上调CDX2基因表达对人胃癌SGC-7901细胞miRNA表达谱及生物学功能的影响

目的:筛选上调尾型同源盒基因2(caudal type homeobox gene 2,CDX2)基因表达时人的胃癌细胞SGC-7901中差异表达的miRNA并预测其靶基因,并观察其对胃癌细胞生物学行为的影响.方法:提取瞬时转染48 h后空载体组(转染P E G F P-N1组)和转染组(转染P E G F P-N1-C D X2组)细胞的总R N A,应用m i R N A芯片检测差异表达的miRNA,并通过Miranda、TargetScan、Mirtarget2软件预测其靶基因,通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析了解靶基因功能.CCK8法检测细胞增殖能力,划痕试验、Transwell小室、细胞黏附实验检测各组细胞体外迁移黏附能力.结果:PEGFP-N1-CDX2组较空载体组有59种差异表达的miRNA,其中25种miRNA发生2倍以上表达上调,34种miRNA发生2倍以上表达下调.通过Gene Ontology(GO)和KEGG pathway分析得到部分miRNA靶基因功能,这些靶基因参与了肿瘤的发生、发展、转移及预后.与对照组相比,PEGFP-N1-CDX2组的胃癌细胞生长、迁移和黏附能力均明显受到抑制(P<0.05).结论:上调CDX2基因表达可明显抑制人胃癌细胞SGC-7901的生长,抑制其迁移黏附能力,CDX2基因的抗肿瘤作用可能与miRNA有关.

Cdx2蛋白在不同亚型肠上皮化生中的表达及其与H. pylori感染的关系

目的探讨胃黏膜肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)中尾型同源异型盒基因2(caudal type homeobox genes 2,Cdx2)蛋白的表达及其与幽门螺杆菌(helicobacter pylori,H.pylori)感染的关系。方法选取内镜下活检的18例正常胃黏膜和53例IM胃黏膜。采用高铁二铵-爱先蓝-过碘酸雪夫反应(HID-AB-PAS)将胃黏膜IM分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型,然后用Cdx2单克隆抗体进行免疫组织化学染色,检测Cdx2在正常胃黏膜及不同亚型IM中的表达。采用一分钟快速尿素酶实验及甲苯胺蓝染色检测H.pylori感染。结果Cdx2蛋白在正常胃黏膜中不表达,IM中Cdx2阳性表达率为83.02%(44/53),其中Ⅰ型IM阳性率为95.45%(21/22),Ⅱ型为83.33%(15/18),Ⅲ型为61.53%(8/13),三者间Cdx2蛋白表达有显著性差异(P=0.036)。IM中H.pylori感染阳性率为47.17%(25/53),其中Ⅰ型IM中H.pylori感染阳性率为27.27%(6/22),Ⅱ型为55.56%(10/18),Ⅲ型为69.23%(9/13),三者间H.pylori感染率亦有显著性差异(P=0.038)。Cdx2蛋白表达主要集中于H.pylori感染阴性者,但H.pylori感染阳性者和阴性者Cdx2表达无统计学差异(P>0.05)。结论Cdx2蛋白异常表达可能参与了胃黏膜IM向胃癌的转变,检测其表达有助于预测胃黏膜IM向胃癌转变的可能性。

结直肠腺癌EGFR、CDX2表达的临床病理意义及相互关系

目的探讨结直肠腺癌组织中表皮生长因子受体(EGFR)及尾型同源框转录因子2(CDX2)蛋白表达的临床病理意义。方法收集结直肠腺癌标本170例,采用免疫组织化学染色法检测EGFR及CDX2蛋白表达,分析其表达与结直肠腺癌临床病理参数之间的关系及意义。结果结直肠腺癌EGFR高表达率随分化程度的降低逐渐增加;结直肠腺癌CDX2高表达率在低分化、淋巴结转移及脉管内癌栓形成的患者中表达降低,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 EGFR和CDX2均参与结直肠腺癌的发生、发展,但两者参与途径可能不同。

人胃癌细胞株CDX2基因表达与其启动子区甲基化的关系

目的:探讨人胃癌细胞株CDX2基因表达与其启动子区甲基化的关系。方法:不同浓度5-aza-CdR处理MKN45细胞株,甲基化特异性PCR(MSP)检测用药前后CDX2启动子甲基化状态;实时荧光定量RT-PCR和WesternBlot分别检测CDX2和DNMT1 mRNA和蛋白表达。结果:MKN45细胞株CDX2基因启动子区域高甲基化,CDX2 mRNA表达极低,蛋白不表达;经3种浓度5-aza-CdR处理MKN45细胞72 h后,细胞中CDX2 mRNA和蛋白表达均出现上调,而DNMT1表达出现下调。结论:CDX2基因表达下调与其启动子CpG岛高甲基化有关,DNMT1可能参与该过程的调节。

CDX2基因与白血病关系的研究进展

尾型同源盒基因（CDX）家族成员CDX2基因是促进胚胎发育和参与造血调控的主控基因.新近研究发现,CDX2在各型白血病中异常表达,是与白血病发生、发展和颅后相关的新的致白血病基因,可望成为白血病微小残留病检测的泛基因标志.CDX2通过调节HOX基因参与白血病转化,进一步探讨CDX2的致白血病机制及其与白血病的关系,对预测白血病复发及个体化、靶向治疗意义重大.

尾型同源异型盒基因2、肿瘤坏死因子α蛋白表达及幽门螺杆菌感染与慢性胃病伴肠上皮化生关系研究

目的 探讨慢性胃病伴肠上皮化生（IM）与尾型同源异型盒基因2（Cdx2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）蛋白表达及幽门螺杆菌（Hp）感染间的关系.方法 行胃镜检查并活检患者130例,依据典型病理分型分为胃炎组（30例）、IM组[100例,包括轻度IM组（30例）、中度IM组（35例）、重度IM组（35例）],检查每组Hp感染情况,免疫组织化学方法检测Cdx2、TNF-α蛋白表达情况.结果 IM组Cdx2、TNF-α蛋白阳性表达率明显高于胃炎组[78.0％（78/100）比6.7％（2/30）、60.0％（60/100）比16.7％（5/30）],差异有统计学意义（P＜0.01）;而且IM组Hp阳性和阴性时Cdx2、TNF-α蛋白阳性表达率均明显高于相应胃炎组[Cdx2蛋白：79.4％（50/63）比1/10、75.7％ （28/37）比5.0％（1/20）,TNF-α：74.6％ （47/63）比4/10、35.1％（13/37）比5.0％（1/20）],差异有统计学意义（P＜0.01）.中度IM组和重度IM组Cdx2蛋白阳性表达率明显高于轻度IM组[80.0％（28/35）和97.1％（34/35）比53.3％（16/30）],重度IM组高于中度IM组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;四组内不同Hp感染情况时Cdx2蛋白阳性表达率比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.轻度IM组与中度IM组TNF-α蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义（P＞0.05）,重度IM组TNF-α蛋白阳性表达率明显高于轻度IM组和中度IM组[80.0％（28/35）比40.0％（12/30）和57.1％（20/35）],差异均有统计学意义（P＜0.05）;胃炎组、轻度IM组、中度IM组、重度IM组内Hp阳性患者TNF-α蛋白阳性表达率明显高于Hp阴性患者（4/10比1/20、47/63比13/37、10/18比2/12、15/21比5/14、22/24比6/11）,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 Cdx2、TNF-α蛋白表达及Hp感染与IM程度关系密切,故监测Cdx2、TNF-α蛋白表达水平有助于判断IM程度,并为如何逆转IM提供了一定依据.