黄芪多糖对异丙肾上腺素诱发的SERCA2a表达及活性降低的影响

目的探讨黄芪多糖对异丙肾上腺素(isopreterenol,ISO)刺激下心肌细胞SERCA2a表达的影响。方法采用Real-time PCR法检测SERCA2a mRNA的表达;利用蛋白质免疫印迹法检测SERCA2a蛋白的表达。以4-硝基酚磷酸二钠(p-NPP)法检测SERCA2a的活性。结果与对照组相比,ISO组心肌细胞SERCA2a mRNA及蛋白的表达均明显降低,而黄芪多糖剂量依赖性地逆转上述降低。此外,黄芪多糖还可明显提高SERCA2a的活性。结论黄芪多糖可缓解ISO引起的SERCA2a表达及活性的下调。该作用可能是黄芪多糖缓解心肌细胞内Ca2+超载,进而发挥其心血管保护作用的重要机制。

p38MAPK／14-3-3γ通路在LPS预处理对抗心肌细胞缺氧／复氧损伤中的作用

目的研究p38MAPK/14-3-3γ通路在LPS预处理对抗缺氧/复氧(A/R)损伤中的作用。方法采用原代培养乳鼠心肌细胞,建立A/R损伤模型及APC、LPS预处理保护模型。实验结束后测定p38MAPK磷酸化蛋白表达及14-3-3γ蛋白表达,同时检测培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、四唑盐(MTT)比色试验测定细胞存活率、TUNEL法检测细胞凋亡、线粒体肿胀实验检测线粒体通透性转换孔(mPTP)开放、流式细胞仪检测线粒体膜电位。结果 LPS预处理对随后心肌A/R损伤有类似APC的保护作用,同时伴随p38MAPK的磷酸化水平升高和14-3-3γ蛋白表达升高;给予SB203850特异性阻断p38MAPK通路,则14-3-3γ蛋白表达明显下调,并且心肌细胞LDH值升高,细胞存活率下降,心肌细胞的凋亡指数升高,mPTP开放加剧,线粒体膜电位降低。结论 LPS预处理对心肌细胞A/R损伤有保护作用,其机制可能是通过激活p38 MAPK,上调14-3-3γ的表达实现。

六棱菊提取物体外抗乙型肝炎的作用

目的:探讨六棱菊(Laggera alata,L.alata)提取物对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染影响.方法:采用D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)致人源HL-7702肝细胞损伤模型,研究六棱菊提取物对类似乙型肝炎引起的肝细胞损伤的影响;采用HBV基因转染的HepG2.2.15细胞模型,评价六棱菊提取物的体外抗HBV作用.通过MTT法检测细胞毒性和细胞活力;通过ELISA和荧光定量PCR法分别检测乙型肝炎表面抗原(hepatitis B virus surface antigen,HBsAg)/乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)和HBV DNA水平.结果:六棱菊提取物在25-100μg/mL浓度时,对D-GalN致肝细胞损伤均具有显著保护作用,而在100μg/mL浓度时展示了其最高保护率为45.66%.六棱菊提取物作用HepG2.2.15细胞3d,在10-100μg/mL浓度下对HBsAg有显著抑制作用,其最高抑制率为45.92%;在100μg/mL下能显著抑制HBeAg分泌,其抑制率为50.5%.六棱菊提取物作用HepG2.2.15细胞6 d,在10-100μg/mL浓度下对HBsAg有显著抑制作用,其最高抑制率为84.31%;在25-100μg/mL浓度下能显著抑制HBeAg分泌,最高抑制率为88.45%;同时,在100μg/mL时对HBV DNA复制有显著抑制作用.结论:六棱菊提取物具有较强的体外抗肝细胞损伤作用和抗HBV作用,其抗乙型肝炎作用可能与所含咖啡酰奎宁酸类活性成分有关.

日本血吸虫和曼氏血吸虫减毒尾蚴免疫小鼠淋巴细胞表型的动态

目的：宿主经照射减毒血吸虫尾蚴免疫后能获得显著的抗攻击感染的抵抗力。本文探讨紫外线减毒尾蚴免疫小鼠淋巴细胞表型的动态变化。方法：小鼠分别感染减毒日本血吸虫和曼氏血吸虫尾蚴（５００条／只），对照组分别感染两种正常尾蚴（２００条／只），免疫后第３、５、７、１０、１４和２１ｄ各组剖杀６－７只，摘取两侧腋窝淋巴结和脾脏分离细胞，采用双染色免疫荧光标记的单抗及ＦＡＣＳｃａｎ流式细胞仪进行细胞表型分析。结果：免疫小鼠腋窝淋巴结细胞总数增加，第１０ｄ达高峰，其中尤以Ｔ细胞显著，而Ｔ细胞总数增加主要是由于ＣＤ＋４Ｔ细胞的增加，而不是ＣＤ＋８Ｔ细胞。与对照组相比，免疫组的反应是非常显著。结论：ＣＤ＋４Ｔ细胞在紫外线减毒血吸虫疫苗保护性免疫机制中可能起重要作用。

小儿清解防感颗粒防治甲流的作用机制研究

目的研究小儿清解防感颗粒抗流感病毒的作用机制。方法采用亚洲甲型鼠肺适应株(A/PR8/H1N1)滴鼻感染小鼠制作小鼠甲流模型,观察小儿清解防感颗粒延长病鼠生命的作用;光学显微镜下观察小鼠肺组织的病变程度并评分,同时计算小鼠肺指数,比较各组间肺指数的变化趋势及小鼠肺病变评分差异。采用环磷酰胺建立小鼠免疫抑制模型,观察各组小鼠的淋巴细胞转化情况。结果小儿清解防感颗粒可显著延长病鼠生命,降低死亡率和肺指数、肺病变评分,升高淋巴母细胞、过渡型细胞百分率及淋巴细胞转化率。结论小儿清解防感颗粒对感染流感病毒A/PR8/H1N1小鼠有一定的死亡保护及肺脏保护作用,并具有增强免疫低下小鼠淋巴细胞转化的作用。

The effects and mechanism of tripterygium wilfordii Hook Fcombination with irbesartan on urinary podocyte excretion in diabetic nephropathy patients

Objective To investigate the effects of the combination of tripterygium wilfordii Hook F (TwHF) and irbesartan on urinary podocytes in diabetic kidney disease (DKD) patients,and to discuss the mechanism of protective effect of TwHF on DKD.Methods A total of