用正交试验法分析四种表面活性剂的复配性能

用正交试验设计法研究月桂醇聚醚硫酸酯钠、十二烷基硫酸钠、椰油酰胺丙基甜菜碱和月桂酰肌氨酸钠复配的最佳使用比例,摸索四种表面活性剂对泡沫、洗后皮肤水分含量及刺激性的影响。结果显示,在给定的因素水平数里,泡沫高度的优方案为AES:13%,K12:4%,CAB:6%,LS30:5%;洗后皮肤水分含量的优方案为AES:14.5%,K12:3%,CAB:6%,LS30:2%;刺激性最小的优方案为AES:11.5%,K12:1%,CAB:6%,LS30:3%。通过试验数据分析可知,AES对泡沫高度和鸡胚试验评分有显著影响;K12对泡沫高度和洗后皮肤水分含量有显著影响;CAB对泡沫高度有影响;而LS30有助于降低鸡胚评分,在3%时效果最好。

江苏部分地区鸡胚源沙门氏菌的分离鉴定及耐药性分析

为调查江苏部分地区未出壳鸡死胚中沙门氏菌感染情况,试验通过细菌分离培养鉴定、MLST分型对来自13家种鸡场的2433个未出壳的鸡死胚进行沙门氏菌分离鉴定,并通过药物敏感性试验确定分离株对不同药物的敏感程度和多重耐药性。结果显示:未出壳鸡死胚沙门氏菌感染率为3.00%,其中鸡白痢沙门氏菌占50.68%(37/73)、肠炎沙门氏菌占41.10%(30/73),同时分离到少量海德尔堡沙门氏菌、科特布斯沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌,分别占4.11%(3/73)、1.40%(1/73)和2.74%(2/73);鸡白痢沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、海德尔堡沙门氏菌、科特布斯沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌分别对应ST92、ST11、ST15、ST582和ST19型;分离株对萘啶酸、链霉素等耐药率较高,分别达86.30%(63/73)和82.19%(60/73),对头孢他啶、厄他培南、氨曲南、阿米卡星表现为敏感,且存在多重耐药性,多重耐药菌株占71.23%(52/73)。结果表明:江苏省部分养鸡场存在一定程度的沙门氏菌感染,尤其是鸡白痢沙门氏菌和肠炎沙门氏菌,分离株耐药情况较为严重,需进一步规范抗菌药的使用。

“无泪配方”的评价体系建立与应用

发用类产品、易触及眼睛的护肤产品以及眼部彩妆上市之前,必须进行眼部刺激测试,以证明该产品对眼睛是安全的。“无泪配方”是这类产品常用的宣称,但是对于“无泪配方”的评估却缺乏相关的标准。本文旨在整合眼刺激相关的评价方法,建立一套更为全面的安全性评估体系,用于筛选和评估“无泪配方”。该评价体系包括第一层级的体外眼刺激测试、体外疼痛受体激活测试,第二层级的动物测试以及第三层级的临床试用测试和临床滴注测试。通过该体系,比较了两款开发中的儿童沐浴配方,筛选出眼刺激更低、更温和的产品。研究结果表明,此评价体系可以有效筛选出“无泪配方”,并为开发这类产品提供支持数据。

鸭病毒性肝炎实验室诊断方法的研究

将鸭病毒性肝炎病毒 (duckhepatitisvirusDHV) (ATCC株 )用鸡胚传一代后 ,测出此病毒的鸡胚半数致死量 (ELD50 )为10 -5.5。通过多次重复试验 ,建立了利用鸡胚中和试验和雏鸭中和试验检测鸭病毒性肝炎 (DVH)的诊断方法。 7株DHV毒株在鸡胚中和试验中的结果是 :胚传一代尿囊液死亡率为 2 / 8～ 5 / 8,1∶10血清中和保护率为 8/ 8,1∶10 0 0肝病料死亡率为 3/ 8～8/ 8,1∶10血清中和保护率为 8/ 8,正常对照全部存活。雏鸭中和试验的结果是 :2 4小时内 1∶10肝病料死亡率为 3/ 8～ 8/ 8,1∶5血清中和保护率为 8/ 8。

应用鸡胚接种试验研究中草药的抗新城疫病毒作用

为了筛选出高效的抗新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)中草药,采用鸡胚接种试验测定了常用清热解毒中草药的体外抗NDV作用。结果表明矮地茶、侧柏叶、贯众、诃子、虎杖、白蔹、夏枯草、黄连对新城疫病毒具有较好的杀灭作用。

中药注射液鸡胚接种抗鸡新城疫病毒研究

为了研究中药与西药奥司他韦(达菲)抗鸡新城疫病毒效果的差异,用珍珠草、华荠苧2味中药制成注射液,采用鸡胚培养法和红血球凝集(HA)试验,检测中药与西药注射液对鸡新城疫病毒的抑制作用。结果表明,中药注射液对鸡胚无毒性作用,并且从鸡胚死亡数、活胚数和HA滴度等方面比较,中药与西药抗病毒效果无差异。表明二者抗病毒效果相似,均能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中增殖。

