Effects of Subchronic Aluminum Exposure on Amino Acids Neurotransmitters in Chicken Brain

To investigate the effects of aluminium （Al） exposure on amino acid neurotransmitters, the chickens with different levels of subchronic Al poisoning were estabolished by continuous peritoneal injection of fixed volume and different concentrations of gradient of aluminium trichloride （AlCl3）. The levels of amino acid neurotransmitters in chicken brains were determined by high performance liquid chromatography （HPLC） after being exposed of Al for 60 days, and Al levels in serum and brain tissue were determined by atomic absorption spectrophotometry （AAS）. The results showed that Glu levels increased with the increase of Al, but there was no significant difference compared with the control. The levels of Al, Asp, Gly, GABA and Tau were significantly higher in Al-treated groups than those in the control. The results indicated that Al intoxication led to excitatory neurotoxicity.

3种培养基对鸡肉产品中两类耐药菌培养的影响

目的:评估不同培养基对鸡肉产品表面四环素耐药(T^(r))菌和磺胺耐药(S^(r))菌菌群的培养效果差异。方法:基于高通量测序技术,分析分别在脑心浸液肉汤(BHI)、胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)和平板计数琼脂(PCA)3种培养基上培养获得的冷鲜鸡和鸡肉熟食表面T^(r)菌和S^(r)菌的菌群结构及丰度。结果:在冷鲜鸡表面鉴定到的101个属的耐药细菌中,仅在BHI、TSA和PCA培养基上获得培养的特有T^(r)菌属各有30,5,3个,特有S^(r)菌属各有9,8,14个;在鸡肉熟食样品表面鉴定到的50个属的耐药菌中,3种培养基上的特有T^(r)菌属分别为3,2,1个,特有S^(r)菌属分别为1,6,0个。耐药菌属丰度差异的Metastat分析结果表明,BHI和TSA对耐药菌群的结构影响具有较高的相似性,冷鲜鸡表面4种T^(r)菌(气单胞菌属Aeromonas spp.、水栖菌属Enhydrobacter spp.、乳杆菌属Lactobacillus spp.和泛菌属Pantoea spp.)和2种S^(r)菌(肠球菌属Enterococcus spp.和乳杆菌属Lactobacillus spp.)在PCA培养基上获得培养的稳定性及丰度均较高。结论:不同培养基获得耐药菌的种类及丰度存在差异,应汇总多种培养基培养所得菌群的测序信息,才能完整描述鸡肉样品表面耐药菌的组成。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇对雏鸡脂质过氧化反应及脑部形态结构的影响

[目的]本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)对雏鸡脑组织形态结构、血清及脑组织中氧化与抗氧化指标的影响,探讨DON的神经毒理作用。[方法]选取120只健康的1日龄海兰蛋雏公鸡,预饲1周后,按单因素试验设计,随机分成4组,每组30只。对照组和试验组饲喂相同的全价饲料,试验组中的低剂量组、中剂量组和高剂量组按采食量分别添加0.27、1.68和12.21 mg·kg-1剂量的DON灌胃染毒,对照组灌服等量的生理盐水,试验从第8天开始,每隔7 d染毒1次,共染毒5次。试验期为36 d。试验结束时,所有雏鸡经翅下静脉采血,分离血清,用于测定过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量等指标;同时每组随机剖杀20只鸡,迅速取脑组织,一部分用于观察脑组织的病理变化及神经细胞的超微结构,另一部分用于测定氧化与抗氧化指标。[结果]与对照组相比,试验组雏鸡血清CAT、SOD和脑组织SOD、GSH-Px活性及NO含量显著降低(P<0.05),各试验组雏鸡血清MDA和高剂量组脑组织MDA含量显著升高(P<0.05),中剂量组和高剂量组血清T-AOC、GSH-Px和脑组织CAT活性及NO含量显著降低(P<0.05),高剂量组脑组织T-AOC活性显著降低(P<0.05);DON可引起试验组雏鸡脑组织产生不同程度的噬神经现象,并伴随部分神经纤维断裂;大脑皮质超微结构显示,随着染毒剂量的增加,试验组鸡脑组织神经元胞体出现不同程度的变性,且与剂量呈正相关。[结论]DON可引起雏鸡血清及脑组织脂质过氧化反应,造成脑组织不同程度损伤,即DON可对雏鸡产生一定的神经毒性。

动物学综合实验在教学中培养探究性的实践

以动物学综合实验——家鸡脑标本的制作与观察为例,从药品的配制、实验材料的准备、实验整个操作程序的设计,到最后的实验结果,让学生独立完成。起到了指导学生探究和掌握科学方法的作用,让学生在体验科学探究的过程中,获得初步的科学探究能力,培养其探索和创新意识,从而提高生物科学素养。

