, calpain μ or calpain 1, which requires micromolar Ca<sup>2+</sup> for activation, and calpain or 2, which requires millimolar Ca<sup>2+</sup> for activation. The presence of other calpains is tissue specific. Atherosclerosis (AS) is an important risk factor for cerebral infarction, coronary heart disease and peripheral vascular disease. It was originally thought that AS was caused by impaired lipid metabolism. This research briefly reviewed Calpain Family, the structure and activation mechanism of calpain1, Calpains in the pathogenesis of atherosclerosis, NLRP3 structural characteristics and activation, ROS/NLRP3 inflammasome activation mechanism and ROS/NLRP3 inflammasome in atherosclerosis. The research showed that the Calpain-1 may play an important role in mitochondrial ROS/NLRP3 inflammasome in atherosclerosis. 展开更多
关键词 calpain-1 ROS/NLRP3 Inflammasome Atherosclerosis (AS)
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基于Calpain-1/NLRP3调控的细胞焦亡及Th17/Treg途径探讨银杏叶抑制乳腺癌细胞增殖的机制 被引量:3
4
作者 李军 黄梅 +1 位作者 林曼迪 吴代陆 《广东医学》 CAS 2022年第7期793-798,共6页
目的探讨银杏叶提取物(EGB)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、焦亡的影响及作用机制。方法将质量浓度为0、10、20、40、80、160 mg/L的EGB作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞上,观察细胞形态;四甲基偶氮唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖;Annexin V/P... 目的探讨银杏叶提取物(EGB)对乳腺癌MCF-7细胞增殖、焦亡的影响及作用机制。方法将质量浓度为0、10、20、40、80、160 mg/L的EGB作用于体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞上,观察细胞形态;四甲基偶氮唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖;Annexin V/PI双染色流式细胞术检测细胞焦亡率;乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测LDH释放量;Western Blot检测MCF-7细胞中Calpain-1、NLRP3、Th17、Treg、caspase-1、cleaved caspase-1、GSDMD的表达。结果EGB可明显抑制MCF-7细胞的增殖;增加MCF-7细胞的焦亡率;增加MCF-7细胞的LDH释放量;增加GSDMD、caspase-1、cleaved caspase-1蛋白表达;降低Calpain-1、NLRP3、Th17、Treg蛋白表达;且作用随着EGB浓度的增加逐渐增强。结论银杏叶可抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,其可能与Calpain-1/NLRP3调控的细胞焦亡及Th17/Treg炎症轴相关。 展开更多
关键词 乳腺癌 银杏叶 增殖 细胞焦亡 calpain-1 NLRP3 Th17/Treg轴
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Calpain-1在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠心肌中的表达及意义 被引量:3
5
作者 赵红 徐梅 初桂兰 《天津医科大学学报》 2011年第2期194-197,共4页
