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香蕉枯萎病菌内源报告基因Foc4carS的鉴定及其应用
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作者 彭军 曾凡云 +5 位作者 王艳玮 漆艳香 丁兆建 王少伶 谢艺贤 张欣 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第5期873-885,共13页
香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴转化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Foc)引起的香蕉毁灭性土传病害,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的香蕉品系,危害最严重。carS基因通过调控下游car结构基因参与调控镰刀菌类胡萝卜素的生... 香蕉枯萎病是由尖孢镰刀菌古巴转化型(Fusarium oxysporum f. sp. cubense, Foc)引起的香蕉毁灭性土传病害,其中4号生理小种(Foc4)能感染几乎所有的香蕉品系,危害最严重。carS基因通过调控下游car结构基因参与调控镰刀菌类胡萝卜素的生物合成,本研究克隆鉴定了Foc4carS基因(FOIG_05085),Foc4carS蛋白具有典型的RING-finger蛋白结构域。利用分割标记法(Split-marker PCR)获得Foc4carS基因的融合片段,同时构建含有Foc4carS基因sgRNA591序列的pUC-fFuCas9-HTBNLS-hph-Foc4carS基因编辑载体,通过PEG介导的原生质体转化获得该基因的敲除突变体、回补突变体以及基因编辑敲除体,并对敲除和回补突变体的生物学特性和致病力进行分析。结果显示:ΔFoc4carS突变体的菌落直径、产孢量和致病力等生物学表型与野生菌株Foc4无显著差异,而ΔFoc4carS突变体菌落颜色呈深橙色,Foc4carS基因的缺失影响了次生代谢产物类胡萝卜素的生物合成;基因编辑的ΔFoc4carS(HDR)突变体不论是再生筛选板还是继代后的PDA平板,其菌落均出现典型的深橙色,表明Foc4carS可作为内源报告基因,在香蕉枯萎菌Foc4中进行基因质粒型CRISPR/Cas9编辑可行。 展开更多
关键词 香蕉枯萎菌Foc4 Foc4carS基因 类胡萝卜素 基因敲除 CRISPR/Cas9基因编辑
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碧根果致敏原Car i 1的分离纯化及表征鉴定
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作者 罗祺书 唐宇 +4 位作者 张英 朱伟超 赵凯文 罗水忠 吴志华 《食品安全质量检测学报》 CAS 2024年第4期13-20,共8页
目的分离纯化碧根果致敏原Car i 1,并对其结构进行表征鉴定。方法以新鲜碧根果果仁为原料,通过粉碎、脱脂、浸提、粗分级、凝胶过滤层析,对碧根果致敏原蛋白Car i 1进行分离纯化。结合十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、液相色谱-串... 目的分离纯化碧根果致敏原Car i 1,并对其结构进行表征鉴定。方法以新鲜碧根果果仁为原料,通过粉碎、脱脂、浸提、粗分级、凝胶过滤层析,对碧根果致敏原蛋白Car i 1进行分离纯化。结合十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、液相色谱-串联质谱法和免疫印迹法3种方法对Cari1进行鉴定,并通过圆二色谱仪与紫外分光光度计表征其二、三级结构。结果本方法纯化获得碧根果致敏原Cari1,单轮制备量可达5 mg以上,且纯度大于95%,蛋白质高级结构未被破坏,能够被全部3名碧根果过敏患者的血清准确识别。结论该纯化方法技术路线简单、设备要求低且单次制备量高,总得率可达65%,操作便捷,为碧根果致敏原Car i 1的相关研究奠定了物质基础。 展开更多
关键词 碧根果 致敏原 car i 1 分离纯化 凝胶过滤层析
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有望刺激特殊基因来增强抵御人类多种实体瘤的CAR-T细胞疗法的疗效
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《生物医学工程与临床》 CAS 2024年第3期342-342,共1页
据Chan JD 2024年4月10日(Nature,2024 Apr 10. doi:10.1038/s41586-024-07242-1.)报道,澳大利亚墨尔本大学等机构研究人员通过研究克服了一个主要障碍,利用一种新型基因工程策略,通过遗传方式赋予嵌合抗原受体(CAR)-T细胞有利的代谢特... 据Chan JD 2024年4月10日(Nature,2024 Apr 10. doi:10.1038/s41586-024-07242-1.)报道,澳大利亚墨尔本大学等机构研究人员通过研究克服了一个主要障碍,利用一种新型基因工程策略,通过遗传方式赋予嵌合抗原受体(CAR)-T细胞有利的代谢特性,显著提升其在治疗人类实体瘤方面的效果。 展开更多
关键词 嵌合抗原受体 实体瘤 遗传方式 car 代谢特性 T细胞
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冷冻干燥淋巴结载药系统可提升CAR-T细胞疗效
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《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期253-253,共1页