DON暴露对雏鸡神经递质及钙调蛋白含量的影响

【目的】通过DON暴露体内试验,根据雏鸡脑组织中神经递质含量及钙调蛋白(CAM)含量的变化,研究DON对雏鸡的神经毒性作用。【方法】选取120只健康1日龄海兰蛋鸡(公)预饲1周后,按单因素试验设计随机均分为DON低、中、高剂量组和对照组,对照组和试验组饲喂相同的全价日粮。DON低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按采食量中含DON 0.27,1.68和12.21mg/kg的剂量灌胃,对照组灌服等量的生理盐水。试验从第8天开始,每隔7d染毒1次,共染毒5次。试验期为36d。试验结束时,每组随机屠宰20只鸡,迅速取出脑组织,检测神经递质含量和CAM含量的变化。【结果】经高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FD)检测,雏鸡脑组织中未发现5-羟色胺吲哚乙酸(5-HIAA);与对照组相比,DON高剂量组雏鸡脑组织中去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)含量显著升高(P<0.05),而多巴胺(DA)含量显著降低(P<0.05)。与对照组相比,DON中、高剂量组雏鸡神经细胞内游离钙([Ca2+]i)浓度和脑组织中CAM含量显著降低(P<0.05),不同DON剂量组CAM mRNA基因相对表达量均显著降低(P<0.05)。【结论】DON暴露可引起雏鸡神经钙稳态变化,并影响部分神经递质的分泌,对雏鸡具有一定的神经毒性作用。

紫外分光光度法测定动物脑组织中牛磺酸含量

目的 用紫外分光光度法测定补充不同牛磺酸水平的大鼠和雏鸡脑组织中牛磺酸含量。方法 1将清洁级 SD雄性断乳大鼠随机分为四组 ,每组 8只 ,A对照组 ,B补充 0 .6 %牛磺酸 ,C补充 1.35 %牛磺酸 ,D补充 3.0 %牛磺酸。另将 1、3、8周龄海兰褐雏鸡随机分为四组 ,每组 5只 ,各组补充牛磺酸的量与大鼠相同。喂饲4周后 ,处死动物 ,取出脑组织存于 - 70℃待测。2用离子交换色谱法分离提取脑组织中的牛磺酸 ,用紫外分光光度法测定牛磺酸含量。结果 补充牛磺酸的大鼠及雏鸡脑牛磺酸含量显著高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,测得方法回收率范围为 92 .5 %～ 10 5 .5 % ,最佳吸收波长为 35 5 nm。结论 该方法快速、简便而且重现性好 ,不受大型仪器限制 。

高铜对雏鸡脑组织抗氧化酶活性的影响

本研究旨在探讨高铜对雏鸡脑组织抗氧化酶活性的影响。将360羽1日龄艾维茵肉鸡健雏随机分为6组,分别喂以对照日粮（10.89 mg.kg^-1）和高铜日粮（Cu 100 mg.kg^-1,高铜I组;Cu 200 mg.kg^-1,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg.kg^-1,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg.kg^-1,高铜Ⅳ组;Cu 800 mg.kg^-1,高铜V组）6周。试验第14、28、42天每组随机抽取5羽鸡剖杀后,测定脑组织胆碱酯酶（CHE）、单胺氧化酶（MAO）、过氧化氢酶（CAT）、铜锌超氧化物歧化酶（Cu-Zn-SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性。脑组织CHE和CAT活性随日粮铜含量的升高而降低,高铜Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V组与对照组比较差异极显著（P〈0.01）;脑组织MAO活性随日粮铜含量的升高而升高,高铜Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和V组与对照组比较差异显著或极显著（P〈0.05或P〈0.01）;脑组织Cu-Zn-SOD和GSH-Px活性,高铜I、Ⅱ组显著或极显著高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,高铜Ⅲ、Ⅳ和V组极显著降低（P〈0.01）。日粮铜水平在400~800 mg.kg^-1时,脑组织的抗氧化酶活性降低,脑组织的抗氧化功能下降。

