不同产地黄芪的多指标质量评价研究

目的:对12个不同产地的黄芪样品的质量进行评价。方法:以总多糖、总黄酮、总皂苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、芒柄花苷及黄芪甲苷8个指标对甘肃、山西、内蒙古及宁夏等产地的12个黄芪样品进行多维分析,并考察8个指标的相关性。结果:12个样品中有3个样品的毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量以及8个样品的黄芪甲苷含量不符合《中华人民共和国药典》(2020年版)规定要求。12个不同产地的黄芪样品中总多糖、总黄酮、总皂苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、芒柄花苷及黄芪甲苷等8个指标的含量(mg/g)分别为13.389~68.777、3.132~4.408、6.761~18.284、0.143~0.374、0.023~0.169、0.020~0.119、0.044~0.110、0.051~1.399 mg/g。芒柄花苷含量与毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量呈正相关(r=0.838),芒柄花素含量与毛蕊异黄酮含量呈正相关(r=0.973),黄芪甲苷含量与其他7个指标含量无相关性。结论:不同产地黄芪的化学成分含量差异显著,质量差异明显,选购黄芪药材需注意其直径的大小。

基于多元线性回归模型估测蒙古黄芪药效成分含量

以蒙古黄芪种苗为试材,采用高光谱和多元线性回归的方法,研究了栽培和仿野生对蒙古黄芪黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量估测方法的影响,以期为实践中利用高光谱快速、准确估测栽培和仿野生蒙古黄芪的药效成分含量提供参考依据。结果表明:栽培和仿野生蒙古黄芪药效成分含量的原始高光谱数据所建立模型的稳定性和拟合度均是最好。估测黄芪甲苷含量模型的RMSE分别是0.0045、0.0085;R^(2)分别是0.761、0.879;所建模型分别是y=0.0054+0.0016x_(1)+0.0002x_(2)+0.0007x_(3)(R^(2)=0.903)、y=-0.1223+0.0040x_(1)+0.0001x_(2)-0.0009x_(3)(R^(2)=0.904)。估测毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量模型的RMSE分别是0.0017、0.0040;R^(2)分别是0.860、0.868;所建模型分别为y=0.0731-0.0080x_(1)-0.0004x_(2)+4×10-6x_(3)(R^(2)=0.891)、y=0.0842-0.0007x_(1)-0.0001x_(2)+0.0002x_(3)(R^(2)=0.883)。

高效液相色谱法测定黄芪中毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷的含量

目的:建立黄芪中毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷含量测定的高效液相色谱法,并测定10批不同来源黄芪商品药材中该成分的含量。方法:色谱柱为Polaris C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(30:70),流速为1.0 mL·min^(-1),柱温为25℃,检测波长为254 nm。结果:毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷在0.010 6～2.12μg呈良好的线性关系,回归方程为Y=3 035.97X-14.85(r=0.999 9),加样回收率平均为95.8％(n=5,RSD=1.3％)。结论:本法简便、快速、灵敏,重现性好。所测10批不同来源黄芪商品药材中毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷含量差异较大。

运用根形态及黄酮类成分鉴定不同年份黄芪品质

为了给黄芪的规范化栽培和合理采收提供依据,对3~8年生6个不同年份黄芪根的形态进行比较,并对根中总黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷积累规律进行研究.运用游标卡尺对黄芪根的最粗直径予以测量,通过显微切片染色方法观测其解剖结构并定位黄酮类成分主要位置,利用紫外可见分光光度法和高效液相色谱法对不同年份黄芪总黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量进行测定.6个不同年份黄芪根直径差异显著,韧皮部是黄芪根黄酮类成分主要储存部位,且5年生黄芪根韧皮部所占比例最高,5年生黄芪根中总黄酮和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量最高.综合分析认为,黄芪药材的合理采收应以5年生黄芪为宜.

