α-Linolenic acid alleviates aluminium chloride-induced toxicity in PC12 cells by activation of PKA-CREB-BDNF signaling pathway

Aluminum has been associated with neurodegenerative diseases.ALA(α-linolenic acid),an essential dietary component for human health,possesses prominent biological activities.Herein,we aim to explore the neuroprotective effects of ALA on aluminum toxicity and reveal the underlying mechanism.Results show that aluminum chloride(denoted as Al)enabled cell viability decline and apoptosis with oxidative stress and mitochondrial damage in differentiated rat pheochromocytoma cells(PC12)for 24 h incubation.Compared with Al(10 mmol/L)treatment alone,ALA(50μmol/L)pretreatment for 24 h significantly enhanced cell viability by 28.40%,and hindered cell apoptosis by 12.35%,together with recovering redox state balance and alleviating mitochondrial damage.It was measured that ALA treatment upregulated Bcl-2 expression and down-regulated Bax level,accompanied with an expression decline of caspase-3 and caspase-9.Meanwhile,ALA pretreatment was proved to increase protein kinase A(PKA)expression and to promote phosphorylation of cAMP response element-binding protein(p-CREB),resulting in elevation on the level of brain-derived neurotrophic factor(BDNF).The above results showed that ALA attenuated Al toxicity in PC12 cells by mediating the PKA-CREBBDNF signaling pathway.

灵芝破壁孢子粉的抗肿瘤活性研究

目的研究灵芝破壁孢子粉对乳腺癌和口腔癌生长的抑制作用。方法采用灵芝破壁孢子粉乙醇提取物处理乳腺癌MCF-7细胞、口腔癌KB细胞和宫颈癌HeLa细胞,检测三种细胞的增殖情况。构建裸鼠乳腺癌MCF-7移植瘤和口腔癌KB移植瘤模型,评价灵芝破壁孢子粉进行灌胃治疗后的肿瘤生长抑制情况。结果灵芝破壁孢子粉乙醇提取物显著抑制MCF-7、KB和HeLa细胞的增殖,且该抑制效应呈剂量依赖性。在MCF-7移植瘤模型中,低、中、高3组灵芝破壁孢子粉给药剂量均有显著的肿瘤生长抑制作用,肿瘤抑制率分别为50.35%、65.72%和80.55%;但在KB移植瘤模型中,低剂量组没有显示显著的肿瘤生长抑制作用,而中剂量组和高剂量组表现出明显的抗肿瘤作用,3组肿瘤抑制率分别为4.03%、37.63%和40.59%。结论灵芝破壁孢子粉能够抑制MCF-7乳腺癌和KB口腔癌荷瘤裸鼠肿瘤的生长。

膜极距电解槽阴极弹性网断丝的原因和预防措施

膜极距电解槽整体更换离子膜时,发现一整台电解槽阴极弹性网断丝。分析阴极弹性网断丝的原因,提出预防和紧急处理措施。

三七破壁饮片指纹图谱研究

目的:建立三七药材、破壁粉体和破壁饮片的HPLC指纹图谱,为三七破壁饮片的质量控制提供依据。方法:采用高效液相色谱法,Hypersil ODS2色谱柱,流动相:乙腈-水(梯度洗脱),流速:1.0 mL/min,检测波长:203nm,柱温:25℃。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"软件对图谱进行分析处理。结果:三七药材、破壁粉体和破壁饮片皂苷类成分指纹图谱标定8个共有峰,三七药材、破壁粉体和破壁饮片之间相似度均大于0.9。结论:建立的HPLC指纹图谱方法具有良好的精密度、重复性和稳定性,适用于三七破壁饮片的质量控制。

延胡索及其破壁品、炮制品中有效成分的研究

目的:比较生品、破壁延胡索及其炮制品中延胡索乙素和去氢紫堇碱的含量差异。方法:采用破壁技术对延胡索进行破壁处理并炮制,采用Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm),流动相乙腈-醋酸盐缓冲液(pH6.0)(30∶70),流速1 mL.min-1,柱温35℃,检测波长280 nm,测定破壁及炮制前后的延胡索乙素和去氢紫堇碱的含量。结果:破壁延胡索与生品相比,去氢紫堇碱和乙素含量都有所增高,破壁醋炙品中两者含量最高。结论:延胡索破壁后有利于生物碱的溶出。

不同前处理方法对番茄红素提取率的影响研究

通过对番茄酱进行酶解法、反复冷冻法、加碱法、研磨法、加盐增加渗透压法等各种细胞破壁的处理,确定自溶法是提高番茄红素萃取率最经济有效的方法。进一步实验表明,番茄打酱时加入0.01%的Vc,然后调pH为5,加入2%的乙烯,50℃处理30min,可得到番茄红素含量较高的番茄酱。