铝暴露对鸡大脑组织钙稳态的影响

以1周龄海蓝白蛋鸡为实验对象,采用连续腹腔注射的方法建立铝中毒模型,研究铝对鸡大脑组织钙稳态的影响。实验设对照、低、中、高4个剂量组,暴露剂量分别为0、18.31、27.47、36.62mg/(kg·d)(Al3+),染铝60d后,用原子吸收分光光度法检测鸡大脑组织中铝的含量,以Fura-2/AM作为细胞内游离钙离子荧光指示剂,检测鸡大脑神经细胞中游离钙离子浓度([Ca2+]i),采用半定量RT-PCR法检测鸡大脑组织中钙调蛋白(CaM)mRNA的表达。结果表明,各染铝组鸡大脑组织铝含量、神经细胞[Ca2+]i显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),CaMmRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05,P<0.01);且呈剂量-效应关系。提示铝暴露可致鸡大脑神经细胞内钙稳态失调。

双向凝胶电泳分析感染禽脑脊髓炎病毒鸡脑组织蛋白表达图谱

本研究采用双向凝胶电泳分离接毒组(感染AEV)和对照组(不接毒)的鸡脑组织全蛋白,经过银染后,用Image ScannerⅡ光密度扫描仪获取凝胶图像,并用Image Master 2D Platinum软件进行差异蛋白分析。对蛋白斑点编辑后,接毒组中检测到793个蛋白点,对照组中检测到827个蛋白点,两张图谱的匹配蛋白点数为614个,凝胶匹配率为75.8%。差异蛋白分析后,发现在接毒组中有16个蛋白点表达量显著下调,这些蛋白质成份可能与组织细胞病变有关,它们将为认识禽脑脊髓炎的发病机理提供线索。

V_E缺乏对雏鸡脑组织的氧化状态及神经细胞凋亡的影响

采用低 VE和添加不饱和脂肪酸的日粮饲喂 1日龄雏鸡 ,建立了 VE缺乏实验动物模型 ,检测其脑组织 (大脑和小脑 )中丙二醛和活性氧的含量及神经细胞凋亡的数量 ,并进行了相关性分析。结果表明 ,VE缺乏雏鸡脑组织中的丙二醛和活性氧含量及神经细胞凋亡的数量显著高于健康对照组 (P<0 .0 5 ) ,细胞凋亡的数量与大、小脑组织中丙二醛和活性氧含量呈显著的相关性 (相关系数分别为 0 .75 0 2、0 .815 5和 0 .8170、0 .6 931) ,说明 VE缺乏雏鸡脑组织处于氧化应激状态 。

牛磺酸的不同摄入水平对生长期鼠和鸡脑发育与神经递质作用的研究

目的 观察不同水平牛磺酸对生长期大鼠和鸡脑神经递质代谢及脑发育的影响 ,探讨其在不同种属动物体中发挥生物效能的作用机制及特点。方法 采用幼鼠和雏鸡作为实验对象 :( 1)健康清洁级、断乳雌性SD大鼠 3 2只 ,按体重随机分为 4组。A组为对照组 ,B、C和D为 3个水平 (即 0 6% ,1 3 5 %和 3 % )牛磺酸补充组 ;( 2 )健康海兰褐壳蛋雏鸡 ( 1,3周龄 ) 4 0只 ,每个周龄组按体重随机分为 4组 ,A组为对照组 ,B、C、D为牛磺酸补充组 (即 0 12 % ,0 6%和 1 3 5 % )。结果 ( 1)牛磺酸能显著提高幼鼠和雏鸡脑牛磺酸积累和蛋白质水平 ,且呈现一定的剂量 -反应关系 ;( 2 )一定浓度的牛磺酸可增加雏鸡脑AChE的合成 ,但高于此范围则表现出抑制作用 ;( 3 )牛磺酸可抑制幼鼠和雏鸡脑 5 -HT和 5 -HIAA的合成。结论 牛磺酸能调节幼鼠和雏鸡脑某些神经递质的释放 ,且在不同种系动物对补充牛磺酸反应性不同。