垂花香薷注射液接种鸡胚抗鸡新城疫病毒研究

鸡新城疫是由新城疫病毒——禽副黏病毒血清1型病毒引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,常呈败血症经过,主要特征是呼吸困难、下痢、神经机能紊乱、黏膜和浆膜出血。发病率和死亡率高,是目前为害养鸡业比较严重的传染病之一。

中药紫草注射液对鸡胚接种后抗新城疫病毒的研究

为研究紫草对新城疫病毒的抑制作用。用鸡胚培养法和血凝试验,测定了4组试验中药紫草对鸡新城疫病毒的作用效果。结果显示:第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药紫草混合液,HA滴度0;第Ⅱ组接种病毒尿囊液与盐酸金刚烷胺混合液,HA滴度4 log2;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度8 log2;第Ⅳ组不接种病毒尿囊液、不给药、HA滴度0。第Ⅰ组与第Ⅲ组差异极显著(P<0.01),第Ⅱ组与第Ⅲ组差异显著(P<0.05)。试验表明,紫草对鸡胚无毒性作用;紫草与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。

鸡胚接种虎杖醇提取液后对新城疫病毒的抑制作用

为研究虎仗对新城疫病毒的抑制作用,用鸡胚培养法和血凝试验测定中药虎仗醇提液对鸡新城疫病毒的作用效果。结果显示,Ⅰ组接种病毒尿囊液与虎杖醇提液,HA滴度0。Ⅱ组接种病毒尿囊液与盐酸金刚烷胺混合液,HA滴度5lg2。Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度9lg2。Ⅳ组不接种病毒尿囊液、不给药、HA滴度0。Ⅰ组与Ⅲ组差异极显著(P<0.01),Ⅱ组与Ⅲ组差异显著(P<0.05)。可见,虎仗醇提液对鸡胚无毒性作用;虎仗醇提液与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。

莪术油注射液鸡胚接种抗新城疫病毒的研究

新城疫也称亚洲鸡瘟或伪鸡瘟,是由新城疫病毒（New castle disease virus,NDV）引起的急性高度传染性疾病。由于疫苗的广泛使用,使该病多以慢性或散发为特点。同时,由于饲养管理不完善、免疫程序不当,以及毒株的变异,使得疫苗预防效果减弱,临床上常表现为非典型新城疫,而对于水禽（鹅、鸭等）则表现为强毒感染,并出现高致死率[1-2]。

垂花香薷挥发油鸡胚接种抗鸡新城疫病毒的研究

用鸡胚培养法和血凝试验,测定了中药垂花香薷挥发油对鸡新城疫病毒的抑制作用。试验结果表明:垂花香薷挥发油对鸡胚无毒性作用;垂花香薷挥发油与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。

NAS制剂在体外对H5N1、H9N2亚型禽流感病毒的杀灭效果研究

采用Klein-Defors悬浮杀灭方法,考察了那氏(NAS)制剂对H5N1和H9N2亚型禽流感病毒的杀灭效果。将不同浓度的NAS制剂药物组与利巴韦林药物对照组与H5N1亚型和H9N2亚型病毒各分别混合10min和30min,后10倍递进稀释成10个稀释度,接种鸡胚尿囊腔。培养一定时间后采集尿囊液进行血凝试验(HA),计算NAS制剂对两种亚型禽流感病毒在不同时间的杀灭率。结果表明,以1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640的稀释浓度与107.63EID50禽流感H5N1亚型病毒液作用10min,病毒杀灭率分别为99.99%、99.99%、32.39%、0、0;作用30min杀灭病毒率分别为100%、99.99%、99.43%、0、0。与108.17EID50H9N2亚型禽流感病毒液作用10min,其杀灭病毒率分别为99.99%、99.99%、32.39%、0、0;作用30min病毒杀灭率分别为100%、99.99%、90%、0、0。提示NAS制剂对这两种病毒都有较好的杀灭作用,而且杀灭效果与时间有关。

Ⅰ型鸭肝炎病毒(MY株)活疫苗毒种的纯粹及生产条件探索

将Ⅰ型鸭肝炎鸡胚化弱毒MY株进行纯粹检验；以100ELD50 0．2mL／枚（含病毒3．0×10^5个拷贝）剂量经鸡胚尿囊腔接种10日龄SPF鸡胚，每隔12h观察并采集鸡胚胚体和尿囊液样本，运用自行建立的检测DHV-1的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量RT-PCR方法检测MY株弱毒的鸡胚增殖规律．结果表明，该毒种符合我国的兽用生物制品规程，毒种纯粹；病毒接种后，鸡胚死亡时间主要集中在48-53h；病毒在感染后的12h，24h，36h，48h和53h时段，鸡胚尿囊液中病毒拷贝数为：3．28×10^2、5．28×10^3、7．01×10^3、3．31×10^5和4.42×10^5；鸡胚胚体病毒拷贝数为：8．46×10^3、1．91×10^6、3．41×10^6、1．36×10^7和1．03×10^7;显示，MY株弱毒经鸡胚尿囊腔接种鸡胚，病毒在胚体中的拷贝数在各时间均高于尿囊液中的拷贝数，且在48-53h达到高峰（1．36×10^7-1．03×10^7）．因此，用鸡胚繁殖MY株弱毒，应以收获鸡胚胚体为主要毒源，收毒时间以鸡胚尿囊腔接种后48～53h为佳．为运用MY株生产Ⅰ型鸭病毒性肝炎弱毒疫苗奠定了基础．