2024年3月6日,浙江大学药学院顾臻教授、李洪军研究员联合浙江大学医学院附属第一医院赵鹏主任医师团队在《自然·材料》(Nature Materials)上发表了最新研究成果“Lyophilized lymph nodes for improved delivery of chimeric anti... 2024年3月6日,浙江大学药学院顾臻教授、李洪军研究员联合浙江大学医学院附属第一医院赵鹏主任医师团队在《自然·材料》(Nature Materials)上发表了最新研究成果“Lyophilized lymph nodes for improved delivery of chimeric antigen receptor T cells”(DOI:10.1038/s41563-024-01825-z)。该研究提出一种肌体组织工程化递药策略,使用冷冻干燥技术保留患者来源淋巴结的基质结构和关键免疫调节因子存储和递送CAR-T细胞,增强CAR-T细胞的杀伤活性和持久性。 展开更多
关键词 浙江大学医学院 免疫调节因子 载药系统 冷冻干燥技术 car 淋巴结 T细胞 持久性
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PC-CAR识别肿瘤靶标的结构原理
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《生物医学工程与临床》 CAS 2024年第1期120-120,共1页
据Sun Y(Bio Rxiv,2023. doi:10.1101/2023.05.24.542108.)报道,美国费城儿童医院的研究人员解析出一种三维蛋白结构,解释了PC-CAR如何识别这些HLA复合物的“骨架”。这些结构信息将使得人们能够了解嵌合抗原受体(CAR)如何识别不同多态... 据Sun Y(Bio Rxiv,2023. doi:10.1101/2023.05.24.542108.)报道,美国费城儿童医院的研究人员解析出一种三维蛋白结构,解释了PC-CAR如何识别这些HLA复合物的“骨架”。这些结构信息将使得人们能够了解嵌合抗原受体(CAR)如何识别不同多态性HLA等位基因中的肿瘤相关抗原,从而为针对更复杂、更难治疗的肿瘤设计精准医疗策略提供更多可能性。 展开更多
关键词 精准医疗 费城儿童医院 嵌合抗原受体 HLA等位基因 car 肿瘤相关抗原 蛋白结构 PC
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CARD11-PIK3R3基因突变让CAR-T细胞抗癌能力提高百倍
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《生物医学工程与临床》 CAS 2024年第2期239-239,共1页
据Garcia J 2024年2月15日[Nature,2024,626(7999):626-634.]报道,美国西北大学和加州大学旧金山分校研究人员通过诱导致淋巴瘤的恶性T细胞基因突变(CARD11-PIK3R3),并将编码这种天然存在的、独特的突变基因整合到CAR-T细胞,使它们杀死... 据Garcia J 2024年2月15日[Nature,2024,626(7999):626-634.]报道,美国西北大学和加州大学旧金山分校研究人员通过诱导致淋巴瘤的恶性T细胞基因突变(CARD11-PIK3R3),并将编码这种天然存在的、独特的突变基因整合到CAR-T细胞,使它们杀死癌细胞的能力提高了100倍以上,而且不存在毒副作用和促癌风险,这为CAR-T细胞疗法在实体瘤上的治疗应用打开了新的大门。 展开更多
关键词 抗癌能力 基因突变 T细胞 美国西北大学 毒副作用 car 实体瘤 淋巴瘤
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靶向CD19的脐带血衍生CAR-NK细胞有望治疗多种B细胞恶性肿瘤
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《生物医学工程与临床》 CAS 2024年第2期179-179,共1页
据Marin D[Nat Med,2024 Jane 18. doi:10.1038/s41591-023-02785-8.]报道,美国德克萨斯大学MD安德森癌症中心的研究人员报道一项Ⅰ/Ⅱ期临床试验,37例复发性或难治性B细胞恶性肿瘤患者接受靶向CD19的脐带血衍生嵌合抗原受体(CAR)自然杀... 据Marin D[Nat Med,2024 Jane 18. doi:10.1038/s41591-023-02785-8.]报道,美国德克萨斯大学MD安德森癌症中心的研究人员报道一项Ⅰ/Ⅱ期临床试验,37例复发性或难治性B细胞恶性肿瘤患者接受靶向CD19的脐带血衍生嵌合抗原受体(CAR)自然杀伤(NK)细胞疗法,结果显示在治疗100 d后的总反应率为48.6%,1年无进展生存率和总生存率分别为32%和68%。该临床试验报道了极佳的安全性,没有出现严重的细胞因子释放综合征、神经毒性或移植物抗宿主疾病。 展开更多
关键词 Ⅱ期临床试验 B细胞恶性肿瘤 嵌合抗原受体 德克萨斯大学 脐带血 总生存率 CD19 car
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FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险
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作者 《中国药物警戒》 2024年第1期19-19,共1页
美国食品药品监督管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。FDA已确定,T细胞恶性肿瘤的... 美国食品药品监督管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。FDA已确定,T细胞恶性肿瘤的风险适用于目前批准的所有经基因修饰的靶向BCMA和靶向CD19的自体CAR-T细胞免疫疗法。接受过多种同类产品治疗的患者发生了T细胞恶性肿瘤。 展开更多