黄芪健骨胶囊质量标准研究

目的建立黄芪健骨胶囊的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对制剂中黄芪、山茱萸药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱(HPLC)法测定制剂中马钱苷、毛蕊异黄酮苷、柚皮苷的含量,色谱柱为XSelect HSS T_(3)柱(250 mm×4.6 mm,3.5μm),流动相为甲醇-0.3%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.8 mL/min,检测波长为240 nm,柱温为25℃,进样量为10μL。结果黄芪、山茱萸的TLC图特征斑点清晰,分离度好,且阴性对照无干扰。马钱苷、毛蕊异黄酮苷、柚皮苷质量浓度分别在21.54~430.80μg/mL(R^(2)=0.9993)、5.02~100.40μg/mL(R^(2)=0.9999)、20.28~405.60μg/mL(R^(2)=0.9997)范围内与峰面积线性关系良好;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于3.0%;平均加样回收率分别为100.66%,98.58%,100.17%,RSD分别为1.70%,2.36%,1.98%(n=6)。结论该方法操作简便,结果准确,重复性好,可用于黄芪健骨胶囊的质量控制。

黄芪中有效成分含量检测方法的建立

《中华人民共和国药典》中采用不同的黄芪样品制备方法和不同的色谱方法分别检测毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷。本研究拟对样品制备方法和两种成分的检测方法进行合并统一,利用高效液相色谱建立黄芪中有效成分的含量测定方法。采用Waters Atlantis?T3色谱柱(250.0 mm×4.6 mm,5.0μm),以水和乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1 mL/min,色谱柱温度30℃,检测波长260 nm,增益值1000,漂移管温度65℃,空气压力30 psi,喷雾器温度36℃。结果显示,毛蕊异黄酮葡萄糖苷和黄芪甲苷标准品在各自范围内线性关系良好(r>0.9990);毛蕊异黄酮葡萄糖苷的平均回收率和相对标准偏差分别为97.66%(n=6)和1.45%,黄芪甲苷的平均回收率和相对标准偏差分别为99.64%(n=6)和0.38%。18批黄芪中2种成分的含量分别为0.3663~1.6101 mg/mL和0.4731~1.6660 mg/mL。本方法缩短了检测时间,提高了检测效率,且快速可靠,稳定性和重复性好,可用于黄芪的质量控制。

当归补血泡腾片的制备及质量分析

优选当归补血泡腾片的处方工艺,并对其质量进行分析。通过Box-Behnken响应面法优化制剂处方。通过TLC法对样品中阿魏酸、藁本内酯进行薄层鉴别。通过HPLC-CAD法对黄芪甲苷进行含量测定,通过HPLC-DAD法对样品中阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷进行含量测定。在当归黄芪提取物用量15%、柠檬酸用量22%、碳酸氢钠用量19%、聚乙二醇6000用量5%、可溶性淀粉用量39%时,制剂的综合评分最佳,实测值与预测值偏差为1.43%。崩解时限、重量差异、硬度、pH等检查符合药典规定。在TLC检测中,阿魏酸、藁本内酯主斑点清晰。黄芪甲苷、阿魏酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷的含量分别为448.38、242.31、526.02μg/g。实验确立的当归补血泡腾片处方科学合理,质量分析方法方便可靠。

HPLC-UV法测定经典名方当归补血汤中5种化学成分含量

本研究旨在建立高效液相色谱-紫外检测法,同时测定当归补血汤中阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮及芒柄花苷的含量。采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(B):0.4%甲酸水(A)梯度洗脱,检测波长280 nm。阿魏酸、洋川芎内酯Ⅰ、毛蕊异黄酮苷、毛蕊异黄酮和芒柄花苷分别在0.091~1.824、0.015~0.308、0.092~1.848、0.036~0.728、0.082~1.656μg/mL质量范围内线性关系良好,r> 0.999;定量限分别为0.091、0.015、0.092、0.036、0.082μg/mL;检测限分别为0.027、0.005、0.028、0.011、0.025μg/mL。该方法精密度、重复性、稳定性、加样回收试验的RSD均小于5%;回收率分别为99.68%、99.40%、100.24%、101.04%和100.88%。所建立的测定方法操作简单,分析灵敏快速,结果准确,可用于当归补血汤的含量测定及质量控制。