种蛋感染蜡状芽孢杆菌的分离鉴定及其药敏试验

通过生化试验、序列分析和药敏试验等方法,研究了19日龄鸡胚中细菌的存在情况及其耐药性。结果表明:经NCBI Blast比对确定分离的5个菌株均为蜡状芽孢杆菌,与GenBank上登录的蜡状芽孢杆菌KF150385、JX566534、KF475814菌株高度同源,同源性高达99.4%;5株分离菌株间也高度同源(99.9%)。药敏试验结果发现:5株蜡状芽孢杆菌对环丙沙星、麦迪霉素、丁胺卡那、红霉素、新霉素、卡那霉素、庆大霉素、诺氟沙星、氧氟沙星敏感,对多黏霉素B、复方新诺明、青霉素、氨苄西林、头孢氨苄、头孢拉定具有耐药性。

莪术油注射液鸡胚接种抗新城疫病毒的研究

[目的]探讨莪术油对新城疫病毒的抑制和杀灭作用。[方法]用鸡胚培养法和血凝试验,测定莪术油对鸡新城疫病毒增殖的抑制作用。[结果]莪术油对鸡胚无毒性作用;莪术油与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。[结论]结果为莪术油在兽医临床上的应用提供了理论依据。

解卫清气注射液对流感病毒的抑制作用

采用鸡胚培养和血球凝集试验观察解卫清气注射液对流感病毒的直接灭活作用。结果显示用药组和病毒对照组间鸡胚生长发育有明显差异，病毒的几何平均滴度分别为２０和１６０（Ｐ＜０．００１）。表明解卫清气注射液的抗病毒作用是通过抑制血凝素而实现的。

地榆水提液抗新城疫病毒作用研究

为探索地榆水提液对新城疫病毒（NDV）的作用，将1g生药／mL地榆水提液倍比稀释后分别接种9～11日胚龄鸡胚，通过观察鸡胚孵化情况测定药物的安全浓度。结果表明地榆水提液在≤12．5mg／个时鸡胚均能孵化出壳。在此基础上设定6．25和3．125mg／个两个浓度并通过3种加药模式以10XELD50NDV接种9～11日胚龄鸡胚。通过鸡胚存活时间、72h胚体长度以及各组尿囊液HA阳性率的测定研究药物对NDV的作用。结果表明攻毒对照组鸡胚于72h内全部死亡，HA阳性率达100％，而药物处理组鸡胚的存活时间和胚体长度均长于攻毒对照组．6．25mg／胚处理组中混合作用组、先加药组和后加药组的HA阳性率分别为0、6．7％、26．7％，3．125mg／J3丕处理组的分别为0、6．7％、40％。本试验表明地榆水提液在鸡胚中对NDV具有明显的预防和直接抑制作用。

鸡传染性法氏囊病毒LS株的分离与鉴定

用SPF鸡胚,从江苏溧水某鸡场病死鸡的法氏囊组织中分离到一株病毒,接种健康非免疫鸡,能致鸡3～5 d内全部发病,死亡率达55%以上,腿肌和腺胃出血,肝和肾肿大出血,脾脏出血,法氏囊肿大出血;该病毒不能凝集鸡红细胞,可以与IBDV阳性血清产生沉淀;应用RT-PCR进行检测,扩增IBDV VP2基因,并与GenBank中的已知序列进行比较.结果表明,所分离的病毒为IBDV毒株.

新城疫病毒La Sota株和鸡传染性支气管炎病毒M41株低免疫鸡胚同胚培养研究

为研究新城疫病毒(NDV)La Sota株和鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株在低免疫鸡胚中进行同胚接种培养的可行性,通过将不同稀释倍数的La Sota株和M41株接种同一低免疫鸡胚,分别测定收获尿囊液La Sota株和M41株含量,确定最佳的稀释倍数以及适宜的培养温度和培养时间。结果显示:La Sota株和M41株以10 000∶5 000的比例稀释,培养96 h病毒含量和收获量最佳,La Sota株含量可达到109.17EID50/0.1 m L,HA效价为1∶1 024,M41株含量可达到106.50EID50/0.1 m L。接种后孵育温度为36.5℃时,每胚收获量比37℃培养增加了1.0~1.2 m L。按照此工艺生产病毒制备疫苗免疫SPF鸡,NDV和IBV抗体均符合国家标准要求。试验探索并优化了La Sota株和M41株在低免疫鸡胚中同胚接种的培养条件,为大规模抗原生产提供数据支持。

鸡蛋胚胎电图测试系统的研究

本文在分析了影响鸡蛋胚胎电图测试的各种噪声干扰源的基础上,介绍了一种能有效地克服干扰,准确、无损地反映整个孵化期内鸡胚交直流电位变化的测试系统。该系统为进一步研究鸡胚电活动规律提供了测试手段。