携带mcr-1鸡源大肠杆菌耐药性及传播特性的初步分析

为研究携带mcr-1鸡源大肠杆菌的耐药性、耐药基因的携带情况及mcr-1基因的传播特性,本研究以从河南、湖北、江西等7个省份分离的182株鸡源大肠杆菌作为研究对象,采用PCR方法扩增其mcr-1基因,并对mcr-1阳性菌株携带的其他耐药基因进行检测。结果显示,在182株大肠杆菌中,mcr-1基因阳性率达到18.13%(33/182)。33株mcr-1阳性菌株中,bla TEM、tet A、bla CTX-M-1G基因检出率最高,分别为100%(33/33)、69.7%(23/33)、48.48%(16/33)。tet M及bla OXA-10基因检出率最低,均为3.03%(1/33)。通过接合试验对mcr-1基因的传播进行了研究,并采用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)对接合子进行验证,结果显示,共获得19株接合子。采用微量肉汤稀释法,测定mcr-1阳性菌株及其接合子的最小抑菌浓度(MIC),结果显示,mcr-1阳性菌株对黏菌素全部耐药。MIC在4μg/m L~64μg/m L;多数mcr-1阳性菌株对阿莫西林、头孢噻呋、庆大霉素、恩诺沙星、多西环素、阿米卡星等6种药物呈多重耐药;与受体菌相比,接合子除对黏菌素耐药值升高外,57.89%(11/19)的接合子对庆大霉素耐药,对其他药物无明显变化。以上结果表明,mcr-1阳性鸡源大肠杆菌对黏菌素的耐药情况严重,且存在多重耐药现象。mcr-1基因可在细菌间水平传播,造成大范围的大肠杆菌对黏菌素耐药,氨基糖类耐药基因可能和mcr-1位于相同的可转移元件上。本研究创新性地利用PFGE对mcr-1菌株的疑似接合子进行确证,对mcr-1接合转移机制进行研究,为减缓黏菌素及多重耐药菌株的传播提供实验依据。

鸡源致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

为了解鸡源致病性大肠杆菌的生物学特性和耐药性,试验通过采集病料、细菌分离培养、16S rRNA基因鉴定、致病性试验、药敏试验等方法。结果表明:分离出的20株细菌的培养特征、镜检特征均符合大肠杆菌特征;16S rRNA基因序列经BLAST比对与大肠杆菌同源性达99.9%～100%,确定20株分离菌为鸡源大肠杆菌;20株大肠杆菌的致病力为40%～100%;10株鸡源致病性大肠杆菌对15种抗菌药物均呈现多重耐药,耐药率为33.3%～93.3%,耐药情况较严重和复杂。

鸡源大肠杆菌临床株的分离鉴定及药敏试验

研究2株分离自广东博罗地区某养鸡场和梅州地区某养鸡场的鸡源大肠杆菌进行分离鉴定和药物敏感试验,根据细菌培养特性试验与分子生物学的鉴定,确定分离菌株为鸡源性大肠杆菌并分别命名为ECGD2010-1株和ECGD2010-2株。对分离鉴定所得菌株进行红霉素、青霉素、氨苄西林、头孢唑林、诺氟沙星、环丙沙星、复方新诺明、氯霉素、庆大霉素和丁胺卡那霉素的药物敏感试验。结果显示,ECGD2010-1株高度耐药,仅对庆大霉素和丁胺卡那霉素敏感;ECGD2010-2株除对氨苄西林耐药外,对其他抗生素均表现出高度敏感。

山东省部分地区鸡源大肠杆菌与低致病性H9亚型禽流感病毒混合感染的调查

为了解近年来山东省鸡大肠杆菌与H9亚型禽流感病毒混合感染的情况,对2012年1月份至2014年3月份期间山东省部分地区送检的1 816份病料进行研究,通过大肠杆菌的分离鉴定和H9亚型禽流感病毒的血凝抑制试验,结果分离出大肠杆菌116例,占总病料的6.39%;检出H9亚型禽流感病毒495例,占总病料的27.26%;检出大肠杆菌和H9亚型禽流感病毒混合感染46例,占总病料的2.53%;且混合感染检出率在第一、四季度较高;青岛、聊城地区大肠杆菌与H9亚型禽流感混合感染检出率高于潍坊和烟台。调查结果表明临床鸡大肠杆菌和H9亚型禽流感病毒混合感染现象比较普遍,严重威胁着山东地区养殖业的发展。