干细胞与心肌再生

由于成年心肌细胞通常不能再生,严重的心肌损伤会导致心肌不可逆的重构坏死,从而发生心功能失调.干细胞再生治疗为心肌再生提供了很好的策略.为了寻找合适的干细胞类型,促进心肌再生,有效改善心功能,需要更好地了解心肌修复和再生的分子基础.已有研究发现多种干细胞可促进心肌再生.描述了骨髓干细胞的促血管新生及心肌分化的能力在心梗治疗中的作用,还讨论了心脏侧群干细胞以及诱导型多能干细胞在心肌再生中的作用和分子机制.所阐述的最新数据有利于拓展干细胞治疗的有效潜能及临床影响.

机械牵张调控LRP6磷酸化介导心脏侧群干细胞增殖

目的研究机械牵张对心脏侧群干细胞(cardiac side population cell,CSP)增殖的作用及机制。方法通过流式细胞仪分选并培养大鼠乳鼠CSP,牵张后观察细胞的增殖。并通过胸主动脉缩窄(transverse aorta constriction,TAC)建立压力负荷小鼠模型,流式细胞仪分选后观察CSP的比例。进一步通过荧光染色以及Western blot检测CSP的LRP6磷酸化水平。结果成功分离及培养CSP,机械牵张可促进CSP增殖。体内实验表明,压力负荷可明显促进CSP比例的升高。免疫荧光及Western blot实验表明,机械牵张可明显促进CSP的LPR6磷酸化。CSP过表达LRP6可明显增强机械牵张介导的促增殖效应。结论机械牵张可促进LRP6磷酸化,从而促进CSP增殖,有利于机体对病理性刺激产生适应性反应以维持心功能。

心脏侧群细胞的研究进展

研究证实心脏中有干细胞的存在,并分离出一组特异的亚细胞群,称为"侧群"细胞。该细胞群具有增殖、分化为心肌细胞的能力。本文对心脏侧群细胞的分选、表面标记、功能及其分子调节作一综述。

基于纳米技术的超微量蛋白免疫分析ERK的磷酸化

目的运用基于纳米技术的超微量蛋白免疫分析(Nanofluidic proteomic immunoassay,NIA)方法检测ERK的磷酸化。方法构建尾加压素Ⅱ(UrotensinⅡ)受体GPR14细胞系,UⅡ(10-7M)刺激该细胞系10分钟后,提取细胞蛋白采用传统Western方法和NIA技术分别检测同种样品ERK的磷酸化,并用两种方法观察UⅡ受体拮抗剂Urantide对ERK磷酸化的抑制作用。通过结扎C57BL/6小鼠冠状动脉左前降支,建立心梗模型,假手术组开胸不结扎,术后1周通过流式细胞术分离心脏侧群干细胞(Cardiac side population cells,CSPs),用NIA技术检测ERK磷酸化。结果 Western分析可观察到UⅡ介导ERK1/2的磷酸化,Urantide抑制该效应。NIA分析可观察到UⅡ介导ERK1/2磷酸化的多种异构体包括p-ERK1a,P-ERK1b,PP-ERK1,PP-ERK2水平升高,Urantide同样抑制该效应。心梗后CSPs数目明显增加。NIA分析显示,心梗促进CSPs上的p-ERK1b,PP-ERK1的水平升高,但对PP-ERK2影响不大。结论通过GPR14细胞系的分析,NIA技术灵敏度高,可检测ERK磷酸化的多种形式,运用该技术可检测数万个CSPs的ERK磷酸化,可观察心梗促进CSPs的某些ERK磷酸化异构体的水平升高,提示可能与心梗后CSPs的增殖有关。

心脏侧群细胞在体外的增殖与分化

目的:描述成年小鼠心脏的SCA1-/CD31-CSP细胞特征,研究它们在体外的增殖、分化能力。方法:通过荧光激活细胞(流式细胞仪)、逆转录酶聚合酶链反应、甲基纤维素和内皮细胞培养基培养,对细胞进行分选、基因、增殖、分化的检测。结果:SCA1-/CD31-CSP细胞表达干细胞和内皮祖细胞基因,这些细胞能够在体外增殖、分化和血管化。结论:在鼠的心脏中SCA1-/CD31-CSP细胞可作为内皮祖细胞。