关键词 T细胞免疫 嵌合抗原受体 CD19 car BCMA 临床试验 恶性肿瘤 基因修饰
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美国FDA向靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品相关企业发送标签安全性内容变更通知函
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《中国医药导刊》 2024年第2期148-148,共1页
美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点接受靶向BCMA或CD1... 美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。 展开更多
关键词 T细胞免疫 嵌合抗原受体 继发性恶性肿瘤 CD19 car BCMA 产品标签 靶向
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FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险
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《中国医药导刊》 2024年第1期76-76,共1页
美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。
关键词 嵌合抗原受体 T细胞免疫 CD19 car 临床试验 BCMA 恶性肿瘤 淋巴瘤
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美国FDA向靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品相关企业发送标签安全性内容变更通知函
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《中国药物警戒》 2024年第3期360-360,共1页
美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点接受靶向BCMA或CD1... 美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。2.黑框警告,处方信息接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。[见警告与注意事项]3.警告与注意事项-继发性恶性肿瘤,处方信息要点继发性恶性肿瘤:接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。 展开更多
关键词 T细胞免疫 继发性恶性肿瘤 嵌合抗原受体 CD19 car BCMA 产品标签 处方信息
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分子靶向药物联合CAR-T细胞治疗恶性血液病
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《微循环学杂志》 2024年第2期101-101,共1页
近日,南方医科大学珠江医院副黄宇贤教授、李玉华教授等结合最新研究进展,综述了分子靶向药物联合CAR-T细胞治疗恶性血液病的机制。相关成果以综述文章的形式发表于《耐药性更新》杂志(Drug Resistance Updates)。文章综合分析了CAR-T... 近日,南方医科大学珠江医院副黄宇贤教授、李玉华教授等结合最新研究进展,综述了分子靶向药物联合CAR-T细胞治疗恶性血液病的机制。相关成果以综述文章的形式发表于《耐药性更新》杂志(Drug Resistance Updates)。文章综合分析了CAR-T细胞治疗耐药的机制及其逆转CAR-T细胞治疗耐药的机制,以及CAR-T细胞治疗与分子靶向药物联合的协同机制、安全性和未来挑战,探索这种联合疗法对血液恶性肿瘤患者的益处,并为后续临床研究提供理论依据。 展开更多
关键词 分子靶向药物 南方医科大学 联合疗法 血液恶性肿瘤 恶性血液病 珠江医院 car 李玉华
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FDA调查接受靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的严重风险
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《中国药物评价》 2024年第1期77-77,共1页
美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后患者出现T细胞恶性肿瘤(包括嵌合抗原受体CAR阳性淋巴瘤)的报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。
关键词 嵌合抗原受体 T细胞免疫 CD19 car 临床试验 BCMA 恶性肿瘤 淋巴瘤
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靶向BCMA或CD19的CAR-T细胞免疫治疗后发生T细胞恶性肿瘤的风险
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《中国处方药》 2024年第2期I0001-I0001,共1页