目的:了解缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠心肌细胞凋亡和Calpain-1表达的变化。方法:采用改良的Rice法构建新生大鼠HIBD模型,64只大鼠随机分为对照组和HIBD后2、12、24 h及2、3、5、7 d组。应用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,并计数凋... 目的:了解缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠心肌细胞凋亡和Calpain-1表达的变化。方法:采用改良的Rice法构建新生大鼠HIBD模型,64只大鼠随机分为对照组和HIBD后2、12、24 h及2、3、5、7 d组。应用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,并计数凋亡指数(AI),RT-PCR法和Western blot法检测各组大鼠心肌中Calpain-1mRNA及蛋白活性的变化。结果:对照组偶见凋亡细胞,HIBD组凋亡细胞均明显增多(P<0.01),3 d达凋亡高峰(P<0.001),此后开始降低,7 d仍高于对照组(P<0.001)。与对照组相比,Calpain-1mRNA于HIBD后12 h开始增高(P<0.001),2 d达到高峰,3~5 d表达量仍维持在较高水平(P<0.001);蛋白活性自HIBD后2 h增高(P<0.05),3 d达高峰(P<0.001)后开始降低,7 d与对照组无统计学差异(P>0.05);Calpain-1 mRNA及蛋白活性均与AI呈直线正相关(r=0.786,P<0.01;r=0.853,P<0.01)。结论:缺氧缺血性脑损伤新生大鼠心肌中Calpain-1表达增强,且与细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 新生大鼠 心肌细胞 凋亡 calpain-1
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重组UK114蛋白对宰后牛肉calpain-1及肌原纤维蛋白特性的影响 被引量:1
6
作者 宋彩丽 尹淑琴 +1 位作者 张晓红 常泓 《山西农业大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2020年第2期79-86,共8页
[目的]探究钙蛋白酶激活蛋白UK114对钙蛋白酶(calpain-1)及钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)介导的牛肉宰后僵直、成熟过程中肌原纤维蛋白性质的影响。[方法]以calpain-1、calpastatin、重组UK114蛋白处理的牛肉为研究对象,测定牛肉宰后... [目的]探究钙蛋白酶激活蛋白UK114对钙蛋白酶(calpain-1)及钙蛋白酶抑制蛋白(calpastatin)介导的牛肉宰后僵直、成熟过程中肌原纤维蛋白性质的影响。[方法]以calpain-1、calpastatin、重组UK114蛋白处理的牛肉为研究对象,测定牛肉宰后成熟过程中calpain-1的活性变化及肌原纤维蛋白水合特性、小片化指数(MFI)、降解情况等指标的变化规律。[结果]随着孵育时间的延长,肌原纤维蛋白表面疏水性呈先上升后下降趋势,溶解性呈现先下降后升高的趋势;Calpain-1和UK114+calpain-1处理组疏水性和溶解性的极值点分别提前到48 h和24 h;calpastatin处理组疏水性和溶解性的极值点推迟到120 h;但UK114+calpastatin处理组在48 h达到极值点。[结论]UK114蛋白可抑制calpastatin的抑制作用,促进calpain-1对肌原纤维蛋白的降解。 展开更多
关键词 重组UK114蛋白 牛肉 calpain-1 肌原纤维小片化指数 表面疏水性
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calpain-1在辛伐他汀抑制糖尿病大鼠心肌炎症中的作用
7
作者 韩倩倩 鲁美丽 +3 位作者 王洪新 李腾 唐富天 张英杰 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2019年第1期60-63,70,共5页
目的探讨钙蛋白酶-1(calpain-1)在辛伐他汀抑制糖尿病大鼠心肌炎症中的作用。方法40只SD大鼠随机分为4组:空白对照组(CON组)、链脲佐菌素组(STZ组)、辛伐他汀高剂量(20 mg/kg)治疗组(STZ+SIM20组)及低剂量(10 mg/kg)治疗组(STZ+SIM10组)... 目的探讨钙蛋白酶-1(calpain-1)在辛伐他汀抑制糖尿病大鼠心肌炎症中的作用。方法40只SD大鼠随机分为4组:空白对照组(CON组)、链脲佐菌素组(STZ组)、辛伐他汀高剂量(20 mg/kg)治疗组(STZ+SIM20组)及低剂量(10 mg/kg)治疗组(STZ+SIM10组),给药12周后,采用HE染色观察心肌组织病理学改变;免疫组化检测心肌组织p65的表达;Western Blot检测心肌组织calpain-1、p65、IκBα的蛋白表达;ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的含量。结果辛伐他汀治疗组与STZ组相比,心肌细胞排列整齐,炎性细胞浸润减少;胞浆p65、IκBα蛋白表达增加,calpain-1、TNF-α、IL-6、核内p65表达减少。结论辛伐他汀对糖尿病大鼠心肌炎症有保护作用,其机制可能与抑制心肌calpain-1表达有关。 展开更多
关键词 辛伐他汀 糖尿病大鼠 calpain-1 炎症
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枸杞多糖通过下调Calpain-1蛋白表达改善糖尿病大鼠血管内皮依赖性舒张功能作用研究
8
