耐甲氧西林葡萄球菌检测方法的比较

目的以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因为金标准,比较头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的优缺点。方法对临床分离的70株葡萄球菌(其中金黄色葡萄球菌40株,凝固酶阴性的葡萄球菌30株)分别用PCR法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和乳胶凝集法检测耐甲氧西林葡萄球菌,药敏试验方法按标准KB(Kirby Bauer)法进行。结果经PCR法检测mecA基因,耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为75.0%(30/40)和80.0%(24/30);头孢西丁纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为93.3%、95.9%;90.0%和100%;苯唑西林纸片扩散法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为90.0%、87.5%;90.0%和83.3%;乳胶凝集法检测MRSA和MRCNS的敏感性、特异性分别为100.0%、100.0%;100.0%和100.0%。与PCR结果比较,3种方法所获得的结果经统计学分析,差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法是成批检测的理想方法;乳胶凝集法检测快速,结果可靠,但检测成本高;实验室应选择合适的方法,以提高MRS的检出率。

头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的评价

目的:评价头孢西丁扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌异质性耐药菌株的可靠性和临床实用性。方法:将临床分离得到的葡萄球菌310株,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准操作规程进行苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法实验,并以PCR检测葡萄球菌mecA基因为判断标准,比较4种方法的敏感性及特异性。结果:经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为57.1%(113/198),耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)为62.5%(70/112)。头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%,检测MRCNS敏感性为98.6%,特异性为100%。结论:头孢西丁纸片扩散法操作简便,结果可靠,可作为临床实验室检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法。

头孢西丁纸片法筛查耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的评价

目的评价头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法。方法采用NCCLS推荐的30μg头孢西丁纸片法和苯唑西林纸片法检测MRSA,以PCR方法检测mecA基因为金标准。同时做头孢西丁对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果用PCR方法检测145株金黄色葡萄球菌,其中mecA基因阳性83株,阴性62株。用头孢西丁纸片法筛查MRSA阳性82株,阴性63株。敏感性为98.8%,特异性为100%。而苯唑西林纸片法检测MRSA敏感性为95.2%,特异性为96.8%。结论头孢西丁纸片法筛查MRSA与mecA基因检测具有很好的一致性,该方法可在常规工作中推广使用。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)在临床的应用价值。方法 用头孢西丁纸片扩散法检测临床分离的 94株金黄色葡萄球菌 ,并与苯唑西林纸片扩散法、琼脂稀释法及mecA基因检测进行比较。结果 mecA基因阳性的 77株金黄色葡萄球菌 ,头孢西丁纸片扩散法均显示耐药。结论 头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测高度一致 ,是筛选和确认MRSA的一种可靠的试验方法。

头孢西丁纸片法检测mecA基因介导的MRS

目的评价应用头孢西丁纸片扩散法检测mecA基因介导的耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)。方法分别用头孢西丁纸片法扩散法、苯唑西林纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、VITEK微生物自动分析系统及聚合酶链反应(PCR)mecA基因检测4种方法对MRS进行检测比较,最低抑菌浓度(MIC)测定应用VITEK微生物自动分析系统GPS卡。结果96株葡萄球菌属(金黄色葡萄球菌16株、凝固酶阴性葡萄球菌80株)中苯唑西林纸片法扩散法、苯唑西林琼脂稀释法、VITEK微生物自动分析系统3种方法检出MRS菌株54株(金黄色葡萄球菌2株、凝固酶阴性葡萄球菌52株),而PCR法检出mecA基因48株(金黄色葡萄球菌2株、凝固酶阴性葡萄球菌46株),头孢西丁纸片法扩散法与PCR法一致。结论头孢西丁纸片扩散法与mecA基因检测法高度一致,是筛选和确认mecA基因介导的MRS一种可靠的方法。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林溶血葡萄球菌

目的以PCR方法检测溶血葡萄球菌mecA基因为标准,评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测耐甲氧西林溶血葡萄球菌(methicillin resistantStaphylococcushaemolyticus,MRSH)的敏感度和特异性。方法用PCR扩增临床分离的114株溶血葡萄球菌,检测特异性的mecA基因片段;头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测溶血葡萄球菌中耐甲氧西林的溶血葡萄球菌。结果114株溶血葡萄球菌经PCR法检测,MRSH有97株,占85.1%;头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法检测MRSH分别有92、65、93株,与mecA基因法结果比较,头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和VITEK GPS109卡微量肉汤稀释法敏感性分别为94.8%(92/97)、67.0%(65/97)、93.8%(91/97);特异性分别为100%(17/17)、100%(17/17)、88.2%(15/17)。χ2检验,头孢西丁纸片扩散法和mecA基因法差异无显著性。结论头孢西丁纸片扩散法检测MRSH具有很高敏感度和特异性,是筛选和确认MRSH的一种可靠方法。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌

