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新疆南部和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊MSTN基因的真核表达
1
作者
王海涛
金波
李树伟
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期82-90,共9页
旨在构建新疆南部4个地方品种(品系)绵羊,即平原型和田羊(HP)、山区型和田羊(HS)、卡拉库尔羊(KL)和多浪羊(DL)的肌生成抑制素(myostatin,MSTN)基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达质粒并在真核细胞中表达。从4种绵羊骨骼肌中提取...
旨在构建新疆南部4个地方品种(品系)绵羊,即平原型和田羊(HP)、山区型和田羊(HS)、卡拉库尔羊(KL)和多浪羊(DL)的肌生成抑制素(myostatin,MSTN)基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达质粒并在真核细胞中表达。从4种绵羊骨骼肌中提取总RNA,逆转录获得c DNA,PCR扩增MSTN后与p MD18-T载体连接构建重组质粒并测序分析,然后将MSTN(HP、HS、DL和KL)基因插入到融合表达载体p EGFP-N1中,构建真核融合表达重组质粒p EGFP-N1-MSTN,在细胞铺满80%时用脂质体法转染到CHO中,观察EGFP与MSTN蛋白在CHO细胞内融合表达的绿色荧光。结果显示,平原型和田羊、山区型和田羊、卡拉库尔羊和多浪羊MSTN的ORF序列都是1 125 bp(不含终止密码子),编码375个氨基酸;与Gen Bank中MSTN序列比较,与田羊(HS、HP)没有差异;卡拉库尔羊有2个碱基差异,造成2个氨基酸变异;多浪羊有6个碱基的差异,造成4个氨基酸变异。成功构建EFGP和MSTN共表达重组质粒并在真核细胞CHO中得以表达。
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关键词
和田羊
卡拉库尔羊
多浪羊
肌生成抑制素
CHO细胞
绿色荧光蛋白
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职称材料
题名
新疆南部和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊MSTN基因的真核表达
1
作者
王海涛
金波
李树伟
机构
塔里木大学生命科学学院塔里木盆地生物资源保护利用兵团重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第5期82-90,共9页
基金
新疆生产建设兵团博士资金专项(2010JC08)
文摘
旨在构建新疆南部4个地方品种(品系)绵羊,即平原型和田羊(HP)、山区型和田羊(HS)、卡拉库尔羊(KL)和多浪羊(DL)的肌生成抑制素(myostatin,MSTN)基因与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合表达质粒并在真核细胞中表达。从4种绵羊骨骼肌中提取总RNA,逆转录获得c DNA,PCR扩增MSTN后与p MD18-T载体连接构建重组质粒并测序分析,然后将MSTN(HP、HS、DL和KL)基因插入到融合表达载体p EGFP-N1中,构建真核融合表达重组质粒p EGFP-N1-MSTN,在细胞铺满80%时用脂质体法转染到CHO中,观察EGFP与MSTN蛋白在CHO细胞内融合表达的绿色荧光。结果显示,平原型和田羊、山区型和田羊、卡拉库尔羊和多浪羊MSTN的ORF序列都是1 125 bp(不含终止密码子),编码375个氨基酸;与Gen Bank中MSTN序列比较,与田羊(HS、HP)没有差异;卡拉库尔羊有2个碱基差异,造成2个氨基酸变异;多浪羊有6个碱基的差异,造成4个氨基酸变异。成功构建EFGP和MSTN共表达重组质粒并在真核细胞CHO中得以表达。
关键词
和田羊
卡拉库尔羊
多浪羊
肌生成抑制素
CHO细胞
绿色荧光蛋白
Keywords
hetian
sheep
carla kul sheep
duolang
sheep
myostatin
CHO cell
green fluorescent protein
分类号
Q953 [生物学—动物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
新疆南部和田羊、卡拉库尔羊、多浪羊MSTN基因的真核表达
王海涛
金波
李树伟
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2016
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