作者 陈卫英 何元 +1 位作者 唐富天 陈晓梅 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期1486-1490,共5页
目的研究枸杞多糖(LBP)对糖尿病大鼠血管舒张功能障碍的改善作用及机制。方法腹腔注射给予8周龄雄性SD大鼠链脲佐菌素[STZ,50 mg/(kg·d),连续5天]建立糖尿病模型。将24只血糖高于15 mmol/L的大鼠随机分为STZ组、LBP高剂量组和LBP... 目的研究枸杞多糖(LBP)对糖尿病大鼠血管舒张功能障碍的改善作用及机制。方法腹腔注射给予8周龄雄性SD大鼠链脲佐菌素[STZ,50 mg/(kg·d),连续5天]建立糖尿病模型。将24只血糖高于15 mmol/L的大鼠随机分为STZ组、LBP高剂量组和LBP低剂量组,每组8只。另用8周龄雄性SD大鼠作为Control组。LBP高剂量组和LBP低剂量组分别灌胃给予LBP[60、30 mg/(kg·d)],连续12周。实验结束后测定大鼠血管内皮依赖性和非依赖性舒张功能,全血中葡萄糖含量,血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和一氧化氮(NO)含量,血管中内皮型一氧化氮内酶活性(eNOS)和Calpain活性,血管中eNOS和Calpain-1蛋白表达。结果与Control组比较,STZ组大鼠血管内皮依赖性舒张功能明显障碍,最大舒张百分率只有Control组的45%。与Control组比较,STZ组血糖、TC、TG水平及Calpain活性、蛋白表达升高(P<0.01),NO含量、eNOS活性和蛋白表达降低(P<0.01)。与STZ组比较,LBP高、低剂量组可改善大鼠内皮依赖性血管舒张,同时血糖、Calpain活性、蛋白表达降低,NO含量、eNOS活性和蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论LBP能够改善糖尿病大鼠血管内皮依赖性舒张功能,其机制可能与下调Calpain-1表达,进而提高eNOS活性和增加NO含量有关。 展开更多
关键词 糖尿病 血管舒张功能 枸杞多糖 一氧化氮 内皮型一氧化氮内酶 calpain-1 中药提取物
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Calpain-1、caspase-3表达在氟致肾细胞凋亡中作用 被引量:4
9
作者 杨小蓉 于燕妮 +1 位作者 万雯 潘菊 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2015年第11期1412-1416,共5页
目的观察氟对大鼠肾脏calpain-1、caspase-3蛋白及其mRNA表达和肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法健康SD大鼠36只,随机分为对照组、低氟组和高氟组3组,每组12只,雌雄各半,分别饮用<1、5、50 mg/L氟化钠的自来水,连续8个月;定期检查大... 目的观察氟对大鼠肾脏calpain-1、caspase-3蛋白及其mRNA表达和肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法健康SD大鼠36只,随机分为对照组、低氟组和高氟组3组,每组12只,雌雄各半,分别饮用<1、5、50 mg/L氟化钠的自来水,连续8个月;定期检查大鼠氟斑牙发生情况,实验期末,收集大鼠24 h尿液测尿氟含量;应用免疫组化和原位杂交法检测肾组织中calpain-1和caspase-3蛋白及mRNA表达;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)及流式细胞仪检测肾小管上皮细胞凋亡率。结果染氟组大鼠出现不同程度氟斑牙表现,且高氟组大鼠氟斑牙程度重于低氟组;与对照组比较,染氟组大鼠尿氟含量明显升高,低、高氟组大鼠肾小管上皮细胞中calpain-1和caspase-3表达[分别为(77.00±7.60)、(83.62±7.78)和(62.33±5.86)、(66.65±3.87)]升高(P<0.05),呈剂量效应关系;肾组织中mRNA表达与蛋白表达水平一致;与对照组比较,低、高剂量染氟组大鼠肾小管上皮细胞凋亡率[(19.76±2.21)%、(24.58±2.57)%]均增加(P<0.05);肾小管上皮细胞中calpain-1表达与caspase-3表达呈正相关(r=0.699,P<0.05)。结论 Calpain-1、caspase-3基因表达升高引起的肾小管上皮细胞凋亡是慢性氟中毒大鼠肾脏病变的机制之一。 展开更多
关键词 氟中毒 calpain-1 CASPASE-3 肾小管上皮细胞 凋亡
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瘦素对窒息新生大鼠心肌组织calpain-1和Bcl-2的表达及细胞凋亡的影响 被引量:2
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作者 吴丹丹 吴星恒 张丽娜 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1044-1049,共6页
