快速动眼睡眠剥夺后GRP78、GRP94在大鼠大脑皮质、海马及延髓中的表达

目的研究不同时间快速动眼(REM)睡眠剥夺对大鼠皮质、海马及延髓葡萄糖调控蛋白(glucose-regulated protein,GRP)表达的影响。方法大鼠随机分为睡眠剥夺1、3、5、7d(SD 1 d,SD 3d,SO 5d,SD 7d,n=10)组、剥夺7d后恢复睡眠6、12h(SD 7d/RS 6h,SD 7d/RS 12h,n= 10)组、环境对照(TC,n=10)组和空白对照(CC,n=10)组。采用改良多平台睡眠剥夺法进行不同时间REM睡眠剥夺。应用免疫组织化学方法及半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测脑组织标本中GRP78、GRP94表达分布规律及时空的变化。结果睡眠剥夺d1皮质、海马区GRP78、GRP94蛋白表达增多(与TC、CC组比较,P<0.05),d 3达高峰,d 5、7与TC、CC组比较无显著差异(P>0.05);延髓区无明显改变;恢复睡眠后只有延髓区GRP94表达增加。RT-PCR显示睡眠剥夺l d GRP78转录增加,d 3达峰值,d 5、7转录无增加;GRP94转录在剥夺期间无增加;恢复睡眠后GRP78、GRP94 mRNA增加。睡眠剥夺d 3 GRP蛋白表达改变皮质区最为明显(P<0.01),其次为海马区(P<0.05)。结论短时间睡眠剥夺后GRP78、GRP94表达渐升高,可能是内质网启动了自身稳定调节的保护功能;长时间睡眠剥夺导致内质网功能障碍,GRP78、GRP94表达下降。皮质区对睡眠剥夺引起内质网应激的保护性反应最为强烈。

Balb/c小鼠静脉注射刀豆蛋白A致大脑皮层内MAPEG基因表达变化及环孢素影响

目的：探索刀豆蛋白A（Con A）致小鼠免疫性炎症时,脑内花生四烯酸和谷胱甘肽代谢膜关联蛋白（MAPEG）家族蛋白的mRNA表达谱,及免疫抑制剂环孢素A（Cs A）对其表达的调控。方法：雄性Balb/c小鼠尾静脉注射Con A,20 mg/kg,制备免疫性炎症模型。另设尾静脉注射Cs A150 mg/kg预给药。采用RT-PCR检测小鼠大脑皮层内MAPEG家族蛋白在mRNA水平的基因表达情况。结果：采用RT-PCR测得未经Con A处理小鼠大脑皮层内,mGST1、mGST3、LTC4S、FLAP和mPGES-1 mRNA均有不同程度表达,但未见mGST2 mRNA表达。给Con A后8 h,无论是否以Cs A预处理,脑内mGST1 mRNA表达显著增加,达到未处理组的1.2-1.5倍;而LTC4S、FLAP和mPGES-1 mRNA表达均未明显受Con A影响。结论：小鼠尾静脉注射Con A可诱导大脑皮层mGST1 mRNA表达上调,但未明显影响MAPEG其它5个成员;同时Cs A未能抑制该变化,提示Con A诱导的免疫性炎症对脑内花生四烯酸类炎症介质代谢影响不明显,但可能涉及氧化应激病理过程。

猫脊髓—丘脑中央外侧核—皮质通路在丘脑水平的突触联系

本文应用顺行溃变和 HRP 逆行追踪相结合的方法,首次在电镜水平对猫丘脑中央外侧核内脊丘系终末与丘脑皮质投射神经元之间的突触联系进行了研究.首次发现在丘脑中央外侧核内,脊丘系终末与该核内投射至前乙状回的神经元及投射至前上薛氏回和中上薛氏回前端的神经元之间,形成直接的轴—树突触联系。为脊髓—丘脑中央外侧核—皮质通路的确立提供了有价值的突触学证据.此外,在中央外侧核内,脊丘系终末和丘脑皮质投射神经元还分别与其它突触成份形成突触联系.本文研究结果为丘脑痛觉整合作用机制的研究,为神经外科痛治疗中的板内核损毁理论提供有价值的形态基础。