近日,美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向B细胞成熟抗原(BCMA)或抗白细胞分化抗原19(CD19)的自体嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞免疫治疗后出现T细胞恶性肿瘤(包括CAR阳性淋巴瘤)的病例报告。这些报告来自临床试验和/或上市后... 近日,美国食品药品管理局(FDA)发布消息,已收到接受靶向B细胞成熟抗原(BCMA)或抗白细胞分化抗原19(CD19)的自体嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞免疫治疗后出现T细胞恶性肿瘤(包括CAR阳性淋巴瘤)的病例报告。这些报告来自临床试验和/或上市后不良事件(AE)。 展开更多
关键词 细胞免疫治疗 T细胞免疫 嵌合抗原受体 CD19 病例报告 car BCMA 临床试验
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美国FDA向靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品相关企业发送标签安全性内容变更通知函
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《中国药物评价》 2024年第1期34-34,共1页
美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点:接受靶向BCMA或CD1... 美国食品药品管理局(FDA)发函要求企业修改靶向BCMA或CD19的自体嵌合抗原受体(CAR)-T细胞免疫治疗类产品标签的安全性内容,增加继发性恶性肿瘤相关风险提示。此类产品标签信息应包含以下内容:1.黑框警告,处方信息要点:接受靶向BCMA或CD19的自体CAR-T细胞免疫治疗后出现了T细胞恶性肿瘤。 展开更多
关键词 T细胞免疫 嵌合抗原受体 继发性恶性肿瘤 CD19 car BCMA 产品标签 靶向
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Car Config在汽车电器环境中的应用
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作者 王郁森 章宇静 +1 位作者 李佳明 徐晓航 《汽车电器》 2024年第2期57-58,62,共3页
伴随着汽车定制化、个性化的需求愈来愈多,同一车型的配置种类纷繁复杂,在整车外部需求增长和内部软硬件管理难度变大的双重压力下,Car Config(整车配置参数)在整车电器的应用重要性不言而喻。文章从Car Config实现的基本原理入手,对其... 伴随着汽车定制化、个性化的需求愈来愈多,同一车型的配置种类纷繁复杂,在整车外部需求增长和内部软硬件管理难度变大的双重压力下,Car Config(整车配置参数)在整车电器的应用重要性不言而喻。文章从Car Config实现的基本原理入手,对其在信号通信数据库中的编码进行解析,分析相关诊断数据,并分别对Car Config在工厂端、售后端、OTA端的应用进行说明,希望能为汽车在定制化、智能化设计方面提供一些参考。 展开更多
关键词 car Config 控制器 配置字 整车配置
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CAR-T治疗在儿童实体肿瘤中的应用现状与展望
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作者 苏雁 《中国小儿血液与肿瘤杂志》 CAS 2023年第5期273-276,304,共5页
儿童肿瘤包括血液系统恶性肿瘤、中枢神经系统肿瘤和颅外实体肿瘤。在过去40年中,通过多种疗法,儿童肿瘤的治疗取得了巨大进步[1-2]。然而,在部分复发难治肉瘤、高危神经母细胞瘤及中枢系统肿瘤中,无有效治愈手段,预后差。嵌合抗原受体... 儿童肿瘤包括血液系统恶性肿瘤、中枢神经系统肿瘤和颅外实体肿瘤。在过去40年中,通过多种疗法,儿童肿瘤的治疗取得了巨大进步[1-2]。然而,在部分复发难治肉瘤、高危神经母细胞瘤及中枢系统肿瘤中,无有效治愈手段,预后差。嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T cells,CAR-T)治疗是通过体外改造T细胞,使其能特异性识别和杀伤肿瘤细胞,从而成为治疗肿瘤的一种新技术。目前,CAR-T治疗相关的临床试验正在广泛开展,并且在血液系统恶性肿瘤方面取得令人鼓舞的结果,CAR-T疗法也被尝试用于治疗各种实体肿瘤。然而,由于实体肿瘤特殊的肿瘤异质性和免疫抑制性微环境等问题,CAR-T细胞疗法在实体瘤中的应用仍面临重大挑战[3]。 展开更多
关键词 血液系统恶性肿瘤 中枢神经系统肿瘤 实体肿瘤 儿童肿瘤 神经母细胞瘤 免疫抑制性 肿瘤异质性 car
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利用CARS-BPNN模型的南疆枣园土壤有机质高光谱反演
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作者 蔡海辉 周岭 +4 位作者 史舟 纪文君 罗德芳 彭杰 冯春晖 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2023年第8期2568-2573,共6页