目的研究瘦素对窒息新生大鼠心肌组织钙依赖中性蛋白酶(calpain-1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达及心肌细胞凋亡的影响。方法将48只新生大鼠随机分为正常对照组、窒息组、瘦素处理组(L20组、L80组、L160组)和calpain-1抑制剂组(CAI-1组... 目的研究瘦素对窒息新生大鼠心肌组织钙依赖中性蛋白酶(calpain-1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达及心肌细胞凋亡的影响。方法将48只新生大鼠随机分为正常对照组、窒息组、瘦素处理组(L20组、L80组、L160组)和calpain-1抑制剂组(CAI-1组)。建立新生大鼠常压窒息模型,各瘦素处理组在造模后立即给予瘦素20、80、160μg/kg进行腹腔注射,CAI-1组造模后立即给予calpain-1抑制剂10 mg/kg腹腔注射。各组均在造模完成后2 h取心肌组织,免疫组化法检测calpain-1、Bcl-2的表达,Tunel法检测心肌细胞凋亡指数(AI)。结果窒息组calpain-1、Bcl-2的表达及AI值较正常对照组均明显升高(P<0.05);各瘦素处理组、CAI-1组calpain-1表达水平及AI值较窒息组显著下降,Bcl-2表达水平较窒息组显著升高(P<0.05);与窒息组相比,各指标变化均以CAI-1组最显著,且与L160组比较差异均无统计学意义(P>0.05);窒息后各组calpain-1与AI值呈正相关,Bcl-2与calpain-1和AI值均呈负相关(P<0.05)。结论瘦素可抑制calpain-1的活化,上调Bcl-2表达,从而减少窒息新生大鼠心肌细胞凋亡。 展开更多
关键词 瘦素 窒息 calpain-1 BCL-2 心肌细胞 凋亡 新生大鼠
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毛蕊异黄酮通过抑制calpain-1的表达发挥抗脑缺血再灌注损伤的研究 被引量:4
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作者 郭超 卞涛 +4 位作者 卜伟 马善波 段佳林 王艳华 文爱东 《现代生物医学进展》 CAS 2019年第4期631-635,共5页
目的:探讨毛蕊异黄酮抗脑缺血再灌注损伤的作用是否与抑制calpain-1的表达有关。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组以及药物组,采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型,于缺血再灌注前30 min腹腔注射给予20 mg/kg毛蕊异黄酮... 目的:探讨毛蕊异黄酮抗脑缺血再灌注损伤的作用是否与抑制calpain-1的表达有关。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、模型组以及药物组,采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型,于缺血再灌注前30 min腹腔注射给予20 mg/kg毛蕊异黄酮或等体积的溶剂。再灌注24 h后,行神经功能学评分、脑梗死面积以及神经元凋亡检测;再灌注12 h、24 h时,采用免疫组化和蛋白印迹技术检测大鼠脑皮层calpain-1的表达。结果:与假手术组大鼠比较,MCAO模型组大鼠再灌注24 h后神经功能学评分、梗死面积、神经元凋亡率及calpain-1的表达均明显升高(P<0.05),而毛蕊异黄酮能够降低模型组大鼠再灌注24 h后神经功能学评分、梗死面积、神经元凋亡率以及calpain-1的表达(P<0.05)。结论:毛蕊异黄酮可能通过抑制calpain-1的表达发挥抗脑缺血再灌注损伤作用。 展开更多
关键词 毛蕊异黄酮 脑缺血 卡配因 作用机制
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黄芪甲苷通过calpain-1/NF-κB信号通路对低氧诱导的肺动脉高压小鼠的保护作用 被引量:3
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作者 田小雪 鲁美丽 王洪新 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2022年第13期1293-1298,共6页
目的:探究黄芪甲苷通过calpain-1/NF-κB信号通路对低氧诱导的肺动脉高压小鼠的保护作用。方法:40只C57BL/6小鼠随机分为5组:常氧对照组、低氧模型组、低氧NF-κB抑制剂组(5 mg·kg^(-1))、低氧ASIV低剂量组(40 mg·kg^(-1))、... 目的:探究黄芪甲苷通过calpain-1/NF-κB信号通路对低氧诱导的肺动脉高压小鼠的保护作用。方法:40只C57BL/6小鼠随机分为5组:常氧对照组、低氧模型组、低氧NF-κB抑制剂组(5 mg·kg^(-1))、低氧ASIV低剂量组(40 mg·kg^(-1))、低氧ASIV高剂量组(80 mg·kg^(-1))。16只calpain-1敲除鼠随机分为2组:常氧calpain-1敲除组、低氧calpain-1敲除组。低氧组置于10%O的低氧舱内造模28 d。造模结束后测定小鼠右心室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI);酶联免疫法(ELISA)检测血清中ET-1、IL-6、TNF-α含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肺小动脉结构,测量肺小动脉血管面积占总面积的百分比(WA)和血管厚度占血管外径的百分比(WT);免疫组化(IHC)观察肺组织PCNA蛋白的表达;免疫蛋白印迹法(Western blot)检测肺组织calpain-1、p65、p-p65、PCNA、VCAM1、ICAM1蛋白的表达。