束缚应激对大鼠血脂及肝脏PPARα、L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达的影响

目的观察束缚应激后大鼠血脂和肝脏过氧化酶体增殖物激活型受体(PPARα)、肝型肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(L-CPT-Ⅰ)mRNA和蛋白的变化,初步探讨应激与血脂的关系。方法健康雄性Wistar大鼠,分为正常对照组(C)、束缚1周组(R1)、束缚2周组(R2)和束缚4周组(R4),每组8只。全自动生化仪测定血脂水平,铜显色法测定血清中游离脂肪酸(FFA)水平。分别用RT-PCR和Western Blot方法检测肝脏PPARα及其靶基因L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达水平。结果束缚应激组皮质醇和去甲基肾上腺素水平均明显高于对照组(P<0.01)。R1、R2、R4组大鼠血清FFA分别为(836.33±90.32)、(795.01±62.12)、(829.56±72.64)μmol/L,均明显高于C组〔(620.83±52.21)μmol/L,P<0.01〕。同样,R1、R2、R4组大鼠血清TG和HDL-C均明显高于C组(P<0.05,P<0.01)。与C组相比,R1、R2、R4组大鼠肝脏中PPARα和L-CPT-ⅠmRNA和蛋白表达均增加(P<0.01)。各应激组间这些指标变化差异均无显著性(P>0.05)。结论束缚应激后大鼠血清FFA、TG和HDL-C水平升高,这可能与其肝脏PPARα及L-CPT-Ⅰ表达增加有关。

孕鼠补充二十二碳六烯酸对仔鼠肝脏肉碱棕榈酰转移酶-ⅠmRNA表达的影响

目的研究孕鼠补充二十二碳六稀酸(DHA)对仔鼠脂肪代谢及肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)mRNA水平的影响。方法成年SD雌鼠随机分成A、B、C三组,待其妊娠后A组给予基础饲料、B组补充低剂量的DHA(1g/kg bw),C组补充高剂量的DHA(2g/kg bw)。所有雄性仔鼠出生后均由A组母鼠哺乳,断乳后给予基础饲料喂饲至出生后第8周。每组8只,动态观察仔鼠的体重、体脂含量、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)及CPT-ⅠmRNA水平。结果三组仔鼠的出生体重差异无显著性(P>0.05);仔鼠出生后的第8周时,C组的体重显著低于A组(P<0.05),B、C组的体脂含量、TG水平显著低于A组(P<0.05),而C组HDL-C水平显著高于A组(P<0.05),但三组TC水平差异无显著性(P>0.05)。动态观察表明,肝脏CPT-ⅠmRNA水平持续性出现B、C高于A组,C组高于B组。结论孕期补充DHA可能通过持续性上调仔鼠肝脏CPT-Ⅰ基因表达来增强脂肪酸的氧化,降低血脂水平,但孕期摄入过量的DHA可能对子代产生不利影响。

孕期补充二十二碳六烯酸对母鼠脂肪代谢及CPT-Ⅰ mRNA表达的影响

目的探讨孕期补充二十二碳六烯酸(DHA)对母鼠脂肪代谢和肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)mRNA表达的影响。方法将SD雌鼠按体重随机分成A、B、C3组,孕期分别食用补充高剂量DHA膳食(A)、补充低剂量DHA膳食(B)、普通膳食(C),待母鼠分娩,实验结束。观察母鼠妊娠期间体重变化及各组子鼠出生数量、出生体重情况,检测母鼠产后肾周脂肪含量、血清甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、血清高密度脂蛋白(HDL-C)水平、瘦素(Leptin)及肝脏组织中CPT-ⅠmRNA的表达丰度。结果各组孕鼠妊娠时间、产子数量、子鼠出生体重均无明显差异,但A、B组的母鼠产后血清甘油三酯水平低于C组;A组母鼠孕期增重量、肾周脂肪含量、总胆固醇、瘦素水平均明显低于C组;A、B组母鼠产后肝脏组织的CPT-ⅠmRNA水平高于C组。结论孕期补充DHA有调节母体血脂、减少体内脂肪含量的作用,而CPT-Ⅰ基因表达的上调可能是其一潜在机制。

PTEN过表达对奶牛肝细胞脂肪酸氧化代谢的影响

目的探讨PTEN过表达对奶牛肝细胞脂肪酸氧化代谢的影响。方法构建PTEN过表达的重组腺病毒载体,病毒扩增后,感染犊牛原代肝细胞,并设空白对照组(加入PBS)和阴性对照组(感染阴性对照腺病毒AD-GFP),感染48 h后,荧光定量PCR检测细胞中PTEN、脂肪酸氧化代谢转运主要基因CPTⅠ、CPTⅡm RNA的表达水平,Western blot检测相应蛋白表达水平。结果重组腺病毒载体经酶切鉴定证明构建正确。过表达PTEN基因后,可升高CPTⅠ和CPTⅡ基因m RNA和蛋白的表达量(P<0.01)。结论 PTEN通过调节脂肪酸氧化酶转录和翻译水平,对脂肪酸在肝细胞内的氧化代谢过程进行调节,其有望作为临床有效的生物调控药物,用于治疗奶牛脂肪肝。