三黄桃葛胶囊中7种成分含量测定研究

目的 建立测定三黄桃葛胶囊中7种成分含量的方法.方法 采用高效液相色谱法对制剂中葛根素、5种游离蒽醌、毛蕊异黄酮苷进行定量分析.结果 葛根素、毛蕊异黄酮苷、芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚的线性范围分别为0.077～1.54 μg（r=0.999 9）,0.057 ～ 1.72 μg（r=0.999 9）,0.016～0.49 μg（r=0.999 9）,0.020 ～0.61 μg（r=0.999 9）,0.018～0.54 μg（r =0.999 9）,0.017 ～0.52 μg（r =0.999 9）,0.023 ～0.70 μg（r=0.999 9）,平均回收率依次为103.00％（RSD=1.37％,n=6）,98.48％（RSD=1.95％,n=6）,102.58％（RSD=1.84％,n=6）,99.04％（RSD=1.81％,n=6）,102.30％（RSD=1.71％,n=6）,99.79％（RSD=1.83％,n=6）,98.76％（RSD=1.75％,n=6）.结论 该方法简便、准确可靠,专属性强,可用于三黄桃葛胶囊的质量控制.

不同产地和加工工艺蒙古黄芪饮片质量对比

目的:以毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为指标,对内蒙古、山西、甘肃、陕西等不同产地、鲜切工艺和传统工艺两种加工工艺以及不同生长年限蒙古黄芪饮片进行对比研究。方法:采用HPLC测定毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量。结果:蒙古黄芪传统片样品毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量在0.2404~0.9305 mg·g^(-1)之间,其中山西应县样品S28(人工种植二年生)含量最低,内蒙古阿鲁科尔沁旗样品S3(仿野生种植四年生)含量最高,二者之间相差近4倍;以毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量为变量进行差异分析,内蒙古与山西、内蒙古与甘肃、陕西与甘肃间均存在差异,样品含量内蒙古>陕西>甘肃>山西;鲜切饮片中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量均高于传统干切饮片,且其含量增加2.155%~133.5%;蒙古黄芪中毛蕊异黄酮葡萄糖苷含量与其生长年限不呈正相关。结论:本研究结果为评价黄芪饮片质量和制订其质量标准提供参考。

UPLC-ESI-MS法测定贞芪扶正胶囊中毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、红景天苷和黄芪甲苷的含量

建立了超高效液相色谱-电喷雾串联三重四级杆质谱法(UPLC-ESI-MS)同时测定贞芪扶正胶囊中红景天苷、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷和黄芪甲苷含量的方法.采用UPLC-ESI-MS联用法,乙腈和0.3%甲酸水溶液不同比例梯度洗脱,流速0.3 m L/min,12 min内可完成测试,且线性关系良好(r2>0.999).方法简便、准确、可靠、重复性好,可用于贞芪扶正制剂的质量控制.

超高效液相色谱波长切换法同时测定芪参还五胶囊中4种成分含量

目的建立超高效液相色谱(UPLC)波长切换法同时测定芪参还五胶囊中羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷4种化学成分含量。方法2021年5月至2022年1月,采用UPLC,色谱柱为WATERS ACQUITY UPLC BEH C18(2.1mm×50 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸水,梯度洗脱,流速0.3 mL/min,柱温35℃,进样量1μL,检测波长分别为检测波长为400 nm(羟基红花黄色素A)、230 nm(芍药苷)、320 nm(阿魏酸)和260 nm(毛蕊异黄酮葡萄糖苷)。结果羟基红花黄色素A、芍药苷、阿魏酸和毛蕊异黄酮葡萄糖苷的线性范围分别为1.34~26.80 mg/L(r=0.9998),2.46~49.20 mg/L(r=0.9999),0.582~11.64mg/L(r=0.9999),0.62~12.40 mg/L(r=0.9999);平均加样回收率分别为101.11%(RSD=1.64%)、99.62%(RSD=0.79%)、100.66%(RSD=2.13%)、101.93%(RSD=1.08%)。结论该方法简便、快速、准确性好,可为全面控制芪参还五胶囊的质量提供参考。