结果:与常氧对照组比较,低氧模型组小鼠的RVSP、RVHI、WA和WT升高(P<0.01),血清中ET-1、IL-6、TNF-α含量升高(P<0.01),肺组织中calpain-1、p-p65、PCNA、VCAM1、ICAM1蛋白表达升高(P<0.05);与低氧模型组相比,低氧calpain-1敲除组、低氧NF-κB抑制剂组、低氧ASIV给药组小鼠的RVSP、RVHI、WA和WT明显降低(P<0.05),血清中ET-1、IL-6、TNF-α含量降低(P<0.05),肺组织中calpain-1、p-p65、PCNA、VCAM1、ICAM1蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:黄芪甲苷可能通过calpain-1/NF-κB信号通路对低氧诱导的肺动脉高压小鼠发挥保护作用。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 低氧 钙蛋白酶-1 钙蛋白酶-1敲除 核转录因子
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黄芪甲苷通过Calpain-1/HIF-1α改善野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠氧化应激 被引量:3
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作者 龚晓男 孙洋 王洪新 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期33-38,共6页
目的:研究黄芪甲苷对野百合碱诱导的肺动脉高压(PAH)大鼠的保护作用并探讨其作用机制。方法:SD大鼠通过单次腹腔注射野百合碱0.06 g/kg建立PAH模型,黄芪甲苷40 mg/kg、80 mg/kg组连续灌胃4 w,腹腔注射钙蛋白酶-1(Calpain-1)抑制剂(MDL-2... 目的:研究黄芪甲苷对野百合碱诱导的肺动脉高压(PAH)大鼠的保护作用并探讨其作用机制。方法:SD大鼠通过单次腹腔注射野百合碱0.06 g/kg建立PAH模型,黄芪甲苷40 mg/kg、80 mg/kg组连续灌胃4 w,腹腔注射钙蛋白酶-1(Calpain-1)抑制剂(MDL-28170,20 mg/kg)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)抑制剂(2ME2,16 mg/kg)。右心室导管插管检测右心室压力(RVSP)和平均肺动脉压(mPAP),采用苏木素-伊红(HE)染色法和马松三色法观察肺组织病理形态,超氧化物阴离子探针(DHE)染色法检测肺组织活性氧(ROS)形成情况,酶联免疫(ELISA)法检测血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)和Calpain-1的水平,比色分析法(WST-1)、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)法分别检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,免疫组化法观察肺组织Calpain-1蛋白的表达情况,免疫蛋白印迹法(Western blot)检测肺组织HIF-1α的表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组中RVSP、mPAP、右心肥厚指数、血管壁面积比(WA)、肺组织纤维胶原沉积面积、肺干湿重、肺组织中ROS含量、血清中MDA水平、肺组织中Calpain-1和HIF-1α蛋白表达显著升高(P<0.01),血清中SOD的生成和GSH-px释放量显著降低(P<0.05或P<0.01);与模型对照组相比,MDL-28170组、2ME2组和黄芪甲苷40、80 mg/kg组中RVSP、mPAP、右心肥厚指数、血管壁面积比(WA)、肺组织纤维胶原沉积面积、肺干湿重、肺组织中ROS含量、血清中MDA水平、肺组织中Calpain-1和HIF-1α蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01),血清中SOD的生成和GSH-px释放量显著升高(P<0.01)。黄芪甲苷对野百合碱的抑制作用与MDL-28170和2ME2作用相似。结论:黄芪甲苷改善MCT诱导的PAH大鼠氧化应激,且可能通过Calpain-1/HIF-1α信号通路发挥其改善作用。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 野百合碱 钙蛋白酶-1 肺动脉高压 缺氧诱导因子-1Α
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siRNA沉默CAPN1基因对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、侵袭及Bcl-2和Bax表达的影响 被引量:1
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作者 郑思化 赵学正 高伟 《浙江医学》 CAS 2023年第22期2363-2366,I0003,共5页
