小鼠单核细胞RAW264.7的细胞生物学特征

目的观察小鼠单核／巨噬细胞RAW264．7的一般细胞生物学特征。方法用倒置相差显微镜观察细胞的形态特征，胎盘蓝染色细胞计数，绘制细胞生长曲线。半定量逆转录聚合酶链反应观察细胞3～2l天破骨细胞表型和功能基因表达谱变化。结果RAW264.7细胞形态以类圆形和不规则多边形为主，一般含l～2个核，有伪足，细胞胞体较小。细胞生长快，5～6天可汇合。RAW264．7细胞能表达成熟破骨细胞的表型标志基因如核因子KB受体活化子（RANK）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）、基质金属蛋白酶9（MMP9）及骨吸收有关的功能基因如组织蛋白酶K（CaK）、整合素av（integrin av）等。RAW264。7细胞培养3～21天，上述基因的mRNA表达不随培养时间改变。结论RAW264．7具有破骨细胞特征性基因表达谱，是一种较好的破骨前体细胞模型。

胆道梗阻对胆囊动力及Cajal间质细胞形态的影响

目的探讨胆道梗阻诱发急性非结石性胆囊炎（AAC）对胆囊Cajat间质细胞超微结构的影响，并初步探究胆囊平滑肌收缩障碍的可能机制。方法健康成年豚鼠60只，胆总管结扎（BDL）方法构建豚鼠AAC模型。平均分为5组，即假手术对照组（Sham）、BDL12h（BDL-12）、24h（BDL-24）、48h（BDL-48）以及72h（BDL-72）组。到实验时间后收集胆囊标本，HE染色后光学显微镜观察各组胆囊病理改变。每只胆囊取3条肌条（8mm×3mm），固定于恒温浴槽，分别给予不同浓度的八肽胆囊收缩素（CCK-8，10^-10 mmol／L、10＾-9mmol／L、10＾-8 mmol／L、10＾-7mmol／L和10＾-6mmol／L）、乙酰胆碱（Ach，10＾-8mmol／L、10＾-7mmol／L、10＾-6mmol／L、10＾-5mmol／L和10＾-4mmol／L）以及KCI（60mmmol／L），利用张力换能器记录胆囊平滑肌肌条的收缩活动。采用透射电镜检测Sham组、BDL-12组和BDL-72组豚鼠胆囊Cajal间质细胞的形态学改变。结果Sham组和BDL-12组未见明显炎性反应；与Sham组相比，BDL-48组及BDL-72组胆囊组织病理学评分差异有统计学意义（P％0．05）。加入CCK-8、Ach和KCl后，各组胆囊平滑肌收缩振幅均增加，且呈浓度依赖性；与Sham组相比，各组效应值均有下降，有统计学意义（P〈0．05）。与Sham组相比，BDL-12组胆囊Cajal间质细胞形态发生改变，BDL-72组改变更为明显。结论胆道梗阻可以诱发AAC。在AAC早期胆囊炎症尚未发生时便可能有胆囊平滑肌的收缩障碍存在，而胆囊Cajal间质细胞可能是收缩障碍的一个重要中间环节。