高温对淮南麻黄鸡血脑屏障的影响

为探究高温对淮南麻黄鸡血脑屏障的影响,将120羽107日龄淮南麻黄鸡随机均分为四组:常温对照组(Ⅰ组)、常温注射组(Ⅱ组)、高温对照组(Ⅲ组)、高温注射组(Ⅳ组)。Ⅰ、Ⅱ组于常温下饲养(21~23℃、RH60%~70%),Ⅲ、Ⅳ组每天高温处理3h(34~37℃、RH 45%~50%),试验持续2周。试验第7、14天,每组随机抽取5羽鸡,Ⅱ、Ⅳ组鸡一次静脉注射γ-氨基丁酸(GABA)(每千克体重8.87mg),Ⅰ、Ⅲ组鸡注射同等剂量的生理盐水,注射0.5h后断头取脑,冰浴上迅速采集脑组织。使用ELISA法分别检测第7、14天四组鸡脑组织中的GABA含量;采用电镜技术观察第14天常温对照组和高温对照组中鸡脑组织的血脑屏障超微结构,并用qRT-PCR技术和Western blot技术检测其脑组织中紧密连接蛋白ZO-1和Occludin的mRNA及蛋白质的表达量。结果显示:试验第7天,Ⅰ、Ⅱ组鸡脑组织中GABA含量无显著差异(P>0.05),Ⅳ组鸡脑组织中GABA含量极显著高于Ⅲ组(P<0.01);试验第14天,Ⅰ、Ⅱ组间鸡脑组织中GABA含量无显著差异(P>0.05),Ⅳ组鸡脑组织中GABA含量高于Ⅲ组,但差异不显著(P>0.05)。与常温对照组相比,高温对照组鸡的血脑屏障结构受到破坏,电镜下观察到大脑皮层血管内皮细胞线粒体嵴有的断裂、有的空泡变性,血管内皮细胞间紧密连接间隙增宽,内皮细胞外基膜增厚、结构疏松;高温对照组鸡脑组织ZO-1的mRNA相对转录量极显著低于常温对照组(P<0.01),Occludin的mRNA相对转录量显著低于常温对照组(P<0.05);高温对照组鸡脑组织ZO-1和Occludin蛋白的相对表达量极显著低于常温对照组(P<0.01)。高温破坏了鸡的血脑屏障,脑组织中ZO-1和Occludin表达下降可能是其原因之一。

nov基因的表达与脑的种系发育分化平行相关

用地高辛标记的cRNA探针原位杂交组织化学方法研究了鲢、鸡、牛、犬和猫脑肾母细胞瘤过度表达基因阳性神经元的比较发育。结果显示 ,低等脊椎动物鲢脑仅有少量novmRNA阳性神经元 ,分布于延髓的迷走神经背核、三叉神经背核、丘脑前核、丘脑后核、下丘脑背侧核、下丘脑外侧核。鸡脑阳性神经元除广泛分布于脑干外 ,小脑、丘脑的多数核团、下丘脑的背侧核、腹侧核和后核以及大脑纹状体等多数脑区也有一定分布。哺乳动物牛、犬和猫脑中novmRNA阳性神经元广泛分布 ,在脑干、小脑、间脑和大脑都检测到强烈阳性信号。以上结果表明 ,在从低等脊椎动物到高等脊椎动物的进化过程中nov基因的表达也从低级中枢向高级中枢扩展 ,提示该基因的表达与脑的种系发育、脑功能的分化平行相关。

Ghrelin免疫反应阳性神经元在鸡脑中的定位分布、发育性变化及禁食对其影响

本试验应用免疫组织化学方法和显微图像分析技术,研究了鸡脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的定位分布,分析了2、16、30、44、58日龄鸡下丘脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的发育性变化规律,并探讨了30日龄鸡分别禁食12、24、48h及重新采食4h对下丘脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的影响。结果表明,在下丘脑弓状核、室旁核、内侧核、室周区、内侧区、外侧区,丘脑卵圆核、圆核,中脑丘中央灰质层、红核,脑桥前庭腹外侧核,小脑内侧核、小脑皮质颗粒层,大脑皮质多形细胞层等,均可观察到Ghrelin免疫反应阳性神经元;随着日龄的增长,下丘脑主要核团中的Ghrelin免疫反应阳性神经元的数量增多,免疫反应强度增强,但细胞密度下降;在禁食条件下,下丘脑Ghrelin免疫反应阳性神经元的免疫反应强度减弱,细胞密度下降。

高铜对雏鸡脑组织细胞凋亡影响的研究

360羽1日龄艾维茵肉鸡随机分为6组,分别喂以对照日粮(Cu 10.89 mg.kg-1)和高铜日粮(Cu 100mg.kg-1,高铜I组;Cu 200 mg.kg-1,高铜Ⅱ组;Cu 400 mg.kg-1,高铜Ⅲ组;Cu 600 mg.kg-1,高铜Ⅳ组;Cu800 mg.kg-1,高铜V组)6周,以流式细胞术和免疫组化染色检测高铜对脑组织细胞凋亡的影响。流式细胞仪检测,高铜Ⅲ组、高铜Ⅳ组和高铜V组脑组织细胞凋亡比例升高,与对照组比较差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)。免疫组化染色检测脑组织Bax和Bcl-2蛋白表达显示,高铜Ⅲ组、高铜Ⅳ组和高铜V组Bax表达阳性细胞比例较对照组极显著升高(P<0.01),而Bcl-2表达阳性细胞比例较对照组显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。同时,高铜Ⅲ组、高铜Ⅳ组和高铜V组脑组织铜锌超氧化物歧化酶活性显著降低(P<0.05或P<0.01)和丙二醛含量显著升高(P<0.05或P<0.01)。结果表明,日粮铜含量达到或超过400 mg.kg-1可诱导雏鸡脑组织细胞凋亡。