目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默钙蛋白酶1(CAPN1)基因对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、侵袭及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响。方法将siRNA序列、CAPN1 siRNA序列分别转染MG-63细胞,分为CAPN1 siRNA组与siRNA组,以... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默钙蛋白酶1(CAPN1)基因对人骨肉瘤细胞MG-63增殖、侵袭及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响。方法将siRNA序列、CAPN1 siRNA序列分别转染MG-63细胞,分为CAPN1 siRNA组与siRNA组,以未转染的细胞作为对照组。采用q RT-PCR法检测细胞中CAPN1 mRNA表达水平;采用四唑盐比色法检测细胞增殖率;采用Transwell侵袭实验检测细胞侵袭率;采用Western blot法检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果CAPN1 siRNA组细胞CAPN1 mRNA表达水平、在培养12、24、36和48 h的增殖率、侵袭率、Bcl-2蛋白表达水平均低于对照组和siRNA组,而Bax蛋白表达水平高于对照组和siRNA组,差异均有统计学意义(均P<0.05);对照组和siRNA组细胞上述指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论siRNA沉默CAPN1表达抑制了MG-63细胞增殖和侵袭能力,并促进其凋亡,其机制可能与调控Bcl-2和Bax蛋白表达有关。 展开更多
关键词 小干扰RNA 钙蛋白酶1 人骨肉瘤细胞 增殖 侵袭 凋亡
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siRNA沉默钙蛋白酶1对人脑胶质瘤细胞LN229增殖及侵袭的影响 被引量:1
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作者 唐树军 胡峻华 +2 位作者 施登超 宁威海 吴科 《解剖学研究》 CAS 2023年第6期518-522,共5页
目的 探讨siRNA沉默钙蛋白酶1(CAPN1)对人脑胶质瘤细胞LN229增殖及侵袭的影响。方法 取人脑胶质瘤细胞LN229于37℃水浴中解冻后制备单细胞悬液,接种于细胞培养板中,融合度至90%左右,将siRNA系列、CAPN1 siRNA序列分别转染细胞,分为实验... 目的 探讨siRNA沉默钙蛋白酶1(CAPN1)对人脑胶质瘤细胞LN229增殖及侵袭的影响。方法 取人脑胶质瘤细胞LN229于37℃水浴中解冻后制备单细胞悬液,接种于细胞培养板中,融合度至90%左右,将siRNA系列、CAPN1 siRNA序列分别转染细胞,分为实验组(CAPN1 siRNA)与siRNA组,以未转染的细胞作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定LN229细胞中CAPN1 mRNA表达;采用MTT法测定LN229细胞增殖情况;采用Transwell小室测定LN229细胞侵袭及迁移情况;采用Western blot测定LN229细胞Bax、Bcl-2和CAPN1蛋白表达。结果 与对照组和siRNA组比较,实验组CAPN1 mRNA表达明显降低(P<0.05);与对照组和siRNA组比较,实验组LN229细胞增殖率明显降低(P<0.05);与对照组和siRNA组比较,实验组LN229细胞侵袭率明显降低(P<0.05);与对照组和siRNA组比较,实验组LN229细胞迁移数目明显降低(P<0.05);与对照组和siRNA组比较,实验组LN229细胞Bax蛋白表达灰度值明显升高,而Bcl-2和CAPN1蛋白表达灰度值明显降低(P<0.05)。而对照组和siRNA组CAPN1 mRNA表达、LN229细胞增殖率、LN229细胞侵袭率、LN229细胞迁移数目、Bax、Bcl-2和CAPN1蛋白表达灰度值比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 siRNA沉默CAPN1可抑制人脑胶质瘤细胞LN229增殖,抑制脑胶质瘤细胞侵袭和迁移,上调Bax表达及下调Bcl-2和CAPN1蛋白表达。 展开更多
关键词 钙蛋白酶1 人脑胶质瘤 SIRNA 增殖 侵袭 LN229细胞
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Notch1/Hes1信号通路在调控低分化胃腺癌细胞钙离子和侵袭能力中的作用
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作者 张竞文 黄菱燕 +2 位作者 秦憬 吕怀盛 景丽 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期133-138,共6页