土壤有机质(SOM)含量是制定枣园土壤施肥方案的主要依据。合理的施肥方案对提升红枣品质、减少农户投入和增加枣园产出有重要意义。利用传统方法获取枣园SOM含量耗费时间和资源,不符合枣园精准施肥管理的需求,土壤有机质高光谱检测是一... 土壤有机质(SOM)含量是制定枣园土壤施肥方案的主要依据。合理的施肥方案对提升红枣品质、减少农户投入和增加枣园产出有重要意义。利用传统方法获取枣园SOM含量耗费时间和资源,不符合枣园精准施肥管理的需求,土壤有机质高光谱检测是一种有效的替代方法。为筛选南疆枣园SOM的高光谱快速检测模型,采用网格布点法采集158个枣园土壤样品,测定风干土样的室内高光谱数据和SOM含量。分别将400~2400 nm全波段(R)和通过竞争自适应加权算法(CARS)、连续投影算法(SPA)、粒子群优化算法(PSO)三种数据降维算法筛选的数据集与偏最小二乘回归(PLSR)、反向传播神经网络(BPNN)、卷积神经网络(CNN)三种建模方法结合构建12种枣园SOM含量的组合反演模型,通过对比模型的精度评价指标和训练时间,筛选枣园SOM含量最优光谱反演模型。结果表明:(1)CARS、SPA、PSO三种降维算法都能将光谱数据压缩至原来的10%以下,筛选波长数分别由原来的2001个变量降为98、156、102个,降维组合模型的验证集RPD均大于1.50,均能实现对枣园SOM含量的反演,与R组合模型相比,降维组合模型至少能节省30%的时间成本,特别是与BPNN和CNN等构建的组合模型,能节省90%的训练时间,且模型稳定性更强,模型效果更优。(2)CARS数据集构建组合模型的验证集R^(2)均大于0.85,RPD均大于2.50,RPIQ均大于1.60,在三种降维算法中效果最好;PSO数据集的组合模型验证效果略低于CARS数据集,但优于R数据集,R^(2)均大于0.80、RPD均大于2.00;SPA数据集构建组合模型的验证效果要低于R数据集,在三种降维算法中效果最差。(3)BPNN和CNN两种方法的反演模型验证效果均优于PLSR模型,而在模型训练时间和模型验证效果等方面,BPNN模型优于CNN模型,其结合CARS数据集的验证效果最优,R^(2)为0.91、PRD为3.34、RPIQ为3.17、nRMSE%为11.93,训练时间为58.00 s,模型符合快速检测枣园SOM含量的要求。CARS-BPNN模型为反演南疆枣园SOM的最优模型,研究结果能够为南疆枣园土壤养分快速检测与制定施肥方案提供参考。 展开更多
关键词 枣园土壤有机质 carS算法 CNN模型 BPNN模型 检测模型
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双特异性CAR-T细胞对EGFRvⅢ^(+)/CD133^(+)胶质瘤干细胞的靶向杀伤 被引量:3
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作者 刘亚丹 谢甲贝 +3 位作者 朱琼琼 卢文杰 丁辉 韩双印 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期296-301,共6页
目的:制备双特异性CAR-T(bs CAR-T)细胞,观察其对表达表皮生长因子Ⅲ型突变阳性(EGFRvⅢ^(+),简称vⅢ^(+))和CD133^(+)胶质瘤干细胞的靶向杀伤作用。方法:基于前期研制的vⅢ/CD133双特异性微抗体和二代CAR构建的双特异性CAR(bs CAR),制... 目的:制备双特异性CAR-T(bs CAR-T)细胞,观察其对表达表皮生长因子Ⅲ型突变阳性(EGFRvⅢ^(+),简称vⅢ^(+))和CD133^(+)胶质瘤干细胞的靶向杀伤作用。方法:基于前期研制的vⅢ/CD133双特异性微抗体和二代CAR构建的双特异性CAR(bs CAR),制备慢病毒载体转染人外周血T细胞,FCM和WB法检测bs CAR转染效率和表达水平。bs CAR-T细胞和vⅢ^(+)/CD133^(+)U87胶质瘤干细胞共培养,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验、IFN-γ分泌实验检测其特异性杀伤作用和对IFN-γ分泌的促进作用。制备裸鼠vⅢ^(+)/CD133^(+)U87干细胞移植瘤模型检测bs CAR-T细胞对移植瘤生长的抑制作用。结果:vⅢsc Fv和CD133sc Fv通过重叠PCR无缝连接入二代CAR表达框(S-vⅢscFv/CD133scFv-Hinge-TM-CD137-CD3ζ)中,然后克隆入p CDH-MSCV-MCS-EF1-copGFP载体的Eco RⅠ和Bam HⅠ位点(pbs CAR)。3种质粒(p VSV-G、p CMV-d R8.9和pbs CAR)共转染HEK293T细胞制备慢病毒载体,转染外周血T细胞,FCM检测bs CAR表达率为71.1%,WB法结果显示bs CAR表达正确。bs CAR-T细胞和vⅢ^(+)/CD133^(+)U87干细胞共培养检测结果显示,bs CAR-T细胞对胶质瘤干细胞具有特异性杀伤作用,与效靶比呈正比;IFN-γ分泌量为(2350.6±92)pg·m L^(-1),明显高于对照组(P<0.01)。裸鼠移植瘤动物模型显示,bs CAR-T细胞在体内具有明显的移植瘤抑制作用(P<0.01)。结论:bs CAR-T细胞能够特异性靶向杀伤vⅢ^(+)/CD133^(+)胶质瘤干细胞,实验结果为促进实体瘤的细胞免疫治疗提供了实验依据。 展开更多
关键词 表皮生长因子Ⅲ型突变体 CD133 双特异性car vⅢ^(+)/CD133^(+)U87胶质瘤干细胞 肿瘤干细胞
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Physical Activity,Sedentary Behavior,and the Risk of Cardiovascular Disease in Type 2 Diabetes Mellitus Patients:The MIDiab Study 被引量:1