多指标综合评分法结合正交实验优选黄芪-葛根药对提取工艺

目的 优选黄芪-葛根药对的提取工艺。方法 以提取液中葛根素、大豆苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的含量及出膏率作为评价指标,采用层次分析法确定各评价指标的权重系数并计算综合评分。通过单因素实验考察料液比、提取次数、提取时间对综合评分的影响,确定各因素的水平。采用多指标综合评分法,以上述7个指标的综合评分为指标,设计正交实验优选黄芪-葛根药对的提取工艺参数并进行验证。结果 葛根素、大豆苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、大豆苷元、毛蕊异黄酮、芒柄花黄素的含量及出膏率的权重系数分别为0.304 7、0.065 2、0.185 8、0.185 8、0.107 8、0.107 8、0.042 7。最终优选出的黄芪-葛根药对提取工艺为料液比1∶8(g/mL),加热回流提取3次,每次1 h。验证实验中各评价指标的RSD均小于3.00%(n=3)。结论 本研究优选的黄芪-葛根药对的提取工艺稳定、可行。

一测多评法同时测定沙芪浓缩丸中5种黄酮

目的 建立一测多评法同时测定沙芪浓缩丸中毛蕊异黄酮苷、水仙苷、银锻苷、异鼠李素、芒柄花素的含量。方法 该药物90%甲醇(含1%甲酸)提取液的分析采用Welch LP-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);流动相乙腈-0.4%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长260 nm。以毛蕊异黄酮苷为内标,计算其他4种黄酮的相对校正因子,计算其含量。结果 5种黄酮在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 9),平均加样回收率91.90%~99.82%,RSD 0.26%~0.64%。一测多评法所得结果与外标法接近(RAD<2%)。结论 该方法准确可行,可用于沙芪浓缩丸的质量控制。

益气活血通便方指纹图谱及功效基准物质预测分析

目的:建立益气活血通便方(Yiqi Huoxue Tongbian Recipe,YHTR)指纹图谱检测方法,并结合网络药理学方法对YHTR功效基准物质进行预测分析。方法:建立YHTR的高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,并对共有峰成分进行指认,运用网络药理学方法建立YHTR的成分-靶点-通路网络,利用AutoDock软件进行分子对接,进一步确定YHTR功效性成分选择的合理性。结果:YHTR的指纹图谱共标定14个共有峰,通过对照品指认出绿原酸、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素7个色谱峰,10批样品的相似度均≥0.792,YHTR的功效基准物质有效地实现从药材-饮片-复方的传递;利用网络药理学方法对YHTR的7个活性成分进行分析,构建成分-靶点-通路网络,富集通路包括癌症、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、脂质与动脉粥样硬化、前列腺癌等信号通路;根据网络药理学和分子对接结果分析,预测绿原酸、松果菊苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、毛蕊花糖苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素7个成分可通过作用于上述通路起到补血活血、润肠通便的功效。结论:HPLC指纹图谱结合网络药理学方法操作简便、准确度高、稳定性好,可用于YHTR的质量控制,7个化学成分的准确测定也为YHTR功效基准物质的研究提供了依据。