目的探讨Notch1/Hes1信号通路对胃癌细胞钙离子水平的影响及其与侵袭的关系。方法采用免疫组化法检测32例原发性低分化胃腺癌组织及32例癌旁正常组织中Notch1、Hes1、Calpain-1和E-cadherin蛋白的表达。将MGC-803细胞分为对照组、Lipofe... 目的探讨Notch1/Hes1信号通路对胃癌细胞钙离子水平的影响及其与侵袭的关系。方法采用免疫组化法检测32例原发性低分化胃腺癌组织及32例癌旁正常组织中Notch1、Hes1、Calpain-1和E-cadherin蛋白的表达。将MGC-803细胞分为对照组、Lipofectamine 2000组、Notch1 siRNA组和Hes1 siRNA组,采用Transwell法对比分析Notch1和Hes1基因沉默MGC-803细胞侵袭能力。应用Flou-4实验检测细胞钙离子水平。运用Western blot法检测Notch1、Hes1、Calpain-1和E-cadherin蛋白的表达。结果 32例低分化胃腺癌组织中Notch1、Hes1、Calpain-1表达(93.75%、96.88%、96.88%)明显高于癌旁正常组织(21.88%、18.75%、25.0%)(P<0.05),E-cadherin表达(25.0%)明显低于癌旁正常组织(93.75%,P<0.05)。MGC-803细胞Transwell和Flou-4实验可见,Notch1 siRNA组和Hes1 siRNA组癌细胞的迁移量明显低于对照组(P<0.05),癌细胞钙离子水平也明显低于对照组(P<0.05)。Western blot检测显示,Notch1 siRNA组和Hes1 siRNA组癌细胞Calpain-1和vimentin的相对含量低于对照组(P<0.05),而E-cadherin相对含量高于对照组(P<0.05)。结论低分化胃腺癌细胞侵袭能力与Notch1/Hes1蛋白及细胞钙离子有关,Notch1/Hes1信号通路参与Calpain-1相关的细胞钙离子调控。 展开更多
关键词 胃肿瘤 NOTCH1 HES1 钙离子 calpain-1 侵袭
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血管性痴呆小鼠海马CA1区CalpainⅠ表达的变化 被引量:5
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作者 王天俊 郎静芳 +4 位作者 吕佩源 张和振 刘昌林 靳玮 郭宗成 《疑难病杂志》 CAS 2010年第2期85-87,F0003,共4页
目的探讨脑缺血—再灌注后不同时期血管性痴呆(VD)小鼠海马CA1区病理改变及CalpainⅠ表达的变化。方法243只雄性昆明小鼠随机分为假手术组(99只)和模型组(144只),VD动物模型采用双侧颈总动脉反复缺血—再灌注合并尾端放血的方法制备;分... 目的探讨脑缺血—再灌注后不同时期血管性痴呆(VD)小鼠海马CA1区病理改变及CalpainⅠ表达的变化。方法243只雄性昆明小鼠随机分为假手术组(99只)和模型组(144只),VD动物模型采用双侧颈总动脉反复缺血—再灌注合并尾端放血的方法制备;分别于造模后第4周、6周和8周测试小鼠的学习和记忆成绩,HE染色观察小鼠海马CA1区正常神经元计数,免疫组化方法观察CalpainⅠ的表达。结果造模后4周、6周和8周时模型组小鼠的学习、记忆成绩均明显劣于假手术组小鼠(P<0.05)。假手术组海马CA1区单位面积正常神经元计数分别为(102±15)个、(108±11)个和(101±12)个;模型组分别为(65±19)个、(21±3)个和(50±11)个,较假手术组均显著降低(P<0.05),其中以造模后6周损害最严重,较模型组造模后4、8周时也显著减少(P<0.05)。假手术组造模后4周、6周和8周时小鼠海马CA1区CalpainⅠ的平均OD值分别是0.030±0.003、0.031±0.003和0.029±0.003;模型组CalpainⅠ的平均OD值分别是0.099±0.009、0.121±0.010和0.115±0.010,较假手术组均显著增高(P<0.05),尤以术后6周时增高明显。结论脑缺血—再灌注6周时海马CA1区神经元损害最严重,CalpainⅠ参与了脑缺血—再灌注后小鼠VD的发生。 展开更多
关键词 痴呆 血管性 学习 记忆 CALPAIN I表达 海马CAI区 小鼠
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饲粮蛋白质水平对猪背最长肌calpain1含量、嫩度及血液激素水平的影响 被引量:4
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作者 张勇 宿永波 +3 位作者 朱宇旌 孙景霞 李喆 王蕊 《中国饲料》 北大核心 2008年第14期22-26,共5页
为研究饲粮蛋白质水平对猪背最长肌calpain1表达的影响及其与肌肉嫩度的关系,选用54头约50kg的LY(长×大)二元杂交去势公猪,随机分为3个处理,每个处理3个重复,每个重复6头猪,分别饲喂10%、18%、26%3种蛋白质水平的饲粮,各饲粮能量... 为研究饲粮蛋白质水平对猪背最长肌calpain1表达的影响及其与肌肉嫩度的关系,选用54头约50kg的LY(长×大)二元杂交去势公猪,随机分为3个处理,每个处理3个重复,每个重复6头猪,分别饲喂10%、18%、26%3种蛋白质水平的饲粮,各饲粮能量及氨基酸模式保持一致,饲养76d后屠宰取样,测定猪背最长肌中calpain1的相对含量、背最长肌的嫩度及血浆中的主要激素水平。结果表明,calpain1的相对含量和剪切力值均随蛋白质水平的升高而升高,但两者之间相关性不显著(P>0.05)。血浆中皮质醇、甲状腺素(T4)的含量随蛋白质水平的升高而减少(P=0.211,P=0.039),胰岛素的含量随蛋白质水平的升高而增加(P=0.103)。Calpain1可能参与了血液中主要激素对蛋白质降解的调控过程。 展开更多