乌鸡和珍珠鸡杂交体胚胎脑干结构观察及形态学指标测定

[目的]探究乌鸡和珍珠鸡杂交体解剖生理结构。[方法]从胚胎发育及形态解剖方面对乌鸡和珍珠鸡杂交体胚胎脑干结构进行观察及形态学指标进行测定。[结果]乌鸡和珍珠鸡杂交体外部形态表现，不产蛋，内生殖器官为睾丸，生殖系统发育异常，食性大。抗病性强。选用人工孵化鸡胚脑干组织，通过透射电镜技术进行光电镜研究表明：神经细胞具突起，胞体直径10～20μm，长度80～160μm.丝足直径0．2μm，上有充满囊泡的丘状结构，每个丘状结构中有250μm的小泡，数目差异大。[结论]该研究为经济禽类的饲养提供了解剖生理学依据。

铝中毒雏鸡脑组织SOD活性及铜锌锰含量变化

采用连续腹腔注射固定体积不同浓度梯度三氯化铝法建立不同程度的铝中毒雏鸡模型,采用火焰原子吸收法检测雏鸡大脑和小脑组织中微量元素铜、锌、锰含量及总SOD和CuZn-SOD活性。结果显示,随着染铝浓度的升高,雏鸡脑组织中微量元素铜、锌、锰含量及总SOD和CuZn-SOD活性降低,与对照组相比,组间差异显著(P<0.05,P<0.01),且存在剂量-效应关系,提示铝中毒雏鸡脑组织SOD活性下降及铜、锌、锰代谢紊乱。

静宁鸡胚脑发育的形态学观察

静宁鸡胚胎孵化,从E8开始到出壳,每天随机取出5个鸡胚,甲醛固定,测量体重、头重和脑重,肉眼及体视镜观察鸡胚脑的形态特征,并取下小脑,石蜡包埋,连续切片,H.E.染色,光学显微镜观察、照相.结果：鸡胚的体重和头重随日龄而增加,E8~E12增重缓慢,从E13开始加速生长;而胚脑的增长与体重和头重的增长类似,即从E13开始生长快速.E13时,小脑皮质分成不明显的3层结构：薄层的内颗粒层,Purkinje细胞层和厚的外颗粒层,此时观察不到髓质;而到E16,外颗粒层变薄,Purkinje细胞层变厚,出现少量髓质;E20时小脑皮质分为明显的分子层、Purkinje细胞层和颗粒层,髓质有所增加.结论：静宁鸡胚胎脑的重量随胚胎体重的增重而增加,小脑髓质随着小脑皮质的发育而逐渐发生.

GDNF及BDNF对受损运动神经元的长期修复

为了研究胶质细胞源神经营养因子（ＧＤＮＦ） 及脑源神经营养因子（ＢＤＮＦ） 对切断轴突的新生运动神经元的长期维持存活及促进神经再生的作用， 我们选用出生时单侧切断坐骨神经的雏鸡模型， 用裸ＤＮＡ 转染方法， 在损伤神经附近的肌肉中转染ＧＤＮＦ ｃＤＮＡ 和ＢＤＮＦ ｃＤＮＡ 的真核表达载体，观察在体表达的神经营养因子对损伤的修复作用。结果显示，在体表达的ＧＤＮＦ 在８ 周内能使切断坐骨神经的腰脊髓运动神经元近９０ ％ 维持存活。切断的坐骨神经从断端向远体端再生，最长再生达９ ．５ｍ ｍ 。表达两个因子比单独表达ＧＤＮＦ 对运动神经元的存活无显著性差异。而两个因子协同作用对坐骨神经的再生更为有效，坐骨神经再生最长的可达１５ ．４ｍ ｍ 。

脑源性神经营养因子在鸡形觉剥夺性近视恢复期中的作用

目的观察形觉剥夺性近视(FDM)恢复期中视网膜脑源性神经营养因子(BDNF)水平的变化,探讨BDNF在FDM中的作用。方法鸡雏单眼遮盖建立FDM模型,剥夺眼去遮盖恢复2周,应用免疫组织化学技术检测剥夺眼视网膜神经节细胞层BDNF的表达。结果去遮盖2周后,剥夺眼BDNF阳性细胞数增加。结论形觉剥夺眼去剥夺后,随着近视程度的减轻,视网膜BDNF的表达水平升高。