麝香酮联合灯盏花素对TBI大鼠脑血流量及caspase-3蛋白表达的影响

目的探讨麝香酮联合灯盏花素治疗创伤性颅脑损伤(TBI)大鼠的治疗效果,并与单用灯盏花素进行比较。方法选择SD大鼠50只,随机分为假手术组、TBI模型组、麝香酮组(1 mg·kg-1)、灯盏花素(200 mg·kg-1)组和联用组,均n=10。采用液压打击法制造大鼠左侧TBI模型,假手术组只开骨窗。分别于制模前6 h、30 min,制模后30 min、6 h给予相应剂量的灯盏花素或麝香酮灌胃给药。激光多普勒血流仪检测各组制模前30 min及制模后30 min、6 h、12 h和24 h的额叶大脑皮质血流量(CBF)变化。制模后24 h,检测大鼠学习记忆能力、脑含水量及caspase-3蛋白表达的情况。结果与模型组比较,麝香酮组各指标无显著差异(P>0.05),灯盏花素组在制模后12 h、24 h CBF显著提高(P<0.05),联用组在各时间点CBF均显著高于模型组(P<0.01)。联用组较模型组和灯盏花素组学习记忆能力均显著提高(P<0.05或P<0.01),脑含水量显著降低(P<0.01),且caspase-3阳性细胞的表达显著降低(P<0.01)。结论麝香酮联合灯盏花素治疗急性重型TBI比单用灯盏花素具有更好的治疗作用。

苯并[a]芘通过P53/PUMA通路介导大鼠脑皮质细胞凋亡研究

目的探讨P53/P53上调凋亡调控因子(PUMA)通路在苯并[a]芘(B[a]P)所致脑皮质神经细胞凋亡中的作用。方法无特定病原体级健康雄性SD大鼠45只随机分为空白对照组、溶剂对照组和低、中、高剂量组,每组9只。3个剂量组分别予1.00、2.50和6.25 mg/kg体质量的B[a]P(以橄榄油溶解),溶剂对照组予1.00mL/kg体质量橄榄油,隔日腹腔注射染毒12周,空白对照组不作任何处理。大鼠染毒结束处死后,每组随机取3只采用TUNEL法检测脑皮质组织细胞凋亡率,余下6只大鼠采用硫代巴比妥酸法和水溶性四氮唑-1法分别检测脑皮质组织丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活力,采用免疫印迹法检测脑皮质组织P53和PUMA蛋白相对表达水平。结果低、中和高剂量组大鼠脑皮质细胞凋亡率均分别高于空白对照组和溶剂对照组(P<0.01),高剂量组大鼠脑皮质细胞凋亡率均分别高于低和中剂量组(P<0.01)。高剂量组大鼠脑皮质组织MDA水平分别高于其余4组(P<0.01),SOD活力均分别低于其余4组(P<0.01);中剂量组大鼠脑皮质组织SOD活力低于溶剂对照组(P<0.05)。3个剂量组大鼠脑皮质组织P53和PUMA蛋白的相对表达水平均分别高于空白对照组和溶剂对照组(P<0.01);大鼠脑皮质组织P53和PUMA蛋白相对表达水平均随B[a]P染毒剂量的增加而增加(P<0.05),呈剂量-效应关系。结论 B[a]P亚慢性染毒可导致大鼠脑皮质组织细胞凋亡,可能机制是B[a]P引起大鼠脑神经细胞氧化应激,通过P53/PUMA通路介导脑皮质细胞凋亡。

针刺“百会”“足三里”对血管性认知障碍模型大鼠认知功能的影响

目的观察针剌“百会”“足三里”对血管性认知障碍（vascular cognitive impairment．VCI）模型大鼠认知功能的影响，探讨其作用机制。方法采用颈内动脉微栓子注入法制备VCI大鼠模型。按随机数字表法分为假手术组、模型组、阳性药物组、针刺组，每组12只。造模2周后，针刺组大鼠电针“百会”“足三里”，1次／d，20min／次；阳性药物组灌胃盐酸多奈哌齐片混悬液0．5206mg／kg，连续干预30d。采用水迷宫实验测试大鼠的认知学习能力，生化法检测大鼠皮层SOD、GSH-Px、MDA、过氧化氢（hydrogen peroxide，H202）含量。结果与模型组比较，针剌组、阳性药物组大鼠穿越平台次数[（7．5±1．9）次、（6．8±2．2）次比（3．7±1．0）次]增加（P〈0．05），目标象限总路程[（495．4±89．4）cm、（487．6±96．2）cm比（341．4±67．3）cm]增加（P〈0．05）；针刺组、阳性药物组大鼠皮层中SOD[（17-3±3．3）U／mg、（15．1±2．5）U／mg比（9．7±4．9）U／mg]水平升高（P〈0．05），MDA[（9．1±2．2）μmol／L、（8．4±3．7）p．mol／L比（15．2±4．4）gmol／L]、H202[（85．2±16．2）μmol／L、（82．1±13．2）μmol／L比（114．7±24．8）μmol／L]含量降低（P〈0．05）；针刺组GSH-Px[（14．5±3．7）U／mg比（9．0±2．5U／mg）]活力升高（P〈0．05）。结论针刺“百会”“足三里”可改善VCI大鼠的认知能力，提高皮层中总SOD及GSH．Px活力，降低MDA、H202含量，增强机体抗氧化能力，同时抑制过氧化反应，改善自由基的代谢。