基于HPLC指纹图谱及多成分含量测定的健儿消食口服液质量评价及稳定性研究

目的:建立健儿消食口服液高效液相色谱法(HPLC)指纹图谱,并结合多指标成分定量分析,对健儿消食口服液进行质量评价及稳定性研究。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5μm),以乙腈-1%乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(–1),检测波长为242 nm,柱温为30℃。建立健儿消食口服液HPLC指纹图谱,并对20批健儿消食口服液进行相似度评价。选择3批样品进行6个月加速试验,考察毛蕊异黄酮苷、橙皮苷、黄芩苷的含量变化及HPLC指纹图谱的变化。结果:建立的健儿消食口服液HPLC指纹图谱确定了29个共有峰,指认了毛蕊异黄酮苷、橙皮苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、芥子碱硫氰酸盐、山梨酸钾7个成分。20批健儿消食口服液生成的对照图谱的相似度为0.971~1.000;6个月加速试验后,3批样品的毛蕊异黄酮苷、橙皮苷含量呈降低趋势,指纹图谱相似度也发生明显变化,但仍在0.9以上。结论:HPLC指纹图谱及多指标成分定量分析可为健儿消食口服液的质量控制及进一步研究提供参考。

超高效液相色谱法同时测定红芪和黄芪药材中有效成分含量

目的建立同时测定红芪和黄芪药材中有效成分含量的超高效液相色谱法。方法色谱柱为Waters BEH C18柱(200 mm×2.1 mm,1.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.2 mL/min,检测波长为250 nm,柱温为35℃,进样量为1μL。结果香草酸、阿魏酸、毛蕊异黄酮苷、异阿魏酸、芒柄花苷、毛蕊异黄酮质量浓度分别在6.05~121.00μg/mL、4.37~87.32μg/mL、0.30~6.02μg/mL、1.09~21.81μg/mL、6.10~122.12μg/mL、1.00~20.05μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(R^(2)≥0.9996);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于5.0%;平均加样回收率分别为98.26%,96.72%,98.78%,97.56%,99.18%,99.19%,RSD均小于4.0%(n=6)。武都红芪药材样品和蒙古黄芪药材样品的共有成分毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮含量差异较大,分别为2.73,46.61,8.45μg/g和42.36,13.03,37.45μg/g。结论所建立的方法可靠,操作简单,可为后期红芪及黄芪药材的质量控制提供参考。

超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱法同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、甘草酸铵的含量

建立了一种超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷和甘草酸铵含量的方法。采用超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱质谱,Hypersil Gold C_(18)型色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.4 mL/min,柱温40℃,进样量1μL;采用电喷雾离子源,正离子模式下,在质荷比100~1500范围内全扫描,通过提取待测成分的精确质量数进行定量。结果表明,毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、甘草酸铵线性范围分别为0.0891~1.4250μg/mL、0.0984~12.6000μg/mL、7.4250~29.7000μg/mL(r≥0.9993),检测限分别为5.57、4.10、5.80 ng/mL,定量限分别为22.26、12.30、23.20 ng/mL,精密度、重复性及样品稳定性(24 h)良好,加样回收率91%~105%(δ_(RSD)≤5.0%,n=6)。本方法简便快捷、特异性强、灵敏度高,可同时检测补中益气丸中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、橙皮苷、甘草酸铵的含量。

HPLC法同时测定宫血停颗粒中六种成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定宫血停颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、异阿魏酸、特女贞苷、柚皮苷、新橙皮苷的含量。方法:采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.5%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,柱温35℃,流速1 mL·min^(-1),检测波长为225 nm。结果:6种成分在标准曲线范围内线性关系良好(r>0.999),平均回收率均大于95%(n=6)。结论:该方法简便、准确、快速,稳定性和重现性良好,为宫血停颗粒质量标准的提高提供了实验依据。

不同来源黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的定量分析

目的:建立黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法,并对不同来源的药材进行分析,为黄芪质量标准的制定提供依据。方法:采用HPLC-DAD法建立黄芪药材中毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法,通过对来源于我国8个省59批黄芪药材的分析,阐明产地、生长方式、生长年限等对黄芪中异黄酮类成分的影响。结果:不同产地、生长方式及生长年限的黄芪药材,其毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量差异较大。从产地分析,以山西、内蒙古和陕西等道地产地含量较高;从生长方式分析,以半野生含量较高;从生长年限分析,年限越短,含量越高。结论:本研究建立的毛蕊异黄酮葡萄糖苷和芒柄花素的含量测定方法简便、准确、重现性好,可用于黄芪药材中异黄酮类成分的质量控制。