六味地黄超微细粉体显微特征观察

目的 对中药复方六味地黄超微细粉体组织特征进行观察研究。方法 用对撞式气流粉碎机对六味地黄方剂药材进行细胞级超微粉碎 ;对照常规粉碎细粉 ,用显微观察法对其组织特征进行观察。结果 六味地黄方剂经超微粉碎后 ,显微镜下观察基本无完整细胞存在。结论 中药复方经超微粉碎可使细胞破壁 ,使其细胞内的各类有效成分充分暴露 。

甘草微粉细胞破壁率测定

建立了甘草微粉细胞破壁率检测的方法。采用细胞计数法,考察超细粉碎技术对甘草细胞破壁率的影响,测定甘草微粉的细胞破壁率。甘草细粉称样量与完整细胞计数的回归分析结果表明,两者显著相关(P<0.01),甘草经超细粉碎后细胞破壁率为91.14%。因此,以木栓细胞为计数指标的甘草粉末细胞破壁率测定方法简便、稳定、可靠。

不同破壁方法对细菌产SOD活性的影响

通过比较四种不同破壁方法对细菌产SOD活性影响的研究,得到一种最有效的细菌破壁方法,应用于从细菌中提取SOD的破壁处理。实验结果表明:四种破壁处理间均达到显著差异水平,并且助融剂破壁处理后SOD活性明显高于其他三种处理方法,即助融剂破壁效果最好,是最适合细菌提取SOD的破壁处理方法。

三孢布拉霉菌的复合酶破壁工艺研究

采用蛋白酶和纤维素酶对三孢布拉霉菌丝体细胞壁进行酶解处理,研究酶添加量、pH、温度和酶解时间等因素对破壁效果的影响。确定最佳工艺条件为:酶添加量为0.3%,pH为6.0,温度45℃,蛋白酶酶解4h后纤维素酶酶解2h,最终提取率达到90.2%。实现了低能、温和、环保的生产提取工艺,为番茄红素工业化清洁生产打下基础。

地表水中浮游植物叶绿素a提取方法的改进研究

[目的]优化地表水中浮游植物叶绿素a的提取方法。[方法]以新配制的90%丙酮为提取液,在低温与室温下反复地冻融浮游植物以破碎细胞,多次震摇后冷藏静置以提取叶绿素a,并与规范法进行对比。[结果]改进法提取的叶绿素a含量较规范法明显提高,且重复测定的精密度较高。两种方法的测定结果存在明显差异,但在含量测定的趋势上具有较强的一致性。改进法可以满足750 nm处吸光值低于0.005的要求,而规范法不能。镜检表明,改进法的植物细胞破碎情况比规范法更佳。[结论]改进法提取浮游植物叶绿素a含量明显高于规范法且重复性较好,具有人为误差小、稳定性好、提取率高、结果准确、操作简便安全等特点。

灵芝孢子对肿瘤细胞生长的抑制效果研究

应用3种肿瘤细胞模型对未破壁灵芝孢子、机械破壁灵芝孢子和全灵芝剥壁孢子进行抗肿瘤试验研究。结果表明,未破壁及不同破壁方式的灵芝孢子对人恶性乳腺癌细胞(MT-1)、人恶性淋巴癌细胞株(Jurkat)、人恶性脑肿瘤细胞(U343)均有不同程度的抑制作用,抑制效果强弱为全灵芝剥壁孢子>机械破壁灵芝孢子>未破壁灵芝孢子,表明破壁的确能提高灵芝孢子对肿瘤细胞的抑制作用,而且选择破壁的方法也很重要,生物酶法破壁能使灵芝孢子的生物活性成分得到充分释放,所以大大提高灵芝孢子的功效。

不同破壁方法对提取废啤酒酵母RNA的影响

从啤酒酵母中提取核酸的方法有很多,常用的是盐法和碱法。本研究对这两种方法提取核酸效果进行了比较,实验说明结果碱法对酵母破壁效果好于盐法,但是核酸提取的综合效果却不如盐法。

花粉的营养成分、结构及破壁方法

花粉是一种含有多种营养成分的食品,但花粉坚硬的外壁阻止人体对其营养成分的吸收,花粉破壁有利于对其进行深层开发与利用。介绍了花粉营养成分的种类、花粉粒的结构组成以及几种主要的破壁方法。

反相高效液相色谱法测定三七破壁粉粒的皂苷类含量

目的建立三七破壁粉粒的含量测定方法。方法利用Waters高效液相色谱仪测定三七破壁粉粒的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量,流动相为乙腈-水,流速为1.0 mL.min-1,测定波长为203nm。结果三七皂苷R1在0.22～2.19μg范围内线性关系良好,平均回收率为103.12%,RSD值为1.44%;人参皂苷Rg1在0.79～7.90μg范围内线性关系良好,平均回收率为102.23%,RSD值为1.97%;人参皂苷Rb1在0.85～8.53μg范围内线性关系良好,平均回收率为96.63%,RSD值为0.99%。结论此法简便、快速,适用于三七破壁粉粒的含量测定,为进一步研究三七破壁粉粒的质量打下了基础。