关键词 蛋白质水平 calpainl 嫩度 激素
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Calpain 1在黄芪甲苷抑制异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌凋亡中的作用 被引量:3
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作者 梅蒙 王洪新 +4 位作者 唐富天 鲁美丽 许崇花 胡进 韩镕徽 《中国动脉硬化杂志》 CAS 北大核心 2015年第4期330-334,共5页
目的探讨Calpain 1在黄芪甲苷抑制异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌凋亡中的作用。方法 SD大鼠48只,随机分为6组,每组8只:正常对照组、异丙肾上腺素组、异丙肾上腺素+普萘洛尔40 mg/(kg·d)组、异丙肾上腺素+黄芪甲苷20 mg/(kg·d)... 目的探讨Calpain 1在黄芪甲苷抑制异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌凋亡中的作用。方法 SD大鼠48只,随机分为6组,每组8只:正常对照组、异丙肾上腺素组、异丙肾上腺素+普萘洛尔40 mg/(kg·d)组、异丙肾上腺素+黄芪甲苷20 mg/(kg·d)组、异丙肾上腺素+黄芪甲苷40 mg/(kg·d)组、异丙肾上腺素+黄芪甲苷80mg/(kg·d)组。给药组连续灌胃2周,并于灌胃1天后腹腔注射异丙肾上腺素10 mg/(kg·d)2周。2周后,采用TUNEL检测心肌凋亡,电镜观察心肌线粒体病变,Western blot检测心肌线粒体Calpain 1、凋亡诱导因子(AIF)的蛋白表达和心肌组织多聚ADP核糖聚合酶1(PARP1)的蛋白表达。结果与正常对照组相比,异丙肾上腺素组凋亡率明显增加;心肌线粒体肿胀、膜融合消失、嵴断裂;心肌线粒体中Calpain 1表达增加,AIF表达减少;心肌组织中PARP1表达增加。与异丙肾上腺素组相比,异丙肾上腺素+黄芪甲苷40 mg/(kg·d)组、异丙肾上腺素+80mg/(kg·d)组表现为心肌凋亡率减少;心肌线粒体结构相对完整;心肌线粒体Calpain 1表达减少,AIF表达增加;心肌组织PARP1表达减少,且呈一定的剂量依赖性。结论黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导的心肌凋亡有一定的保护作用,其机制可能与抑制线粒体Calpain 1表达,从而减少线粒体AIF释放至胞浆并转位至核有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 心肌凋亡 CALPAIN 1 异丙肾上腺素
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盐酸多奈哌齐对血管性痴呆小鼠海马CA1区Calpain 1表达的影响 被引量:4
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作者 王天俊 吕佩源 +3 位作者 王贺波 张和振 靳玮 郭宗成 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2009年第3期179-182,186,共5页
目的探讨盐酸多奈哌齐对反复脑缺血-再灌注后血管性痴呆(VaD)小鼠海马CA1区Calpain 1表达的影响。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注合并尾端放血的方法制备VaD动物模型。分别于术后第4周和第8周测试小鼠的学习和记忆成绩,应用免疫... 目的探讨盐酸多奈哌齐对反复脑缺血-再灌注后血管性痴呆(VaD)小鼠海马CA1区Calpain 1表达的影响。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注合并尾端放血的方法制备VaD动物模型。分别于术后第4周和第8周测试小鼠的学习和记忆成绩,应用免疫组化方法观察海马CA1区Calpain 1表达的变化及盐酸多奈哌齐对其的影响。结果术后4周和8周时模型组小鼠的学习、记忆成绩均明显劣于假手术组小鼠(P<0.01),海马CA1区Calpain 1表达分别是(0.090 0±0.010 0)和(0.102 0±0.008 4),显著高于假手术组的(0.033 2±0,004 3)和(0.031 7±0.004 6)(P<0.01)。多奈哌齐治疗组小鼠在术后4周和8周时学习记忆能力较模型组显著改善(P<0.01),海马CA1区Calpain 1表达各为(0.052 0±0.008 4)和(0.068 0±0.008 4),显著低于模型组小鼠(P<0.05)。结论 Calpain 1可能参与了脑缺血再灌注后小鼠VaD的发生,盐酸多奈哌齐改善VaD小鼠学习和记忆的能力可能与其减少Calpain 1表达有关。 展开更多
关键词 血管性痴呆 学习和记忆 盐酸多奈哌齐 卡配因1
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