目的 以PCR法检测葡萄球菌的mecA基因(mecA基因法)为标准,评价头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌的灵敏度和特异性。方法 PCR扩增葡萄球菌的特异性mecA基因片段,头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林盐平板法检测葡萄球菌中耐甲氧西林葡萄球菌,药敏试验方法按标准K B(Kirby Bauer)法进行。结果 在190株临床分离的葡萄球菌中金黄色葡萄球菌(金葡菌)138 株,表皮葡萄球菌30株,溶血葡萄球菌22株,经PCR法检测mecA基因,金葡菌中耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的发生率分别为81.2%(112/138)、96.1%(50/52)。头孢西丁纸片扩散法检测金葡菌中MRSA和CNS中MRCNS的发生率分别为81.2%(112/138)、94.2%(49/52),与mecA基因法结果相比较,头孢西丁纸片扩散法检测葡萄球菌中MRS的灵敏度和特异度分别为99.4%(161/162)、100.0%(28/28), 两者符合率为99.5%(189/190),2种方法所获得的结果经统计学处理,两者差异无显著性。结论 头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌具有很高的灵敏度和特异度,适合在临床微生物实验室中进行推广。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌多重耐药研究

目的了解本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的多重耐药情况。方法收集经头孢西丁纸片扩散试验和青霉素结合蛋白2a胶乳凝集实验分离出的51株MRSA,用β-内酰胺酶实验、D试验、Kirby-Bauer法检测MRSA产β-内酰胺酶以及对红霉素、克林霉素、4种氟喹诺酮类药物(氧氟沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、加替沙星)和万古霉素耐药性。结果51株MRSA头孢西丁纸片抑菌圈直径介于6～20mm,产β-内酰胺酶率为84.3%,对红霉素、克林霉素、氟喹诺酮类、万古霉素耐药率分别为98.0%、86.3%、88.2%、0,红霉素诱导克林霉素耐药率为50.0%(3/6)。结论MRSA呈多重耐药,轻度感染可根据药敏结果选万古霉素与氟喹诺酮类?生素联合用药。

头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的临床应用

目的以PCR检测耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）mecA基因为金标准，评价头孢西丁纸片扩散法检测MRS的临床应用。方法收集各种细菌感染性标本分离到的葡萄球菌，细菌的鉴定采用法国梅里埃全自动微生物分析系Vitek-60，分别采用PCR扩增mecA法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林纸片扩散法和抗青霉素结合蛋白2a（抗PBP2a）胶乳凝集法检测葡萄球菌中MRS。结果经PCR检测mecA证实西安地区SA中MRSA的发生率为69．2％（54／78），CNS中MRCNS的发生率为67．7％（65／96）；其余三种方法检测SA中的MRSA发生率分别为67．9％，57．7％，66．7％，CNS中MRCNS的发生率分别为64．6％，58．3％，63．5％。头孢西丁纸片扩散法与mecA基因法结果相比较检测MRSA，其灵敏度和特异度分别为98．1％和100．0％，两者符合率为98．7％；MRSCoN的灵敏度和特异度分别为95．4％扣100．0％，两者符合率为96．9％。结论头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感度和特异度高于苯唑西林纸片扩散法，与PCR检测mecA法具有较好的一致性，可作为临床实验室常规检测MRS的常规方法。

四种初筛试验检测耐甲氧西林葡萄球菌的评价

目的评价四种初筛试验检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的价值。方法收集临床分离金黄色葡萄球菌100株、凝固酶阴性葡萄球菌51株,分别进行头孢西丁纸片、MHA中添加4%NaCl的头孢西丁纸片、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂,以PBP2a胶乳凝集作为MRS检测标准,按CLSI2006版标准操作和判读结果。结果对于金黄色葡萄球菌,头孢西丁纸片、MHA中添加4%NaCl的头孢西丁纸片、MHA中添加2%NaCl的苯唑西林纸片、苯唑西林-盐琼脂检测MRS灵敏度和特异性分别为96.3%和100.0%、85.2%和100.0%、77.8%和100.0%、92.6%和94.5%,其中2株苯唑西林-盐琼脂24h未生长但延长至48h生长,48h内敏感性100.0%;对于凝固酶阴性葡萄球菌,四种方法检测MRS灵敏度和特异性分别为97.8%和80.0%、95.6%和80.0%、95.6%和80.0%、100.0%和80.0%(P>0.05)。结论四种方法均能可靠检测MRS,头孢西丁纸片和苯唑西林-盐琼脂具有较高应用价值。