白芍微粉细胞破壁率的测定

目的:建立白芍微粉细胞破壁率的检测方法。方法:采用细胞计数法,以薄壁细胞为评价指标,考察超细粉碎技术对白芍细胞破壁率的影响,测定白芍微粉的细胞破壁率。结果:白芍细粉称样量与完整细胞计数的回归分析结果表明,两者呈显著相关性。白芍经超细粉碎后细胞破壁率为97.01%。结论:白芍粉末细胞计数方法简便,稳定,可靠。

黄芪破壁饮片煎煮、冲泡与传统饮片煎煮后5种有效成分溶出含量比较

目的:比较黄芪破壁饮片煎煮、冲泡与传统饮片煎煮后有效成分溶出含量的差异,为黄芪破壁饮片临床应用提供参考。方法:通过正交试验确定黄芪破壁饮片和传统饮片最优的煎煮工艺[液料比(m L/g)、煎煮次数、煎煮前浸泡时间(min)]以及破壁饮片最优冲泡工艺[水温(℃)、液料比、冲泡次数],在各自的最优工艺下比较5种成分(黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素)在不同煎煮/冲泡时间点的溶出含量差异。结果:黄芪破壁饮片按最优煎煮工艺(液料比50∶1,煎煮前不浸泡,煎煮2次)煎煮5~10 min时其有效成分溶出含量已达到传统饮片煎煮(煎煮前浸泡30 min,液料比50∶1,煎煮3次)30 min的溶出含量;其在最优冲泡工艺(液料比75∶1,水温100℃,冲泡3次)下有效成分可以达到传统饮片煎煮时溶出含量的80%~90%。结论:黄芪饮片经过破壁后有效成分溶出速率更快,可以免去煎煮前浸泡时间,并减少煎煮时间、次数,煎煮效率显著提高;临床使用时可采用冲泡方式。

超临界二氧化碳处理对油菜蜂花粉破壁的影响

采用超临界二氧化碳对油菜蜂花粉进行处理,通过快速卸压使蜂花粉细胞壁破裂,经扫描电镜观察不同压力对蜂花粉破壁的影响,并比较了超临界二氧化碳破壁油菜蜂花粉和未破壁花粉油脂在脂肪酸组成上的差异。结果表明,超临界二氧化碳压力越高,花粉细胞的破壁效果越好,破壁后与未破壁的蜂花粉油脂脂肪酸组成差异显著。超临界二氧化碳对蜂花粉进行破壁在较低温度下进行,破壁时间短,工艺流程简单,是一种理想的蜂花粉破壁新方法。

多重破壁技术提取葡萄酒泥废酵母β-葡聚糖研究

以葡萄酒泥废酵母为试材,采用高压均质法和冻融法协同破碎酵母细胞壁,并辅以复合蛋白酶和脂肪酶酶解技术,研究多重破壁技术对β-葡聚糖纯度的影响。在单因素实验基础上,利用Box-Behnken实验设计原理,以酵母浓度、均质时间和冻融加水量为实验因素,以β-葡聚糖纯度为响应值,优化葡萄酒泥酵母β-葡聚糖提取工艺。结果表明:葡萄酒泥酵母β-葡聚糖最优提取工艺为均质压力70 MPa,酵母浓度13%,均质时间34 min,冻融加水量25%,在此条件下提取所得酵母β-葡聚糖纯度为91.69%,得率为13.23%,该方法为酵母葡聚糖的开发利用提供了参考依据。

获得最大酵母多糖提取率的破壁方法研究

试验旨在选择获得最大酵母多糖提取率的酵母菌破壁方法。以酵母多糖提取率与细胞破壁率为综合评定指标,首先对超声波破碎、超声波清洗、反复冻融、蛋白酶处理4种方法进行条件优化,选择最适破壁条件;然后将此4种单一的破壁方法与超声波破碎和蛋白酶处理协同方法相比较,确定获得最大多糖提取率的破壁方法。结果表明,当超声波清洗时间达到40min、超声波破碎时间达到50min时,酵母多糖提取率达到最大值;当菌泥加水量和冻融次数分别为15%与3次时,多糖提取率最大;当蛋白酶用量300IU/g、酶解时间15h、pH 5.0、处理温度40℃时,蛋白酶处理的多糖提取率最高。4种破壁方法中蛋白酶处理的效果最佳,对应的多糖提取率为149.81mg/g,破壁率为53.49%。协同破壁处理的提取效果要优于单一的破壁方法,但考虑到协同作用对多糖结构的完整性构成威胁,将蛋白酶处理确定为最佳的酵母菌破壁方法。