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作者 Yafei Wu Guijun Qin +32 位作者 Guixia Wang Libin Liu Bing Chen Qingbo Guan Zhongshang Yuan Xu Hou Ling Gao Chao Xu Haiqing Zhang Xu Zhang Qiu Li Yongfeng Song Fei Jing Shizhan Ma Shanshan Shao Meng Zhao Qingling Guo Nanwei Tong Hongyan Zhao Xiaomin Xie Chao Liu Zhongyan Shan Zhifeng Cheng Xuefeng Yu Shulin Chen Tao Yang Yangang Wang Dongmei Li Zhaoli Yan Lixin Guo Qiuhe Ji Wenjuan Wang Jiajun Zhao 《Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第1期26-35,共10页
The aim of this study was to explore the associations of moderate-to-vigorous-intensity physical activity(MVPA)time and sedentary(SED)time with a history of cardiovascular disease(CVD)and multifactorial(i.e.,blood pre... The aim of this study was to explore the associations of moderate-to-vigorous-intensity physical activity(MVPA)time and sedentary(SED)time with a history of cardiovascular disease(CVD)and multifactorial(i.e.,blood pressure(BP),body mass index(BMI),low-density lipoprotein cholesterol(LDL-C),and glycated hemoglobin A1c(HbA1c))control status among type 2 diabetes mellitus(T2DM)patients in China.A cross-sectional analysis of 9152 people with type 2 diabetes from the Multifactorial Intervention on Type 2 Diabetes(MIDiab)study was performed.Patients were grouped according to their self-reported MVPA time(low,<150 min·week−1;moderate,150 to<450 min·week−1;high,≥450 min·week−1)and SED time(low,<4 h·d–1;moderate,4 to<8 h·d–1;high,≥8 h·d–1).Participants who self-reported a history of CVD were identified as having a CVD risk.Odds ratios(ORs)and 95%confidence intervals(CIs)of CVD risk and multifactorial control status associated with MVPA time and SED time were estimated using mixed-effect logistic regression models,adjusting for China’s geographical region characteristics.The participants had a mean±standard deviation(SD)age of(60.87±8.44)years,44.5%were women,and 25.1%had CVD.After adjustment for potential confounding factors,an inverse association between high MVPA time and CVD risk that was independent of SED time was found,whereas this association was not observed in the moderate-MVPA group.A higher MVPA time was more likely to have a positive effect on the control of BMI.Compared with the reference group(i.e.,those with MVPA time≥450 min·week−1 and SED time<4 h·d–1),CVD risk was higher in the low-MVPA group:The OR associated with an SED time<4 h·d–1 was 1.270(95%CI,1.040–1.553)and that associated with an SED time≥8 h·d–1 was 1.499(95%CI,1.149–1.955).We found that a high MVPA time(i.e.,≥450 min·week−1)was associated with lower odds of CVD risk regardless of SED time among patients with T2DM. 展开更多
关键词 Type 2 diabetes Physical activity Sedentary time car diovascular disease
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