基因扩增和3种表型筛查法检测耐甲氧西林葡萄球菌的应用评价

目的比较4种方法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的阳性检出率、灵敏度和特异度,以便临床检测MRS时选择。方法用Vitek-32全自动细菌鉴定仪法、苯唑西林琼脂稀释法、头孢西丁纸片扩散法和mecA基因检测法分别检测175株葡萄球菌中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS),经行×列表资料的χ2检验比较阳性检出率,并以mecA基因检测法为"金标准"计算其他3种方法的灵敏度和特异度。结果4种方法检出MRSA的阳性率无差别(χ2=1.640,P>0.05),但检测MRCNS的阳性率有差别(χ2=9.478,P<0.05),其中Vitek-32全自动细菌鉴定仪法和苯唑西林琼脂稀释法检出MRCNS的阳性率高于mecA基因检测法;3种表型检测法检测MRSA的灵敏度和特异度分别为100%、96.3%、96.3%和88.2%、100%、100%,检测MRCNS的灵敏度均为100%,特异度分别为50%、46.1%和65.4%。结论最终判定MRS时,要考虑到mecA基因和苯唑西林最低抑菌浓度两个因素,并区别对待mecA基因介导的MRS和非mecA基因介导的MRS。

头孢西丁纸片筛选产AmpC酶革兰阴性杆菌

目的评价头孢西丁纸片筛选产AmpC酶革兰阴性杆菌的可靠性。方法头孢西丁纸片抑菌圈直径<18mm为可疑产AmpC酶株,采用头孢西丁三维试验作为确证实验。结果头孢西丁纸片检测的57株产AmpC酶株中,有27株为非产酶株假阳性率为49.1%(27/57)。阴沟肠杆菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的假阳性分别为60%(15/25)、33.3%(6/18)和50%(7/14)。有1株产AmpC酶肺炎克雷伯菌漏检。结论头孢西丁纸片筛选产AmpC酶阴沟肠杆菌和肺炎克雷伯菌特异性差,检测大肠埃希菌产AmpC酶株尚可。

耐甲氧西林葡萄球菌3种检测方法的实验比较及临床应用

目的通过对200株临床分离的葡萄球菌耐苯唑西林的检测,比较3种表型检测法的阳性率并对其临床实用性进行评价。方法采用美国NCCLS 2004年制订的头孢西丁-纸片扩散法、V ITEK 32微生物鉴定仪检测及苯唑西林盐琼脂法测试m ecA介导的葡萄球菌耐药。结果200株被检测的葡萄球菌中,头孢西丁-纸片扩散法检出耐苯唑西林的阳性率为68%(136/200);苯唑西林盐琼脂法的阳性率为67.5%(135/200);V ITEK 32仪的阳性率为68.5%(137/200);且耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(M RCN S)的耐药率(86.2%)高于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(26.23%)。3种检测方法结果经χ2检测差异无显著性。结论3种方法操作都简便,但各有优缺点,V ITEK32仪器检测葡萄球菌耐笨唑西林费用高,一般小型医院不具备条件;盐琼脂筛选法判读直观,但要掌握好孵育时间;NCCLS 2004版的纸片扩散法较经济实用,不仅可检测被检菌是否耐笨唑西林,同时还可获得大环内酯-林可霉素-链阳霉素(M LSB)结果,但是当头孢西丁的判断折点在临界时应当复检,建议与盐琼脂筛选法同步检测。

头孢西丁纸片法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的研究

目的:研究头孢西丁纸片法筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法。方法:以PCR方法检测m ecA基因为金标准,采用NCCLS推荐的头孢西丁纸片法和苯唑西林纸片法检测MRSA。结果:共分离出179株金黄色葡萄球菌,其中m ecA基因阳性127株,阴性52株。用头孢西丁纸片法筛查MRSA,敏感性为99.2%,特异性为98.1%;而苯唑西林纸片法检测MRSA敏感性为97.2%,特异性为94.6%。结论:头孢西丁纸片法筛查MRSA与m ecA基因检测具有一致性,其操作简便、敏感性和特异性高,可作为临床实验室检测MRSA的可靠方法。

头孢西丁纸片评价耐甲氧西林葡萄球菌的探讨

目的评价头孢西丁纸片法检测耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的特异性和灵敏度。方法收集临床分离金黄色葡萄球菌100株、凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS)52株,分别进行头孢西丁纸片法、添加4% NaCl的头孢西丁纸片法、添加2% NaCl的苯唑西林纸片法以及苯唑西林-盐琼脂法检测,以苯唑西林-盐琼脂法作为MRS检测标准,按CLSI2006版标准判读结果。结果头孢西丁纸片、添加4% NaCl的头孢西丁纸片、添加2% NaCl的苯唑西林纸片检测MRS特异性均达100.0%;对于金黄色葡萄球菌3种纸片法的灵敏度分别为82.7%、79.3%、72.4%;对于凝固酶阴性葡萄球菌,3种纸片法的灵敏度分别为97.9%、95.8%、95.8%。加盐与不加盐头孢西丁纸片法检测MRS的差异无显著性(P>0.05),耐药株抑菌圈直径(mm)分别为10.68±6.42、13.36±7.37(P<0.01)。结论加盐与不加盐头孢西丁纸片法均能可靠检测MRS,前者对耐药株结果更易判读。

几种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评价

目的对三种检测耐甲氧西林葡萄球菌方法的可靠性和临床实用性进行评价。方法以PCR检测金黄色葡萄球菌甲氧西林决定因子A(mecA)为金标准,按临床实验室标准化委员会(CLSI)操作规程用苯唑西林纸片扩散法、头孢西丁纸片扩散法、苯唑西林琼脂稀释法对临床分离的155株金黄色葡萄球菌进行检测。结果 155株金黄色葡萄球菌经mecA基因检测,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为61.9%(96/155);头孢西丁纸片扩散法检测MRSA的敏感性和特异性均为100%;苯唑西林纸片扩散法的敏感性为95.8%,特异性为91.5%;苯唑西林琼脂稀释法的敏感性为100%,特异性为98.3%;头孢西丁纸片扩散法优于苯唑西林纸片扩散法和苯唑西林琼脂稀释法。结论头孢西丁纸片扩散法操作简便、敏感性高、特异性好、结果可靠,可作为医院微生物实验室日常工作中检测耐甲氧西林葡萄球菌的常规方法。

胶体金法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的方法学评估

目的 评估胶体金法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的意义.方法 以胶乳凝集法作为对照,比较头孢西丁纸片扩散法、Vitek32全自动微生物鉴定/ 药敏系统和胶体金层析技术检测MRSA 的敏感度和特异度.结果 采用胶乳凝集法检测出MRSA 113株,阳性检出率为77.9%（113/145）;纸片扩散法检出MRSA 111株,阳性检出率为76.6%（111/145）;Vitek32 全自动微生物鉴定/药敏系统检出MRSA 111株,阳性检出率为76.6%（111/145）;胶体金法检出MRSA 112株,阳性检出率为77.2%（112/145）.结论 胶体金层析技术适用于临床微生物实验室.

三种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌检测方法的比较

目的比较3种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的方法。方法以胶乳凝集法作为对照,比较头孢西丁纸片扩散法、BD pheniox-100全自动微生物鉴定/药敏系统检测MRSA的敏感性和特异性。结果用胶乳凝集法检测95株金黄色葡萄球菌,检出MRSA64株,阳性率为67.4%(64/95)。头孢西丁纸片扩散法检出MRSA64株,敏感性和特异性均为100%(64/64、31/31),BD phoenix-100全自动微生物鉴/药敏系统检出MRSA63株,敏感性和特异性分别为98.5%(64/65)和100%(31/31)。结论3种方法均能较准确地检测出MRSA。

4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌方法的评估

目的:评价4种检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)方法的临床应用价值。方法:用mecA基因检测MRSA乳胶凝集法、头孢西丁纸片扩散法和苯唑西林微量稀释法对临床分离的160株金黄色葡萄球菌进行检测并作比较。结果:160株中有127株为MRSA,4种检测方法结果一致。结论:头孢西丁纸片扩散法可作为医院微生物实验室日常工作中检测MRSA的简便又准确的实验方法,并值得推广应用。

双纸片抑制增效试验在AmpC酶检测中应用分析

目的探讨分析双纸片抑制增效试验在肺炎克雷伯菌产AmpC酶的检测应用,评价该方法在临床实验室的应用价值。方法采用头孢西丁纸片法,头孢西丁三维试验,双纸片抑制增效试验,以及耐药基因多重PCR技术对临床分离菌株进行检测。结果 137株临床分离肺炎克雷伯菌中,对头孢西丁不敏感的菌株共有22株,头孢西丁三维试验阳性有11株;双纸片抑制增效试验FOX/FOX+PBA双纸片组中阳性有18株,CTT/CTT+PBA双纸片组中阳性有11株;多重PCR技术检测阳性有19株。头孢西丁三维试验阳性结果与PCR结果符合率为47.4%(9/19),双纸片抑制增效试验中,CTT/CTT+PBA双纸片组阳性结果与PCR结果符合率为57.9%(11/19);FOX/FOX+PBA双纸片组阳性结果与PCR结果符合率为94.7%(18/19)。结论双纸片抑制增效试验,其方法简便,结果准确性高,其中FOX/FOX+PBA双纸片组可应用于临床分离肺炎克雷伯菌产AmpC酶的检测。